全 文 ：表 1　健康志愿者静脉滴注低 、 中 、 高 3个剂量兰索拉唑后药物动力学参数 (x±s , n=12)
Tab 1　Pharmacokinetic parameters after a single dose of lansoprazole at 15 , 30 , and 60 mg(x±s, n=12)
参数
(parameter)
不同剂量下的药动学参数值 (pharmacokinet ic parameter value at diff eren t dosage)
15 mg 30 mg 60 m g
Cm ax/μg·mL -1 0.92±0.33 2.05±0.59 4.04±0.55
tmax/ h 0.75 0.75 0.75
t1/2/ h 1.76±1.43 1.21±0.40 1.86±1.29
AUC0-10h/μg·mL -1 · h 3.41±2.14 6.25±3.55 11.65±5.96
AUC0-∞/μg·mL-1· h 7.67±6.37 9.21±7.13 14.68±10.01
V/ L 5.95±5.18 6.32±3.74 5.26±6.03
CL/ L · h-1 3.98±4.38 4.81±2.18 5.43±2.43
MRT0-10h/ h 3.55±0.85 3.28±0.56 2.72±0.76
MRT0-∞/ h 7.13±2.86 7.39±3.94 5.26±3.19
　　兰索拉唑的体内清除有明显的个体差异 , 可能由于兰索
拉唑在肝脏中主要由细胞色素 P450 2C19 (CYP2C19)代
谢[ 10] , 而 CYP2C19存在基因多态性。亚洲人 CYP2C19 慢
代谢型的比例约为 20%～ 25%[ 11] , 而本实验 12 名受试者中
有 3 名受试者 (M2、 F3 与 F5)各剂量计算出 Cmax 与
AUC0-∞明显较另外 9 名高 , CL 比另 9 名低 , 可能与
C YP2C19 基因型不同有关[11-12] , 临床应注意个体化用药。
参考文献
[ 1] Zimmermann AE , Katona BG.Lansoprazole:a comprehen sive
review [ J] .Pharmacotherapy , 1997 , 17 (2):308-326.
[ 2] 沈海蓉 , 李中东 , 钟明康.新型抗真菌药兰索拉唑 [ J] .中国
新药与临床杂志 , 2004 , 23 (5):308-312.
[ 3] 梁建华 , 张石革.质子泵抑制剂的研究进展与临床应用 [ J] .
中国药房 , 2002 , 13 (1):51-53.
[ 4] 于成功 , 吴寒.质子泵抑制剂的临床应用与研究进展 [ J] .中
华消化内镜杂志 , 2007 , 24 (1):74-75.
[ 5] Xu HR , Chen WL , Li XN , et al.The effect of CYP2C19 act ivi-
ty on pharmacokinetics of lansoprazole an d it s active metaboli tes
in healthy subjects [ J] .Ph arm Biol , 2010 , 48 (8):947-952
[ 6] Shi S , Klotz U.Proton pum p inhibi to rs:an update of th eir clin-
i cal u se and pharmacokinetics [ J] .Eu r J Clin Pharmacol ,
2008 , 64 (10):935-951.
[ 7] 张伟 , 秦玉花 , 赵红卫 , 等.注射用兰索拉哇在健康人体内单 、
多剂量的药动学研究 [ J] .中国新药与临床杂志 , 2008 , 27
(2):89-93.
[ 8] Hisak azu K , Akinobu H , Chizu ko N , et al.H igh-performance
liquid ch romatograp hic as say for the sim ultaneous determinat ion
of lans op razole enan tiomers and metaboli tes in h uman liver mi-
crosomes [ J] .J Chtomatog r B , 2001 , 757(1):127-133.
[ 9] 浦锡娟 , 何峰.HPLC 法测定注射用兰索拉唑中主药及有关物
质的含量 [ J] .中国药房 , 2007 , 18 (13):1013-1014.
[ 10] T sukasa U , Norio Y , Takenori T , et al.Determination of lan-
soprazole and tw o of i t s metabolit es by liquid-liquid ext ract ion
and automated column-sw itching high-performance liquid chro-
matography:ap plication to measuring CYP2C19 activi ty [ J] .
J Chtomatog r B , 2005 , 816 (1-2):309-314.
[ 11] Klotz U , S chw ab M , T reib er G.CYP2C19 polym orphism and
proton pum p inhibi to rs [ J ] .Basic Clin Ph arm acol Toxicol ,
2004 , 95 (1):2-8.
