全 文 ：第 12 卷
2 0(X) 年
黑 龙 江 八 一 农 垦 大 学 学 报 12 ( 2 ) : 2 1~ 2 4
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.
o f H e i lo n画ian g A u g ist F isrt L an d R ec lam西o n U n iv esr i yt Jun e 20 00
文章编号 : 100 2 一20 9 0 ( 2 0 00 ) 0 2 . 0 02 1一 0 4
庆枝卫矛根皮中麻醉成分 F 对昆虫作用的研究
孔样清 ’ , 吴文君 2
l( 黑龙江八一农垦大学植科院 , 密山 15 8 30 8 ; 2 . 西北农林科技大学植保系 , 杨凌 71 21 0 0)
摘 要 : 以统枝卫矛根皮中分离到的麻醉成分 F 对粘虫 、 菜青虫和小地老虎进行选择性试验 , 发现
无选择麻醉作用 ; 化合物使粘虫心搏速率降低 , 呼吸耗氧盆降低 , 并使试虫体内谷氨酸及 丫 。氨基丁
酸含量显著增加 , 分别增加 73 . 7% , 192 .3 % . 化合物 F 可能影响 丫 。氨基丁酸 为递质的突触神经兴奋
传导 。
关键词 : 疵枝卫矛 ; 症状观察 ; 作用方式 ; 麻醉活性
中图分类号 : 5 4 8 .2 2 9 2 文献标识码 : A
由于长期 、 大量的使用化学农药 , 使 自然环境受到了严重污染 , 生态平衡遭到严重
破坏 , 人类健康受到严重危害 , 为 了减少化学农药对环境的污染和对人类的危害 , 一些
发达国家提出 , 在本世纪末减少一半有害化学物质的生产 , 农药的最终出路是加强对低
污染或无污染的生物农药 、 植物农药的开发研究 。 对于植物性农药的开发 , 一是直接将
植物的全株或某些部位按农药的标准加工成制剂 , 用于大田防治 , 二是从植物中分离出
具有控制有害物活性的化合物 , 以这些化合物 为 “ 模板 ” 进行模拟合成 。 历史上已成功
地合成 了拟除虫菊酷类和沙蚕毒素类化合物 。 因此 , 各国政府为了给 21 世纪作科学技
术贮备 , 都投入 了巨额资金 , 集中了众多的专家研究开发生物农药 。
1 材料与方法
1
.
1 麻醉成分 :F
以陕西眉县采取的疵枝卫矛提取得到 , 提取方法见西北植物学报 st] 。
1
.
2 症状学观察
以载毒叶片饲喂 3 龄粘虫幼虫 , 每处理 3 ,0头观察试虫的取食特点及中毒症状 , 2h4
后添加新鲜无毒的叶片观察对生 一长发育的影响 , 直至化蛹 。
1
.
3 作用方式及选择性
触杀作用 : 以 3 龄粘虫幼虫为试虫 , 每处理 20 头在每虫胸部背面点滴 1 p l样品的
丙 酮溶液 , 饲喂新鲜叶片 , 观察有无中毒症状 。
收稿日期 : 19 9 9一 0 9一 15
作者简介 : 孔样清 , 男 , 3 7 岁 , 讲师 , 西北农业大学硕士毕业 , 主要从事植物保护教学与研究 。
2黑 龙 江 八 一 农 垦 大 学 学 报 第 12卷
胃毒作用及毒力测定 :按吴文君川的方法进行 。
胃毒选择作用 :以 4龄粘虫 , 小地老虎及菜青虫饥饿 12 h 后供试 , 每处理 20 头 ,
每隔 Zh 观察一次取食反应 , 共观察 2 4 h 。
1
.
4 对粘虫某些生理指标的影响
1
.
4
.
1 对心搏速率影响 : 挑选 5 龄粘虫 , 处理组饲喂定量载毒小麦叶片 。 分别解剖正
常试虫 、 麻醉试虫各 10 头 , 置于生理盐水 中 , 在 20 ℃条件下观察心搏 12 。
1
.
4
.
