全 文 ：科 考 氏 叙 第 4 9卷 第 2 3期 2 0 0 4年 1 2 月 论 文
拟南芥防卫基因 尸D F I . 2 启动子中 G C C 盒是
应答茉莉素反应必要的顺式作用元件
张海文 ①②③ 谢 丙 炎② 卢向 阳③ 杨宇红② 陈 琪① 黄荣峰① ’
(①中国农业科学院生物技术研究所 , 国家植物基因研究中心 , 国家品种资源和遗传改良重大科学工程 , 北京 10 0 0 81
②中国农业科学院蔬菜花卉研究所 , 北京 10 0 0 81 ; ③湖南农业大学理学院 , 长沙 4 10 12 8 . * 联系人 ,
E
一
m ia l : r o n g fe n g @ Pu b l i e 3为 t a · n e t￡ n )
摘要 通过对 尸D F .I 2 启动子进行缺失突变和点突变 , 结合在烟草叶片中的农杆菌瞬时表达 , 分析了该
启动子中应答茉莉素反应的必要顺式作用元件 , 验证 了该基因上游 1 86l bP 的区域具有应答茉莉素反应
的功能 . 通过缺失突变证实了该启动子一3 0 和一23 4 bp 间的区域是该启动子应答茉莉素反应的重要区
域 . 为了进一步阐明此重要区域中的应答茉莉素反应的必需区域 , 分别对此区域中的 G C C 盒 、 类 G 盒
和一个回文序列进行了点突变 . 在烟草叶片中的瞬时表达分析表明 , G C C 盒的突变使该启动子丧失了
对 M eJ A 的应答 , 而类 G 盒和回文序列的突变没有明显的改变该启动子区域对茉莉素的反应 , 表明
G C C 盒是 尸。 F l . 2 基因启动子中应答茉莉素反应的必需顺式作用元件 . 在此基础上 , 将含有 4 次重复
G C C 盒序列的片段与 C a M v 35 5 的最小启动子序列构建成嵌合启动子 . 在烟草叶片中, 该嵌合启动子
可应答茉莉素的诱导反应 ,表明 G C c 盒是 尸D F I . 2 基因启动子中应答茉莉素反应必要的顺式作用元件 .
关键词 农杆菌渗透法 G C C 盒 茉莉素 尸刀F .l 2 启动子 顺式作用元件
在植物防卫反应相关基因的表达过程 中 , 顺式
作用元件通过与转录因子 的互作发挥着重要调控作
用 : 环境刺激经过一系列信号转导 、 传递后 , 激活防
卫相关转录因子与特异顺式作用元件的互作 , 从而
实现相关防卫功能基因的表达 . 目前 , 通过转基因技
术提高植物的抗逆性 已成为植物基 因工程 中重要的
研究策略 . 鉴于顺式作用元件的上述重要调控作用 ,
与早期的组成型表达的抗性基因的转基因应用相 比 ,
使用诱导型启动子介导的抗性基因无疑具有多方面
的优势 , 因此鉴定抗性相关 (特别是细菌性病原相关 )
诱导型启动子已成为 目前植物分子生物学研究 的热
点 汇’ 一 8] . G c c 盒是一类乙烯应答的顺式作用元件 , 存
在于众多 PR 基因的启动子序列中 , 在植物抗性反应
和生长发育中具有重要调控作用 .研究表明 , G C c 盒
可与某些 E R F ( e th y l e n e r e s p o n s i v e af e to r )蛋 白互作 ,
参与乙烯应答的多种防卫反应 . 而 E R F 蛋 白是一类
植 物特 有的调节 蛋 白 , 在拟南芥 9[] 、 烟草 l[ 0] 和番
茄 [“ 一 , 4] 等多种植物 中广泛存在 , 参与细胞发育 、 激
素 、 病虫害 、 低温 、 干旱和高盐等多种信号传递过
程 [2 。 “ , ” 1.
茉莉素臼as m on at e , JA )是植物防卫反应的信号分
子和生长发育的调节子 〔, “ , `7」. 近年来的研究表明 , JA
和乙烯协同诱导多种植物中许多防卫相关基因的表
达 8[] , l9] , 如 JA 和 乙烯能协同诱导拟南芥 DP FI . 2,
刀石乙 和 C H IB「` 6, 2 0 ]及烟草 o s m o t i n 和 尸尺1西 [2 ` ] 的表
达 . 尸D FI . 2基因编码一种植物防卫蛋白 , 其体内表达
受茉莉酸 甲醋 (m e t h y l J A , M e J A ) 、 乙烯 、 真菌侵染和
多种活性氧组分的诱导 , 但不受水杨酸的诱导 「`6,2 ` ].
p D IF
.
