作 者 :刘万年
期 刊 :华中师范大学 2014年 08期 页码:66
关键词:对羟基苯基丙酮酸双氧化酶;人源HPPD;拟南芥HPPD;表达;鉴定;纯化;
摘 要 :对羟基苯基丙酮酸双氧化酶(HPPD)是一种α-酮酸非亚铁血红素双氧化酶,广泛存在于动、植物及多数微生物体内。HPPD参与催化对羟基苯基丙酮酸盐(HPP)转化为尿黑酸盐(HG)。在植物体内,HPPD一旦受到抑制,将造成质体醌和生育酚的生物合成被阻断,进而使得类胡萝卜素的合成减少、光合作用电子传递链中断以及叶绿体的光氧化现象的发生,最终导致植物产生白化症状而死亡,由此成为除草剂的作用靶标。本论文主要是围绕重组人源和拟南芥HPPD的表达、鉴定和纯化展开,具体包含以下3个方面的工作:1.通过基因重组技术,将人源HPPD(hHPPD)基因通过PCR扩增、酶切、连接到pET-28a表达载体上,再转化至大肠...