全 文 ：香鳞毛蕨软膏对大鼠实验性体癣的治疗作用
李红枝 1 沈志滨1 赵 瑛2 江 淼 2 张德连 2
(1.广东药学院 ,广州 510224;2.哈尔滨商业大学 ,哈尔滨 150076)
摘要 目的:观察香鳞毛蕨软膏对大鼠实验性体癣的治疗作用。方法:制做大鼠实验性体癣模型 , 然后用香鳞
毛蕨软膏对其进行治疗 。结果:高剂量用药组病灶部位皮肤逆培养石膏样毛癣菌生长阴性率最高。 结论:香鳞毛
蕨软膏高剂量组对大鼠实验性体癣治疗效果较佳。
关键词 香鳞毛蕨软膏;体癣
香鳞毛蕨 DryopterisfragransL.为鳞毛蕨科鳞毛
蕨属植物 ,生长于海拔 1000 ～ 1700m的山坡或岩石
缝中 ,分布于东北 、华北各省。根据民间验方记载香
鳞毛蕨对多种皮肤病均有较好的治疗效果 ,因此 ,利
用动物实验性体癣模型研究抗皮肤癣病药物 ,对此
药的研制与开发有着重要意义 。
1 实验器材与试剂
HHBIL420型医用培养箱 (江苏省连云港市墟
沟电器厂), 蛋白胨 (北京双旋微生物培养基制品
厂),琼脂(青岛水产品加工厂),达克宁(西安扬森
制药有限公司 030910013),肤痒宁软膏:按制备工
艺制得软膏高 、中 、低剂量组 ,分别含生药 2g、1g和
0.5g(广东药学院中药系提供)。基质组:按制备工
艺制得不含生药的软膏。阳性对照组:达克宁软膏
实验动物:Wistar大鼠体重 250 ～ 300克(哈尔滨兽
医研究所提供),雌雄各半 ,随机分组 。
2 实验方法
2.1 石膏样毛癣菌的制备 参照文献 〔1 ～ 8〕先将实
验器皿干热灭菌 ,按照比例制备沙氏培养基 ,调 pH
为 5.5,高压灭菌后取出 ,在无菌室中将基质倒入培
养皿中 ,冷却 。在无菌条件下 ,用接种环将菌种涂抹
在基质上 ,放入恒温箱中 37℃培养十天 ,十天后取
出检查 。
2.2 动物模型的制备 取 50只 Wistar大鼠(雌雄
各半)分别称重并随机分组 。大鼠为体重在 250 ～
300g间的成年大鼠 ,皮肤情况良好 ,体毛光滑。
脱毛后观察 24小时 ,使其皮肤恢复。确认皮肤
无腐蚀性点状样渗血等损伤即可使用 。
染菌:将脱毛后的大鼠在脱毛处用手术刀刮伤
皮肤直至有血渗出为度。取少量培养好的菌种 ,用
刀片涂抹于创面上 。用纱布包好 ,再用胶布缠绕以
免挣脱 。每日观察并且重复染菌直至第 9天出现病
变 。成功染菌后 ,病变程度按文献记载方法评分 ,用
0、1、2、3、4分级表示 ,评分如下 〔9 ～ 11〕。
无病变为 0;少数红斑性丘疹或病变趋向痊愈 ,
新生体毛长出者为 1;红斑融合或呈岛状散在且周
围发红者为 2;红斑全面扩大 ,有大量鳞屑及厚皮者
为 3;伴有出血的极期病变为 4。
动物分组及用药:根据以上记录的大鼠病变程
度将大鼠分为五组 (高剂量组 、中剂量组 、低剂量
组 、阳性对照组和基质组)。对分组大鼠用药 ,将各
药剂分别涂于各组大鼠染菌部位 ,用纱布包好 ,并用
胶布固定 ,第一周 ,每天上药两次 ,早晚各一次 ,第二
周每天上药一次 ,观察病变愈合情况并记录。要判
断是否痊愈还需做培养 。
2.3 大鼠病灶皮肤逆培养 用药十四天后将大鼠
处死 ,取病灶部位皮肤 ,每只大鼠病灶处各取三块约
3mm皮肤 ,放入 70%乙醇中浸泡 2 ～ 3分钟 ,杀死杂
菌 ,经无菌盐水洗净后在无菌室中接种于沙氏培养
基中 ,并标记。将培养皿放入恒温培养箱中 37℃培
养两周后 ,取出 ,观察石膏样毛癣生长情况。根据石
膏样毛癣菌的特点 ,镜下观察 ,检查病灶部分皮肤内
有无石膏样毛癣菌生长 ,以各组动物的平均病变程
度和病灶皮肤逆培养石膏样毛癣菌株生长的阴性率
作为判断药物疗效的指标。
3 结果与讨论
3.1 大鼠染菌后皮损结果 所有接种了石膏毛癣
菌菌株的大鼠均有不同程度的发病 ,接种后两到三
天接种部位有轻度红肿 ,三到四天后有的出现少数
