全 文 ：分析测试学报 第 41 卷第 1期 1 9 9 5 . 1 . 25
F E N X I C E SH I X U E B A O ( J o u r n a l o f In s t r u m e n t a l A n a l y s is )
芦笋根中菠葵皂试元的气相色谱测定
李长秀 ` 张铁垣 陈维杰
(北京师范大学分析测试中心 北京 x o o s 7 5 )
摘 要
芦笋根粉末经提取 、 分离得到菠羹皂贰元 。利用 G C一 M S 、 RI 、并与气相色谱保留值比较进行定性分析 ,气
相色谱外标法定量测定 , 同时考察了气相色谱定量测 定的 回收率和水解时间对测定值的影响 。 实验结果表明 ,
风干芦笋根中菠羹皂贰元的含量在 1% 以上 。
关键词 : 芦笋 ,菠羹皂贰元 ,气相色谱 。
芦笋 ( A sP a ar g u , 硕八“ n al is iL n n) 为百合科天门冬属植物 ,学名石刁柏 。其嫩茎可食 ,是一
种具很高营养价值的名贵蔬菜 ,对多种疾病有显著疗效 ,近年来有许多芦笋抗癌防癌的报道 ,
引起人 们关注 。 经研究发现 , 其有效成分多是 街体皂贰类化合物〔`一 3〕 ,其水解产物多为菠葵皂
贰元 ( s a r s a s a p o g e n i n ) 〔, 一 5 〕 ,化学名称为 5尽, 2 0日F , 2 2 a F 、 2 5 pF 螺旋幽 3件醇 ,为一种街体皂贰元 。
街体皂贰元很多是工业上合成街体激素的原料 ,有很好的利用价值 。
有文献报道气相色谱 L6二、 高效液相色谱川法测定与菠莫皂贰元结构类似的薯我皂贰元 。本
文建立了菠莫皂贰元的气相色谱测定法 ,并测定了芦笋根中菠莫皂贰元的含量 。
1 实 验 部 分
1
.
1 仪器与试剂
日本岛津制作所 G C 一 g A 气相色谱仪 、 C 一 R BI 数据处理机 ,美国 iF n i g a n 一 M A T 公司 4 5 10
型 G C 一M S 联用仪 ,美国尼高力 1 70 一S X 傅立叶红外光谱仪 , 日本芝山制作所 Y a an co 显微熔点
测定仪 , S p 一 2 1 0 0 ( 3% )玻璃填充柱 ( Zm 又 Zm m , 1 0 0一 1 2 0孔 ,载体 s u p e le o p o r t , S u p e l e o . In 。 . )
S E
一
54 弹性石英毛细管柱 ( 3 0 m x 0 . 25 m m ) ,筱羹皂贰元 (中国药品生物制品检定所 ) 。
1
.
2 样品制备及试液配制
1
.
2
.
1 总皂试的提取 风干芦笋根粉末 ,经石油醚提取去脂后置于大型索氏提取器中以甲醇
回流提取约 40 h ,趁热过滤 , 除去溶剂得棕色粘稠状物 。将其悬浮于一定量的水中 ,先以 乙醚萃
取去脂 ,水层继续用水饱和的正丁醇多次萃取至萃取液无色 ,合并萃取液 , 以正丁醇饱和的水
洗涤 ,减压除去正丁醇 ,得棕色的固状粗总皂贰 。
1
.
2
.
2 获莫皂试元样品的制备 准确称上述粗总皂贰 0 . 5。。g , 加入少量甲醇 (3 一 s m L )溶解 ,
石加入 20 m L Zm ol / L 的盐酸加热回流水解 h3 。 冷却水解液 , 乙醚萃取 (8 m L x 3 ) ,萃取液依次
以 l m ol / L 的盐酸 、 饱和 N a CI 水溶液 、 5%的 N a ZC 0 3水溶液洗涤 , 水洗至中性 , 无水 N a ZS O 。干
· 现在北京石油化工科学研究院工作
分析测试学报 第 一 4卷第 一期 ( 1 9 95 )
燥 。 除去乙醚 ,即得菠葵皂贰元样品 。
1
.
2
.
3 试液配制
准确称一定量的标样及菠葵皂贰元样品 ,以 1 , 4一二氧六环定容 ,得一定浓度的标样及样品
试液 。
1
.