[ 12] Tak ahisa F , Naohi to S , Fumitoshi W , et al.Effect of cyto-
ch rome P4502C 19 genoty pic diff erences on cure rates for gas-
t roes ophageal ref lux disease by lan sopraz ole [ J] .Clin Pharm
Th , 2002 , 72 (4):453-460.
(收稿日期:2010-12-30;修回日期:2011-02-21)
小叶黑柴胡茎叶总黄酮体外抗氧化活性的研究
刘秀芳1 , 2 , 李婷婷1 , 蔡光明2＊ , 张卓勇1 , 刘峰群2 (1.首都师范大学 , 北京　100048;2.中国人民解放军第三
O 二医院全军中药研究所 , 北京　100039)
摘要:目的　探讨小叶黑柴胡茎叶总黄酮 (TFA)体外抗氧化活性。方法　采用分光光度法 , 测定小叶黑柴胡茎叶
总黄酮对 DPPH ·自由基 、 · OH 自由基和 O 2 -·自由基的抑制效果 , 考察小叶黑柴胡茎叶总黄酮的体外抗氧化能
力。结果　小叶黑柴胡茎叶总黄酮对 DPPH ·自由基活性 、 · OH 自由基和 O2 -·自由基的清除率可达 94.67%、
93.60%和 90.04%。结论　小叶黑柴胡茎叶总黄酮具有很好的抗氧化活性。
　　基金项目:北京市政府专项基金 (编号:0853279)。
作者简介:刘秀芳 , 女 , 硕士 , 主要从事药物分析工作 , Tel:(010) 66933324 , E-mail:l xf04510317@163.com　　＊通讯作者:蔡光
明 , 男 , 研究员 , 主要从事药物分析和中药化学研究 , Tel:(010) 66933323 , E-mail:cgm1004@vip.sina.com
172
C ent ral S outh Ph arm acy.M arch 2011 , Vol.9 No.3　中南药学 2011年 3月第 9卷第 3期
关键词:小叶黑柴胡;总黄酮;抗氧化活性
中图分类号:R965　　　　文献标识码:A　　　　文章编号:1672-2981 (2011)03-0172-04
doi:10.3969/ j.issn.1672-2981.2011.03.004
Antioxidant activity of flavonoids of the aerial part of
Bupleurum smithii Wolff var.parvi f olium in vitro
LIU Xiu-fang1 , 2 , LI T ing-ting1 , CAI Guang-ming2＊ , ZHANG Zhuo-yong 1 , LIU Feng-qun2 (1.Captial Normal U-
niv ersity , Beij ing 100048;2.China Military Institute o f Chinese Materia Medica , 302 Military Hospital of Chi-
na , Bei jing 100039)
Abstract:Objective　 To determine the antiox idant activ ity o f flav onoids o f the aerial par t o f B upleurum smithii Wolff
var.parvi f olium (TFA)in vitro.Methods　Scavenging effects of the to tal flav onoids f rom the aerial par t of Bup leu-
rum smithii Wolff va r.parvi folium on DPPH free radical , hydro xy l free radical , and supe rox ide fr ee r adical w ere de-
te rmined by spectropho tometry.Results　F lavonoids of the aerial par t o f Bup leurum smithii Wolff var.parvi f olium
po ssessed str ong scavenging activity on DPPH free r adical hydro xy l free radica l , and free super oxide radical with co r-
responding maximum scaveng ing rate 94.67%, 93.60%, and 90.04%.Conclusion　The to tal flavonoids of the aerial
pa rt of B upleurum smithii Wolff va r.parv i f olium have strong antiox idant activity.
