作 者 :胡涛
期 刊 :浙江农林大学 2015年 06期 页码:62
关键词:拟南芥;乙醇脱氢酶;原核表达;酶学性质研究;分子动力学;
摘 要 :乙醇脱氢酶是许多有机体中主要短链醇代谢的关键酶。典型的乙醇脱氢酶是一个锌结合酶,以二聚体形式作用且依赖NAD(P)+辅助因子互变乙醇和乙醛。植物ADH的3个保守功能域分别为锌结合位点、Rossmann折叠NAD(P)+结合蛋白和具有GroES结构的ADH_N结构域。这3个保守结构在物种中具有相当高的保守性。为了探究拟南芥乙醇脱氢酶的结构与生化特性,本实验构建了拟南芥ADH蛋白的原核表达载体,纯化可溶性ADH蛋白并进行体外功能结构试验。主要结果如下:1.成功构建得到的原核表达拟南芥ADH蛋白载体,以pET-HTT为表达载体,Rosetta为宿主表达细菌,20℃条件下0.1%IPTG诱导15 h,...