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笃斯越橘组培苗增殖扩繁培养基配方筛选试验



全 文 :·生物技术· 北方园艺2013(09):138~139
第一作者简介:郑永春(1974-),男,吉林抚松人,硕士,讲师,研究
方向为植物科学。
责任作者:迟丽华(1975-),女,吉林省吉林市人,硕士,讲师,研究
方向为果树栽培。
收稿日期:2012-12-14
笃斯越橘组培苗增殖扩繁培养基配方筛选试验
郑 永 春,迟 丽 华
(吉林农业科技学院,吉林 吉林132101)
  摘 要:以笃斯越橘叶片为外植体,研究比较了不同基本培养基、激素浓度、培养基的pH值
对增殖扩繁的影响,以筛选出最适合笃斯越橘组培苗增殖扩繁的培养基配方。结果表明:添加
0.4mg/L TDZ的B5培养基为笃斯越橘组培苗增殖扩繁的最佳培养基,培养基最佳pH为5.4。
关键词:笃斯越橘;增殖扩繁;基本培养基;激素浓度;pH值
中图分类号:S 663.9 文献标识码:A 文章编号:1001-0009(2013)09-0138-02
  笃斯越橘(Vaccinium uliginosumL.)属杜鹃花科越
橘属落叶灌木,高15~100cm,主要产于黑龙江和内蒙
古大兴安岭,吉林长白山等地。其果实呈球形或椭圆
形,直径约1cm,蓝紫色,被白粉,自然栽培的果实成熟
期在7~8月[1]。该果实含有丰富的营养成分,并且具有
广泛的药用价值,可以起到保护眼睛、增强视力、软化血
管、增强人体免疫力、抗癌等作用,果实可生食,亦可酿
酒、制作果酱或饮料等,具有广阔的市场前景。越橘目
前生产上常见的繁殖方法为扦插、嫁接和组织培养,扦
插和嫁接的繁殖速度比较慢,规模化生产有一定的困
难,且培育出的苗木无论从苗木长势、还是果实品质方
面都不及组培繁殖苗木[2-3]。而在越橘的组织培养过程
中,组培苗增殖扩繁的速度是规模化生产的保证,越橘
品种不同,具体的增殖扩繁培养基配方也有差异。该试
验以笃斯越橘叶片培养的组培苗为试材,通过比较不同
基本培养基、添加激素浓度、培养基的pH对增殖扩繁的
影响,以期筛选出最适合笃斯越橘组培苗增殖扩繁的培
养基配方。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试的笃斯越橘组培苗(以叶片为外植体)由吉林
农业科技学院花卉组培室培养[4]。从培养室中挑选生
长健壮、旺盛、无任何污染及玻璃化的苗木若干,备用。
1.2 试验方法
1.2.1 基本培养基配方的筛选 选用 MS、White、N6、
B54种基本培养基,每种培养基均分别添加0.2mg/L
TDZ,糖30g/L,琼脂6g/L,培养基pH值调节到5.8。
1.2.2 激素浓度的筛选 将1.2.1筛选出的最佳基本
培养基中分别添加0(对照)、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/L
的TDZ,同时添加糖30g/L,琼脂6g/L,培养基pH值
调节到5.8。
1.2.3 配方pH值的筛选 将1.2.2筛选出的最佳基
本培养基的pH值分别调整到5.2、5.4、5.6、5.8、6.0,同
样5个配比中添加的糖均为30g/L,琼脂6g/L。
1.2.4 培养条件 3个阶段的培养均在培养室进行,培
养温度为25℃左右,光照强度2 000lx,光照时间
14h/d,组培室的相对湿度为80%[5]。
1.3 项目测定
把挑选出的笃斯越橘组培苗转接到各自所测的基
本培养基的配比中,转接时将茎段切割成1.5cm长,每
瓶转接4个茎段。转接后定期观察,培养18d时,发现
茎段下面开始萌发出愈伤组织,28d开始分化出大量的
不定芽,随着培养天数的增加,不定芽的数量逐渐增
多,培养48d后,统计不定芽的鲜物重、干物重、芽数
等的增殖情况。
2 结果与分析
2.1 最佳基本培养基配方的筛选
由表1可以看出,B5配方的鲜物重、干物重分别达
到88.7mg/株、18.4mg/株,极显著高于其它3个配方;
从萌发出的芽数看,B5芽数平均为7.1个/株,极显著高
   表1 不同培养基种类对不定芽增殖的影响
基本培养基
鲜物重
/mg·株-1
干物重
/mg·株-1
芽数
/个·株-1
B5 88.7a 18.4a 7.1a
MS  55.8b 9.8b 5.0b
N6  21.2c 5.4c 4.2b
White  4.8d 2.1d 1.8c
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北方园艺2013(09):138~139 ·生物技术·
于MS配方,MS配方与N6配方之间不显著。总之,无
论从萌发的芽数,还是从萌发芽的重量看,以B5作为基
本培养基最为合适。
2.2 最佳激素浓度的筛选
以B5为基本培养基,进行最佳激素浓度筛选。由表
2可以看出,6个激素配比中,从鲜物重、干物重方面,0.4
mg/L TDZ配比均极显著高于其它激素配比,分别为
245.2、54.1mg/株;从芽数来看,0.4mg/L TDZ配比最