Key words:Bupleurum smithii Wolff v ar.parvi f olium Shan et Y.Li;total flav onoids;antio xidant
　　小叶黑柴胡 (B upleurum smithii Wolff v ar1 parv i f oli-
um Shan et Y.Li), 俗称 “野槐子根” , 为伞形科 (Umbel-
lifer-ae)柴胡属植物 , 主产于青海及西北部分地区。青海省
位于青藏高原东北部 , 由于其特殊的地形和生态环境条件 ,
植物种类较为丰富。取材于青藏高原的纯天然药用植物资源
大多生长在高寒 、 干旱 、 强烈紫外线照射环境中 , 富有极强
的生命力和生物活性 , 药用品质极佳[1-2] 。
小叶黑柴胡用药历史悠久[ 3] , 作为保肝抗炎的中草药可
用于治疗急性黄疸性肝炎 、 重症瘀胆型肝炎 、 胆囊炎等疾
病[ 4] 。以往对小叶黑柴胡的研究多集中于根及根茎部分 , 而
地上部分 (茎叶)的研究尚未见文献报道。本课题组[ 5-7]对
其地上茎叶部分的提取 、 纯化工艺 , 茎叶主要成分及含量 ,
药理药效作用进行了系统研究。笔者通过测定小叶黑柴胡茎
叶总黄酮 (TFA)对多种自由基 [ DPPH (1 , 1-二苯基-2-
三硝基苯肼) ·自由基体系 、 O 2- ·自由基体系 、 · OH 自
由基体系] 的清除效果 , 验证其抗氧化活性 , 为阐明其利胆
退黄及抗炎作用机制奠定基础。
1　仪器与试药
1.1　仪器
电热恒温鼓风干燥箱 (黄石恒丰医疗器械有限公司);
AB265-S 型电子微量分析天平 (梅特勒-托利多仪器有限公
司);安捷伦-8453 紫外分光光度计 (美国惠普公司);DK
-S24 恒温水浴锅 (上海精宏实验设备有限公司)。
1.2　试药
小叶黑柴胡 (青海省西宁市湟中县 , 经青海省药品鉴定
所鉴定药材为小叶黑柴胡);芦丁对照品 (中国药品生物制
品检定所 , 批号:100080-200306);DPPH · 样品 (Alfa
Aesar , lot:L23T009);羟自由基试剂盒 (南京建成生物工
程研究所 , 批号:20100119);维生素 E (VitE , 中国药品
生物制品鉴定所 , 批号:100062-201009 , 纯度:98.9%);
维生素 C (VitC , 中 国药品生物制 品鉴定所 , 批号:
100425-200702);磷酸二氢钾 、 磷酸氢二钠 、 邻苯三酚 (焦
性没食子酸)、 亚硝酸钠 、 硝酸铝 、 乙醇 、 盐酸等均为分析
纯。
1.3　TFA的制备[ 8]
取小叶黑柴胡地上茎叶部分 , 干燥粉碎 , 用 85%乙醇
浸泡 1 h , 提取 3 次 , 1 h·次-1 , 将提取液过滤 , 于 60 ℃,
-0.08 MPa减压浓缩至相对密度为 1.0 ～ 1.1 , 加入水稀释
至 2 倍体积 , 放置 , 产生沉淀 , 过滤 , 收集滤液 , 即为粗提
物。粗提物上 D-101 型大孔吸附树脂柱 , 其比上柱量为
3.89 mg · mL-1 , 比吸附量为 3.31 mg · m L-1 , 水洗脱 ,
以 Molisch 反应 (糖在浓无机酸作用下 , 脱水生成糠醛及糠
醛衍生物 , 后者能与α-萘酚生成紫红色物质)为阴性判定水
洗脱终点;70%乙醇洗脱 , 收集洗脱液 , TLC 检测芦丁不
再出现来判定终点 , 70 ℃真空干燥 , 得到原料药粉。以芦
丁为对照品 , 60%乙醇溶液为溶媒 , 按照分光光度法测定
TFA 的含量 , 经测定其含量为 68%。
2　方法
2.1　DPPH·自由基体系[ 9-10]
取 2 mL 不同浓度样液 (取 25 mgTFA 样品 , 用 60%
EtOH 定容于 25 mL 容量瓶当中 , 分别取 0 、 0.5、 1、 2、
3 、 4、 5 、 6 mL 于10 mL 容量瓶当中 , 用 60%EtOH 定容。)
于具塞试管中 , 加入 2 mL DPPH ·溶液 (准确称取 20 mg-
DPPH · 样品 , 用 60%EtOH 定容于 250 m L 棕色容量瓶
中), 混匀 , 静置 30 min 于 517 nm 处测定吸光度 A i;同时
测定 2 mL DPPH·溶液与 2 m L60%EtOH 混合溶液的吸光
度 Ac;2 mL 提取液与 2 mL 60%EtOH 混合溶液的吸光度
A j。采用 VitC 作为阳性对照药按照同法进行测试。根据以
173
