全 文 ：辣椒辣素敏感神经元介导干地黄胃粘膜保护效应
　　收稿日期:1999-10-01
　　基金项目:广东省中医药管理局科研基金资助项目(98380)
　　作者简介:李　林(1963-),女 ,湖南长沙人 ,学士 ,讲师.
李　林1 , 王竹立2 , 叶美红2 , 赖晓嵘2
(中山医科大学　1.附属第三医院中医科 , 广东 广州　510630;2.生理学教研室 , 广东 广州　510089)
摘　要:【目的】研究干地黄胃粘膜快速保护作用及机制。【方法】在给无水乙醇之前或之后立即给予干地黄煎剂或提取
物A ,观察其保护胃粘膜免受损伤的作用 ,并用不同浓度辣椒辣素预处理以分析其保护机制。【结果】①胃饲 6 g·kg-1干地黄
煎剂或提取物A 均能显著保护胃粘膜免受随后给予无水乙醇 2 mL 所致的损伤;②先给予无水乙醇 ,后胃饲干地黄煎剂或提
取物 A则无保护作用;③先给予 φ=70%乙醇 2 m L ,后给予干地黄煎剂 6 g·kg -1 , 保护效应又再出现;④先胃饲无水乙醇 ,后
经十二指肠注射 12 g·kg-1提取物A 亦能显著减轻胃粘膜损伤;⑤分别用 100 g·L-1 、400 g·L-1和 800 g·L -1的辣椒煎剂预处
理大鼠 ,提取物 A 的胃粘膜保护作用随着辣椒辣素给药剂量的增大明显减弱直至消失。【结论】干地黄对胃粘膜有快速保护
作用 ,其机制可能与胃粘膜内辣椒辣素敏感神经元传入冲动增多有关。
关键词:胃粘膜/药物作用;地黄/治疗作用;辣椒辣素;醇 ,乙
中图分类号:R285.5　　　文献标识码:A　　　文章编号:1000-257X(2000)02-0133-04
Capsaicin-sensitive Neuron-mediated Protective Effects
of the Dry Radix Rehmanniae on Gastric Mucosa
LI Lin1 , WANG Zhu-li2 , YE Mei-hong 2 , LAI Xiao-rong2
(1.Depar tment of T raditional Chinese Medicine , Third A ffiliated Hospital , Sun Yat-sen University o f Medical Sciences ,
Guangzhou , 510630;2.Department of Physio logy , Sun Yat-sen University of Medical Sciences , Guangzhou , 510089 China)
Abstract:【Objective】To study the immediate protective ef fects and its mechanism of the dry Radix
Rehmanniae(DRR)on gast ric mucosa.【Methods】The decoction or ex tract A of DRR was given orally into
rats before or af ter absolute ethanol to observe the protective effects on gast ric mucosal damage.The rats were
pret reated w ith the different concentrat ions of capsaicin to analyze the pro tection mechanism.【Results】① The
6 g·kg-1 decoction or ex tract A of DRR , which w as administered orally , protected markedly the gast ric mucosa
from damage induced by 2 mL absolute ethanol given soon af terwards.②The absolute ethanol w as administered
o rally , then the 6 g·kg-1 decoction or ext ract A of DRR was followed instantly , the pro tective ef fect did not oc-
cur.③When the 6 g·kg-1 decoction of DRR was administered orally follow ing closely 2 mL φ=70%ethanol ,
the protective effect did occur again.④ The 12 g·kg-1 ex tract A injected into duodenum af ter absolute ethanol
g iven orally , reduced markedly gast ric mucosa damage too.⑤Pret reatment wi th the 100 g·L-1 , 400 g·L-1
and 800 g·L-1 decoction of chilli(dried fruit of capsicum)to rats respectively , the protect ive effects of ex tract
A on gast ric mucosa were reduced gradually to nil in a dose-dependent manner.【Conclusions】The DRR possess-
es an immediate protection on gast ric mucosa , the mechanism of it may be mediated by increasing afferent im-
pulses of capsaicin-sensitive neurons in gast ric mucosa.
