作 者 :周茜
期 刊 :上海师范大学 2010年 09期 页码:58
关键词:拟南芥;转录因子;融合蛋白;原核表达;多克隆抗体;
摘 要 :在拟南芥花药发育过程中,MYB家族转录因子TDF1在调控绒毡层发育及后期功能上起关键的作用。在花药发育早期,该转录因子特异性地在绒毡层,花粉母细胞和小孢子中高效表达。该基因突变体花药的体细胞早期出现空泡化现象,小孢子提前降解,导致不育。本研究利用PCR方法扩增TDF1基因并克隆到原核表达载体pET-32a。将表达载体TDF1-pET32a转入大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG成功诱导表达了分子量约为56KD的TDF1融合蛋白。该融合蛋白主要以包涵体形式存在,分离出包涵体后进行可溶性处理作为抗原免疫家兔。制备出的多克隆抗血清经ELISA测定效价为1:2560,Western bl...