全 文 ：　文章编号:1007-4961(2000)03-0236-04
红王子锦带花组培微繁的研究
王进茂 , 张法勇 , 张　涛 , 梁海永 , 郑均宝
(河北农业大学林学院 , 保定　071000)
摘要:为迅速扩繁 , 取红王子锦带花 (Weigela florida cv.`Red-Prince )半木质化枝条 , 经消
毒 , 制作成带短叶柄的茎段外植体 , 进行组培微繁研究。初始诱导较适宜的培养基为 MS+BA
2.0 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1;在芽的增殖培养时 , 上述培养基中附加 GA3 2.0 mg·L-1可促进
茎的高生长和茎的增殖数量。在嫩茎增殖培养中克服了玻璃化现象的产生。
关键词:红王子锦带花;组培微繁;再生完整植株
中图分类号:S685.99　文献标识码:A
红王子锦带花 (Weigela florida cv.`Red_Prince )属忍冬科 , 锦带花属 , 系锦带花的一
个园艺变种[ 1 ,2] 。为落叶开张性灌木 , 株高 1 ～ 2 m。枝条扶疏 , 嫩枝淡红色 , 枝条开展成拱
形 , 聚伞花序生于叶腋或枝顶 , 花 5裂 , 漏斗状钟形。其花红似火 , 着花繁茂 , 在春季观赏
花木中尤其引人注目 , 为园林植物中的珍贵花灌木[ 1 ～ 5] 。锦带花可用播种 、扦插 、分株或压
条等方法繁殖[ 6 , 7] 。因种子细小不易采集 , 且种子发芽率低 , 因此极少用播种法;红王子锦
带花自1982年引入我国 , 目前数量很少 , 繁殖材料缺乏[ 1～ 3] 。锦带花 (Weigela florida)的组
织培养曾有过报道 (李容辉 , 1988)。红王子锦带花的组织培养工作至今未见报道。为迅速
扩大繁殖 , 进行了组培微繁研究。
1　材料和方法
1.1　材料
材料取自河北农业大学林学院园林苗圃内的红王子锦带花植株 , 2 ～ 3 a 生 , 高 40 ～ 50
cm 。取其半木质化的枝条为外植体 。
1.2　方法
1.2.1　外植体的消毒　将从室外植株上剪取的半木质化枝条 , 去掉叶片 , 保留 0.2 ～ 0.3 cm
长的叶柄 。用自来水冲洗 , 在超净工作台上用 75%酒精消毒 1.5 ～ 2.0 min , 用无菌水清洗 ,
连续 2次;然后用0.1%的升汞消毒 2 min , 连续 2次 , 最后一次用无菌水清洗 5次 。切成
0.8 ～ 1.2 cm 长的带芽茎段 , 把消毒时外露的切面重新切去 , 露出新的切面 , 然后接入预先
设计的6种培养基中 。
收稿日期:1999-07-08;修改稿收期:1999-10-15
王进茂:男, 1994年毕业于河北林学院 , 现任河北农大林学院生物技术实验室讲师。
第15卷 第3期 河　北　林　果　研　究 Vol.15 No.3
2 0 0 0年 9月 HEBEI JOURNAL OF FORESTRY AND ORCHARD RESEARCH Sep.2000
1.2.2　培养基和培养条件　以MS为基本培养基 , 附加 BA或 KT 、 NAA 、 GA3 等 , 其种类和
浓度见结果与分析 , pH 为5.8 , 蔗糖浓度为 1.5%～ 3.0%。组培室温度为 22 ～ 28℃, 光照
黑暗时间为14 10 h , 光照强度为2 500 ～ 3 000 lx 。
1.2.3　样本数和检测方法　每组试验重复 3 ～ 5次 , 每个重复 2 ～ 4个样本。资料统计经方
差分析 , 差异显著性检验 , 用新复极差法进行多重比较。表2中＊＊代表差异极显著 。
2　结果与分析
2.1　细胞分裂素和生长素对芽的初始诱导的影响
外植体接入培养基后 , 首先是叶柄基部变粗 、膨大 、似透明状 , 在茎段底部形成愈伤 。
培养 7 ～ 10 d腋芽萌发 , 37 d茎高达 0.5 ～ 1.5 cm , 叶长 3.0 ～ 4.5 cm , 每个外植体形成的芽
最多 5 ～ 6个。芽的增殖途径为:外植体腋芽萌发后 , 长成嫩茎 , 其上新生的腋芽萌发形成
二次芽 , 依次再形成芽。
表 1　外源植物激素与芽的初始诱导的关系 (培养 37 d)
试验号 培养基MS+ mg·L-1
每个外植体平均
增殖芽数 个
茎高
cm
叶长
cm 叶色
1—1 BA3.0 NAA0.2 5 0.5 3.5 黄绿
1—2 BA2.0 NAA0.2 3 1.5 4.0 鲜绿
1—3 BA2.09 NAA0.05 0 0 0 —