2 启动子序列 中含有多个顺式作用元件 , 如 P
转录因子结合位点 、 干旱应答元件 、 2 个 S B F 1 B ox
1 序列 、 l 个 e e e 盒 (A o e e G e e )及与之紧密相邻
的类 G 盒 (C AT G T G ) 和 1 个类似 的 回文 序 列
( GAT AT
A c )C 2[ ]
. 虽然多种启动子序列 中分离到与
JA/ 乙烯应答反应 的相关序列 , 但目前还不清楚 JA/
乙烯调控下游信号组分及其相关靶基因的作用机理 .
农杆菌渗透介导的体内瞬时表达系统在研究顺
式作用元件 、 转录因子及两者间的相互作用方面具有
快速 、 可靠的优点 [ ’ 1. 本研究中 , 我们通过烟草叶片
的农杆菌渗透法来确定 尸D FI . 2 启动子中应答 M eJ A
反应的顺式作用元件 , 结果表明 G C c 盒是该启动子
中应答 M eJ A 反应 中必要的顺式作用元件 .
1 材料与方法
( i) 表达载体的构建 . 将从拟南芥 (A r ab i J 口27 5 15
2 4 44 w WW
.
S C IC h i n a
.
C O m
论 文 第 4 9卷 第 2 3期 2 0 0 4年 12 月 科 李 遨 叙
ht al ia an )基因组 D N A 中扩增出的 尸。 lF . 2 基因上游
1 8 6 1 b p 片段 ( G e n B a n k 登录号 : A t 5 9 4 4 4 2 0 )克隆到
p G EM -T ve ct or 中 , 作为该启动子的全长序列 . 通过
分析该全长启动子 . 利用不同的特异性引物扩增不
同长度缺失的启动子片段 , 并克隆到载体 p lB l ZI 报
告基因 G US 上游的 iH nd l 和 B a m H I酶切位点之间 ,
构建相应的融合基因 , 命名为 lP , 2P , 3P , 4P 和 5P (图
1)
. 利用合成的特异性引物分别对 P 4 中 G C c 盒及其
上游 (回文序列 )和下游 (类 G 盒 )相邻的 6 个碱基进行
突变 . 突变的启动子片段插人到载体 p Bl l ZI 中 , 构
建相应 的点突变启动子 , 命名为 6P , 7P 和 8P (图 2) .
为了验证 G C C 盒是否能应答茉莉素反应 , 我们将含
4 火G c C 串联的顺式作用元件和 35 5 最小启动子片段
卜 9 0 b )P 构建成融合启动子 , 并克隆到 p lB l 21 质粒
万 in d l 和 B a m H I 位点 , 构建成 4 x G C C 一 3 5 5 m i n 融合
基因 , 命名为 gP .
P I }1 8 6 1 b P
G 习5 ,
注射器进行农杆菌渗透 , 然后用保鲜袋密封培养 24 h,
接着用 50 件m ol 几 M eJ A 处理 24 h , 对照用蒸馏水处
理 . G u S 的组织化学染色及其定量检测参照 eJ fe r son
等人 [2 , ]方法 . G u s 活性单位为 p m o l M u · m i n 一 , ·
m g
一 `蛋白 .
2 结果与分析
2
.
