全 文 ：药学学报 A C t aP h r a ma c eu t i caS i ni。 a19 5 9 ; 2 4 (6 ):` 7 1 ~4 7 5
、 , 扩 . 、 ` 币 户. 、 、 碑沪 .“ ` 声 , 、 户 . 口 , ,
研究简报
` 姆
r 、 . “ 抽 , ` 护 , ` 目护
去氢紫荃碱对兔血小板T X B Z及主动脉 6一 ke to -
P G F I P G F l a 含量的影响
杨 军 王义明 柴瑞华
(辽宁中医学院药理教研室 , 沈阳 1 1 0 0 32)
去氢柴茧碱 ( de h y d 0r 0 0r y d al in e , D H C )是从婴栗科植物延胡索块茎中提取的一种季胺
类生物碱 ( 其结构式如下 ) 。 实验证实延胡索治疗冠心病的有效成分为 D H (C , ) 。 D H C 对 心
血管系统的药理研究也有报道 ( 2 ’ 3 ) 。 近年的实验证明D H C 有升高血小板内。 A M P 含量的作
用并抑制 A D P诱导的血小板第四 因子 ( P F ` )的释放以 , 。 本实验通过观察 D H C对体内血栓形
成中起最重要作用的前列腺素活性物质 T x A Z与 P G I: 含量的影响 , 探讨 D H C 治疗血栓性疾
病的作用机制 。
C H
· o \ }/ 丫、 ` 0 ” -
C ” ao / \ / 瑞/ 、
/ \ / \ /
C H
3
材 料 与 方 法
F T Z ] o 1G 型液闪计数器 ; 7 2 1分光光度计 ; D H C (天津药物所赠 ) ; T X B : 及 6一 k e t o -
p G F , a药盒 (解放军 3 0 1医院 ) , A A ( S i g m a ) 用 0 . 5 m o l / L 的 N a Z C O :溶液配成 3 3 m m o l / L
浓度 , 丙二醛测定显色剂由硫代巴比妥酸 ( t h i o b a r b i t u r i e a e i d , T B A ) 5 0 0 m g溶于 2 0 %
N a o H 1 0 m l
, 用 7 0 %高氯酸调至 p H 7 . 4 , 加重蒸水 1 0 o m l ,最后加 7 % 高氯酸 5 0 m l配制
而成 。
兔血小板 T X B Z含量测定 兔在乌拉坦全麻下 自颈动脉采血 , 以 3 . 8 % 拘 摊酸钠与血
一 : g抗凝 , 血样离心 ( z 0 0 0 r / m i n ) 5 m i n 。 取上层 p R p 1 m l离心 ( 3 0 0 0 r / m i n ) 1 5 m i n ,
弃 _ L清液 , 以 0 . 1% E D T A 生理盐水溶液清洗血小板 , 加冷磷酸缓冲液制成血 小 板 悬 浮
本文于 1 9 8 8年 7月9 日收到 。
药学学报A 。 ta Pha r ma c e u ti 。 。 si ni 。a 1 5 9 9, 2 4 ( 6 ) : 4 7 1一连7 5
液 , 30 例统计 , P R P中血小板数为 。 . 65 1土 0 . 0 86 X 10 。 /m l , 每 m l血小板悬液加药液或对照
液 2 0 0件1 , 3 7 oC 下温育 1 5 m i n , 加 0 . 5 m l三氯醋酸溶 液停止反应 。将反应液以 3 0 0o r / m i n 离
心 15 m in ; 上清液以水饱和乙醚提取 3 次 , 置 65 ~ 70 ℃水浴蒸干 , 进行 T x B Z 放射免疫分
析测定 。
兔主动脉 6 一 ke t o 一 P G F ; a 含量测定 取出兔主动 脉 , 剥尽结缔 组织 , 以 滤 纸 吸去表
面液体 。 准确称量 50 m g , 置盛有 1 . 0 m l的M o E w e n氏溶液试管中 , 加药液或对照液 2 0 讨 ,
在 37 ℃温浴中温热 15 m in , 加 15 % 三氯醋酸中止反应 , 移置反应液于匀浆管内 , 冰浴下磨
