全 文 :新疆医学2014年第44卷
·论著·
驱虫斑鸠菊提取物对小鼠免疫系统的影响
贺亚军 黄 睿 郝立君
摘 要 目的:探讨驱虫斑鸠菊提取物对小鼠免疫系统的影响。方法:驱虫斑鸠菊提取物高、中、低剂
量组灌胃小鼠 10 d,眼眶采血分离血清,用酶联免疫吸附法测定血清中 IgA、IgG、IgM、C3、C4及 IL-2的
水平;解剖小鼠,测量小鼠胸腺和脾脏指数。以醋酸可的松作为阳性对照组,以生理盐水和溶媒作为空白
照组和阴性对照。结果:①驱虫斑鸠菊提取物对小鼠免疫球蛋白 IgA、IgG影响不大,对 IgM、C3、C4有显
著的降低作用;②驱虫斑鸠菊提取物对 IL-2分泌有明显的抑制作用(P<0.01);③驱虫斑鸠菊提取物对
正常小鼠胸腺指数、脾指数有显著降低作用(P<0.01)。结论:驱虫斑鸠菊提取物对小鼠免疫系统具有明
显抑制作用。
关键词 驱虫斑鸠菊;抗体;白细胞介素 - 2;胸腺 /脾指数
EffectsofExtractsofVernoniaanthelminticaWilldonImmuneSystemofNormalMice
HE Yajun HUANG Rui HAO Lijun
Abstract:Objective:ToexploretheeffectoftheVernoniaanthelmin-ticawilldontheimmunesystemofmice.
Methods: VM extract high, medium and low dose mice lavage for 10 days, orbital blood serum separation, enzyme
linked immunosorbent method for determina -tion of serum IgA, IgG, IgM, C3, C4 and the levels of IL - 2; Kill the
mice and measure the thymus/spleen index. With cortisone acetate as the positive control group, with physiological
saline and solvent as blank group and the negative control. results: 1) VM extract had little impact on the mice
immuneglobulinIgA,IgG;butcandecreaseIgM,C3andC4levelsignificantly;(2)theVMextractcaninhibitorythe
secretionofIL-2obviously(P<0.01);(3)theVMextractcanreducedtheofthymus/spleenindexsignificantlyonthe
normalmice(P<0.01).Conclusion:TheVMextracthasobviousinhibitoryeffectonthemiceimmunesystem.
Keywords:VernoniavanthelminticaWilld(VW) Antibody Interleukin-2(IL-2) Thymus/spleenIndex
作者单位:830001 新疆 乌鲁木齐 新疆维吾尔自治区人民医院临检中心
驱虫斑鸠菊,为菊科植物驱虫斑鸠菊(Vernonia
anthelminticaWilld,VW)的成熟果实[1],主要分布于
印度、巴基斯坦及我国新疆,维吾尔药名卡拉孜然,
是维吾尔医最常用于增加色素药之一,临床上多用
于白癜风的治疗。白癜风是一种常见的后天性限局
性或泛发性皮肤色素脱失病。由于皮肤的黑素细胞
功能消失引起,但机制还不清楚。形态学上可见病
损皮肤色素颗粒减少,黑素细胞破坏、数量减少乃
至消失,多数学者认为该病与遗传、免疫及神经因
素有关[2]。
本文从免疫学方面探讨驱虫斑鸠菊提取物对
正常小鼠的影响。通过检测灌胃驱虫斑鸠菊后小鼠
血清免疫球蛋白含量及免疫器官指数变化,研究驱
虫斑鸠菊提取物对于小鼠免疫系统的影响,为该药