中南药学 2011年 3月第 9卷第 3期　C ent ral S outh Ph armacy.March 2011 , Vol.9 No.3
下公式计算抑制率:抑制率={1 -(A i -Aj)/ Ac}×
100%抑制率越大 , 则表示该试样的抗氧化活性越强。
2.2　O2 -·自由基体系[ 11-12]
取 2.7 m L磷酸盐缓冲液 (PBS , pH 8.2), 加 0.2 mL
蒸馏水 , 0.1 mL 的邻苯三酚 (取 0.126 g 邻苯三酚 , 定容
于 100 m L容量瓶中)。混匀于 25 ℃保温 , 4 min 后加入 10
mol· L-1 HCl 1 滴终止反应。于 325 nm 处测吸光度 A0 。测
定样品清除能力时 , 取 2.7 mL 磷酸盐缓冲液 , 加 0.2mL 不
同浓度的样液 , 0.1 m L 的邻苯三酚 , 混匀于 25 ℃保温 , 4
min 后加入 10 mol· L-1HCl 1 滴终止反应。于 325 nm 处测
吸光度 Aj 。采用与 TFA 等浓度的 VitC 作为阳性对照药按
照同法进行测试。清除率计算公式:S= [ 1-(A j -A i)/
A0] ×100 %, A i 为样液吸光度。
2.3　· OH 自由基体系[ 13]
采用羟自由基试剂盒 , 以经典的 Fenton 反应体系产生·
OH , 反应如下:Fe3++H 2O 2 ※Fe2++OH · +OH - , 按照
测试盒说明进行加样 , 混匀后于 37 ℃反应 1.0 min。再分别
加入 2 m L显色剂 , 室温放置 20 min , 用蒸馏水调零 , 测定
550 nm 波长处的吸光度 A550 。采用 VitC 和 VitE 作为阳性
对照药按照同法进行测试。羟自由基的抑制率= (对照管
A550 -测定管 A550)/对照管 A550 ×100%。
3　结果
3.1　DPPH ·自由基体系
DPPH·是一种稳定的自由基 , 在 517 nm 处有强吸收。
当有自由基消除剂存在时 , DPPH ·的单电子被配对而使其
颜色变浅 , 在最大吸收波长处的吸光度变小 , 而且这种颜色
变浅的程度与配对电子数是成化学计量关系的。因此 , 利用
中草药提取液与 DPPH ·的反应 , 就可以检测其消除自由基
的能力[ 14-17] 。
以水溶性抗氧化剂 VitC 作对照 , 研究了 TFA 对 DPPH·
的清除作用 , 结果见图 1。由图 1可知 , TFA 对 DPPH·具
有很明显的清除作用 , 且清除效果随着浓度的增加而增大。
图 1　小叶黑柴胡茎叶总黄酮对 DPPH·自由基的清除作用
Fig 1　DPPH free radical scavenging act ivi ty of f lavonoids of the aeri-
al part of B up leurum smi th ii Wolff var. parvi f olium
3.2　O2 -·自由基体系
超氧阴离子自由基难于用一般方法产生和检测 , 但是在
弱碱性条件下 , 邻苯三酚发生自氧化反应 , 生成 O 2-· 和
有色中间产物 , 该中间产物在λ=325 nm 处有一特征吸收
峰。当加入 O2 -· 清除剂时 , 它能迅速与 O 2 -·反应 , 从
而阻止中间产物的积累 , 致使溶液在λ=325 nm 处吸收减
弱。故可以通过测定 A325值来评价清除剂对 O 2 -·的清除作
用 (见图 2)。由图 2 可知 , 在低浓度时 , VitC 与 TFA 对
O 2
-·自由基的清除能力相比 , 差别不是很大 , 但是随着浓
度的增大 , TFA 对 O 2 -·自由基的清除能力明显比 VitC 的
清除能力要强。
图 2　小叶黑柴胡茎叶总黄酮对O 2 -·自由基的清除作用
Fig 2　Superoxide f ree radical scavenging act ivity of f lavon oid s of the
aerial part of B up leurum smi th ii Wolff var.parvi fol ium
3.3　· OH 自由基体系
Fenton 反应是常见的产生羟自由基的化学反应 , H 2O2
的量和 Fenton 反应生成的 · OH 量成正比 , 当给予电子受
体后 , 用 g riess试剂显色 , 形成红色物质 , 其呈色与· OH
的多少成正比关系[ 18-19] 。
以水溶性 VitC 和脂溶性 VitE 同时作为对照 , 研究
TFA 对 · OH 自由基的清除作用 , 结果见图 3。由图 3 可
