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经低温贮藏的兰州百合种球种植后的鳞茎生长过程中GA_3和ABA含量变化



全 文 :植物生理学通讯 第42卷 第5期,2006年10月 867
经低温贮藏的兰州百合种球种植后的鳞茎生长过程中GA3和ABA含量变化
李云飞 孙红梅 李天来*
沈阳农业大学园艺学院,辽宁省设施园艺重点实验室,沈阳110161
提要 6℃下贮藏67和101 d的兰州百合种球种植后,于花蕾伸出顶端2~3 cm时将其摘除,以后定期取样,检测鳞茎膨大
成熟过程中GA3和ABA含量的结果表明:6℃下处理101 d的母鳞茎中GA3含量先上升后下降,而处理67 d的则相反;
新鳞茎中GA3含量呈升高趋势,处理101 d的含量高于处理67 d的。母鳞茎中ABA含量先下降后上升,处理67 d的高
于处理101 d的,新鳞茎中则相反。母鳞茎中GA3/ABA比值先升高后下降,处理101 d的高于处理67 d的;新鳞茎中则
显著下降。据此认为,在百合鳞茎膨大成熟过程中,GA3和ABA之间的含量和作用并不全是互为消长的关系。
关键词 百合;鳞茎;生长;GA3;ABA
Changes in GA3 and ABA Contents in Growing Bulb of Lilium davidii var.
unicolor Hort. after Different Duration under Low Temperature
LI Yun-Fei, SUN Hong-Mei, LI Tian-Lai*
College of Horticulture, Shenyang Agricultural University, Key Laboratory of Protected Cultivation, Liaoning Province, Shenyang
110161, China
Abstract The bulbs of Lilium davidii var. unicolor Hort. were stored in moist sawdust for 67 d and 101 d at
6℃. The changes in GA3 and ABA contents in bulbs at the growth period were determined. The results showed
that GA3 content after 101 d increased during the initial growth stages and then declined in mother bulb, while
GA3 after 67 d had opposite changes. GA3 content in daughter bulb increased steadily in the storage duration.
ABA content in mother bulbs declined and then increased, which was higher after 67 d than after 101 d, while
the results were contrary in daughter bulbs. The ratio of GA3 to ABA in mother bulbs increased and then
declined, which were higher after 101 d than after 67 d, while the ratio declined in daughter bulbs dramatically.
So we concluded that the relation of GA3 and ABA was not entirely growth and decline.
Key words lily (Lilium davidii var. unicolor Hort.); bulb; growth; GA3; ABA
收稿 2006-05-08修定  2006-09-13
资助 国家自然科学基金(30400307)和辽宁省教育厅基金
(2004F084)。
*通讯作者(E-mail: ltl@syau.edu.cn, Tel: 024-88487004)。
作为地下贮藏器官的百合鳞茎是一种变态器
官,它的发生和发育在很大程度上受环境、激素
和营养条件的调节(何玉科1999)。对于百合中的
激素调节作用,以往多以离体培养的小鳞茎为试
材(Roh 1990; Park等1996; Lim等1998; Gerrits和
De Klerk 1992; Kim等1994; Franco和H 1997; De
Klerk等1992),研究外源植物生长调节剂影响百
合鳞茎生长的对象以生长素类和细胞分裂素类激素
居多,而赤霉素和脱落酸类激素的调节作用知之
甚少。为此,本文将经低温下贮藏的百合种球种
植后,在其花蕾伸出顶端2~3 cm时摘除花蕾,定
期检测鳞茎发育过程中GA3和ABA的含量变化,
以期为进一步研究百合鳞茎的发育提供参考。
材料与方法
试验材料为兰州百合(Lilium davidiivar.