3 仪器亲件
气相色谱采用 S P 一 2 1 0 0 ( 3% )玻璃填充柱 , 气化室 31 0 ℃ , 柱温 2 50 ℃ , 载气 N Z , 流速为
3 Om L /m in
,柱前压 20 6 k P a , IF D 检测 。 每次进样 0 . 4拼L , C 一 R BI 数据处理机对峰面积积分 , 外
标法定量 。
G C
一
M S 采用 S E 一 54 弹性石英毛细管柱 , 气化室 3 0 ℃ , 柱 温 2 40 ℃ , 载气氦气 , 柱前压
9 6
.
s k P a
,灯丝电流 0 . 2 5m A , 电离方式 E l , 电子能量 7o e V , 倍增器电压 1 3 0 0 V 。质谱直接进样 ,
电离方式 E l , 电子能量 7e0 V ,灯丝电流 0 . 25 m A ,倍增器电压 1 3 0 o v 。
2 结 果 和 讨 论
2
.
1 样品的 G C 一M S 测定
G C
一
M S 测定样品的重建总离子流图见图1 。
在图中扫描数为 1 89 的峰 ,其质谱图有明显的 m z/ 为4 16 的分子离子峰 ,很强的 m z/ 为 1 39
的基峰和中等强度的 m / 2 1 1 5的峰 ,显示螺旋山环化合物的特征 ,结合谱库检索 ,可确定该峰是
菠葵皂贰元的峰 。
6 9 120 0
5 0 150
: 4 0 5 : 0 0 澳。 S C A NT IM E
圈 1 样品 G C 一M S 皿理总离子流图
2
.
2 标准工作曲线绘制
分别配制质量浓度 内 为0 . 25 、 0 . 50 、 1 . 0 、 2 . 0 、 3 . 0 、 4 . 0 9 / L 的标样试液 ,气相色谱测定 ,标
样色谱图见图 a2 。
最小二乘法求得直线为
y = 1 2 4 7 4
.
3x 一 3 60 2 . 1
相关系数 y ~ 0 . ” 6 ,有 良好的线性关系 。
2
.
3 回收率实验
分别配制样品试液 ,加入一定量的标样 , 测定加入标样前后的峰面积 ,计算回收率 ,结果见
表 l 。
第 1 4卷第 1期 (1 9 9 5 )分析测试学报
表 1获莫皂试元回收率 单位 :m g
样品皂贰元含量 加入标样量 回收值 回收率 / %
9 7
9 6
叮八才 O 01
.
3 2 2
0
.
7 1 9
0
.
9 06
测定值
2
.
3 2 0
1
.
7 7 4
1
.
69 2 0
.
7 6 8
- J ~.一 ~` ~一 ~月卜
6 8
ǎ J-和帐嗽任丫碑卿似墉
水解时间 / t一 ` 粗皂贰中贰元含量 吻
!
l
““ 1”日 1卜`亡 J n
占 .ì 01
图 2标样和样品色讼图
a .标样 b.样品 .
图 3水解时间的影响
2
.
4水解时间对样品测定值的影响
分别取 0.5 9 0 0皂贰在不同水解时间下回流水解 ,制得皂贰元 ,配制成一定浓度的样品试
液 ,测定并计算粗皂贰中皂贰元含量 ,作水解时间影响曲线 , 见图 3 。
2
.
5 样品测定
取 6月 、 n 月两次采集的芦笋根提取总皂贰 ,水解后测定 ,水解时间均为 3 h ,结果见表 2 ,样
品色谱图见图2b 。
样 品 峰面积 (计数 )
农 2 芦笋根中救葬皂俄元含 t
浓度 总皂贰中贰元
内 / g · L 一 , 吻
芦笋根中总皂贰 芦笋根中皂贰元
吻 / X 1 0一 3
óUO甘八6J任6月采
1 1月采
1 8 7 9 9
1 4 9 87
0
.
2 0 6
0
.
1 8 1
0
.
0 6 6 8 1 3
.
8
0
.
1 1 7
2
.
6 纯皂试元的制备
水解得皂贰元经甲醇两次重结晶 ,得白色晶体 ,熔点 1 94 ~ 1 96 ℃ 。
质谱直接进样 ,得质谱图见图 4 。
红外光谱可看到 。 / e m 一 ` 3 20 0一 3 6 0 0的轻基吸收峰 , 。 / e m 一 ’ 为 8 4 9 、 9 0 0 、 9 1 8 、 9 8 7的螺旋幽
分析测试学报 第 2 4卷第 1期 (1 9 9 5 )
环化合物 F 环特征吸收 ,且 9 1 8 c m `吸收峰强度大于 g Oc0 m 一 `吸收峰强度 , 显示 F 环 C : : 。 F的构
型特征 。
以上数据均与菠莫皂贰元的数据相符合 。
1 1 5裁添 卜 1曰 八 于品 2日2 2 L6丫 ” ’ , ” ’ ` ” ’ , ’
,赫6 sese.J曰曰肋脚.砧
。`11
1以。、卜
|ó
卜. 占 : T二_ 二
2 5 e 3日e
卜户: ,理群一 …
喊叫泪睡
图 4 芦笋根中获葵皂试元质谱图
2
.