知 , 随着浓度的增大 , VitE 与柴胡对 · OH 自由基的清
除能力差距逐渐减小 , 当浓度>0.5 mg · mL -1时 , 柴胡
对 · OH 自由基的清除能力开始大于 VitE 的清除能力;
当浓度>0.1 mg · mL -1时 , 柴胡对 · OH 自由基的清除
能力就大于 VitC 的清除能力 , 并随着浓度的增大 , 效果
更加显著。
图 3　小叶黑柴胡茎叶总黄酮对·OH 自由基的清除作用
Fig 3　Hy droxyl f ree radical scaven ging activi ty of f lavonoids of the
aerial part of B up leurum smi th ii Wolff var.parvi fol ium
4　结论
正常情况下 , 体内自由基的产生与消除处于一种动态平
衡之中。如果体内的活性自由基得不到及时清除而蓄积在细
胞内 , 则将导致它们与体内某些生物大分子如蛋白质 、 核
酸 、 脂质等发生反应 , 从而影响细胞物质及能量的正常代
谢[ 20-21] 。现已证实 , 氧化损伤与动脉粥样硬化 、 心脑血管疾
病 、 中枢神经系统功能障碍 、 糖尿病 、 癌症及肝脏的化学毒
性反应 、 衰老 、 休克 、 炎症以及人类免疫缺陷病毒 (HIV)
感染等病理过程的发生都直接或间接与自由基的损伤有关。
许多研究表明 , 黄酮类物质在体内和体外都具有较强的抗氧
化性[ 22] 。
超氧阴离子自由基 O2 -·是生物体内最早产生的自由
基 , 羟自由基 (· OH)是最活泼也最具危险性的自由基 ,
174
C ent ral S outh Ph arm acy.M arch 2011 , Vol.9 No.3　中南药学 2011年 3月第 9卷第 3期
往往也更难清除 , 已发现许多抗氧物质能清除 O2 -· 但却
不能清除· OH 自由基。本实验探讨了 TFA 对由 Fenton 反
应体系产生· OH 的清除能力 , 研究结果表明 TFA 有较强
的清除· OH 自由基的作用。应用 DPPH 法即二苯代苦味肼
基自由基分光测定法 , 通过检测抗氧化剂对 DPPH ·自由基
的清除能力可以表示其抗氧化活性的强弱。研究发现 TFA
有较强的清除 DPPH ·自由基的作用。
实验采用体外方法直接证明了 TFA 具有较强的抗氧化
活性 , 能明显清除 O2 -· 、 · OH 和 DPPH·自由基 , 机制
可能与 TFA 抗氧化性和清除自由基能力有关。实验结果表
明 , TFA 是一种很好的抗氧化剂 , 为进一步研究防治与自
由基相关的各类疾病的药品提供了实验依据。
参考文献
[ 1] 陈志国 , 窦增堂 , 罗红军, 等.适宜青海栽培的几种道地中藏
药材 [ J] .青海科技 , 2001 , 8 (1):21-24.
[ 2] 汤芳玲 , 蔡光明 , 袁波 , 等.小叶黑柴胡超高效液相色谱指纹
图谱研究 [ J] .中南药学 , 2010 , 8 (3):230-234.
[ 3] 刑世瑞.宁夏中药资源 [ M] .银川:宁夏人民出版社 , 1987.
[ 4] 赵玉珍, 陶尚成, 邢永春 , 等.小叶黑柴胡的药理作用研究
[ J] .中药材 , 1998 , 18 (8):405-407.
[ 5] 熊晗晖 , 蔡光明 , 黄鹤慧, 等.藏柴胡地上部分有效成分提取
工艺的研究 [ J] .中南药学 , 2007 , 5 (3):214-216.
[ 6] 周伟 , 蔡光明 , 黄鹤慧 , 等.高效液相色谱法测定小叶黑柴胡
中槲皮素与异鼠李素的含量 [ J] .中国药房 , 2007 , 18 (9):
693-695.
[ 7] 詹雪晶 , 蔡霈 , 蔡光明 , 等.小叶黑柴胡茎叶总黄酮对四氯化
碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用 [ J] .中南药学 , 2010 , 8
(4):241-243.
[ 8] 黄鹤慧 , 蔡光明 , 金光珠, 等.高效液相色谱法测定青海小叶
黑柴胡茎叶中芦丁的含量 [ J] .解放军药学学报 , 2006 , 22
(6):439-440.
[ 9] 彭长连 , 陈少薇 , 林植芳 , 等.用清除有机自由基 DPPH 法评
价植物抗氧化能力 [ J] .生物化学与生物物理进展 , 2000 , 27
(6):658-661.
[ 10] 翁新楚 , 吴侯.抗氧化剂的抗氧化活性的测定方法及其评价
[ J] .中国油脂 , 2000 , 25 (6):119-122.
