作 者 ：段治军;陈长征;李伯良
期 刊 ：生物化学与生物物理学报 1996年 02期 页码：9
关键词：酵母豆蔻酰－CoA；蛋白质N端转酰基酶；PCR；基因表达；
摘 要 ：利用ＰＣＲ技术，从酵母染色体中扩增得到酵母豆蔻酰－ＣｏＡ：蛋白质Ｎ端转酰基酶（ＹＳＣＮＭＴ）基因，并克隆到ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＫＳ＋载体中。由ＤＮＡ全序测定表明，获得了ＹＳＣＮＭＴ编码基因。进一步构建了Ｔ７Ｐｒｏｍｏｔｅｒ控制下的含上述完整ＹＳＣＮＭＴ编码基因的表达质粒ｐＭＦＴ７－５－ＮＭＴ，转化大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３），进行ＩＰＴＧ诱导表达研究。通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，观察到一与理论分子量一致的诱导条带（约５３ｋＤ），占全菌蛋白的３９％左右，且可溶性部分约占上清液中全部蛋白的３４％。经一步Ｐ１１磷酸纤维素阳离子交换柱层析，将其纯化到纯度达９７％以上．纯化的表达产物经Ｎ端氨基酸序列分析，...