成匀浆 。 匀浆离心 ( 3 0 o o r/ m i n ) 15 m in , 上清液同上法提 取烘干后 , 以放免 分 析 法 测
6 一 k e t o
一
P G F , a 含量 。
兔血小板M D A水平测定 血小板悬浮液制备同上 。 取 1 . 0 m l 血小 板 悬 浮 液于反应
管内 , 加药液或对照液 2 0 0 协 l , 3 7 oC 温育 5 m i n , 即加入 3 3 m m o l / L的 A A 2 0 协1继续保温
5 m in
, 加 T B A 液0 . 5 m l 停止反应 。 反应管置沸水 中15 m in , 显色冷却后离心得上清液 , 以
文献 (s) 法进行 M D A 测定 。
结 果
一 D H C 对兔血小板 T x B : 及主动脉 6 一 ke t 。 一 P G F l a 含量的影响
如表 l所示 : 。 . 41 , 0 . 58 及 o . 83 m g D H C均显著抑制 T X B : 产生 , 随剂量加大而作用增
强 。 抑制 率分别为 6 5 . 2 , 8 0 . 5和 8了. 6% 。 0 . 3 0 m g a s p i r i n 也显著抑制 T X B Z 的产生 , 抑
制率为 6 3 . 9 % 。 三个剂量组的 D H C对 6 一 ke ot 一 P G F ; a 生成有抑制作用 , 但。 . 41 m g D H C仅
能轻度抑制 6 一 k e t 。 一 P G F , a 产生 , 与生理盐水对照组相比 , 作用无显著性差异 。 三个剂量
组 D H C及 a s p i r i n 0 . 3 0 m g抑制 6 一 k e t o 一 P e F , a 产生率分别为 5 . 6 4 , 4 7 . 5 2 , 6 1 . 0 2和 3 5 . 4 2 % 。
T a b l
。
E f f e e t o f D H C a n d
1 n w a s 五e d r a b b i t P ] a t e l e t s
f o r 1 5 m i
n i n 玄” v 玄艺o r
s P i r i n o n f o r m a t i o n o f T X B :
a n d 6
一
k e t o
一
P G F I
。
i n a o r t a s a t 3 7
O
C
C o m P a
C o n e n
( m g / m l )
6
一
K e t o 一 P G F l a
( n g / s o m g )
C o n t r o l
D H C
A 5 P i r i n
0
。
4 1
0
。
5 8
0
。
8 3
0
_
3 0
T X B :
( n g / m l )
0
。
5 6 6士0 。 0 5 6
0
。
1 7 9土0 。 0 2 7 二
0
.
1 0 8士 0 . 0 5 1二
0
。
0 7 0土 0 . 0 1 8 . 。
0
。
2 4 0士 O。 0 3 1二
1
。
2 3 9士 0 。 6 0 6
1
。
1 3 2土 0 。 4 2 2
0
。
6 5 0土0 。 1 8 6 .
0
.
4 8 3土0 。 1 8 8 二
0
。
7 6 3土0 。 3 3 4 .
8 r a b b i t s
C o n t r a s t
w e r e u s e d i n e a e h g r o u P
。
t 0 e o n t r o l : . P < 0
。
0 5
, 二 P < o 。 0 1
二 . D H c 对 A A 诱导的 M D A 生成的影响
如表 2 所示 : D H C 可显著抑制M D A 的生成 , 随剂量加大而作用增强 , 有量效依赖关
药学学报A 。 taP 五a r ma 。 e。 t呈c a s i n宝c 。 1 08。; 24 (6 ): 47 2~47 5
系 。 0. 3 0mg a sP i ri n也显著抑制 MDA 合成 , 作用与 o . 41 m g D H C相似 , 二者差异无显著
性 。
T a b 2
.