红斑丘疹 ,随时间延长病情逐渐加重 ,红斑逐渐扩
大 ,五 、六天后有的出现大量鳞屑 ,病情逐渐加重 ,有
的形成厚痂皮 ,少数出现溃烂。八到十天左右病变
逐渐达到高峰 ,但伴有溃烂 、出血的极期病灶较少 ,
与文献报道一致。
接种成功后取皮屑置载玻片上滴加 10%KOH
少许 ,以盖玻片覆盖后在火焰上微热 ,软化角质 ,盖
上盖玻片 ,显微镜下观察 ,有丝状石膏毛癣菌菌株。
菌株粗细不一 ,有分枝。小分生孢子产多 ,呈卵圆
形 ,散在或聚集在一起 。偶可见到呈棒状 、壁薄 、表
面光滑的大分生孢解子 。
·941·中药材第 28卷第 10期 2005年 10月
3.2 染菌大鼠用药后皮损情况 用药九天后大鼠
染菌部位皮屑明显减少 ,红肿开始消退 ,少数出现出
血性红斑 ,有的长出体毛 ,十四天后各组大鼠染菌部
位情况均有好转 。达克宁组大部分明显好转 ,厚痂
消失 ,鳞屑减少 ,但有两只在恢复过程中出现明显的
溃烂情况 ,两三天后好转。
根据实验结果 ,利用统计学方法进行检验得出:
香鳞毛蕨高剂量组用药前后病变程度有非常显著的
差别(P<0.01),病灶皮肤用药后程度改善非常明
显;香鳞毛蕨中 、低剂量组用药前后病变程度也有显
著性差别(P≤0.05);达克宁组用药前后病灶皮肤
病变程度也有明显改善(P<0.01);而基质组大鼠
病灶皮肤病变程度改善不明显(P>0.05)。
3.3 染菌大鼠病灶皮肤逆培养结果 见表 1。由
统计方法得出 ,将五个用药组疗效比较 ,经卡方检验
达克宁与基质组的疗效存在显著的差异 (P<
0.05),香鳞毛蕨高剂量组(2.0g/ml)与基质组之间
存在非常显著的差异(P<0.01),说明香鳞毛蕨高
剂量对大鼠试验性体癣有非常显著的治疗作用 。而
香鳞毛蕨低剂量组(0.5g/ml),中剂量组(1.0g/ml)
表 1 大鼠病灶皮肤逆培养结果
组别 阴性 阳性 合计 阴性率(%)
基质组 8 16 24 33.33
达克宁组 16 8 24 66.67
低剂量组 14 10 24 58.33
中剂量组 15 9 24 62.50
高剂量组 19 5 24 79.17
合计 72 48 120 60.00
与基质组的疗效之间没有显著的差异 (P<0.05)。
特别是高剂量(2.0g/ml)的疗效非常显著。无论从
病变程度还是从病灶皮肤逆培养石膏样毛癣菌株生
长阴性率与对照组相比 ,其差异有非常显著意义 。
参 考 文 献
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(2005-02-28收稿)
·制剂与质量·
大孔吸附树脂纯化断血流总皂苷工艺研究
张 毅1 鄢 丹2 韩玉梅 2
(1.重庆市药品检验所 ,重庆 400015;2.成都中医药大学 ,成都 611730)
摘要 目的:研究大孔吸附树脂纯化断血流总皂苷的工艺条件及参数。 方法:以洗脱率 、精制度等为指标 ,考
察大孔吸附树脂对断血流总皂苷的吸附性能和洗脱参数。结果:11.4ml断血流总皂苷样品液(生药 0.2g/ml)上大
孔吸附树脂(Υ15mm×H90mm, 干重 2.5g),用蒸馏水 , 30%、 70%乙醇各 3BV依次洗脱 ,断血流总皂苷富集于 70%
乙醇洗脱液部位。结论:采用大孔吸附树脂技术富集 、纯化断血流总皂苷 , 其洗脱率为 86.8%, 精制度为 153.2%,
该法可较好地纯化断血流总皂苷。
关键词 大孔吸树脂;纯化;断血流;总皂苷
断血流为唇形科植物荫风轮 Clinopodium
polycephalum(Vaniot)C.Y.WuetHsuan或风轮菜
Clinopodiumchinensis(Benth.)O.Kuntze的干燥地
上部分 ,具有止血之功 ,常用于崩漏 、尿血 、鼻衄 、牙
·942· 中药材第 28卷第 10期 2005年 10月