2 对呼吸强度的影响 : 挑选 5 龄粘虫 , 饥饿 12 h 后 , 用每张载有 5 0 9 样品的小麦
叶片饲喂 . 挑选取食完一张叶片并麻醉的试虫 , 每 5 头一组 , 重复三组 。 以瓦勃呼吸仪
测定呼吸强度 12 ,反应槽水温为 25 ℃ , 在水槽中平衡 30 m in 后 , 每隔 hl 测量一次耗氧量 ,
连续测量 3 次 。
1
.
4
.
3 对粘虫体内谷氨酸及 丫 一氨基丁酸的影响 : 实验设正常试虫 、 麻醉前期 、 麻醉期 、
苏醒期四个处理 。 将试虫在 80 % 乙醇中研磨 , 过滤至蒸发皿中 , 以 50 m L 80 % 乙醇冲洗
滤渣 , 在 60 ℃恒温水浴中蒸干 , 蒸干后加入磺基水杨酸沉淀蛋白质 。 用 B ac k m an 121 氨
基酸分析仪分析谷氨酸及 卜氨基丁酸的含量 ( 以每百克鲜重谷氨酸或 卜氨基丁 酸的毫
克计 ) 。
2 结果与分析
2
.
1 症状学观察
2
.
1
.
1 取食特 点 : 在 每张 小 麦 叶片上 分 别载 毒 巧 . 0 00 林 g 、 .2 5 0 O p g 、 1 . 2 5 0 协 g 、
0
.
62 5 协g
、
0
.
0 0 0 p g
。 每处理投入载毒叶片后发现试虫很快取食 。 在 .0 00 一 .2 5 0 0 p g 处
理组中试虫表现为连续取食 , 直至将叶片取食殆尽 。 在 巧 .0 0 0 , g 、 处理组中 , 试虫一
般取食少量叶片后离开 , 在培养皿中爬行一段时间后继续取食 , 直至取食完大部分叶片 。
在载毒 15 . 000 , g 、 2 . 5 00 协 g 、 1 . 2 5 0 协g 、 0 . 62 5 , g 、 0 . 0 00 协 g 、 处理组中取食量分别
为 8 .7 4% 、 8 9 . 1% 、 9 3 . 3% 、 9 .4 6% 、 1 00% , 由此可 见 , 载毒量对取食量影 响不大 。
2
.
1
.
2 中毒症状 : 试虫取食一定量毒物后 , 会 出现麻醉现象 , 整个麻醉过程可 分 为 3
个时期 :
A 麻醉前期 试虫连续或间断取食后 , 有些试虫进行间歇性活动 , 绝大部分试虫处
于静止状态 。 此时若用镊子触其腹部末端 , 试虫还会爬行 , 但爬行速度及活泼程度均不
及对照试虫 。
B 麻醉期 试虫在轻度麻醉状态下 , 用镊子触其腹部末端 , 试虫不再爬行 , 虫体瘫
软 , 但反应并不完全消失 , 个别试虫头部还可微微扭动 , 进入深度麻醉后 , 试虫反应完
全消失 。
C 苏醒期 经过一段时间 , 麻醉试虫也会苏醒 。 开始 , 试虫躯体前半部微有活动 ,
但仍不能爬行 。 经过一段时间后可作短距离爬行 , 刚苏醒的试虫不取食 , 再经过一段时
间方可取食 。
2
.
2 作用方式及选择性
触杀作用 : 将 F 用丙酮稀释成 1 . 5% 、 1 . 0% 、 .0 5%浓度 , 在 3 龄粘虫的胸部背面点
滴 1 “ L , 饲以新鲜叶片并饲养至 4 龄 , 结果说明试虫并不表现麻醉及其它中毒症状 ,
蜕皮亦正常 。
第 2 期 孔祥清等 : 优枝卫矛根皮中麻醉成分 F 对昆虫作用的研究 23
胃毒作用 : 按吴文君介绍的测定胃毒麻醉毒力的方法 , 测定麻醉成分 F 的麻醉中
量 N o s。 为 73 . 0 协 9/ 9 0
选择性 : 以每叶片载毒 1 5 0 9 的剂量饲喂菜青虫 、 小地老虎 4 龄幼虫 ,结果发现菜
青虫及小地老虎均可麻醉 ,但小地老虎麻醉后虫体不如粘虫及菜青虫瘫软 ,且苏醒较快 。
说明麻醉成分没有明显 的选择性 。
2
.