1—4 KT3.0 AA0.2 2 1.0 3.5 鲜绿
1—5 ZT2.0 IAA1.0 1 0.5 3.0 鲜绿
1—6 BA0.5 IBA0.1 2 1.0 3.5 鲜绿
　　　注:以上 6种培养基的蔗糖浓度为 2.5%
由表 1可以看出 , 芽的初始诱导 , 附加的外源植物激素 BA和 NAA 的组合好于 KT 和
NAA 、 ZT和 IAA 、 BA和 IAA的组合 。细胞分裂素 生长素的比例为 10∶1 , BA达 2.0 mg·L-1
左右最适 。同时也发现 , 芽的增殖数量与茎高成反比关系 , 而且形成过多的芽时叶片颜色发
黄 , 生长弱。
2.2　光强和GA3 对芽增殖培养的影响
在超净工作台上将试管嫩茎剪切成带芽茎段 , 至少保留两片完整叶 。然后接种于MS+
BA2.0 mg·L-1+NAA0.2mg·L-1+2.5%糖的培养基上进行芽的增殖培养 , 60 d后发现 87.5%
的茎段可以增 5个以上的芽 。在1 000 ～ 15 000 lx 光下经 2次继代 , 发现有玻璃化现象发生 。
转至自然光下 (光强≥10 000 lx 的照光时间每天在 4 h 以上)培养 2 周或在2 500 ～ 3 000 lx
的光下培养 3周以后 , 玻璃化嫩茎 100%转化为正常[ 9] 。在无根试管植株的继代过程中发现
高生长缓慢 , 因此试验了培养基中附加 3种浓度的GA3 对茎的伸长和芽的增殖的影响。结果
表明GA3促进无根试管植株的高生长和芽的增殖 。当GA3 达2.0 mg·L-1和 3.0 mg·L-1时作用
最明显 , 红王子锦带花茎高达 6.2 ～ 6.4 cm , 而未加 GA3 的只达 2 ～ 3 cm。结果见表 2。
237　第 3期　　　　　　　　王进茂等:红王子锦带花组培微繁的研究　　　　　　　　　
表 2　GA3 对茎的增高和芽的增殖的影响
试验号 MS+ mg·L
-1
BA NAA GA3
茎高
cm
芽的增殖
个
CK 0 0 0 2.2 2.0
2-1 2.0 0.2 0 3.3 2.4
2-2 2.0 0.2 1.0 3.2 2.3
2-3 2.0 0.2 2.0 　6.4＊＊ 　4.9＊＊
2-4 2.0 0.2 3.0 　6.2＊＊ 4.4
　　　注:以上 4种培养基蔗糖浓度为 3.0%;培养 38 d
2.3　不同生长素种类及浓度对生根
及移栽成活的影响
从表 3可知:在 MS 培养基中附
加 IBA的几组试验 , 生根较早 , 4 ～ 5
d开始生根 , 根细长 , 根的数量多 ,
愈伤组织较少;3-1 (对照)实验号
上嫩茎 细 、少 、无愈伤;附加 NAA ,
培养 8 ～ 10 d 才在愈伤组织上露出根
尖 , 根粗而短 , 根的数量随 NAA 浓
度加大而增多 , 愈伤组织发育旺盛。
再生植株高度也是附加 IBA高于附加
NAA。总之 , 附加低浓度的 IBA和NAA (0.1 ～ 0.5mg·L-1)均促进了嫩茎生根和移栽的成活
率。
表 3　不同的生长素种类和浓度对生根及移栽成活的影响
试验号 MS+(mg·L
-1)
IBA NAA
植株高
cm
生根率
%
根数
条
根长
cm
愈伤
%
成活率
%
3-1 0 0 3.2 100 6.3 0.6 0 66.7
3-2 0.1 0 3.6 100 14.3 1.2 46.4 100.0
3-3 0.5 0 4.3 100 21.7 1.0 80 80.0
3-4 1.0 0 4.5 100 21.7 0.6 80 73.3
3-5 2.0 0 4.1 100 22.9 0.5 100 80.0
3-6 0 0.1 3.4 100 11.8 0.4 100 88.9
3-7 0 0.5 3.4 100 16.2 0.2 100 100.0
3-8 0 1.0 3.1 100 29.0 0.1 100 55.6
3-9 0 2.0 3.3 100 21.0 0.1 100 22.2
　　注:以上 9种培养基的蔗糖浓度为 1.5%;试管内培养 15 d , 炼苗 15 d , 栽后 15 d调查
3　小结
3.1　茎尖茎段培养诱导完整植株的最适培养基和培养条件
1)茎的初始诱导　将消毒后的带芽茎段 (长 0.8 ～ 1.2 cm), 接入初始诱导培养基:MS
+BA2.0 mg·L-1 +NAA 0.2 mg·L-1 +3%蔗糖 , 在 22 ～ 28℃, 2 500 ～ 3 000 lx 下 , 培养 40 d
