全 文 ：延胡索中盐酸脱氢紫堇碱对照品的制备与鉴定＊
徐世芳　李晓誉　叶益萍■　陈峰阳　王虎根
(浙江省医学科学院·杭州 310013)
摘　要　目的:研究中药延胡索中盐酸脱氢紫堇碱的制备方法。方法:延胡索粗粉用 80%乙醇提取 ,浓缩
后经 D101 大孔树脂柱色谱分离获得总生物碱 , 再以氧化铝柱色谱和凝胶 G-15柱色谱分离 ,收集含脱氢
延胡索碱的组分 ,经甲醇重结晶制备对照品 ,并采用波谱方法对其进行结构鉴定。 结果:经 HPLC 分析和
面积归一化法计算 ,盐酸脱氢紫堇碱对照品纯度为 98.6%。结论:该制备方法简便可行 ,可用于盐酸脱氢
紫堇碱对照品的制备。
主题词　延胡索/分析　盐酸脱氢延胡索碱/分离和提纯　延胡索/化学
＊浙江省科技计划项目 No.2005F12025
■通讯作者
　　延胡索为罂 粟科植物 延胡索(Corydalis yanhusuo
W.Twang)的干燥根茎 ,别名玄胡 、元胡[1] 。主产于我省东阳 、
磐安 、缙云等地 ,为道地药材“浙八味”之一。延胡索为我国
传统活血止痛中药 , 具有活血化瘀 、理气止痛功效。现代药
理研究表明:生物碱是延胡索治疗心血管疾病的有效成分 ,
其中脱氢紫堇碱(脱氢延胡索碱 , Dehydrocorydaline)是主要有
效成分 ,其具有扩张冠状血管 、提高冠脉血流量 、改善心肌耐
缺氧能力等作用 ,对心肌缺血 、坏死亦有保护作用[ 2] 。 中国
药典2005版仅收录延胡索药材中延胡索乙素的含量测定方
法 ,卫生部药品标准中药成方制剂收载的用于治疗冠心病 、
心绞痛和急性心肌梗塞的延胡索单味制剂“可达灵片”收录
了脱氢紫堇碱的薄层扫描含量测定方法 ,而目前市场上没有
脱氢紫堇碱对照品出售 ,因此给延胡索及其制剂的质量控制
带来了困难。本文采用大孔吸附树脂 、氧化铝和凝胶柱色谱
相结合 , 探索了盐酸脱氢紫堇碱对照品的分离制备 , 其分离
工艺简单 ,可以获取大量高纯度的盐酸脱氢紫堇碱对照品。
1　仪器与试剂　Bruker AVANCE DMX-500 型核磁共振仪 ,
Bruker Esquire 3000plus型质谱仪 , Shimadzu LC-20AT 型高效液
相色谱仪(SPD-20A 型 VWD检测器 , N2000 工作站);D101 大
孔吸附树脂:南开大学化工厂;中性氧化铝:上海五四化学试
剂有限公司;凝胶G-15:Pharmarcia公司;乙腈:Merck公司;其
他试剂均为分析纯。延胡索药材购自杭州市中药饮片厂。
2　方法与结果
2.1　延胡索总生物碱的分离　延胡索生药粗粉 800g , 用
80%乙醇回流提取 3次 , 每次 2 小时 , 合并 3 次提取液 , 减压
浓缩至 500ml , 上 D101大孔树脂柱色谱 , 经水洗脱(2 ～ 3BV),
再用 0.02N 盐酸 50%乙醇洗脱(3BV), 收集洗脱液 , 减压浓
缩 ,得到棕褐色总生物碱 11.5g。
2.2　盐酸脱氢紫堇碱的分离与制备　取总生物碱 11.5g 经
中性氧化铝柱色谱分离 ,用乙醇洗脱 , 以氯仿:甲醇:水=15:
3:1(下层)展开后 , 合并含脱氢紫堇碱的组分 2.5g。该组分
以水溶解 ,上凝胶 G-15柱色谱 , 以 0.01N盐酸水溶液洗脱 ,
收集流份 ,HPLC 检测 ,合并纯度达到 90%以上的样品 , 再用
甲醇重结晶 , 得到黄色针状结晶 500mg。
2.3　盐酸脱氢紫堇碱的鉴定
2.3.1　纯度检测　高效液相色谱条件:Diamonsil C -18
(4.6mm×250mm , 5μm)色谱柱;流动相:乙腈:0.2%醋酸(18:
82);检测波长:210nm;流速:1ml/ min;柱温:30℃。面积归一
化法计算 , 其纯度为 98.6%, 见图 1。
图 1　盐酸脱氢紫堇碱的HPLC色谱图
2.3.2　结构鉴定　黄色针状结晶(甲醇)。 EI-MS:366[ M+
1] +。 1HNMR(DMSO-d6 , 500MHz)δ:9.94(1H , s ,H-8), 8.23
(1H , d , J =9.5Hz , H-11), 8.20(1H , d , J =9.5Hz ,H -12),
