全 文 ：1440 第 56 卷 2015 年第 9 期
收稿日期:2015-05-28
基金项目:宁波市科技局农业攻关项目 (2014C10066)
作者简介:朱宏芬 (1974 － )，女，浙江宁波人，农艺师，主要从事植物组培及栽培技术研究与推广工作。E-mail:nbnkyzhu
@ 163. com。
文献著录格式:朱宏芬，施永泰，倪建刚，等． 盆栽铁线莲 Crystal Fountain组织培养技术 ［J］． 浙江农业科学，2015，56 (9) :1440 －1442．
DOI:10. 16178 / j. issn. 0528-9017. 20150930
盆栽铁线莲 Crystal Fountain组织培养技术
朱宏芬，施永泰，倪建刚，黄 坚
(宁波市农业科学研究院，浙江 宁波 315040)
摘 要:以铁线莲 Crystal Fountain嫩茎为外植体，在添加各种激素的培养基上进行诱导、增殖和生根培养，
结果表明，MS + 0. 2 mg·L －1 TDZ + 0. 01 mg·L －1 NAA为最佳增殖培养基，增殖系数达到 3. 3，芽健壮，生长
快;1 /2MS + 0. 5 mg·L －1 IBA为最佳生根培养基，生根率达 82%。
关键词:盆栽铁线莲;水晶喷泉;组织培养
中图分类号:S 687. 3 文献标志码:B 文章编号:0528-9017(2015)09-1440-02
铁线莲属植物 (Clematis L．)隶属于毛茛科
(Ｒanunculaceae)，是一种观赏价值高、具有多种抗逆
性的藤本植物，分布于世界各地，约 300余种，我国
各地均有分布，有 140 多种［1］。由于其花形新颖别
致、花朵色泽多变、花期较长，在欧美庭园应用广
泛，尤其在垂直绿化中具有相当重要的作用，被誉为
藤本皇后。铁线莲属水晶喷泉 (Crystal Fountain)为
日本园艺品种，重瓣大花，淡蓝色，奶黄色雄蕊 (瓣
化)如同涌出的喷泉，花期长且丰花，是较合适的盆
栽品种，具有极高的观赏性和开发前景。但是 Crystal
Fountain不能进行有性繁殖，组织培养技术能有效解
决该问题。张启香等［2 －3］分别以不同品种铁线莲叶
片、茎尖和茎段为外植体进行培养，对愈伤组织诱
导、继代增殖培养和生根培养进行了研究，建立了比
较完整的快繁体系，获得了再生植株，大大提高了该
属植物的繁殖率。本试验在前人研究的基础上，以
Crystal Fountain带芽茎段为外植体，研究不同激素对
芽诱导增殖和生根的影响，为利用组织培养快速繁殖
该品种提供技术参考。
1 材料和方法
1. 1 材料
以宁波市农业高新技术试验园区的 Crystal
Fountain嫩茎为外植体材料。
1. 2 方法
外植体灭菌。将材料用自来水冲洗 10 min，在
超净工作台上，用 75%酒精浸泡 5 s，0. 1%升汞
消毒 6 ～ 8 min，无菌水冲洗 3 遍;然后把材料切成
1. 0 ～ 1. 5 cm 长、带 1 个腋芽的茎段，接种到启动
培养基中。
启动培养基选用 MS + 0. 5 mg·L －1 6-BA +
30 g·L －1蔗糖 + 6. 5 g·L －1琼脂，pH 调至 5. 8 ～
6. 0。培养条件为温度 (25 ± 2)℃，光照强度 0. 15
万 ～ 0. 2 万 lx，每天光照时间 12 h。
诱导与增殖培养。待启动培养基中培养的外植
体侧芽长至 2 ～ 3 cm 时，将其切下，剪成单芽茎
段，转接于添加不同激素配比的 MS 培养基上，培
养条件同上，培养 30 d 后观察不同培养基中芽的
生长情况和增殖系数。共设 22 个处理，每处理重
复 5 瓶，每瓶接种 1 个带芽茎段。
生根培养。以 1 /2MS为基本培养基，将 2 ～3 cm
长的芽接种到添加不同激素的生根培养基上，培养
条件同上，培养 25 d 时观察不定根生长情况。共
设 6 个处理，每处理重复 5 瓶，每瓶接种 10 株。
1. 3 数据处理
增殖系数 =增殖芽数 /接种芽总数 × 100，生根
率 /% =生根苗数 /接种苗数 × 100。
2 结果与分析
2. 1 启动培养
外植体在启动培养基中培养 7 d 左右芽开始萌
动，10 d后开始抽出侧芽，30 d后侧芽可长至 2 ～
朱宏芬，等:盆栽铁线莲 Crystal Fountain组织培养技术 1441
3 cm，芽较健壮，绿色。
2. 2 激素对增殖培养的影响
表 1 为不同种类及浓度的细胞分裂素 (6-BA，
KT和 TDZ)和 NAA组合对 Crystal Fountain增殖的