E f f e e t
m a l o n d i a l d e 五y d e
m i n 云竹 V名t r o
0 f D H C a n d a s P i r i n o n r a b b i t P l a t e l e t
f o r m a t i o n i n d u e e d b y A A a t 3 7℃ f o r
C 0 m P d
C o n e n
( m g / m l )
M D A
(终m o l / m l )
I n h i b i t i o n o f
M D A f o r m a t i o n (% )
C o n t r o l
D H C
A 5 P 1 r i n
0
O
。
4 1
0
。
5 8
O
。
8 3
0
。
3 0
0
。
2 4 2士0 。 0 6 6
0
。
1 7 1士0 。 0 33 .
0
。
1 5 8土 0 。 0 2 7二
0
。
1 4 5士 0 。 0 1 4二
0
。
1 8 1士0 。 0 3 2 .
2 9
。
3 4
3 4
。
7 1
4 0
。
0 8
2 5
。
2 1
8 r a b b i t s w e r e u s e d i n e a c h g
r o u P
。
C o n t r a s t t o e o n t r o l : . P < 0
。
0 5 ; 。 . P < 0
。
0 1
。
讨 论
实验结果表明D H C对 T X B : 和 6一 ke t 。 一 P G F l a 生成均有抑制作用 。 0 . 41 m g D H C虽能
显著抑制 T X B : 的合成 , 但对 6 一 ke ot 一 P G F ,以抑制不显著 , 这与低剂量 as p ir n 作用相似 。据
文献报道 (“ ) , 单个刘量的 as iP ir n 就能使血小板中T X A Z 合成酶和环氧化酶持久乙酞化 , 使
血小板中新酶无法合成 。 st u ar t氏提出 as p i ir n最佳用量以每 日30 0 m g为宜 , 血浆浓度不超
过 3 m g % , 能明显抑制血小板聚集且副作用小仍 。 实验中 as iP ir n 量加大 10 倍 , 发现其对
6一 k e t o
一
p G F ; a 及 T X B Z生成均有显著抑制 。
体外由 A A诱导的血小板M D A 生成的实验发现 : D H C 各浓度组均能明显抑制 M D A
的生成 , 效应 与剂量呈依赖关系 。 as iP ir n 0 . 30 m g与 D H C 0 . 41 m g 作用无显著差异 。 说
明 D H C和环氧化酶特异性抑制剂 as iP r in 脚 作用均涉及环氧酶这一合成环节 。 但环氧酶系
统在血小板中包括环氧化酶和 T x A : 合成酶 , 在血管内皮细胞中则包括环氧化酶和 P G I : 合
成酶 。 仅从 M D A生成减少还不能判断 D H C 是仅抑制血小板环氧化酶还是 T X A : 合成酶 。
从上述实验推测 D H C在作用机理上与 as iP ir n 有共同之处 , 即在适当剂量时能显著抑
制 T x A : 合成 , 而对 P G I Z合成的抑制程度较小 。 因此建议 D H C临床应用时剂量不可过大 。
关键词 将氢紫童碱 ; 血栓素 B : ; 6 一酮 一前列腺素 F l 。 ; 丙二醛 ; 阿司匹林
参 考 文 献
秦永棋 , 等 . 延胡索治疗冠心病有效成分的研究 . 天津医药 19 7 8 ; 10 , 45 .
蒋燮荣 , 等 . 延胡索治疗冠心病的药理实验 . 中草药通讯 1 9 7 8 ; 1 1 , 5 0 7 .
蒋燮荣 , 等 . 脱氢第董碱对心血管系统的药理作用 . 药学学报 1 982 ; 1 7 , 61 .
药学学报 A etaP zl r am a。u et ia cs in ia c19 59 ;24( 6 ) :4 了 1一4 5 74 5 7
理 .范祈田 , 等 . 去氢紫荃碱对血小板环核普酸含量及血小板第四 因子释放的影响 . 中药药理与临
床 1 9 8 7 : 3 (增刊 ) : 名1 .