3 对心搏的影响
观察结果表明 ,粘虫麻醉后心搏速率明显降低 , 对照试虫心搏平均 1.6 5 次m/ in , 而
麻醉试虫心搏仅 5 . 3 次 /m in (表 l ) 。 观察还发现对照试虫心搏节律正常 , 从后向前同步
搏动而有力 , 麻醉试虫心搏微弱 , 有间歇 、 不能完全收缩 、 有时快有时慢的现象 , 有的
试虫后几节心室搏动 , 前几节不动 , 或前后不 同步 。
表 1 麻醉试虫和正常试虫心搏
试虫编号
对照试虫心搏
(次 /m in )
麻醉试虫心搏
(次 /m in )
13
.
0 1 1 18
.
5 16 19
.
5 16
8 9 10 平均
2 0
.
5 13
.
5 2 1
.
0 16
.
5
3一.5
2
.
4 对呼吸耗氧量的影响
挑选麻醉的试虫及正常试虫 , 以瓦勃呼吸仪测定呼吸耗氧量 , 每次测定时间为 l h ,
测定 3 次 , 呼吸耗氧量 以 c m 3 / g h/ 表示 , 结果见表 2 。
表 2 呼 吸耗氧量 ( c m3 / g / h)
重复
正 `常试虫
麻醉试虫
0
.
8 4 5
0
.
8 0 3
0
.
84 3
0
.
70 2
0
.
83 9
0
.
58 6
从表 2 看出麻醉试虫 的耗氧量低 于正常试虫 , 并且随时间的延长 ( 即麻醉 的加深 )
而下降 , 正常试虫的耗氧量则基本上没有变化 。 这正与麻醉试虫心搏速率降低相吻合 。
2
.
5 对试虫体内谷氨酸及 丫 一氨基丁酸的影响
测定 正常 、 麻醉前期 、 麻醉期 、 苏醒 期 4 龄粘虫体内谷氨酸及 卜氨基丁酸含量 ,
结果见表 3 。
表 3 试虫体内谷氨酸及 丫 一氨基丁酸含量 (m g 1/ 00 9 )
处理 谷氨酸 增加值 (% ) G A B A 增加值 (% )
2 3 8
.
4
19 2
.
3
76
.
9
3481.243正常试里
麻醉前期
麻醉期
苏醒期
注 :表中数据为二次测定结果的平均值 。
从表 3 看出 , 试虫取食麻醉成分后到真正麻醉这个时期内 , 虫体 内的谷氨酸即增
加 , 试虫真正麻醉后谷氨酸含量进一步增加 , 麻醉苏醒后 , 谷氨酸含量比麻醉期略有下
黑 龙 江 八 一 农 垦 大 学 学 报 第 1 2卷
, 但仍明显高于对照 。 试虫体内 G A B A 含量在试虫取食后麻醉前这一段时间内增加
24一降
最多 , 到了真正麻醉反而略有下降 , 试虫麻醉苏醒后明显低于麻醉期 , 但仍高于对照试
虫 。 试虫体内谷氨酸和 G A B A 含量的变化 , 说明庆枝卫矛中麻醉成分可能和这两种神
经递质相关的神经传导有关 。
参 考 文 献
l[ l 吴文君 . 新化合物苦皮藤素 I 的分离及其生物活性 IJ . 西北农业大学学报 , 19 8 , 16 ( 2) : 93 一% ·
2[] 陈长琅 , 韩召军 , 王荫长 . 昆虫生理生化实验 [M l . 北京: 中国农业出版社出版 , 19 93 . 7 9一83 .
13 】孔样清 . 优枝卫矛根皮中杀虫成分的分离及其生物活性 [J] .西北植物学报 , 2 0 0 ,2 o (2 ) : 2 9 一 30 .2
A S T U D Y O F H O W N A R C O T I C
A C T I V I T Y F F R O M T H E R 0 0 T
O F E U O N Y M U S V E R R U C O S I D E S A F F E C T IN S E C T
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A b s t r a e t: C o m Po u n d F h a d n o s e l e e t i v e n a r e o ti e t o ar m y w o mr
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e a t e pr i l lar 印 i e r is r op a e 夕a n d e u tw o mr 阴 g or r i s y P s i l o n 夕 . C o m P a r e d w it h t h e e o n t r o l l a vr a e ,
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