Key words:gastric mucosa/drug effects;rehmannia glutinosa / therapeutic use;capsaicin;alcohol , ethyl
133中山医科大学学报(Acad J SUMS),2000 , 21(2):133～ 136
DOI :10.13471/j.cnki.j.sun.yat -sen.univ(med.sci).2000.0051
　　中药的胃肠道细胞保护作用已有不少研究[ 1] ,
但大都是从量效关系角度进行的研究 ,对于中药保
护作用的时效关系研究尚未见报道。本实验室曾
经发现提前 15 min 胃饲干地黄(dry Radix
Rehmanniae)即可明显减轻无水乙醇所致的胃粘
膜损伤 ,其作用持续 2 h以上[ 2] 。但地黄起作用的
时间还能否再提前? 地黄对胃粘膜的快速保护机
制是什么? 目前仍不清楚。本工作旨在观察无水
乙醇造模前后立即给予干地黄煎剂对无水乙醇性
胃粘膜损伤的影响 ,并对其可能机制进行探讨 。
1　材料与方法
1.1　材　料
1.1.1　动　物　采用 Spague-Daw ley 纯种 2级大
白鼠 ,体质量(160±20)g ,雌雄不拘。由本校实验
动物中心提供。
1.1.2　药物及试剂　干地黄煎剂的制备:同本实
验室赖晓嵘文方法[ 2] 。
1.2　动物造模 、手术 、分组及给药
1.2.1　胃粘膜损伤模型　实验前大鼠禁食 24 h ,
不禁水 。给大鼠胃饲(或经十二指肠下段注射)2
mL(或 1 mL)无水乙醇(或 φ=70%乙醇), 1 h 后
脱臼处死大鼠 ,剖腹 ,结扎幽门 、贲门 ,取出胃用 φ
=10%甲醛固定 10 min。沿胃大弯剪开胃壁 ,收集
胃内容物 ,测定胃液量 ,将胃漂洗干净后展平测量
损伤指数 。
1.2.2　十二指肠上段一结肠吻合术　大鼠经 15
g/L 戊巴比妥钠溶液 50 mg·kg-1腹腔麻醉后切开
腹壁 ,在距幽门约 1 cm 处剪断十二指肠 ,缝合下段
残端开口;将与胃相连的十二指肠上段通过一粗细
适宜的塑料管与结肠相连通 ,用线结扎固定。实验
时药物经十二指肠下段注入 ,使之不与胃内的无水
乙醇混合 。
1.2.3　动物分组与给药　采用随机分组原则 ,将
130只大鼠 ,分成 7 个大组 ,用 Ⅰ 、Ⅱ 、Ⅲ ……表示;
每个大组内又分为 2 ～ 3个小组 ,共分成 17 个组。
例如 Ⅰ大组内有 3个小组 ,分别用 Ⅰ-1 、Ⅰ-2 、Ⅰ-3
表示 ,以此类推 。具体分组及处理如下:(1)Ⅰ ～ Ⅲ
大组(共 8个小组)实验均在未作特殊处理的大鼠
上进行 。 Ⅰ-1 组:9只鼠 ,先胃饲干地黄煎剂 6 g·
kg-1 ,再立即胃饲无水乙醇 2 mL;Ⅰ-2 组:7只鼠 ,
先胃饲提取物 A 6 g·kg -1 ,再立即胃饲无水乙醇 2
mL;Ⅰ-3组:9只鼠 ,先胃饲去离子水 6 mL·kg-1 ,
再立即胃饲无水乙醇 2 mL ;Ⅱ-1 组:10只鼠 ,先胃
饲无水乙醇 2 mL , 再立即胃饲干地黄煎剂 6 g·
kg
-1;Ⅱ-2组:7只鼠 ,先胃饲无水乙醇 2 mL ,再立
即胃饲提取物 A 6 g·kg-1;Ⅱ-3组:12 只鼠 ,先胃
饲无水乙醇 2 mL ,再立即胃饲去离子水 6 mL·
kg-1;Ⅲ-1组:8只鼠 ,先胃饲 φ=70%乙醇 2 mL ,
再立即胃饲干地黄煎剂 6 g·kg -1;Ⅲ-2组:8只鼠 ,
先胃饲φ=70%乙醇 2 mL ,再立即胃饲去离子水 6
mL·kg-1;(2)Ⅳ大组(含 3个小组)实验在十二指
肠上段 —结肠吻合术后的大鼠上进行。 Ⅳ-1 组:8
只鼠 ,先胃饲无水乙醇 1 mL ,再十二指肠下段注射
提取物 A 6 g·kg-1;Ⅳ-2组:6只鼠 ,先胃饲无水乙