的临床应用提供理论依据。
1 资料与方法
1.1 材料
1.1.1 受试药物:驱虫斑鸠菊提取物由新疆自治区
人民医院临床药学研究所提供,批号010810。驱虫
斑鸠菊提取物浸膏粉在研钵中研细,再加入3%淀
粉浆研成混悬液,提取固形物重量计1mg/ml。
1.1.2 剂量设计:从小鼠腹腔注射驱虫斑鸠菊提取
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物 MTD〉87.4 mg 浸膏 /kg 按体表面积等效剂量折
算,小鼠药效剂量按最大耐受量的1/40、1/20、1/10
的剂量给药。驱虫斑鸠菊提取物低剂量:2.19mg/kg;
驱虫斑鸠菊提取物中剂量:4.37mg/kg;驱虫斑鸠菊
提取物高剂量:8.75mg/kg(均以固体物计)。
1.1.3 阳性对照:醋酸可的松片由浙江医药股份有限
公司提供,制剂规格为5mg/片,剂量设计:10mg/kg
(按临床给药量折算成小鼠剂量)。
1.1.4 空白对照:生理盐水。
1.1.5 溶媒对照:3%淀粉浆溶剂。
1.1.6 实验动物:昆明种系雌性小鼠购自新疆医学
实验动物中心(合格证编号:医动字第16-001号),
体重:20±2g,每组13~14只,共6组。饲养条件:
室温24~26℃,湿度50%RH左右,光照良好。动物
饲以新疆医学实验动物中心生产的鼠料,自由进食
和饮水。
1.1.7 仪器试剂:DG-3022A型酶标测定仪为国营
华东电子管厂产品,ARRAYR360 特种蛋白分析仪
美国BECKMAN公司,酶联免疫试剂盒均购自晶美
生物工程有限公司。
1.2 方法
1.2.1 分组:实验小鼠分为6组,①空白对照组;②
驱虫斑鸠菊提取物低剂量组(Q-L);③驱虫斑鸠菊
提取物中剂量组(Q-M);④驱虫斑鸠菊提取物高剂
量组(Q-H);⑤阳性对照组;⑥溶媒对照组。
1.2.2 给药方案:各组以0.4ml灌胃,每日一次给药
10d,第11d摘眼球取血,3000rpm/5min离心,分
离出血清。
1.2.3 小鼠免疫球蛋白量的测定:用酶联免疫吸附
法测定IgA、IgG、IgM、C3、C4的值。
1.2.4 小鼠IL-2的测定:用酶联免疫吸附法测定测
定小鼠IL-2水平。
1.2.5 小鼠胸腺指数和脾脏指数测定:给药10d,
断颈处死,称体重解剖,取出脾脏、胸腺,计算脾脏/
体重,胸腺/体重的值。
2 结果
2.1 驱虫斑鸠菊提取物对小鼠免疫球蛋白量的影
响
各实验组小鼠血清中免疫球蛋白 IgA、IgG、
IgM、C3、C4含量与空白对照组小鼠比较见表1。驱
虫斑鸠菊提取物对免疫球蛋白IgA、IgG影响不大,
对IgM、C3、C4有显著的降低作用。
药物 例数 IgA(g/L) IgG(g/L) IgM(g/L) C3(g/L)C4(g/L)
空白组 11 0.090± . 13 0.086±0.016 0.075±0.010 0.078±0.006 0.085±0.016
Q-H 12 0.085±0.01 0.078±0.016 0.052±0.013** 0.055±0.029* 0.022± 13**
Q-M 12 0.084±0.009 0.076±0.012 0.048±0.010** 0.066±0.015* 0.020± 0 **
Q-L 12 0.083±0.010 0.074±0.013 0.058±0.019* 0.070± 1 * 0.020± 0 **
阳性组 12 0.073± .011** 0.069±0.012** 0.048±0.019** 0.045±0.017** 0.023±0.008**
溶媒组 12 0.091± .013 0.082±0.014 0.078±0.011 0.080±0.006 0.084±0.011
表1 驱虫斑鸠菊提取物对小鼠免疫球蛋白量的影响
*:P<0.05,**:P<0.01与阴性组比。
2.2 驱虫斑鸠菊提取物对小鼠 IL-2的影响
驱虫斑鸠菊提取物对小鼠分泌IL-2的影响见
表 2,驱虫斑鸠菊提取物对小鼠 T 淋巴细胞分泌
IL-2有明显的抑制作用。
2.3 驱虫斑鸠菊提取物对小鼠免胸腺 / 脾指数的
影响
