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宜昌荚蒾和日本珊瑚树的化学成分研究



全 文 :226-235.
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(收稿日期:2011-03-14)
基金项目:国家科技重大专项“重大新药创制”项目(2009ZX09502-013) ;国家综合性新药研究开发技术大平台(2009ZX09301-007)
作者简介:李薇薇,女,硕士研究生 研究方向:天然产物活性成分研究 * 通讯作者:李晓波,女,教授,博士生导师 研究方向:中药活
性成分、质量标准及新技术应用 Tel:(021)34204806 E-mail:xbli@ sjtu. edu. cn
宜昌荚蒾和日本珊瑚树的化学成分研究
李薇薇,史海明,王梦月,汪筱雨,李晓波* (上海交通大学药学院,上海 200240)
摘要:目的 研究两种荚蒾属植物宜昌荚蒾和日本珊瑚树的化学成分。方法 采用多种色谱方法及波谱技术分离纯化并鉴
定化合物结构。结果 从宜昌荚蒾中分离得到 8 个化合物,分别为 β-谷甾醇(1) ,熊果酸(2) ,艾纳香素(3) ,胡萝卜苷(4) ,
(-)-lyoniresinol 3α-O-β-D-glucopyranoside(5) ,(+)-lyoniresinol 3α-O-β-D-glucopyranoside(6) ,adoxoside(7) ,马钱苷(8)。从日
本珊瑚树中分离得到 5 个化合物,分别为 a-香树脂醇(9) ,熊果酸(2) ,6α-hydroxylup-20(29)-en-3-on-28-oic acid(10) ,2a-
hydroxyursolic acid(11) ,胡萝卜苷(4)。结论 化合物 3,5,7,8 为首次从荚蒾属中分离得到;化合物 2 ~ 5,7,8 为首次从宜昌
荚蒾中分离得到;化合物 4,9,11 为首次从日本珊瑚树中分离得到。
关键词:宜昌荚蒾;日本珊瑚树;化学成分
中图分类号:R284 文献标志码:A 文章编号:1001 - 2494(2011)16 - 1234 - 04
Chemical Constituents of Viburnum erosum var. erosum and Viburnum odoratissimum var. awabuki
LI Wei-wei,SHI Hai-ming,WANG Meng-yue,WANG Xiao-yu,LI Xiao-bo* (School of Pharmacy,Shanghai Jiaotong Uni-
versity,Shanghai 200240,China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To study the chemical constituents of Viburnum erosum var. erosum and Viburnum odoratissimum var. aw-
abuki. METHODS Compounds were isolated by various column chromatographies and identified by a combination of spectrophotometric
methods. RESULTS Eight(No. 1 -8)and 5(No. 2,4,9 -11)compounds were isolated from the stems and leaves of V. erosum var.
erosum and V. odoratissimum var. awabuki,respectively. The compounds are identified as follows:β-sitosterol(1) ,ursolic acid(2) ,
blumeatin(3) ,daucosterol(4) ,(-)-lyoniresinol 3α-O-β-D-glucopyranoside(5) ,(+)-lyoniresinol 3α-O-β-D-glucopyranoside(6) ,ad-
oxoside(7) ,loganin(8) ,a-amyrin(9) ,6α-hydroxylup-20(29)-en-3-on-28-oic acid(10) ,2a-hydroxyursolic acid(11). CONCLU-
SION Compounds 3,5,7,8 are isolated for the first time from the genus Viburnum. Six(No. 2 -5,7,8)and 3(No. 4,9,11)com-
pounds are isolated from the stems and leaves of V. erosum var. erosum and V. odoratissimum var. awabuki for the first time,respectively.