1 G C C 盒是 P D F I . 2 启动子应答 M eJ A 的必需顺
式作用元件
利用特异引物从野生型拟南芥基因组 D N A 中扩
增 出 尸D F I . 2 上游 18 61 bP 的启动子区域 . 为了确定
T A T A bo
x 上游应答茉莉素反应的最小序列区域 , 利
用特异 引物对该启动子进行不 同长度 的缺失突变 ,
将全长及其缺失启动子片段与 G U S 报告基因构建为
一系列的融合表达基因 , 命名为 1P 巧 (图 1) . 通过农
杆菌渗透法转染和 M eJ A 处理 , 烟草叶片中 G u S 报
告基因的瞬时表达分析结果如图 3 . 从图 3 可以看出 ,
1P 融合基因在 M eJ A 处理的烟草叶片中表现出很高
的表达水平 , 而对照 (用水处理 )叶片的 G U s 报告基
因基本没有表达 , 表明 尸刀 F l . 2 在植物体内受 M eJ A
的诱导表达 . G U S 活性的定量和定性分析结果表明 ,
全长启动子构建的融合基因 1P 具有最高的诱导表达
活性 (图 3) . 以 lP 诱导表达活性作为对照 , P Z , 3P 和
图 1 尸D F I . 2 启动子及其系列缺失启动子与 G US 基因融
合的示意图
缺失的位点相应为一 1 8 61 , 一 7 0 0 , 一 5 0 0 , 一3 0 0 和一 2 43 b p , 构建的相应基
因载体命名为 1P , 2P , 3P , 4P 和 5P (
a
) p l (H
ZO ) p l (M
e JA ) p Z p 3 p 4 p s
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14 00
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g at ct g at a
P 6
巨三]
P7
gt c at c a a c
P 8
图 2 P 4 启动子区域的点突变示意图
相应的 P 4 启动子野生型序列和突变序列 . P 6 , P 7 和 P S 分别是 回文序
列 、 G C C 盒和类 G 盒的突变
( i ) 瞬时表达与 G u S 活性分析 . 植物转染方
法参照 aY ng lj 的方法 , 5一6 周的烟草幼嫩叶片用微量
图 3 烟草叶片中尸D F I . 2 启动子及其系列缺失启动子驱
动 G US 报告基因应答茉莉素反应的瞬时表达
G us 报告基因的组织化学染色 (a) 和 G u s 活性定量分析结果 ( b) . 黑色
实心柱型表示 M eJ A 诱导处理 , 白色空心柱型表示水处理对照 . 测定
为 3 次试验结果的平均值 , S E 为误差
W WW
.
S C IC h in a
.
C O m 2 4 45
科 考立 叙 第 4 9卷 第 2 3期 2 0 0 4年 1 2 月 论 文
P 4的启动子片段维持了 M eJ A 诱导 尸D F I. 2启动子驱
动 G u S报告基因表达的绝大部分活性 (高于 80 % 的活
性 , 图 3 的 P Z , 3P 和 P 4) ; 而 5P 的表达水平显著下降
(图 3 , P )S ; 表明在 z〕 z〕F .l 2 启动子的全长序列 中 ,
一 30 0一 24 3 b p 这一段序列是应答茉莉素反应的重要
区域 .
诱导型启动子 中通常含有多种不 同的顺式作用
元件 , 但并不是所有 的顺式作用元件都会应答某种
特异的诱导反应 . 已有研究表明 , 在 尸D FI . 2 启动子
一
30 0一 24 3 bP 区域 中含有 G c c 盒 、 类 G 盒和一个类
似的回文序列 , 这些元件参与调控植物对许多外界
胁迫的应答防卫反应 . 为了进一步确定此 区域中应
答茉莉素反应的必需顺式作用元件 , 以 4P 融合基因
为基础 , 我们设计 3 对特异性引物 , 对 G c C 盒 、 G C C
盒上游相邻的回文序列和下游的类 G 盒进行突变 ,
获得相应 的突变启动子片段 . 然后构建成相应的植
物融合表达基因 6P , 7P , 8P (图 2) . 用农杆菌渗透法转
染烟草叶片 , M eJ A 处理的烟草叶片中 GU S 活性的
定量和定性分析结果如图 4所示 G C C 盒上游 回文序
列突变 (P 6) 和类 G 盒的突变 ( P )S 仍然保留了 P 4 融合
基因应答茉莉素的诱导反应 , 而 G c c 盒的突变 (7P )
启动子几乎完全丧失了 P 4 融合基因应答茉莉素的诱
导反应 , 其表达效率与对照 (lP 用水处理 )的表达相似 ,
表明 G C C 盒是 尸D FI . 2 启动子中应答茉莉素反应的
必需顺式作用元件 .
.2 2 在体内 G C C 盒能够有效地应答 M eJ A 反应
为了进一步证明 G C C 盒是应答 M eJ A 反应的重
要顺式作用元件 , 我们合成 4 次重复的 G C c 盒序列 ,
并将此序列与 C aM V 35 5 最小启动子融合成为一个
嵌合型启动子 , 然后将此启动子与 G u S 报告基因融
合 , 构建成 4x G c c 一35 5 m in : : G us 融合表达基因 (图
5 a()
,
9P )
. 经 M eJ A 诱导处理后进行 G u s 报告基因的
烟草叶片其瞬时表达效果如图 5 (b) 所示 . 从图 5 可以
看出 , 9P 在烟草中能应答 M eJ A 反应 , 并有效地启动
G u S 报告基因的表达 , 而对照 (水处理 )不能有效地驱
动 G U S 报告基因的表达 . M eJ A 处理后 , 9P 驱动的
G u s 报告基因表达的活性较对照 (用水处理 )提高了 4
倍 (图 4 (b) 的 P g 和图 5 (b) ) , 其活性接近 P 4融合基因
的诱导表达水平 , 表明 G C C 盒 在该嵌合启动子中
能够有效地应答 M eJ A 的诱导反应 . 以上的结果证明
了 G C C 盒是 尸刀 F l . 2 启动子应答 M eJ A 反应 的必要
的顺式作用元件 .