多,为7.0个/株,显著高于0.6mg/L TDZ配比。且随
着激素浓度的增加,三者的量均呈上升趋势,当激素浓
度达到0.4mg/L时,三者均达到最高,进而随着浓度的
增加,鲜物重、干物重、芽数的量反而呈下降趋势。因
此,TDZ的添加量以0.4mg/L为最好。
表2 不同激素浓度的配方中不定芽增殖情况
添加激素TDZ量
/mg·L-1
鲜物重
/mg·株-1
干物重
/mg·株-1
芽数
/个·株-1
0  13.1e 4.3e 1.2d
0.2  160.7b 36.8c 4.8b
0.4  245.2a 54.1a 7.0a
0.6  176.8b 46.3bc  6.2ab
0.8  97.9c 18.2d 2.4c
1.0  45.6d 11.6d 2.0c
2.3 最佳配方pH值的筛选
以B5为基本培养基,在添加0.4mg/L TDZ的基
础上,进行pH值筛选试验。由表3可以看出,pH5.4的
配方中无论鲜物重、干物重还是芽数均大于其它pH值
配方,分别为286.2、44.8mg/株,极显著地高于其它配
方的鲜、干物质,说明配方pH值调节为5.4最有利于不
表3 不同pH值配方中不定芽的增殖情况
pH值
鲜物重
/mg·株-1
干物重
/mg·株-1
芽数
/个·株-1
5.2  128.1d 18.6c 4.9c
5.4  286.2a 44.8a 12.2a
5.6  185.8bc  28.7b 7.6b
5.8  165.2c 27.0b 5.6c
6.0  98.2e 15.6c 3.2d
定芽的增殖。
3 结论与讨论
该试验从基本培养基、激素浓度、pH值3个方面进
行筛选,以期选择出最佳的适合笃斯越橘组培苗增殖扩
繁的培养基配方。结果表明,以B5为基本培养基添加
0.4mg/L TDZ激素,将pH调节为5.4,所增殖的不定
芽无论从鲜物重、干物重还是芽数均达到最大。同时由
于试验进行的过程中采用的是单因素试验,另外在激素
浓度、pH的选择方面,不同配比的数据间差略大,有一
定的跳跃性,有待于进行精确研究,以筛选最佳培养基。
参考文献
[1] 任宪威.树木学[M].北京:中国林业出版社,2006:269.
[2] Ahmed E.Long term effects o f propagation by tissue culture or
softwood single-node cutting on growth habit,yield,and berry weight of
‘northblue’blueberry[J].Hort Science,1996,16(4):705-706.
[3] Read P E,Hartley C A,Sandahl J G,et al.Field performance of in vitro
propagation blueberries[J].Proc Intl Plant Prop Soc,1987,22(4):450-452.
[4] 叶飞,建德锋.越橘叶片组培快繁技术研究[J].中国南方果树,2012
(3):58-60.
[5] 廉家盛,朴炫春,廉美兰,等.培养基种类、玉米素浓度及pH值对蓝
莓“美登”组培增殖生长的影响[J].延边大学农学学报,2010(4):270-271.
Screening Test on the Propagation Medium of
Vaccinium uliginosumL.Seedlings in vitro
ZHEN Yong-chun,CHI Li-hua
(Jilin Agricultural Science and Technology Colege,Jilin,Jilin 132101)
Abstract:Taking the leaves of Vaccinium uliginosumas explants,the efects of diferent basic mediums,the concentrations
of added hormone and the pH value on the propagation were studied in order to select the best medium formula that was
suitable for Vaccinium uliginosumL.seedlings to propagate.The results showed that B5medium added 0.4mg/L TDZ
was the best medium formula for Vaccinium uliginosumL.seedlings to propagate,and 5.4of pH was the best.
Key words:Vaccinium uliginosumL.;propagation;basic medium;hormone concentrations;pH value
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