7.40(1H , s ,H-1), 7.19(1H , s , H-4), 4.87(2H , t , J =5.0Hz ,
H-6), 4.11(3H , s , OCH3), 4.10(3H , s , OCH3), 3.90(3H , s ,
OCH3), 3.86(3H , s , OCH3), 3.15(2H , t , J=5.5Hz , H-5), 2.51
(3H , s , CH3)。 13CNMR(DMSO-d6 , 125MHz)δ:151.1(C-9),
150.7(C -3), 147.7(C -2), 144.5(C -10), 144.5(C -8),
136.5(C-13a), 133.6(C-13b), 132.3(C-4a), 130.2(C-
8a), 126.4(C-12), 121.7(C-12a), 121.2(C-11), 119.6(C-
13), 114.8(C-1), 111.5(C -4), 62.5(OCH3), 57.5(C-6),
57.3(OCH3), 56.7(OCH3), 56.3(OCH3), 27.3(C -5), 18.2
(CH3 -13)。经与文献[3]对照 , 该化合物的结构鉴定为脱氢
紫堇碱(Dehydrocorydaline)。
3　讨论　脱氢紫堇碱是延胡索治疗心血管疾病的主要有效
成分 , 可以作为其制剂含量测定控制的指标。卫生部药品标
·129·中国中医药科技 2009年 3 月第 16卷第 2 期 Mar.2009 Vol.16 No.2
准中药成方制剂收载“可达灵片”采用脱氢紫堇碱的薄层扫
描含量测定方法 ,此外姜舜尧采用高效液相色谱法测定元胡
止痛片中脱氢延胡索碱的含量[ 4] 。以往的研究中 ,延胡索生
物碱的分离常用溶剂萃取和酸碱处理 ,然后采用硅胶柱层析
分离 ,样品回收率低 , 且需要大量有毒有机溶剂[3] 。本文采
用大孔吸附树脂柱色谱法获得总生物碱 ,然后采用氧化铝柱
色谱和凝胶G-15 柱色谱相结合的方法 , 获得脱氢紫堇碱对
照品 ,分离工艺仅需要乙醇 、水及少量酸 , 而且回收率高 , 适
合于大量生产制备。
另外 ,盐酸脱氢紫堇碱的鉴定中还按照药典附录Ⅲ进行
了氯化物的鉴别试验 , 结果呈阳性。
　　参考文献
1　国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部).北京:化学工业
出版社 , 2005:94.
2　蒋燮荣 ,吴庆仙 ,施化莲 ,等.脱氢紫堇碱对心血管系统的药理作
用.药学学报 ,1982 , 17(1):61.
3　王文蜀 ,肖巍 ,喻蓉 ,等 ,中药延胡索化学成分研究.中央民族大
学学报(自然科学版), 2007, 16(1):80.
4　姜舜尧 , 高效液相色谱法测定元胡止痛片中脱氢延胡索碱的含
量.中国中药杂志 , 2000, 25(8):479. (修回:2008-12-10)
齐刺电针疗法治疗脊髓损伤 24例临床观察
盛国滨　霍　金　王　玲　(黑龙江中医药大学·哈尔滨 150040)
1　临床资料　在本院专科病房与门诊选择符合美国脊髓损伤协会
2000年ASIA 诊断标准[ 1] 的患者共 48 例 ,男 35例 ,女 13例;年龄 18
～ 70岁之间;发病在 4周之后处于脊髓休克期后恢复期的患者。随
机分为治疗组和对照组。其中 ,治疗组 24 例 ,脊髓完全性损伤 10
例 , 脊髓不完全性损伤 14例。对照组 24例 ,脊髓完全性损伤 9例 ,脊
髓不完全损伤 15例。所有患者均经过 CT和 MRI检查确诊。
2　方法　
2.1　治疗组　(1)齐刺电针。取穴:主穴分为 3个平面取穴 ,即脊髓
损伤平面 ,上平面(脊髓损伤节段的上 1个节段)及下平面(脊髓损伤
节段的下 2～ 3个节段)。针法:每个平面均在正中先刺 1针, 并于两
旁(夹脊穴)各刺 1针 , 3 针齐用。上肢呈弛缓性瘫痪的配双侧的肩
、曲池 、外关 、合谷;下肢呈弛缓性瘫痪的配双侧的髀关 、伏兔 、阳陵
泉 、足三里。然后应用长城KWD-808Π电针仪(常州英迪电子医疗