驱虫斑鸠菊提取物对正常小鼠脾重/体重、胸
腺/体重有显著降低作用,见表3。
表2 驱虫斑鸠菊提取物对小鼠分泌IL-2的影响
**:P<0.01与阴性组比。
药物 例数 IL-2(g/L)
空白组 11 330.8±3 .8
Q-H 12 253.8±36.7**
Q-M 12 263.0±35.9**
Q-L 12 256.5±23.8**
阳性组 12 258.0±62.1**
溶媒组 12 327.8±53.4
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表3 驱虫斑鸠菊提取物对小鼠免疫器官的影响
*P<0.05,**P<0.01与阴性组比。
3 讨论
3.1 驱虫斑鸠菊在维吾尔医药中用于清除异常黏
液质,临床上多用于白癜风的治疗,并有较好的疗
效[3]。目前,对于白癜风的发病机理并不完全清楚,
有学者认为其属于自身免疫病[4]。本文从驱虫斑鸠
菊提取物对正常小鼠免疫分子、免疫器官指数的作
用,探讨其对小鼠免疫功能的影响。
3.2 本研究结果指出,驱虫斑鸠菊提取物对小鼠
免疫球蛋白IgA、IgG影响不大,对 IgM、C3、C4 有
显著的降低作用,这个结果与邓瑞春等[5]的研究结
果不完全一致。邓的结果认为对 IgG、IgA、IgM 均
有显著的降低作用,这有待其他研究进一步论证。
白细胞介素 -2(interleu-kin-2,IL-2)又名 T 细胞
生长因子(T cell growth factor,TCRF),主要由活化
的CD4+Th1细胞产生的具有广泛生物活性的细胞
因子,可促进Th0和CTL的增殖,故为调控免疫应
答的重要因子[6]。本研究结果指出,驱虫斑鸠菊提
取物对小鼠IL-2的分泌有显著的降低作用,可能
抑制小鼠CTL等免疫反应。
胸腺和脾脏指数高低取决于其中淋巴细胞增
殖的程度,可粗略估计小鼠免疫功能的强弱,能使
胸腺指数降低的药物一般多是具有很强免疫抑制
作用细胞毒类药物。本研究结果指出,驱虫斑鸠菊
提取物对于小鼠的胸腺指数和脾脏指数有明显的
降低作用,从另一个指标反映驱虫斑鸠菊提取物对
于小鼠免疫系统的影响,
总之,驱虫斑鸠菊对白癜风的治疗作用,可能
是通过抑制机体的免疫功能,降低机体对自身组织
(如黑素细胞)的免疫反应,减少自身组织的破坏来
发挥作用的。
参考文献
[1] 国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本
草:维吾尔药卷[M].上海:上海科学技术出版社,
2005:206-207.
[2] Whitton ME,Ashcroft DM,GonzálezU. Therapeu-
ticinterventionsforvitiligo [J].JAmAcadDerma-
tol,2008;59(4):713-717.
[3]韦侃侃,胡滨山,高永军.复方卡力孜然酊联合驱
虫斑鸠菊注射液治疗白癜风疗效观察 [J].医药
论坛杂志,2009,30(11):94-95.
[4]胡文治,赵广.白癜风免疫学发病机制的研究进
展 [J]. 中国皮肤性病学杂志,2013,27(9):
935-937
[5]邓瑞春,周勇,徐建国,尚靖,王旭丹,于鲁海,章
金刚,王冬平.驱虫斑鸠菊对小鼠免疫分子的影
响[J].生物技术通讯,2002,13(3):183-186.
[6] Martin F B,Annette O. Interleukin 2:from im-
munostimulation to immunoregulation and back a-
gain.EMBORep.2007;8(12):1142-1148.
药物 例数 脾脏指数 胸腺指数
阴性组 11 6.5±1.2 5.2±1.7
Q-H 12 4.2±1 ** 2.5±1.1**
Q-M 12 4.5±1 1** 2.6±1.5**
Q-L 12 4.8±1 2** 2.4±1.1**
阳性组 12 4.7±1.4** 3.2±1.2**
溶媒组 12 6.8±1.2 4.9±1.1
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