KEY WORDS:Viburnum erosum var. erosum;Viburnum odoratissimum var. awabuki;chemical constituents
·4321· Chin Pharm J,2011 August,Vol. 46 No. 16 中国药学杂志 2011 年 8 月第 46 卷第 16 期
宜昌荚蒾(Viburnum erosum Thunb. var. ero-
sum)和日本珊瑚树[Viburnum odoratissimum Ker-
Gawl. var. awabuki(K. Koch)Zabel ex Rumpl.]均
为五福花科(Adoxaceae)荚蒾属(Viburnum)植物。
宜昌荚蒾主要分布于华东、华中及西南等地区,其味
涩、性平,具有解毒,祛湿,止痒之功效,主治口腔炎,
脚丫湿烂,湿疹等症[1]。日本珊瑚树产于浙江和中
国台湾地区,日本和朝鲜南部也有分布。长江下游
各地常见栽培,因对煤烟和有毒气体具有较强的抗
性和吸收能力,是一种很理想的园林绿化树种[2]。
珊瑚树和日本珊瑚树的树叶可以使鱼失去知觉,在
南亚和冲绳岛地区用作麻醉剂来捕鱼已有上百年的
历史[3]。
目前,尚无有关宜昌荚蒾枝叶的研究报道,本实
验采用多种色谱方法和波谱技术,从 2 种植物的枝
叶中共分离得到 13 个化合物,分别为宜昌荚蒾 8 个
和日本珊瑚树 5 个。其中 4 个化合物(3,5,7,8)为
首次从荚蒾属中分离得到;6 个(2 ~ 5,7,8)和 3 个
化合物(4,9,11)分别首次从宜昌荚蒾和日本珊瑚
树中分离得到。
1 仪器与材料
Agilent 1200 型高效液相色谱仪;HPLC色谱柱:
Waters C18(7. 8 mm × 300 mm,6 μm) ;Bruker Ad-
vance DRX -500 型或 Bruker Avance Ⅲ 400 型核磁
共振仪;质谱仪:Agilent 1100 系列 LC /MSD 或 Wa-
ters UPLC Acquity /QTOFMS Premier。比旋光度用
Jasco 1030 polarimeter测量;SGW X - 4 显微熔点仪
(上海精密科学仪器有限公司) ;柱层析硅胶(100 ~
200 目、200 ~ 300 目,青岛海洋化工厂) ;薄层板(烟
台市化学工业研究所) ;Sephadex LH - 20(Amer-
sham Pharmacia公司) ;实验所用试剂均为分析纯或
色谱纯。
宜昌荚蒾枝叶采自重庆市,日本珊瑚树枝叶采
自上海交通大学闵行校区,均由上海交通大学药学
院王梦月副教授鉴定,分别为宜昌荚蒾(V. erosum
var. erosum)和日本珊瑚树(V. odoratissimum var.
awabuki)。标本均存放于上海交通大学药学院中药
基因组学实验室。
2 提取与分离
2. 1 宜昌荚蒾
宜昌荚蒾干燥枝叶 20. 0 kg,用体积分数 85%
乙醇加热回流提取 3 次,提取液减压浓缩后悬浮于
水中,依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和正丁醇萃
取。乙酸乙酯部分 125 g 经硅胶柱色谱,以氯仿-甲
醇(100∶ 1→2∶ 1)梯度洗脱得到 7 个流分 Frs. 1 ~ 7。
Fr. 1 经石油醚-丙酮(1 ∶ 1)重结晶后得到化合物 1
(300 mg)。Fr. 2 经硅胶柱色谱分离后,再经 Sepha-
dex LH -20 柱色谱,以 CH3OH洗脱后得到化合物 2
(200 mg)。Fr. 4 经 Sephadex LH - 20 柱色谱,用
CH3OH洗脱得到化合物 3(10 mg)。Fr. 5 经硅胶
柱色谱,石油醚-丙酮(15∶ 1→1∶ 1)洗脱后得到化合
物 4(100 mg)。正丁醇部分 443 g经硅胶柱色谱,以
三氯甲烷-甲醇(50∶ 1→1∶ 1)梯度洗脱得到 10 个流
分。Fr. 3 经硅胶柱色谱,用三氯甲烷-甲醇(10 ∶ 1)