器械有限公司生产),主穴上 、下同侧联线 ,正极接上点 ,负极接下点 ,
波形用密波。配穴上 、下肢分别同侧上下联线 ,波形用疏波。每日 1
次 , 每次 30分钟 , 10次为 1疗程 ,间隔 2天行下 1疗程。(2)脑蛋白水
解物(云南盟生药业有限公司生产)120mg 加入 0.9%NaCl 注射液
250ml中静滴 ,每日 1次。观察 3个月评定疗效。
2.2　对照组　予脑蛋白水解物治疗 ,同治疗组。
2.3　观察方法　观察两组疗效及治疗前后体感诱发电位(SEP)潜伏
期异常情况[ 2] 。
2.4　统计学处理　采用 SAS统计软件进行分析 ,采用χ2 检验。
3　结果　
3.1　疗效标准　参照文献[3] 。
3.2　两组疗效比较　见表 1。
表 1 两组疗效比较〔n(%)〕
组别 n 显效 有效 无效 有效率
治疗组 24 3(12.5) 18(75.0) 3(12.5) 87.5%
对照组 24 0(0) 10(41.7) 14(58.3) 41.67%
　　与对照组比较＊P<0.05
3.3　两组治疗前后 SEP 潜伏期异常情况比较　治疗组 24例 , 治疗
前 SEP潜伏期异常 16例 , 66.67%;治疗后异常 10例 , 41.67%;疗后
疗前比较有明显改善(P<0.01);对照组疗前异常 15例 , 62.5%,疗
后异常 13例 , 54.16%,两组比较 P<0.05。
4　讨论　脊髓损伤属于祖国医学“痿证”的范畴 , 乃督脉损伤所致。
督脉为阳脉之海 ,总督一身阳气 ,督脉失养 ,造成肢体痿废不用。针
刺督脉能直达病所 ,疏经活络 , 调节脏腑气血平衡 , 减轻和延缓伤后
早期病理损害,改善脊髓微循环 ,促进神经功能恢复和神经再生。而
夹脊穴位于督脉与足太阳膀胱经之间 , 针刺夹脊穴可以调理督脉与
膀胱经之气 ,因五脏六腑之俞穴聚会于膀胱经脉 ,所以针刺夹脊穴又
可调整脏腑气血之平衡 ,疏通经脉。因此 ,齐刺电针疗法取督脉及两
侧损伤平面上下的夹脊穴治疗截瘫 ,可以疏通督脉 ,调和气血使经气
运行通畅 ,提高体质,有利于疾病的治疗。
督脉与夹脊穴位于脊神经后支 ,电刺激通过脊神经根可直接作
用于脊髓及其包膜 ,有利于调节病变部位的血液供应和神经功能。
此外,根据神经解剖学研究 ,交感神经纤维通过交通支与脊神经联
系 ,并随脊神经分布到周围器官和脏器 , 通过针刺穴位 ,引起针感传
导反应 ,通过神经体液传导作用 ,可影响到交感神经末稍释放的化学
介质 ,以调整脏腑功能 ,达到治疗疾病的目的[4] 。本治疗方法在同侧
督脉与夹脊穴上下各联接一对导线 ,并始终保持正极在上 、负极在下
的联接 ,形成方向恒定的较强的电场 ,也有利于刺激神经纤维沿电力
线的方向再生 ,促进脊髓功能的恢复。 从脊髓损伤节段的病理解剖
和病理生理特点上看 ,脊髓损伤面和正常脊髓之间可能还存在有可
能恢复功能的部分区域 ,如果采取有效措施 ,改善局部的血液供应 ,
以及改善脊髓损伤区和周围临近神经组织的不良环境 ,也可能使这
一区域的神经获得最大程度的恢复。 这对于肢体瘫痪 ,丧失生活自
理能力的患者来说 ,即使是提高小部分肌力 ,使截瘫平面有所下降 ,
也有很重大意义。采用齐刺电针的方法, 可以使脊髓性截瘫患者的
脊髓神经功能有所恢复 ,从而说明齐刺电针是治疗脊髓性截瘫的一
种有效方法。
　　参考文献
1　周星帆 ,王丽萍 ,王书智 ,等.脊柱脊髓损伤MRI 诊断及临床应用.
实用医学杂志 , 2003, 10(7):728.
2　刘南平 ,孙海峰 ,陈景云 ,等.脊髓疾病体感诱发电位检测的临床
应用.宁夏医学杂志 , 2002, 24(8):475.
3　邱卓英.国际功能 、残疾和健康分类(ICF)应用指导(一)·中国康
复理论与实践 , 2003, 9(1):2.
4　李志刚 ,刘书坤.近十年电针治疗脊髓损伤的临床和实验研究概
况.中国中医药科技 , 2004, 11(6):386.
(修回:2008-12-25)
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