全 文 ：2015 年 1 月 第 17 卷 第 1 期 中国现代中药 Modern Chinese Medicine Jan. 2015 Vol. 17 No. 1
·中药工业·
*［通信作者］ 韦怡，讲师，研究方向:中医临床及教学;E-mail:65653067@ qq. com
HPLC测定蒲地蓝消炎片中紫堇灵的含量
覃华亮1，韦怡2*
(1. 广西壮族自治区柳州食品药品检验所，广西 柳州 545006;
2. 广西中医药大学 附属瑞康医院，广西 南宁 530011)
［摘要］ 目的:建立蒲地蓝消炎片中紫堇灵含量的测定方法。方法:采用 Diamonsil C18色谱柱(250 mm ×
4. 6 mm，5 μm) ，流动相为甲醇 － 0. 015 mol·L －1磷酸盐缓冲液(pH 6. 7) (70∶30) ，流速为 0. 8 mL·min －1，检测波长
为 289 nm，柱温为 35 ℃。结果:紫堇灵进样量在 0. 141 5 ～ 0. 377 3 μg 与峰面积呈良好的线性关系(r = 0. 999 6);
平均回收率为 98. 49%(n = 6) ，ＲSD = 0. 45%。结论:该方法简便准确，分离度高，专属性强，重复性好，可用于
蒲地蓝消炎片中紫堇灵的含量测定。
［关键词］ 蒲地蓝消炎片;紫堇灵;高效液相色谱法;含量测定
Determination of Corynoline in Pudilan Anti-Inflammatory Tablet by HPLC
TAN Hualiang1，WEI Yi2*
(1. Liuzhou Institute for Food and Drug Control，Liuzhou 545006，China;
2. Ｒuikang Hospital Affiliated to Guangxi University of Chinese Medicine，Nanning 530011，China)
［Abstract］ Objective:To establish an HPLC method to determine the content of corynoline in Pudilan Anti-
Inflammatory tablet. Methods:The Diamonsil C18(250 mm ×4. 6 mm，5 μm)column was used. The mobile phase consisted of
methanol -0. 015 mol·L －1 phosphate buffered solution(pH 6. 7) (70 ∶ 30 for volume)at flow rate of 0. 8 mL·min －1 . The
detection wavelength was 289 nm and the column temperature was 35 ℃. Ｒesults:The calibration curve was in good linearity
within the range of 0. 141 5-0. 377 3 μg(r = 0. 999 8，n = 6). The average recovery was 98. 49%，and the ＲSD was 0. 45%
(n = 6)． Conclusion:This method is simple，accurate，high separation degree，strong specificity and good repeatability，
which can be used for determining the content of corynoline in Pudilan Anti-Inflammatory tablet.
［Key words］ Pudilan Anti-Inflammatory tablet;Corynoline;HPLC;Content determination
doi:10． 13313 / j． issn． 1673-4890． 2015． 1． 015
蒲地蓝消炎片由黄芩、蒲公英、苦地丁、板
蓝根组成，收载于 《卫生部药品标准·中药成方
制剂》(第三册) ，具有清热解毒，抗炎消肿的功
效，用于疖肿、腮腺炎、咽炎、淋巴腺炎、扁桃
腺炎等［1］。紫堇灵是苦地丁中的有效成分之一，
具有镇静、抗钩端螺旋体及肝损伤保护作用［2-3］。
查阅相关文献［4-10］，并没有关于蒲地蓝消炎片中
紫堇灵含量测定方法的报道，为了更好地控制药
品质量，本文采用高效液相色谱法对蒲地蓝消炎
片中紫堇灵含量进行测定，并考察了该方法的准
确性。
1 仪器与试药
1. 1 仪器
LC-2010A高效液相色谱仪、紫外可见波长检测
器(日本岛津) ，LC Solution 色谱工作站，UV-2450
紫外可见分光光度计(日本岛津公司) ;Mettler Xp26
微量电子分析天平(瑞士梅特勒公司，精密度:百万
分之一);Mettler AE-200 电子分析天平(瑞士梅特勒
公司，精密度:万分之一) ;AS7240BT 超声波清洗
器(天津奥特赛恩斯仪器有限公司)。
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2015 年 1 月 第 17 卷 第 1 期 中国现代中药 Modern Chinese Medicine Jan. 2015 Vol. 17 No. 1
1. 2 试药
紫堇灵对照品(中国食品药品检定研究院，批号:
111734-200601);蒲地蓝消炎片(广东心宝制药有限公
司，批号:20140105，20131201，20130905) ;甲醇为
色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 对照品溶液的制备
精密称取紫堇灵对照品适量，加甲醇制成质量
浓度为 0. 235 8 mg·mL －1的对照品储备液，备用。精