影响。3 种细胞分裂素与 NAA 组合均可促进增殖，
细胞分裂素 KT的增殖效果最差，增殖系数最高为
2. 0，苗长势一般，生长缓慢，叶片有枯黄现象。
6-BA的增殖效果好于 KT，0. 01 mg·L －1 NAA 组
合增值效果好于 0. 05 mg·L －1 NAA组合，当 NAA
浓度为 0. 01 mg·L －1时，增殖系数基本与 6-BA 浓
度成正比;当 NAA 浓度为 0. 05 mg·L －1时，增殖
系数随 6-BA 浓度的递增呈现先上升后下降的趋
势，且 6-BA浓度大于 1. 00 mg·L －1时，基本以基
部产生丛生芽为主。TDZ的增殖效果最好，且叶片
无枯黄现象，低浓度 TDZ 更有利于苗的生长和增
殖，表现为芽健壮，生长快，节间短粗，叶色深
绿，长势好，有效芽多;当 TDZ浓度达到 0. 50 mg·
L －1时，增殖系数最高，但苗生长不良，节间缩
短，畸形，玻璃化严重。综合分析增殖系数和芽长
势情况，结果表明，MS + 0. 20 mg· L －1 TDZ +
0. 01 mg·L －1 NAA 为 Crystal Fountain 组培最佳增
殖培养基。
表 1 不同种类及浓度细胞分裂素和 NAA处理对 Crystal Fountain增殖的影响
处理浓度 / (mg·L －1)
6-BA KT TDZ NAA
增殖系数 生长状况
0. 50 0 0 0. 01 1. 8 长势一般，抽生侧芽，愈伤少，有黄叶
1. 00 0 0 0. 01 3. 2 长势较好，侧芽多，愈伤少，有黄叶
1. 50 0 0 0. 01 2. 8 长势一般，侧芽多，黄化，愈伤中等
2. 00 0 0 0. 01 4. 1 长势一般，侧芽多且矮，愈伤多，有黄叶
0. 50 0 0 0. 05 1. 2 长势一般，侧芽生长，愈伤多，未出丛生芽，有黄叶
1. 00 0 0 0. 05 2. 7 长势一般，基部丛生芽生长，愈伤多，有黄叶
1. 50 0 0 0. 05 2. 4 长势较好，基部丛生芽生长，愈伤多，有黄叶
2. 00 0 0 0. 05 2. 0 长势一般，基部丛生芽生长，愈伤多，有黄叶
0 0. 25 0 0. 01 1. 3 长势一般，无愈伤
0 0. 50 0 0. 01 1. 5 长势一般，无愈伤，有黄叶
0 1. 00 0 0. 01 2. 0 长势一般，愈伤少，有黄叶
0 0. 25 0 0. 05 1. 1 长势一般，无愈伤，有黄叶
0 0. 50 0 0. 05 1. 4 长势一般，无愈伤，有黄叶
0 1. 00 0 0. 05 1. 8 长势一般，愈伤少，黄叶多
0 0 0. 05 0. 01 1. 0 长势一般，愈伤少
0 0 0. 10 0. 01 2. 4 长势好，侧芽健壮，生长较快，愈伤中等
0 0 0. 20 0. 01 3. 3 长势好，侧芽健壮，生长较快，愈伤中等
0 0 0. 50 0. 01 4. 7 芽畸形，玻璃化，愈伤中等
0 0 0. 05 0. 05 1. 3 长势好，生长较快，愈伤少
0 0 0. 10 0. 05 2. 8 长势好，芽壮，叶大，粗壮，愈伤少
0 0 0. 20 0. 05 3. 5 长势中等，愈伤少
0 0 0. 50 0. 05 5. 9 叶小，芽畸形，玻璃化，愈伤少
2. 3 不同 NAA和 IBA浓度对生根培养的影响
在生根培养基中，10 d 后组培苗基部出现
白色根原基，12 d 可见白色根系出现，25 d 时
根系粗壮，生根率和平均根数如表 2 所示，不
同浓度 NAA 和 IBA 都能诱导芽生根， IBA 处理
的生根效果好于 NAA，其中 1 /2MS + 0. 5 mg·
L － 1 IBA 培养基的生根率最高，达 82%，且生根
条数也最多，平均根数为 3. 8 条，根较粗壮，
白色。随着 NAA 浓度的升高，生根率先上升后
下降，当 NAA 浓度达到 1. 5 mg·L － 1时，基部
产生大量愈伤，生根率明显下降，根系细弱，
褐色，长势差。
表 2 NAA和 IBA处理对 Crystal Fountain生根的影响
处理浓度 / (mg·L －1)
IBA NAA
始根时间 /d 平均根数 生根率 /% 根系生长情况
0. 5 0 12 3. 8 82 长势正常，根系生长较好
1. 0 0 15 3. 2 74 基部少量愈伤，根系生长好
0 0. 1 21 1. 7 44 长势正常，根系生长正常
0 0. 5 16 2. 3 68 基部少量愈伤，根系长势一般
0 1. 0 17 1. 4 36 基部较多愈伤，根系长势差