unicolor Hort.)。百合地上植株枯萎以后收获鳞
茎,去除地上茎,选取鳞片抱合紧密、无病虫
伤害、鳞茎盘无损伤、重(26±1) g的独头鳞茎,
清洗干净,用50%多菌灵可湿性粉剂500倍液浸
泡30 min后放入聚乙烯袋,按每10个鳞茎1.5 L
的比例装入事先消毒、含水量为70%的锯木屑以
保湿,放于(6±0.5)℃的ZPQ-350型智能气候箱中
处理67、101 d,再放入18℃培养箱中,待种
球发芽后,定植于日光温室中,株行距15 cm×20
cm,覆土7~8 cm,按常规管理,于其花蕾伸
出顶端2~3 cm时摘除花蕾。分别于摘蕾时、摘
DOI:10.13592/j.cnki.ppj.2006.05.014
植物生理学通讯 第42卷 第5期,2006年10月868
蕾后30 d及成熟时采挖鳞茎,分成母鳞茎和新鳞
茎两部分,清洗干净,用液氮处理后置于-86℃
的超低温冰箱中保存备用。
参照南京农业大学植生室的方法,采用酶联
免疫法(李宗霆和周燮1996)测定母鳞茎和新鳞茎中
GA3和ABA含量。样品用80%冷甲醇提取,提
取液用Sep-pak C18小柱(Waters公司产品)纯化。取
纯化后的样品液400 mL,用真空冷冻干燥机冻
干,加入400 mL pH 7.4稀释缓冲液溶解,用于
GA3含量的测定。另取纯化后的样品液400 mL,
冻干后加入200 mL甲醇溶解,将溶解液进行甲酯
化处理,用于ABA含量的测定。测定时,将试
剂盒包被,4℃湿盒12 h,洗涤甩干,加入抗体,
37℃温育70 min,洗涤甩干,加入ABA (GA3)标
准液和样品液,20℃温育20 min,加入辣根过氧
化物酶标抗体,37℃温育60 min,洗涤甩干,加
入底物邻苯二胺溶液,37℃温育20 min,加入3
mol·L-1 H2SO4溶液终止反应,将微孔板置于酶标
仪(DG5031型)上测定490 nm的OD值。ELISA试
剂盒由南京农业大学生产。
结果与讨论
1 不同贮藏时间的百合鳞茎发育过程中内源GA3
含量变化
鳞茎发育期间,以6℃处理101 d的母鳞茎
GA3含量先上升后下降,而处理67 d的则与之相
反(图1)。在接近成熟期时,处理101 d的母鳞
茎中GA3含量开始低于处理67 d的。经6℃处理
101和67 d的新鳞茎中GA3含量均呈升高趋势,但
处理101 d的上升幅度较大,并且含量高于处理
67 d的。这说明摘除花蕾后,新鳞茎中GA3含量
增加可促进细胞的分裂和扩大,因而鳞茎膨大生
长,GA3含量持续上升并维持较高水平可能有利
于鳞茎维持膨大生长的时间延长。
2 不同贮藏时间的百合鳞茎发育过程中内源ABA
含量变化
母鳞茎中ABA含量先下降后上升,处理67 d
的ABA含量高于处理101 d的(图2)。新鳞茎中ABA
图1 不同贮藏时间的百合鳞茎中GA3含量变化
Fig.1 Changes in GA3 content of lily bulb at different storage durations
图2 不同贮藏时间的百合鳞茎中ABA含量变化
Fig.2 Changes in ABA content of lily bulb at different storage durations
植物生理学通讯 第42卷 第5期,2006年10月 869
含量则是先上升后下降,其中处理101 d的变化
幅度较大,其ABA含量高于处理67 d的。
3 不同贮藏时间的百合鳞茎发育过程中GA3/ABA
比值变化
由图3可以看出:母鳞茎在生育期内的GA3/
图4 不同贮藏时间的百合鳞茎中淀粉酶活性变化
Fig.4 Changes in amylase activities of lily bulb at different storage durations
图3 不同贮藏时间的百合鳞茎中GA3/ABA变化
Fig.3 Changes in GA3/ABA of lily bulb at different storage durations
ABA上升,67和101 d处理都是先升高再下降,
但67 d的变化幅度较小,101 d处理高于67 d处
理。新鳞茎GA3/ABA在生育期内显著下降,67 d
处理的在摘除花蕾后30 d至成熟期略有升高,67 d
处理的高于101 d处理的。
4 不同贮藏时间的百合鳞茎发育过程中淀粉酶活
性变化
67和101 d处理的母鳞茎和新鳞茎淀粉酶活性
的变化都呈下降趋势,母鳞茎和新鳞茎淀粉酶的
活性都是101 d处理的低于67 d处理的(图4)。
新鳞茎在摘除花蕾时的ABA含量最低,随着
鳞茎的发育膨大,ABA含量显著升高,GA3/ABA
比值则显著下降,这可能是鳞茎由膨大向成熟休
眠转变的必要条件。有报道认为ABA可抑制a-淀
粉酶的合成(Rogers和Rogers 1992) ;我们的试验
结果也表明,从摘除花蕾开始,母鳞茎和新鳞茎
中淀粉酶活性呈显著下降趋势,表明ABA很可能
有调节淀粉水解酶活性和促进不溶性碳水化合物在
鳞茎中积累的作用。
本文结果还表明,百合新鳞茎生长过程中
ABA和GA3含量均增加,这与已有报道中的二者
相互拮抗的结果(郭得平等1991)不一致,可见
ABA和GA3在鳞茎生长过程中的作用并不完全是
互为消长的关系,其间的作用机制还需深入研
究。
参考文献
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