[ 11] 贾之慎 , 杨贤强.茶多酚清除活性氧自由基 O 2- · 和·OH
的分光光度法研究 [ J] .中国茶叶 , 1993 , 19 (1):25-26.
[ 12] 李明静 , 庆伟霞 , 杨玉霞 , 等.七种天然黄酮类化合物对超
氧阴离子自由基的清除活性 [ J] .化学研究 , 2006 , 17 (4):
70.
[ 13] 蔡仲军 , 陈仕江 , 伊定华 , 等.不同产地冬虫夏草清除羟自
由基作用的研究 [ J] .中草药 , 2004 , 35 (1):57.
[ 14] 李红 , 郅洁 , 马彦梅 , 等.沙枣黄酮的提取及其抗氧化作用
的研究 [ J] .时珍国医国药, 2010 , 21 (1):35-36.
[ 15] 陈旭丹 , 于晓莹 , 郝晓萌 , 等.三种黄酮类化合物抗自由基
的研究 [ J] .食品研究与开发 , 2007 , 28 (6):20-21.
[ 16] 邵惠训.自由基和自由基清除剂 [ J] .生物工程进展 , 1994 ,
14 (4):49-50.
[ 17] 曾佑炜 , 徐良雄 , 彭永宏.45种花卉清除自由基能力的比较
[ J] .应用与环境生物学报 , 2004 , 10 (6):699-702.
[ 18] Jin M , Cai YX , Li JR.1 , 10-phenan th roline-Fe2+ oxidative
assay of hy droxyl radical produced by H 2O 2/ Fe2+ [ J] .Prog
Biochem Biophy s , 1996 , 23 (6):553-555.
[ 19] Halliw ell B , Gu tteridge M , Aruoma OL , et al.The deox-
cyribose method:a sim ple “ t est- tub e” assay for determina-
tion of rate constan ts for react ions of hydroxyi radials [ J] .
Analy tical biochemist ry , 1987 , 165 (1):215-219.
[ 20] 胡大林.自由基与 DNA 的氧化损伤 [ J] .国外医学卫生学分
册 , 2002 , 29 (5):261.
[ 21] Fang YZ , Yang S , Wu G , et al.Free radicals an tioxidant ,
and nut ri ti on.Nu trit ion , 2002 , 18 (10):872.
[ 22] 刘宝剑 , 郭延生 , 曲亚玲 , 等.红车轴总黄酮体外抗氧化作
用的研究 [ J] .中国药学杂志 , 2009 , 44 (16):1234-1237.
(收稿日期:2010-11-02;修回日期:2010-12-30)
反相高效液相色谱法同时测定毛两面针中
氯化两面针碱 、乙氧基白屈菜红碱和毛两面针素的含量
孙培文1 , 2 , 刘海涛1 , 2 , 雷鹏1 , 2 , 李新中1 , 2＊ , 黄琪1 , 2 , 李观勇3 (1.中南大学湘雅医院药剂科 , 长沙　410008;
2.中南大学药学院 , 长沙　410013;3.桂林医学院 2007级药学本科实习生 , 广西桂林　501004)
摘要:目的　建立同时测定毛两面针中氯化两面针碱 、 乙氧基白屈菜红碱和毛两面针素的含量方法。方法　采用
RP-HPLC 法 , 色谱柱:P romosil-C18柱 (250 mm×4.6 mm , 5 μm);流动相:乙腈-水 (含 0.2%磷酸和 0.2%三乙
胺)(28∶72);检测波长:273、 328 nm;流速:1.0 m L·min-1 ;柱温:30 ℃。结果　氯化两面针碱 、 乙氧基白
屈菜红碱和毛两面针素分别在 0.011 ～ 0.139 μg(r=0.999 7)、 0.010 ～ 0.125 μg (r=0.999 9)、 0.102 ～ 1.23 μg
　　基金项目:湖南省中医药科技基金重点课题 (编号:2009008);长沙市科技局重点项目 (编号:K0802115-31)。
作者简介:孙培文 , 男 , 硕士研究生 , 主要从事中药制剂研究 , Tel:15874817569 , E-mai l:spw znxy @163.com　　＊通讯作者:李新
中 , 男 , 博士生导师 , 主要从事中药新药的研究 , Tel:(0731) 84327454 , E-m ail:xylix z@126.com
175
中南药学 2011年 3月第 9卷第 3期　C ent ral S outh Ph armacy.March 2011 , Vol.9 No.3