醇 1 mL , 再十二指肠下段注射提取物 A 12 g·
kg-1;Ⅳ-3组:7只鼠 ,先胃饲无水乙醇 1 mL ,再十
二指肠下段注射去离子水 12 mL·kg-1;(3)Ⅴ大组
(含 2个小组)实验在给大鼠胃饲 100 g·L-1辣椒煎
剂1 mL 24 h后进行 。 Ⅴ-1组:6只鼠 ,先胃饲提取
物A 6 g·kg-1 ,再立即胃饲无水乙醇 2 mL;Ⅴ-2
组:6只鼠 ,先胃饲去离子水 6 mL·kg-1 ,再立即胃
饲无水乙醇 2 mL;(4)Ⅵ大组(含 2个小组)实验在
给大鼠胃饲 400 g·L-1辣椒煎剂 1 mL 24 h 后进
行。 Ⅵ-1组:7只鼠 ,先胃饲提取物 A 6 g·kg-1 ,再
立即胃饲无水乙醇 2 mL;Ⅵ-2 组:7只鼠 ,胃饲去
离子水 6 mL·kg-1 ,再立即胃饲无水乙醇 2 mL;
(5)Ⅶ 大组(含 2个小组)实验在给大鼠胃饲 800 g·
L-1辣椒煎剂 1 mL 24 h后进行 。 Ⅶ -1 组:6只鼠 ,
先胃饲提取物 A 6 g·kg -1 ,再立即胃饲无水乙醇 2
mL;Ⅶ -2组:7只鼠 ,先胃饲去离子水 6 mL·kg-1 ,
再立即胃饲无水乙醇 2 mL。对照组与给药组同时
进行实验 ,以保证实验条件的齐同性。
1.3　观察指标
1.3.1　损伤指数测量　同赖晓嵘文方法[ 2] 。损伤
指数用观测到的粘膜损伤的总长度来表示 ,量/单
位为 l t/mm 。
1.3.2　损伤抑制率计算　见下式:
损伤抑制率=对照组平均损伤指数-给药组平均损伤指数对照组平均损伤指数 ×100%
1.4　统计学方法　各组损伤指数均以 x ±s表示。
均值之间的差异用双相成组 t 检验 。
2　结　果
2.1　预先给予干地黄煎剂或提取物 A 对无水乙
134 中山医科大学学报(Acad J SUMS), 2000 , 21(2)
醇性胃粘膜损伤的影响
在给予无水乙醇之前先胃饲 6 g·kg-1的干地
黄煎剂或提取物 A均能显著抑制胃粘膜损伤(表 1
中的 Ⅰ-1 、Ⅰ-2 、Ⅰ-3组)。煎剂与提取物 A的效价
接近 。
表 1　在给予乙醇前或后立即胃饲干地黄煎剂或
提取物 A 对胃粘膜的保护
Table 1　P ro tection of decoction o r ex tract A o f dry
Radi x Rehmanniae g iven o rally before or
after ethanol(E)on gastric mucosa
Group
w(dose)
/ (g·kg-1) n
Index of damage
l t
3)　/ mm r i
2)　/ (%)
Before 100%E
Ⅰ-1(decoct ion) 6 　 9 　 30.3±29.6 1) 　 76.6
Ⅰ-2(ex tract A) 6 7 32.7±25.5 1) 74.7
Ⅰ-3(w ater) 6 9 129.4±51.4 　 -
After 100%E
Ⅱ-1(decoct ion) 6 10 270.0±90.1 -30.1
Ⅱ-2(ex tract A) 6 7 260.7±83.2 -25.6
Ⅱ-3(w ater) 6 12 207.6±87.6 　 -
After 70%E
Ⅲ-1(decoct ion) 6 8 35.9±23.1 1) 70.2
Ⅲ-2(w ater) 6 8 120.5±51.3 　 -
　　1)Compare wi th contro l:P <0.001;2)r i:inhibito ry rate;3)l t:tot al
length of gastric mucosal damages
2.2　随后给予干地黄煎剂和提取物 A 对无水乙
醇性胃粘膜损伤的影响
先给予 2 mL 无水乙醇 ,随后立即胃饲 6 g·