洗脱后得到 Frs. 3. 1 ~ 3. 4,Fr. 3. 1 用 HPLC(CH3
CN-H2O = 10∶ 90)分离,得到化合物 5(10 mg)和 6
(10 mg)。Fr. 3. 2 同样用 HPLC(CH3 CN-H2O = 20∶ 80)
分离,得到化合物 7(20 mg)和 8(25 mg)。
2. 2 日本珊瑚树
日本珊瑚树干燥枝叶 2. 3 kg,用甲醇冷浸提取
15 d,提取液减压浓缩后得提取物 350 g。取提取物
300 g经硅胶柱色谱,以二氯甲烷,二氯甲烷-乙酸乙
酯(9∶ 1) ,二氯甲烷-乙酸乙酯(7∶ 3) ,二氯甲烷-乙酸
乙酯(1∶ 1) ,乙酸乙酯,乙酸乙酯-甲醇(4 ∶ 1) ,乙酸
乙酯-甲醇(7 ∶ 3)进行梯度洗脱,得到 9 个流分
Frs. 1 ~ 9。Fr. 2 经硅胶柱色谱,以石油醚-丙酮(50∶ 1
→10∶ 1)梯度洗脱,得到化合物 9(320 mg)。Fr. 3
经硅胶柱色谱,以石油醚-丙酮(50∶ 1→10∶ 1)梯度洗
脱,得到化合物 2(1. 2 g)。Fr. 4 经硅胶柱色谱,以
二氯甲烷-甲醇(20 ∶ 1→5 ∶ 1)梯度洗脱,得到 Frs.
4. 1 ~ 4. 5,Fr. 4. 3 接下来用 Sephadex LH - 20 分
离,以三氯甲烷-甲醇(1∶ 2)洗脱得到化合物 10(410
mg)。Fr. 5 经硅胶柱色谱,以二氯甲烷-甲醇(20 ∶ 1
→5∶ 1)梯度洗脱,得到 Frs. 5. 1 ~ 5. 4,Fr. 5. 2 经硅
胶柱色谱用石油醚-丙酮(7 ∶ 3)洗脱得到化合物 11
(240 mg)。Fr. 7 经硅胶柱色谱,以二氯甲烷-甲醇
(20∶ 1→5∶ 1)梯度洗脱,得到化合物 4(510 mg)。
3 结构鉴定
化合物 3:白色粉末,mp 218 ~ 220 ℃,ESI-MS
m/z:301. 1[M - H]-。1 H-NMR(500 MHz,DMSO-
d6)δ:2. 72(1H,dd,J = 3,17 Hz,H-3a) ,3. 24(1H,
dd,J = 12. 5,17 Hz,H-3b) ,3. 78(3H,s,7-OCH3) ,
5. 42(1H,dd,J = 3,12. 5 Hz,H-2) ,6. 07(1H,d,J = 2
Hz,H-6) ,6. 10(1H,d,J = 2 Hz,H-8) ,6. 75(2H,s,
H-2,6) ,6. 87(1H,s,H-4) ,9. 04(1H,s,5-OH) ,
·5321·
中国药学杂志 2011 年 8 月第 46 卷第 16 期 Chin Pharm J,2011 August,Vol. 46 No. 16
9. 07(1H,s,3-OH) ,12. 10(1H,s,5-OH) ;13 C-NMR
(125 MHz,DMSO-d6)δ:78. 7(C-2) ,42. 2(C-3) ,
197. 0(C-4) ,163. 2(C-5) ,94. 6(C-6) ,167. 5(C-7) ,
93. 8(C-8) ,162. 8(C-9) ,102. 6(C-10) ,56. 0(7-
OCH3) ,129. 3(C-1) ,114. 4(C-2) ,145. 8(C-3) ,
118. 0(C-4) ,145. 2(C-5) ,115. 3(C-6)。以上数
据与文献[4]报道艾纳香素(blumeatin)的数据一致。
化合物 5:无色油状物,旋光值: [α]D - 105°(c
1. 2,甲醇) ,ESI-MS m/z:605. 0[M + Na]+。1H-NMR
(500 MHz,CD3 OD)δ:2. 65(1H,dd,J = 5. 9,15. 0
Hz,Ha-1) ,2. 60(1H,dd,J = 10. 9,15. 0 Hz,Hb-1) ,
3. 54(1H,dd,J = 5. 9,10. 0 Hz,Ha-3α) ,3. 34(1H,
dd,J = 6. 4,11. 1 Hz,Hb-2α) ,3. 69(6H,s,3,5-
OCH3) ;
