全 文 :收稿日期:2011-09-08; 修订日期:2011-12-14
基金项目:国家自然科学基金(No. 30860363)
作者简介:熊科元(1965-) ,男(汉族) ,江西南昌人,现任江西中医学院主
管药师,学士学位,主要从事中药质量分析工作.
* 通讯作者简介:刘荣华 (1964-) ,男(汉族) ,江西永新人,现任江西中医
学院教授,博士学位,主要从事中药质量评价与中药药效物质基础研究工
作.
不同产地白茅根总酚酸的含量比较
熊科元,刘荣华* ,陈石生,任 刚,邵 峰,黄慧莲,马志林
(江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室,江西 南昌 330004)
摘要:目的 比较不同产地白茅根的总酚酸含量。方法 以没食子酸为对照品,采用紫外可见分光光度法测定采自 11 个
不同产地白茅根中总酚酸的含量,检测波长为 695 nm。结果 不同产地白茅根中总酚酸的含量存在差异,其中产于江西
九江的白茅根总酚酸含量最高(3. 48 mg·g -1) ,其次是产于南昌的白茅根(3. 09 mg·g -1) ,其他产地总酚酸含量也均超
过了 2. 10 mg·g -1。结论 测定方法稳定,该研究可为白茅根总酚酸的合理开发利用及质量控制提供可借鉴的依据。
关键词:白茅根; 总酚酸; 紫外可见分光光度法
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2012. 04. 024
中图分类号:R284. 2 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2012)04-0844-02
Comparative Analysis of Total Phenolic Acid in the Roots of Imperata cylindrica from Dif-
ferent Habitats
XIONG Ke-yuan,LIU Rong-hua* ,CHEN Shi-sheng,REN Gang,SHAO Feng,HUANG Hui-lian,MA Zhi-lin
(Key Laboratory of Modern Preparation of TCM,Jiangxi University of TCM,Ministry of Education,Nanchang
330004,China)
Abstract:Objective To compare the contents of total phenolic acid in the roots of Imperata cylindrica Beauv. var. major
(Nees)C. E. Hubb. from different habitats. Methods Gallic acid was taken as the standard and the wavelength was set at 695
nm. The content of total phenolic acid in the roots of Imperata cylindrica from eleven different habitats was determined with the
method of ultraviolet and visible spectrophotometry. Results This method was stationary. The content of total phenolic acid in the
roots of Imperata cylindrica from different habitats was apparently different,the one from Jiujiang city Jiangxi Province was the
highest (3. 48 mg·g -1) ,followed by that from Nanchang city Jiangxi Province (3. 09 mg·g -1) ,and those from the other habi-
tats were all over 2. 10 mg·g -1 . Conclusion The experiment results can provide scientific evidence for comprehensive develop-
ment,utilization and quality control of tatal phenolic acid in Imperata cylindrical.
Key words:Imperata cylindrica; Total Phenolic Acids; Ultraviolet and visible spectrophotometry
白茅根为禾本科植物白茅 Imperata cylindrica Beauv. var.
major(Nees)C. E. Hubb.的干燥根茎,又名兰根、地筋、白花茅根、
茅草根、甜草根等,广泛分布于全国各地,具有凉血止血、清热生
津、利尿通淋之功效[1]。白茅根中的酚酸类成分具有血管舒张、
抗血小板聚集、抗补体、神经保护、抗 HBV、细胞毒性、抗 p -糖蛋
白等活性[2 ~ 8]。而白茅根酚酸类成分的含量测定迄今未见报道。
本研究建立白茅根总酚酸含量进行测定方法,并对不同产地白茅
根总酚酸进行比较,旨在为白茅根资源的合理开发利用及质量控
制提供理论依据。
1 仪器与试药
V -2550 型紫外分光光度计(日本 Shimadzu 公司) ;KQ -
300DB型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司) ;Sarto-
rious BT 124S型万分之一天平[赛多利斯科学仪器(北京)有限
公司];UR -210 型旋转蒸发仪(瑞士 Buchi 公司)。所有化学试