kg-1的干地黄煎剂或提取物 A ,胃粘膜损伤指数较
对照组反有所增大 ,但差异尚无统计学意义(P >
0.05)(表 1中 Ⅱ-1 、Ⅱ-2 、Ⅱ-3 组)。煎剂与提取物
A的作用一致。说明后给予干地黄不能减轻无水
乙醇所致的胃粘膜损伤。
2.3　随后给予干地黄煎剂对 φ=70%乙醇所致损
伤的影响
先给予 φ=70%乙醇 2 mL ,随后立即给予 6 g
·kg-1的干地黄煎剂 ,亦能明显抑制胃粘膜损伤(表
1中的Ⅲ-1 、Ⅲ-2组)。
2.4　十二指肠注射提取物 A 对无水乙醇性胃粘
膜损伤的影响
在施行了十二指肠上段—结肠吻合术的大鼠 ,
预先胃饲无水乙醇 ,随后立即经十二指肠下段分别
注射 6 g·kg-1(Ⅳ-1 组)和 12 g·kg-1(Ⅳ-2组)提
取物 A ,损伤指数均较对照组减少(表 2)。说明十
二指肠给予干地黄对无水乙醇性胃粘膜损伤有明
显抑制作用。
2.5　辣椒煎剂预处理对提取物 A 胃粘膜保护作
用的影响
分别用 100 g·L-1 、400 g·L-1和 800 g·L -1的
辣椒煎剂预处理大鼠 ,预先给予提取物 A 对无水
乙醇性胃粘膜损伤的抑制作用随着辣椒给药剂量
增大明显减弱甚至基本消失(表 3)。
表 2　十二指肠内给予提取物 A 对胃粘膜的保护
Table 2　Pro tection of ex tract A of dry Radix Rehmanniae given intraduodenally on gastric mucosa
G roup Drug w(dose)/ (g·kg-1) n Index o f damage
l t
3)　/ mm r i
2)　/ (%)
Ⅳ-1 extract A 6 8 93.8±33.1 10.9
Ⅳ-2 extract A 12 6 19.3±13.3 1) 81.7
Ⅳ-3 water 12 7 105.3±28.9 -
　　1)Compare with control:P <0.001;2)r i:inhibito ry rate;3)l t:to tal leng th o f gastr ic mucosal damages
表 3　不同浓度辣椒煎剂预处理对提取物 A 胃粘膜保护作用的影响
Table 3　Effects of pretreatment with the different concentrations of chilli decoction on gastric mucosa protection induced by extract A
Group n
pretreatment
ρ(chilli)/ g·L-1) Drug
Index o f damage
l t
3)　/ mm r i
2)　/ (%)
Ⅴ-1 6 100 ex tract A 10.0±5.2 1) 88.2
Ⅴ-2 6 100 w ater 85.0±59.6 -
Ⅵ-1 7 400 ex tract A 102.0±38.5 38.2
Ⅵ-2 7 400 w ater 165.0±79.3 -
Ⅶ -1 6 800 ex tract A 233.3±113.9 0.7
Ⅶ -2 7 800 w ater 235.0±84.2 -
　　1)Compare with control:P <0.01;2)r i:inhibi tory ra te;3)l t:total leng th of gastric muco sal damages
135第 2期　李　林 ,等.辣椒辣素敏感神经元介导干地黄胃粘膜保护效应
3　讨　论
中药一般被认为起作用慢 ,而作用较持久。本
实验则发现胃饲干地黄煎剂或提取物 A 后 ,可立
即发挥胃粘膜保护作用。说明中药也可以起效很
快。我们前面的工作已经证明:干地黄的胃粘膜保
护并不是由于药物与无水乙醇在胃腔内发生理化