13C-NMR(125 MHz,CD3OD)δ:33. 9(C-1) ,
41. 2(C-2) ,46. 5(C-3) ,43. 2(C-4) ,147. 5(C-5) ,
139. 4(C-6) ,148. 7(C-7) ,107. 7(C-8) ,130. 1(C-
9) ,126. 2(C-10) ,134. 5(C-1) ,107. 1(C-2,6) ,
149. 1(C-3,5) ,139. 9(C-4) ,66. 1(C-2α) ,72. 0
(C-3α) ,60. 1(5-OCH3) ,56. 6(7-OCH3) ,56. 9(3,
5-OCH3) ,104. 3(C-1″) ,75. 1(C-2″) ,78. 1(C-3″) ,
71. 6(C-4″) ,78. 0(C-5″) ,62. 8(C-6″)。以上数据与
文献[5]报道(-)-lyoniresinol 3α-O-β-D-glucopyrano-
side的数据一致。
化合物 6:无色油状物,旋光值: [α]D + 61°(c
2. 20,甲醇) ,ESI-MS m/z:605. 1[M + Na]+。1 H-
NMR(500 MHz,CD3OD)δ:2. 66(1H,dd,J = 6,15. 2
Hz,Ha-1) ,2. 57(1H,dd,J = 11,15. 2 Hz,Hb-1) ,
3. 56(1H,dd,J = 6,10. 0 Hz,Ha-3α) ,3. 35(1H,dd,
J = 6. 4,11. 1 Hz,Hb-2α) ,3. 67 (6H,s,3,5-
OCH3) ;
13C-NMR(125 MHz,CD3OD)δ:33. 7(C-1) ,
40. 7(C-2) ,46. 7(C-3) ,42. 8(C-4) ,147. 7(C-5) ,
139. 0(C-6) ,148. 7(C-7) ,107. 9(C-8) ,130. 3(C-
9) ,126. 5(C-10) ,134. 6(C-1) ,107. 1(C-2,6) ,
149. 1(C-3,5) ,139. 1(C-4) ,66. 5(C-2α) ,71. 6
(C-3α) ,60. 4(5-OCH3) ,56. 8(7-OCH3) ,57. 0(3,
5-OCH3) ,104. 9(C-1″) ,75. 3(C-2″) ,78. 3(C-3″) ,
71. 8(C-4″) ,78. 0(C-5″) ,62. 9(C-6″)。以上数据与
文献[5]报道(+)-lyoniresinol 3α-O-β-D-glucopyrano-
side的数据一致。
化合物 7:白色粉末,mp 140 ~ 143 ℃,ESI-MS
m/z:389. 2[M - H]-。1 H-NMR(400 MHz,CD3 OD)
δ:5. 20(1H,d,J = 5 Hz,H-1) ,7. 47(1H,s,H-3) ,
2. 89(1H,ddd,J = 8. 2,8. 2,13. 0 Hz,H-5) ,2. 20,
1. 45(1H,m,H-6) ,1. 90,1. 38(1H,m,H-7) ,2. 12
(1H,m,H-8) ,2. 03(1H,ddd,J = 6. 9,6. 9,13. 0 Hz,
H-9) ,4. 15(1H,dd,J = 6. 5,11. 0 Hz,H-10) ,3. 58
(1H,dd,J = 6. 5,11. 0 Hz,H-10) ,3. 71(3H,s,
OCH3) ,4. 66(1H,d,J = 8. 0 Hz,H-1) ,3. 20(1H,
dd,J = 8. 0,9. 3 Hz,H-2) ,3. 30 ~ 3. 35(3H,m,H-
3,4,5) ,3. 67(1H,dd,J = 4. 8,11. 0 Hz,H-6) ,
3. 88(1H,dd,J = 1. 8,11. 0 Hz,H-6) ;13C-NMR(100
MHz,CD3OD)δ:98. 6(C-1) ,153. 2(C-3) ,111. 9(C-