剂购自国药集团化学试剂有限公司,均为分析纯。没食子酸对照
品购自中国药品生物制品检定所(批号 110831 - 200803)。
白茅根样品均于 2010 - 09 分别采自四川安岳、江西新建、江
西九江、江西宁都、江西崇仁、湖北武汉、广东广州、河北石家庄、
安徽砀山、河南郑州、福建邵武,并经江西中医学院刘荣华教授鉴
定,凭证标本存于江西中医学院中药标本室。
2 方法与结果
2. 1 供试品溶液制备 将白茅根于 60 ℃恒温干燥,粉碎,过 60
目筛。准确称取上述白茅根粉末 2. 0 g于 100 ml具塞锥形瓶中,
加 50%乙醇 80 ml 在 30 ℃下超声提取 40 min,过滤,滤液在 40
℃下减压干燥,用适量 60%乙醇溶解,定容至 10 ml,取 0. 3 ml,用
60%乙醇定容至 10 ml,即得。
2. 2 对照品液的制备 准确称取没食子酸标准品 12. 29 mg,先用
少量 60%乙醇溶解,再加 60%乙醇定容至 25 ml。精密量取 2 ml
置 50 ml容量瓶中,用 60%乙醇定容,得浓度为 19. 70 μg·ml -1
没食子酸对照品溶液。
2. 3 方法学考察
2. 3. 1 线性关系考察 参照文献方法[9],并作改进,精密吸取上
述没食子酸对照品溶液 0. 50,1. 00,1. 50,2. 00,2. 50,2. 80 ml 分
别置于 25 ml 容量瓶中,加入新鲜配制的 0. 10 mol·L -1三氯化
铁 - 0. 008 0 mol·L -1铁氰化钾(1∶ 1)混合液 1 ml,摇匀,暗处
放置 5 min,加 0. 10 mol·L -1盐酸定容至刻度,摇匀,暗处放置 20
min,在波长 695 nm处测定吸光度。以吸光度 A 为纵坐标,没食
子酸浓度 X(μg·ml -1)为横坐标,结果表明,没食子酸在
0. 039 33 ~ 2. 200 8 μg·ml - 1范围内呈良好的线性关系,回归
方程为:A = 0. 291 1X + 0. 054 9,R2 = 0. 998 5。标准曲线见图 1。
2. 3. 2 精密度实验 按“2. 3. 1”项下方法重复测定对照品溶液 6
次。结果吸光度平均值为 0. 391,RSD = 0. 13%(n = 6)。
2. 3. 3 重复性实验 按以上比色测定条件,对江西南昌白茅根样
品溶液(0. 5 ml)重复测定 6 次。结果吸光度平均值为 0. 306,
RSD = 2. 29%。
2. 3. 4 稳定性实验 取对照品溶液及江西南昌白茅根样品溶液
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时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 4 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL. 23 NO. 4
按“2. 3. 1”项下方法显色,分别于暗处放置 0,10,20,30,40,50,
60,90 min后测定。结果表明,供试品与对照品溶液吸光度值在
20 ~ 45 min内稳定,RSD = 1. 25%(n = 6)。实际操作时,选择暗
处放置 20 min再测定。
图 1 没食子酸标准曲线
2. 3. 5 加样回收实验 精密称取江西新建白茅根样品粉末 1. 0g
共 9 份,置具塞锥形瓶中,精确加入没食子酸对照品适量,按供试
品处理方法制备,测定吸光度,分别计算加样回收率。在 97% ~
102%之间,平均加样回收率为 99. 56%,RSD = 1. 39%(n = 9)。
结果见表 1。
表 1 总酚酸加样回收实验结果
编号
样品含量
m /mg
对照品加入量
m /mg
测得量
m /mg
回收率
(%)
平均回收率
(%)
RSD
(%)
1 1. 54 1. 80 3. 35 100. 56
2 1. 51 1. 80 3. 34 101. 67
3 1. 57 1. 80 3. 36 99. 44
4 1. 53 1. 50 3. 05 101. 33
5 1. 55 1. 50 3. 04 99. 33 99. 56 1. 39
6 1. 52 1. 50 3. 00 98. 67
7 1. 54 1. 20 2. 73 99. 17
8 1. 55 1. 20 2. 72 97. 50
9 1. 58 1. 20 2. 76 98. 33
n = 9
2. 4 不同产地样品含量测定 分别精密称取 11 个产地的白茅根
粉末 2. 0 g,按供试品处理方法制备供试品溶液,分别按上述条件
测定总酚酸含量。结果见表 2。
表 2 不同产地样品总酚酸含量 mg·g - 1
产地 总酚酸含量
四川安岳 2. 25
江西九江 3. 48
江西南昌 3. 09
江西宁都 2. 40
江西崇仁 2. 94
湖北武汉 2. 85
广东广州 2. 73
河北石家庄 2. 76
安徽砀山 2. 29
福建邵武 2. 10
河南郑州 2. 28
n = 3
3 讨论
波长的选择,按照紫外 -可见分光光度法测定,在 200
~ 800 nm 波长范围内进行扫描,测定显色后的供试品和咖啡酸
对照品最大吸收波长,确定测定波长为 695 nm。见图 2。
1.白茅根样品 2.没食子酸对照品
图 2 白茅根样品及咖啡酸对照品溶液全波长扫描图
实验过程中发现,显色剂配制时间、反应时间和放置时间对
吸光度有较大影响,另外光线和温度对实验结果也有一定影响,
须严格控制,且对照品溶液、供试品溶液加各种试剂及测定的时
间均应一致。曾考察了 0. 1 mol·L -1的盐酸和 0. 1 mol·L -1的
冰醋酸两种溶剂,结果显示盐酸的显色稳定性比冰醋酸好。
含量测定结果显示,不同产地的白茅根药材中总酚酸含量差
异较大,最高的江西九江产白茅根(3. 48 mg·g -1) ,江西南昌的
含量次之,其他产地总酚酸含量也均超过了 2. 10mg·g -1。
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