反应所致[ 2] ,本实验用 φ=80%乙醇去除干地黄
煎剂中的难溶于醇的蛋白质 、淀粉 、无机盐和大部
分杂质 ,所得的提取物 A 仍有与原煎剂同样的保
护作用 ,且效价几乎完全不变 ,进一步说明干地黄
的作用并非由其中的粘性部分(如多糖等)所致。
有趣的是 ,若先给予无水乙醇 ,随后立即给予干地
黄 ,则不仅没有任何保护作用 ,甚至还似乎在一定
程度上加重了胃粘膜损伤 。对此我们的解释是 ,先
给无水乙醇 ,可能使与其接触的胃粘膜表面的细胞
层和感受器迅速坏死 ,结果导致随后的干地黄不能
发挥其作用 ,干地黄本身的某些理化性质可能还会
轻微加重无水乙醇所致的损伤;而先给干地黄或其
提取物A ,则使随后给予的无水乙醇被稀释成 φ=
70%左右[因为所用干地黄煎剂的平均量为 0.9
mL/鼠 , 2 mL 无水乙醇被稀释成 φ=2.0 / (2.0+
0.9)=69%] ,因而胃粘膜表层损伤较轻 ,加上乙醇
透过附着的地黄与胃粘膜接触需要一定时间 ,故使
地黄有充分时间与胃粘膜表面的细胞层和感受器
接触 ,触发某种机制发挥保护作用 。为了验证这一
假设 ,本文中特别设计了一组先给 φ=70%乙醇再
给干地黄的实验 ,又观察到干地黄保护胃粘膜现
象 ,从而初步证实了上述推测 。另外 ,先胃饲无水
乙醇 ,再立即将提取物 A 注入未与乙醇接触的十
二指肠上段 ,也发现有保护作用 ,只是所需药量比
胃内给药约需增大一倍。
由于干地黄作用如此之快 ,我们有理由假设这
是一种神经介导的反射过程。资料表明 ,胃粘膜内
存在有大量的辣椒辣素敏感神经元 ,这些初级传入
神经元将胃粘膜感受到的信息传入中枢 ,介导胃粘
膜血流增加等效应 ,从而发挥胃粘膜保护作用。高
剂量(≥50 mg·kg-1)的辣椒辣素可引起神经递质
的过量释放 ,导致辣椒辣素敏感神经元受到长期和
不可逆的损害 ,失去其信息传入功能 ,这种作用被
称为化学“去神经”作用[ 3] 。有实验提示 ,250 g/L
的辣椒煎剂已能引起化学“去神经”作用 ,使胃粘膜
血流减少[ 4] 。本实验采用100 、400和800 g·L-1的
辣椒煎剂对大鼠进行预处理 ,结果发现 ,随着辣椒
煎剂浓度的升高 ,干地黄提取物 A 对无水乙醇性
胃粘膜损伤的抑制率明显下降 ,直至基本消失。提
示A液的胃粘膜保护机制很可能是通过辣椒辣素
敏感神经元的传入活动而发挥作用的。这也可以
解释为何干地黄保护作用起效快 、短时间即达高峰
的原因。
在实验中我们还曾用 2倍于实验组剂量的提
取物 A胃饲大鼠 ,并于 1 h 后处死之 ,未见胃粘膜
有任何损伤 ,因此可排除干地黄作为弱的屏障破坏
剂刺激胃粘膜 ,引起“适应性细胞保护”作用的可能
性。另外还用 800 g·L-1辣椒煎剂胃饲大鼠 , 1 h
后也未见胃粘膜有明显损伤 ,说明本实验所用辣椒
煎剂本身并不会直接导致胃粘膜损害。但辣椒煎
剂的“去神经”作用导致无水乙醇所致的损害加重 ,
却可从对照组损伤指数较预处理前升高中明显看
出。
参考文献:
[ 1] 王竹立 ,李　林 , 赖晓嵘.中药与胃肠道细胞保护[ J] .
中国中西医结合杂志 , 1996 , 16(8):508.
[ 2] 赖晓嵘 , 王竹立 , 李　林 , 等.干地黄煎剂防止无水乙
醇性胃粘膜损伤作用及其机制[ J] .中国中西医结合
杂志 , 1998 , 18 基础理论研究特集:145.
[ 3] 王志均 , 朱文玉.细胞保护[ M] .北京:北京医科大学 、
中国协和医科大学联合出版社 , 1995.557.
[ 4] 董秀云 ,森治树.辣椒煎剂对胃粘膜血流量的影响和
细胞保护作用[ J] .中华消化杂志 , 1989 , 9(6):335.
(编辑　张敏瑞)
136 中山医科大学学报(Acad J SUMS), 2000 , 21(2)