4) ,35. 0(C-5) ,32. 54(C-6) ,27. 8(C-7) ,43. 1(C-
8) ,43. 7(C-9) ,65. 9(C-10) ,170. 7(C-11) ,52. 6
(OCH3) ,99. 9(C-1) ,73. 6(C-2) ,76. 6(C-3) ,
70. 4(C-4) ,77. 1(C-5) ,61. 5(C-6)。以上数据与
文献[6]报道 adoxoside的数据一致。
化合物 8:白色粉末,mp 217 ~ 220 ℃,ESI-MS
m/z:389. 1[M - H]-。1 H-NMR(400 MHz,CD3 OD)
δ:5. 24(1H,d,J = 4. 9 Hz,H-1) ,7. 37(1H,s,H-3) ,
3. 35(1H,m,H-5) ,1. 65(1H,m,H-6) ,1. 90(1H,m,
H-6) ,3. 65(1H,m,H-7) ,2. 03(1H,m,H-8) ,2. 20
(1H,ddd,J = 6. 5,8,13. 0 Hz,H-9) ,1. 08(3H,d,J =
6. 5 Hz,H-10) ,3. 70(3H,s,OCH3) ,4. 66(1H,d,J =
8. 0 Hz,H-1) ,3. 20(1H,dd,J = 8. 0,9. 3 Hz,H-2) ,
3. 28 ~ 3. 35(m,H-3,4,5) ,3. 65(1H,dd,J = 4. 6,
11. 0 Hz,H-6) ,3. 85(1H,dd,J = 1. 8,11. 0 Hz,H-
6) ;13 C-NMR(100 MHz,CD3 OD)δ:97. 6(C-1) ,
152. 0(C-3) ,114. 0(C-4) ,32. 1(C-5) ,42. 7(C-6) ,
74. 9(C-7) ,42. 1(C-8) ,46. 4(C-9) ,13. 4(C-10) ,
169. 4(C-11) ,51. 7(OCH3) ,100. 0(C-1) ,74. 7(C-
2) ,77. 9(C-3) ,71. 5(C-4) ,78. 3(C-5) ,62. 7(C-
6)。以上数据与文献[7]报道马钱苷(loganin)的数
据一致。
化合物 9:白色粉末,mp 186 ~ 188 ℃,HR-TOF
MS m/z:425. 378 5[M - H]-。1 H-NMR(500 MHz,
C5D5N)δ:5. 23(1H,t,H-12) ,3. 47(1H,q,J2α,3α =
15,J3α,2β = 5 Hz,H-3α) ,1. 33,1. 27,1. 17,1. 08,
1. 06,0. 99(each 3H,s,6 × CH3) ,0. 95(3H,d,J =
6. 5 Hz) ,0. 92(3H,d,J = 5. 5 Hz) ;13 C-NMR(125
MHz,C5D5 N)δ:38. 7(C-1) ,27. 4(C-2) ,77. 4(C-
3) ,38. 6(C-4) ,55. 0(C-5) ,18. 1(C-6) ,32. 6(C-7) ,
39. 6(C-8) ,47. 4(C-9) ,36. 5(C-10) ,23. 0(C-11) ,
124. 2(C-12) ,139. 2(C-13) ,41. 6(C-14) ,26. 2(C-
15) ,28. 2(C-16) ,33. 3(C-17) ,58. 6(C-18) ,39. 2
(C-19) ,39. 1(C-20) ,30. 8(C-21) ,41. 1(C-22) ,
28. 1(C-23) ,15. 2(C-24) ,15. 9(C-25) ,16. 4(C-
26) ,22. 8(C-27) ,27. 6(C-28) ,17. 1(C-29) ,20. 8
·6321· Chin Pharm J,2011 August,Vol. 46 No. 16 中国药学杂志 2011 年 8 月第 46 卷第 16 期
(C-30)。以上数据与文献[8]报道 a-香树脂醇(a-
amyrin)的数据一致。