密吸取上述储备液 1 mL，置 10 mL 量瓶中，加甲醇
稀释至刻度，制成质量浓度为 23. 58 μg·mL －1的对
照品溶液。
2. 2 供试品溶液的制备
取重量差异下的样品，研细，精密称定 1. 0 g，
置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇 20 mL，称定重量，
超声处理 30 min，放冷，再称定重量，用甲醇补足
减失的重量，摇匀，滤过，用 0. 45 μm 微孔滤膜过
滤，取续滤液作为供试品溶液。
2. 3 色谱条件
Diamonsil C18色谱柱(250 mm × 4. 6 mm，5 μm) ;
流动相为甲醇 － 0. 015 mol·mL －1 磷酸盐缓冲液
(pH6. 7) (70∶30) ;流速为 0. 80 mL·min －1;检测波
长为 289 nm;柱温为 35 ℃;进样量为 20 μL。理论
板数按紫堇灵峰计算应不低于 5 000。
2. 4 线性关系考察
分别精密吸取对照品溶液 6、8、10、12、14、
16 μL，注入色谱仪中，测定，以进样量为横坐标，
峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程为 Y =
1. 451 × 106X + 6. 042 × 103，r = 0. 999 8。结果表明，
紫堇灵在 0. 141 5 ～0. 377 3 μg具有良好的线性关系。
2. 5 精密度试验
精密吸取 2. 1 项下对照品溶液 10 μL，按 2. 3 色
谱条件连续进样 6 次，在相同条件下测定，得紫堇
灵峰面积的 ＲSD =0. 81%，结果表明精密度良好。
2. 6 稳定性试验
取供试品溶液(批号:20140105)，分别在室温放
置 0，6，12，18，24 h后进样 10 μL分析，测定紫堇
灵的峰面积，所得峰面积的 ＲSD =0. 62%(n = 6)。结
果表明，供试品溶液室温放置 24 h内稳定性良好。
2. 7 重复性试验
取同一批号样品(批号:20140105) ，按 2. 2 方
法制备 6 份供试品溶液，按 2. 3 色谱条件下进样
20 μL，测定峰面积，计算紫堇灵平均质量分数为
0. 21 mg·g －1，ＲSD =0. 93%，结果表明重复性良好。
2. 8 专属性试验
取按蒲地蓝消炎片处方比例和工艺制成的缺苦
地丁的阴性对照品适量，精密称取 1. 0 g，按 2. 2 方
法制备成缺苦地丁的阴性对照溶液，按 2. 3 色谱条
件测定，结果表明处方中其他成分对紫堇灵的测定
无干扰，见图 1。
A. 紫堇灵对照品;B. 供试品;C. 缺苦地丁的阴性样品;
1. 紫堇灵。
图 1 蒲地蓝消炎片及对照品 HPLC图
2. 9 加样回收率试验
精密称取 6 份已知含量的供试品 (批号:
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20140105，含紫堇灵 0. 21 mg·g －1)，各 0. 50 g，分
别精密加入 2. 1 紫堇灵对照品储备液 0. 5 mL，按上
述制备方法及色谱条件操作，结果见表 1。
表 1 蒲地蓝消炎片中紫堇灵加样回收率试验
序号
取样量
/ g
样品中含
量 /mg
测得量
/mg
回收率
(%)
平均回收
率 (%)
ＲSD
(%)
1 0. 501 1 0. 105 2 0. 221 8 98. 90 98. 49 0. 45
2 0. 508 4 0. 106 8 0. 223 2 98. 73
3 0. 503 3 0. 105 7 0. 223 1 99. 58
4 0. 502 7 0. 105 6 0. 220 3 97. 29
5 0. 509 8 0. 107 1 0. 222 9 98. 22
6 0. 507 5 0. 106 6 0. 222 0 97. 88
注:紫堇灵对照品加入量均为 0. 117 9 mg。
2. 10 蒲地蓝消炎片样品的测定
取 3 批蒲地蓝消炎片样品(批号:20140105，
20131201，20130905)，测定紫堇灵的含量，每一批
样品按 2. 2 方法制备 3 份供试品溶液，按上述方法
进样分析，结果见表 2。
表 2 蒲地蓝消炎片中紫堇灵的测定(n = 3)
mg /片
批号 紫堇灵 ＲSD (%)
20140105 0. 053 0. 72
20131201 0. 056 0. 63
20130905 0. 049 0. 91
3 讨论
在初试验时，采用《中国药典》2010 版一部中
苦地丁含量测定项下的流动相和检测波长检测样品
中紫堇灵的含量［11］，结果发现，紫堇灵出峰的峰形
好，基线平稳，柱效高，保留时间适中，达到良好
的分离效果，由此确定色谱条件。
紫堇灵为异喹啉类生物碱，易溶于三氯甲烷、
丙酮等有机溶剂。笔者分别考察了以甲醇、丙酮、
三氯甲烷为溶剂的提取效率，其中甲醇提取最为完
全。提取方法考察了加热回流和超声提取，结果发
现加热回流提取所得成分较多，导致干扰峰数量多、
面积大，而紫堇灵含量相对较低，无法对紫堇灵峰
进行准确积分，最终选用超声法进行提取。提取方
法确定后，分别考察了 10，20，30，40，60 min 的
超声提取，结果表明 30 min 以后，样品中紫堇灵的
含量不再提高，因此确定提取时间为 30 min。
有研究表明［12］，目前市场上不同产地的苦地
丁所含紫堇灵的差异很大，选用不同产地的苦地丁
投料，必然会影响到蒲地蓝消炎片的质量。现行标
准中，除检查项外，无鉴别及含量测定项目，无法
较好地控制药品质量。本文采用高效液相色谱法测
定蒲地蓝消炎片中的紫堇灵含量，样品处理简单，
方法快速准确，对其质量控制具有一定的参考
价值。
参考文献
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(收稿日期 2014-04-29)
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