全 文 ：第 2 1 卷
1 9 9 3 年
第 1 期
3 月
河南职技师院学报
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用试管嫁接进行
山喳一苹果无性杂交研究初报
刘 用生
(园艺系 )
摘要 本文采用了一项新的离体培养技术 , 它包括无菌苗的获得 、 试管嫁接 、嫁接部位愈伤组织
的增殖以及从愈伤组织中再生植株的操作程序 。 采用这项技术成功地实现了山椿一苯果的试管嫁
接 , 并从愈伤组织中诱导分化出了无根绿苗 。 该项技术的建立可能会开辟一条新的试管育种途径 。
本文简要报道该试验体系 . 并对试管嫁接产生无性杂种的可行性与优越性作了理论上的探讨 。
关键词 试管嫁接 ; 无性杂交 ; 离体培养 ; 山 植 ; 苹果
中图分类号 5 6 0 3 . 6
通过嫁接等无性杂交方法虽 已获得了不少新种类或新品种 ! `一 ’ , 但由于种种原因 . 目前尚
未当作一种有实用价值的育种手段 1 `户。 试管嫁接在培育无病毒苗和研究砧穗关系方面已得到
广泛应用 LS J , 但尚未见利用试管嫁接接进行无性杂交的尝试 。 我们将离体培养技术与传统的无
性杂交方法相结合 ,试图开辟一条新的试管育种途径 。
1 材料与方法
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1 试验材料
采用山植 ( C r a t a 。 g “ 、 L . )品种 “ 豫北红 ” 与苹果 (几了“ l“ 、 p “ , , ` il a M i l l )品种 “ 红星 ` ,果实成熟
期的种子 。
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2 试验方法
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1 无 菌苗的获得 将种子用 7 0 %酒精消毒 l :二 11, , 0 . 1 %升汞消毒 10 m i t l . 再用无菌水冲
洗 3 次 . 然后用手术刀剖开种皮 .分别将苹果与山桔的胚取出并接种于培养基 ( 1) 和 ( 2) 上 . 进
行培养 。
收稿 日期 : 1 9 2一 09 一 1 4 .
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2试苦稼接 从山枯试管实生苗上切取 。 . 5~1 。m 长的茎尖 .采用劈接法将其嫁接到苹
果实生苗的砧木上 .转至培养基 (3) 上进行培养 。
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3 嫁接部位愈伤组织 的增 殖 将接合处的愈伤组织切下 ,接种到培养基 ( 4) 上进行增殖
培养 。
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4 诱导分化绿苗 将愈伤组织切成 0 5 ~ 1 c m 大小的团块 . 接种到培养基 (5 )上 . 诱导分
化绿苗 。
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5 少子养基 ( 1 )改 良 M S + B A O . 5 + G A I + l %蔗糖 ; ( 2 ) M S + B A I + I B A O . 2 5 + 3%蔗
糖 ; ( 3 ) M S + B A o . 2 + I B A o . 5 + 3%蔗糖 ; ( 连) M S + B A Z+ I B A o . 5 + L H 1 0 0 + 3%蔗糖 ; ( 5 ) M S
+ B A I十 N A A O . 1+ L H 10 0 未 3 %蔗糖 。
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6 少乡养条件 培养室温度 20 ~ 28 C ;光照强度 2 0 0 0 lx . 每天照光 16 .h
2 结果与讨论
山植与苹果的种胚在附加 6一 B A 等生长调节剂的培养基 中 . 不经低温处理 , 培养 15 夭即
可获得正常的试管苗 。 将山碴实生苗 。 . 5 ~ 1 。 m 长的茎尖嫁接到苹果砧木上 ,表现亲和 良好 ,
嫁接苗生长旺盛 , 叶色浓绿 ,且叶片形状有多种多样的变异 。 将嫁接部位的愈伤组织切下继续
培养 , 愈伤组织都有不同程度的生长 。 将愈伤组织切成 0 . 5一 1 c m 大小的团块接种到分化培养
基上 ,经培养一段时间分化出了无根绿苗 ,其有关性状 尚有待进一步研究 。
从现有的无性杂交资料来看 . 同一植物不同部位和组织形成无性杂种的可能性是不同的 。
从部位看 ,越是接近嫁接接 口处的枝条变异的可能性越大 ; 从组织的性质看 , 愈伤组织变异的
可能性较大 。 远在 20 世纪初丹尼尔就首先注意到嫁接愈伤组织的重要作用 。 以后不少人提到
愈伤组织的意义 。 许多试验也证实 , 愈伤组织 比接穗更能经常产生明显变异的枝条 。 由愈伤组
织处产生的芽 , 尤其是不定芽 , 己培育出许多著名的无性杂种 L’ ` 。 加之愈伤组织在离体培养过
程中往往产生变异 〔“ ’ 砚 , 因此 , 我们认为 , 选用嫁接部位的愈伤组织进行增殖培养并再生植株 ,
获得无性杂种的可能性是很大的 。
利用试管嫁接进行果树无性杂交育种具有许多独特的优点 : ( 1) 不同属间 、 科间的嫁接 亲
和 力比有性杂交为高 ,并且试管苗发育阶段较幼小 . 试管内湿度适宜 , 因此嫁接很容易成活 。
( 2) 有性杂交只能在花期的短暂时间进行 ,常规的无性杂交也只能在嫁接的适宜季节进行 .而
试管嫁接却可以周年在实验室进行 。 ( 3) 与体细胞杂交枝术和 L . B . 枝术 ! 吕:相 比 . 操作程序简
便 , 要求的仪器设备简单 。 ( 4 )即使产生嫁接嵌合体 ,也可通过无性繁殖方法保持其性状 。
本文采用试管嫁接进行果树无性杂交 . 只是一次尝试 ,也仅是本研究的开头 。 很多理论和
实际问题还有待进一步探索和实践 。
(本研究承蒙杨永光教授和殷桂琴老师的支持与帮助 ,特此致谢 。 )
参考文献
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