作 者 :周光辉
期 刊 :内蒙古农业大学 2012年 07期 页码:73
关键词:拟南芥;锌指蛋白;过表达;RNAi;启动子;
摘 要 :根据拟南芥已经测序完成的序列,设计一对特异引物,通过PCR技术得到一段1464bp,含有AtZFNl基因编码区的DNA片段,含有完整启动子的DNA片段。AtZFNI基因编码的蛋白质含有396个氨基酸。将该序列放在NCBI网站通过Blast比较,结果表明:该序列已知的植物锌指蛋白序列有着高度同源性,其中,与葡萄的锌指蛋白同源性高达73%。 将AtZFNl基因插入pBI121质粒中,构建植物表达载体pBI-ZFN1,并保存在农杆菌GV3101中;利用pKANNIBAL和pART27载体,构建拟南芥锌指蛋白基因RNAi载体pART-S-A,并保存在农杆菌GV3101中。‘通过花序浸泡法,将构建...