5
. 尹钟 未, 等 . 阿魏酸钠对大鼠血小板丙二醛生成的影响 . 中国药理学报 1 9 8 ;6 4 : 3 3 6 .
6
, 郑培良 . 阿斯匹林在防治血仕性疾病中的作用原理和童效关系 . 中国医院药学杂志 1 9 8 4 ; 了:
3 4 7
。
7
.
S t 一 a r t R K . p l a t e l e t f u n e t i o n s t u d i e s i n 五u m a n b e i n g s r e e e i v i n g 3 0 0 m g o f a s -
P 1 r i n P e r d a y
。
J L
a b C l i n M
e d 1 9 7 0 : 7 5
: 4 6 3
。
8
.
H a m 石 e r g M , e t a l . 更, r o s t a g l a n d i n e n d o P e r o x i d e s : N o v e l t r a n s f o r nZ a 之i o n o f a r a e h i -
d o n i e a e i d i n h u m a n P l a t e l e t s
.
p r o e N a t l A e a d S e i U S A 1 9 7 4 : 7 1
: 3 4 0 0
.
EFF ECT OF D EHYD RO CORYD A L INE ON F O又MA T ION OF
T HROM BOX ANE B
Z
IN P LA T E LET S A ND 6 一K ET O PGF , a IN
RA BBl l
’
A ORT A
J Y a n g
,
Y M W
a n g a n d R H C h a i
( D e P a r t o n e 几 t o f P 阮a ; , n a e o Zo g y , L艺a o 此云件 9 C o Z乙e g e o j T r a d乞艺尤o n a 艺 C儿i凡 e s e
M 己 d名e i几 e , S l e 矛乙y a 矛2 9 1 10 0 0 3 n )
A B S T R A C T D e h y d r o e o r y d a l i n e ( D H C ) w a s s li o w n t o r e d u e e t h e P r o d u e
-
t i o n o f t h r o m b o x a n e B Z ( T X B
Z
) i n p l
a t e l e t s a n d 6
一
k e t o 一 p r o s t a g l a n d i n F l a
( 6
一
k e t o
一
p G F
, a ) i n t h e a o r t a o f r a b b i t s i n v i t r o
.
T h e e f f e e t o f D H C i n e cr a s e d
w i t h t h e i n e r e o s e o f d o s e
.
D H C 0
.
4 1 m g w a s f o u n d t o i n h i b i t t h e f o r m a t i o m
o f T X B
Z
m a r k e d l y 、 \ h i l e n o t r e d u e e t 上e e o n t e n t o f 6一 k ( t o 一 f C F ! a . D l l C a l s o
e x h i b i t e d o b v i o u s i n h i b i t o r y e f f e e t o n t h e a r a e h i d o n i e a e i d ( 0
.
6 6 m m o l / L )
i n d 以 e e d f o r m a t i o n o f P l a t e l e t m a l o n d i a l d e h y d e (M D A )
.
T h e s e e f f e e t s w e r e
5 i m i l i a r t o t h e s p e c i f i e e y e l o x y g e n a s e i n h i b i t o r
, a s p i r i n ( 0
.
0 3 m g / m l )
. 飞’ h e
r e s u l t s s u g g e s t t l l a t ( 1 ) D l王C r e d u c e d b o t h e o n t e n t s o f T X A : a n d P G I Z i n , 云t r o .
( 2 ) D H e m a r k e d l y i n h i b i t e d t h e s y s t e m o f e y e l o x y艺 e n a s e i n c e l l m i e r o s o m e s .
( 3 ) A s t o w h e t h e r T X A
: s y n t h e t a s e o r e弓了 e l o x y g e n a s e w a s i r h i b i t e d i n t h e s e
e x P e r i m e n t s 15 s t i l l t o b e e l u e i d a t e d
.
K e y w o r d s D e h少 d r o e o r y d a l i n e ; T h r o m b o 二丈a n e B Z ; 6一 K e t o 一 p G F l a ; M a ] o n -
d i a l d e h y d e ; A s P i r i n