7 结果讨论
( 1 )实验中曾对 比了 S E 一 3 0柱 、 O V 一 1 7柱 、 D E G S 柱和 S P 一 2 1 0 0柱 , 实验结果表明 S P 一 2 2 0 0
柱效果最好 ,峰形好 、 出峰时间快 , 因而选它作为分析柱 。
( 2) 选用 1 , 4一二氧六环作溶剂 ,是由于它对样品的溶解性好 , 且溶剂本身沸点较高 ,减小溶
齐lJ挥发带来的配制误差 。
( 3) 由皂贰水解成皂贰元 ,缓和条件下水解不易完全 ;剧烈条件下水解 , 易使皂贰元发生脱
水 、 环合等变化 。考察了水解时间的影响 , 观察到在本文采用的水解条件下 , 水解时间从 2一
s h
, 皂贰元测得值变化很小 ,考虑到水解完全和缩短分析时间两个因素 , 在样品分析时采用水
解时间为 3h 。
( 4) 由分析结果 可知 , 风干芦笋根 中菠莫皂贰元的含量在 1%以上 , n 月采的根中含量明显
高于 6月采样品 ,所以对芦笋根的采集利用宜在秋后进行 。
参 考 文 献
1
.
G o r y a n u G M
,
K r o k h rn a l y u k V V
,
K in t y a P K
,
C l y z l n V 1
.
F a r rn
a t s iy a ( M
o s c o w )
,
1 9 7 6
,
2 5 ( 4 ) , 6 6
( R
u s s
)
2
.
S h im
o y a m
a d a M
,
S u z t , k i M
,
S o n t a H
,
M a r u y a m a M
,
( ) k u b o K
.
A g r , e
.
B io l
.
C h e m
. ,
1 9 9 0
,
5 4 ( 1 0 )
,
2 5 5 3
3
.
P a n t G
,
P a n w a r M S
,
N e g l D S
,
R a w a r M S M
,
M o r r i s G A
.
P h y t
o e
h
e
nr i
s t r y , 1 9 8 8
,
2 7 ( 1 0 )
,
3 3 2 4
4
.
K a w a n o K
,
S a k a l K
,
S a t o H
,
S a k a 门飞u r a 5
.
A g r
, e
.
B 一0 1
.
C h
e m
. ,
1 9 7 5
,
3 9 ( 1 0 )
,
1 9 9 9
5
.
G o r y a n u G M
,
K r o k h lr a ly u k V V
,
K i n t y a F K
.
K 卜i rn . P r i r . S o e d i n . , 1 9 7 6 , ( 6 ) : 8 2 3 ( R u 、 s )
6
.
C o o k e B K
,
A n a ly s t
,
1 9 7 0
,
9 5
:
9 5
7
. 达式禄 ,唐祥怡 , 达晖宁 , 杨玖云 . 色谱 , 1 9吧 , 10 0 2 ) : 9 8
(收稿 日期 : 1 9 9 3 . 1 0 . 飞8 )
“第 14卷第 l期 ( 1 9 9 5 )分析测试学报
G a s C hr o m a to gr a p hi e De ter m i na tio o nf Sr a s a s a po g e ni n
i nt heR o o tof A s P
ar a g u
s叹fj 王 c i a n li sL i n n
L i C ha ng xiu
,
Z h a n g T i e y u a n
,
C h e n W e iii e
(A n a l外 ie a l 乙 T e s t i n g C e n t r e , eB ij in g N o r m a l U n iv e r s i t y , eB i ji n g 1 0 0 8 7 5 )
A b s t r 8 C t
T h
e e o n t e n t o f
s a r s a s a p o g e n i n i n t h
e r o o t o f 滩sP a ar g us 伪口又e i、 115 L in n w a s o b t a in e d b y e x t r a e t io n a n d
s e p a r a t io n
.
T h
e q u a l it i
v e r e s u l t w a s g o t b y u s in g G C
一
M S
,
I R
, a n
d
e o m p a r a t io n w i t h s t a n d a r d o f G C a n a l y
-
5 15
.
T h
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m
o u n t o f
s a r s a s a p o g e n i n w
a s d e t e r m in e d b y t h e e x t e r n a l s t a n d a r d m e th o d o f g a s e h r o m a t o g r a p h y
.
T h
e r a t e o f
r e e o v e r y o f t h e m e t h od
a n d t h
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h y d
r o
ly
s is t im e t o t h e d e t e r m i n a t io n w e r e s t u d ie d
.
T h e r e s u lt s h o w e d t h a t t h e a m o u nt
o
f
s a r s a s a卯 g e n in i n t h e d r ie d r o t o f A JP a ar g 。 司不` i加 10 L i n n w a s
a b o v e l %
.
K e y w o r d s
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