左右即可切取试管植株嫩茎。
2)芽的增殖培养基为MS+BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1+GA3 2.0 mg·L-1 , 每 40 d
左右进行一代芽的增殖。
3)生根培养基为 MS+IBA0.1 ～ 0.5 mg·L-1 (或 NAA 0.1 ～ 0.5 mg·L-1) +1.5%蔗糖 ,
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接种后经 10 ～ 15 d生根。在自然光下 (光强10 000 lx 以上)每天照光 4 h以上 , 经 2周炼
苗 , 即可移栽。
3.2　红王子锦带花芽的增殖培养的关键技术
1)用茎段 、 茎尖为外植体 , 为促进茎的高生长 , 加快芽的增殖速度 , 需在芽的增殖培
养基上附加2.0 mg·L-1的GA3 。
2)在继代增殖的过程中需2 500 ～ 3 000 lx以上的较强光照 , 以控制玻璃化现象的发生 ,
促进试管植株正常的形态建成 。
3)试管植株嫩茎生根过程中 , 为减少愈伤组织的发生 , 提高移栽成活率 , 在 MS培养
基中宜附加 IBA 0.1 ～ 0.5 mg·L-1 。红王子锦带花的组培苗 , 如果从一个茎尖开始 , 40 d继
代一次 , 按3.0的繁殖系数 , 去除污染等其他损失 20%左右 , 1 a可获得 1 ～ 2万株优良苗
木。
参 考 文 献:
[ 1] 利　民.红王子锦带花 [ J] .植物杂志 , 1995 (6):25
[ 2] 马　勋.红王子锦带花 [ J] .中国花卉盆景 , 1995 (11):30～ 31
[ 3] 崔纪如 , 黄亦工等.37种 (含品种)新优植物简介 [ J] .北京园林 , 1996(1):20～ 23
[ 4] 陈有民.园林树木学 [M] .北京:中国林业出版社 , 1992
[ 5] 孙可群等.花卉及观赏树木栽培手册 [M] .北京:中国林业出版社 , 1998
[ 6] 李子军.四季锦带 、 紫叶小檗茎扦插技术 [ J] .吉林林业科技 , 1996 (4):57
[ 7] 小　敏.锦带花扦插繁殖育苗.林业月报 , 1989 (2):4
[ 8] 李容辉 , 臧淑英.三种花灌木的组织培养 [ J] .植物生理学通讯 , 1998 (3):51
[ 9] 郑均宝 , 田建强等.741杨和苹果试管苗玻璃化现象及其转化研究 [ J] .河北林学院学报 , 1996, 11 (1):6～ 12
(编辑　刘彦琴)
STUDIES ON in -vitro MICRO-PROPAGATION
OF Weigela florida cv.`RED-PRINCE
Wang Jinmao , Zhang Fayong , Zhang Tao , Liang Haiyong , Zheng Junbao
(Forestry College of Hebei Agricultural University , Baoding 071000)
Abstract:Using the semi-lignificated branchlets from Weigela florida cv.`Red-Prince as the stem
explant with short petiole , the suitable medium for the orginal induction is modified MS+6-BA 2.0 mg
·L-1+NAA0.2 mg·L-1.Appending GA32.0 mg·L-1 to the medium can advance the height growth of
tender stem and bud multiplication in the course of proliferation culture.Vitrification of plantlets in vitro
of Weigela florida cv.`Red_Prince was overcomed in culture of tender stem proliferation.
Key words:Weigelaflorida cv.`Red_Prince ;in-vitro;regeneration of plantlet
239　第 3期　　　　　　　　王进茂等:红王子锦带花组培微繁的研究