化合物 10:白色粉末,mp 274 ~ 277 ℃,HR-TOF
MS m/z:469. 332 8[M - H]-。1H-NMR(500 MHz,C5
D5N)δ:4. 97(1H,s,H-29) ,4. 80(1H,s,H-29) ,
4. 13(1H,m,H-6) ,3. 53(1H,m,H-19) ,1. 81,0. 76
(each 3H,s,2 × CH3) ,1. 67,1. 11(each 6H,s,
4 × CH3) ;
13 C-NMR(125 MHz,C5 D5 N)δ:39. 7(C-
1) ,33. 2(C-2) ,218. 5(C-3) ,47. 5(C-4) ,58. 4(C-
5) ,66. 6(C-6) ,44. 8(C-7) ,41. 4(C-8) ,49. 1(C-9) ,
38. 1(C-10) ,21. 9(C-11) ,25. 9(C-12) ,38. 1(C-
13) ,42. 6(C-14) ,30. 0(C-15) ,32. 5(C-16) ,56. 4
(C-17) ,49. 4(C-18) ,47. 4(C-19) ,151. 0(C-20) ,
30. 9(C-21) ,37. 3(C-22) ,31. 9(C-23) ,19. 8(C-
24) ,17. 7(C-25) ,16. 5(C-26) ,14. 6(C-27) ,178. 6
(C-28) ,109. 8(C-29) ,19. 3(C-30)。以上数据与文
献[9]报道 6α-hydroxylup-20(29)-en-3-on-28-oic acid
的数据一致。
化合物 11:白色粉末,mp:253 ~ 256 ℃,HR-
TOF MS m/z:473. 363 8[M + H]+,471. 357 0[M -
H]-。1H-NMR(500 MHz,C5D5N)δ:5. 45(1H,t,H-
12) ,4. 08(1H,dt,H-2β) ,3. 38(1H,d,J = 9. 5 Hz,H-
3a) ,2. 60(1H,d,J = 11. 5 Hz,H-18) ,1. 26,1. 19,
1. 06,1. 03,0. 96(each 3H,s,H-23,27,26,24,25) ,
0. 97(3H,d,J = 6. 5 Hz,H-30) ,0. 93(3H,d,J = 6. 5
Hz,H-29) ;13 C-NMR(125 MHz,C5 D5 N)δ:48. 5(C-
1) ,68. 9(C-2) ,84. 2(C-3) ,40. 2(C-4) ,56. 3(C-5) ,
19. 2(C-6) ,33. 9(C-7) ,40. 4(C-8) ,48. 4(C-9) ,
38. 8(C-10) ,24. 1(C-11) ,125. 9(C-12) ,139. 7(C-
13) ,42. 9(C-14) ,29. 0(C-15) ,25. 3(C-16) ,48. 3
(C-17) ,53. 9(C-18) ,39. 7(C-19) ,39. 8(C-20) ,
31. 4(C-21) ,37. 8(C-22) ,29. 7(C-23) ,18. 1(C-
24) ,17. 3(C-25) ,17. 9(C-26) ,24. 3(C-27) ,180. 2
(C-28) ,21. 8(C-29) ,17. 8(C-30)。以上数据与文
献[10]报道 2a-hydroxyursolic acid的数据一致。
β-谷甾醇(1)、熊果酸(2)和胡萝卜苷(4)的鉴
定通过 TLC与相应对照品比对,Rf 值一致,且混合
熔点不下降。
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(收稿日期:2011-03-28)
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中国药学杂志 2011 年 8 月第 46 卷第 16 期 Chin Pharm J,2011 August,Vol. 46 No. 16