0 1. 5 20 1. 1 14 基部大量愈伤，根系细弱，褐色，长势差
1442 第 56 卷 2015 年第 9 期
檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪
3 小结与讨论
TDZ具有生长素和细胞分裂素的双重功能，在
苹果、蓝莓、树莓等植物离体培养中，通过愈伤或
器官发生途径诱导芽的发生和增殖［3 － 4］。在铁线莲
中以茎尖为外植体进行胚性愈伤组织及体细胞胚的
诱导［5 － 6］。本试验以铁线莲 Crystal Fountain 茎段为
外植体，在培养基中添加 3 种不同水平的激素，通
过比较不同培养基中 Crystal Fountain芽的增殖情况
发现，低浓度的 TDZ 对铁线莲 Crystal Fountain 侧
芽和不定芽的萌发及诱导有促进作用，相比 6-BA、
KT，其增殖苗更加健壮。0. 2 mg·L －1 TDZ的诱导
效果最好，植株最健壮;当 TDZ浓度大于 0. 5 mg·
L －1时，会导致植株畸形，玻璃化严重。
本研究结果表明，不同生长素类物质对铁线莲
Crystal Fountain不定芽生根的诱导效果不同，IBA
对不定芽的生根诱导效果好于 NAA，0. 5 mg·L －1
IBA的生根率最高，生根数最多，且根系粗壮。
参考文献:
［1］ 中国科学院中国植物志编辑委员会． 中国植物志 ［M］． 北
京:科学出版社，1980.
［2］ 张启香，方炎明，吕梅，等． 铁线莲‘Multi-Blue’不定芽
及体细胞胚发生的初步研究 ［J］． 园艺学报，2007，34
(2) :465 － 468.
［3］ 徐晓峰，黄学林． TDZ:一种有效的植物生长调节剂 ［J］．
植物学报，2003，20 (2) :227 － 237.
［4］ 张宗勤，董丽芬，张波，等． TDZ 对树莓微繁殖的影响
［J］． 经济林研究，2004，22 (4) :50 － 52.
［5］ 张启香，胡恒康，方炎明． 铁线莲‘Multi-Blue’体细胞胚
诱导和植株再生 ［J］． 南京林业大学学报:自然科学版，
2010，34 (6) :18 － 22.
［6］ 王磊，史俊，周余华，等． 铁线莲‘Utopia’无菌外植体的
建立 ［J］． 北方园艺，2010 (5) :156 － 157.
(责任编辑:侯春晓)
收稿日期:2015-07-15
基金项目:浙江省创意农业工程技术研究中心项目 (2013E10037) ;台州市院地合作项目
作者简介:张冬青 (1953 －) ，女，浙江黄岩人，研究员，主要从事油菜遗传育种工作。Email:dq_ zhang@ 126. com。
文献著录格式:张冬青，张尧锋，余华胜，等． 彩色油菜品种及其应用 ［J］． 浙江农业科学，2015，56 (9) :1442 － 1443．
DOI:10. 16178 / j. issn. 0528-9017. 20150931
彩色油菜品种及其应用
张冬青，张尧锋，余华胜，林宝刚，华水金
(浙江省农业科学院 作物与核技术利用研究所，浙江 杭州 310021)
摘 要:浙江省农业科学院油菜育种组根据观光农业发展对特色油菜的需求，筛选和培育出了白色、橘红、
土黄、紫色不同花色的甘蓝型油菜品种 4 个，并应用于创意农业图案设计。
关键词:创意农业;甘蓝型油菜;彩色油菜花
中图分类号:S 565. 4 文献标志码:B 文章编号:0528-9017(2015)09-1442-02
近年来，发展休闲农业已成为我国农业发展
的一大亮点。《全国休闲农业发展 “十二五”规
划》提出了休闲农业的发展目标，到 2015 年，
休闲农业成为横跨农村一二三产业的新兴产业，
成为促进农民就业增收和满足居民休闲需求的民
生产业。预计 “十二五”期间，我国休闲农业点
接待人次和经营收入年均增长 15%以上;到 2018
年，我国休闲农业市场规模将接近 5 900 亿元。
由于我国农村占有了约 70%的土地资源，因此，
大部分休闲资源分布于农村。伴随土地流转、新
农村建设，农村的道路、通讯、住宿、配套设施
等休闲农业基础建设取得巨大进步，通过休闲农
业、创意农业与旅游、娱乐的结合，农业的附加
值将得到极大的提高［1 － 3］。为了满足农业休闲观
光、旅游的需要，浙江省农科院 “十二五”期间
承担了省科技厅 “浙江省创意农业工程技术研
究”的任务，开展了不同花色油菜的引种和选
育。历经 6 年的研究筛选，培育成了 4 个不同花
色的甘蓝型油菜品系，可为各地创意农业图案设
计的需求提供重要素材。