4 X G C C
一
3 5 S m in
八éUnnU八n Oo八ù厂n1.胜
尸9 (M e JA ) P g (H : O )
图 5 G c c 元件与 35 5 最小启动子区域构建的融合启动子
在植物中驱动 G US 报告基因应答 M eJ A 反应的瞬时表达
(a) 融合基因构建的示意图 ( P g) , G c c 盒连接在 c a M v 35 最小启动子
区域的上游 . (b) P g 融合基因的 G u s 报告基 因的组织化学染色
八”曰O八U
月
4伪乙
碗日·丫属二。分d/挚叹的口。
图 4 在烟草叶片中 P4 及其突变启动子驱动 G US 报告基
因应答茉莉素反应的瞬时表达
G us 报告基因的组织化学染色 (a) 和 G u s 活性定量分析结果 (b) . 黑色
实心柱型表示 M eJ A 诱导处理 , 白色空 』合柱型表示水处理对照 . 活性
测定为 3 次试验结果的平均值 , S E 为误差
24 4 6
3 讨论
大量研究表 明利用诱导型特异启动子构建植物
Ww w
,
S o iC h i n a
.
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论 文 第 4 9 卷 第 2 3 期 2 0 0 4 年 12 月 科 考 五 叙
高效表达系统是提高转基因植物胁迫应答能力 的有
效手段 . 目前 , 在植物中已分离出许多受生物和非生
物胁迫调控的诱导型启动子 , 并对它们 的调控 区域
的功能进行了研究卜 7 , 2] . 本研究 中 , 我们通过农杆
菌渗透法介导的烟草叶片瞬时表达分析了 尸D F I . 2 启
动子中应答 M eJ A 诱导反应的顺式作用元件 . 研究结
果表明 , 该研究系统在分析诱导型启动子和组织特
异性启动子特性方面具有快速 、 可靠而有效的优点 .
越来越多的分子遗传学研究结果证实茉莉素和
乙烯在植物的发育和防卫相关反应 中发挥着重要的
作用 2[, ` 5 ,24 ,25 ] . 拟南芥 尸 D F I . 2 基因是研究 乙烯和茉
莉素诱导反应的标记基因 l[ “ ], 已有的研究结果表明
该启动子 中含有多种与其他 防卫基因激活表达有关
的顺式作用元件 , 如存在于许多 尸R 基因且与乙烯反
应相关的 G c c 盒 3[, 5 ,26] 、 存在于许多胁迫诱导型启动
子中的类 G 盒 . 类 G 盒可与多种不同的转录因子结
合 , 在应答伤害 、 脱落酸和真菌侵染等多种胁迫反应
并激活相关基因表 达的过程 中起重要 的作用 6[,7 ,27] .
不 同 的顺 式作用 元件决定了不 同外界刺激调 节
p D F I
.
2 的基因表达 , 在此过程中这些元件可能独立
或相互依赖来发挥作用 . 为 了阐明该启 动子应答茉
莉素反应的作用机制 , 本研究对 尸D FI . 2 启动子进行
了缺失和点突变分析 片段缺失分析结果表明 , 该基
因启动子 中一3 0 bP 上游片段的缺失对其应答 M eJ A
的诱导没有显著的影响 , 但缺失到一 2 43 bP 时 , 该启
动子基本不能有效地应答茉莉素的诱导反应 . 这些
结果表明该启动子 中一 30 0一 24 3 bP 序列是其应答茉
莉素诱导反应 的必需调控区域 . 在此重要 区域 中含
有一个 G C C 盒及与之紧密相连的类 G 盒和一段 回文
结构序列 . 为了阐明此启动子区域 中应答茉莉素反
应的必需顺式作用元件 , 我们分别对这 3个结构元件
进行了碱基取代突变 . 瞬时表达结果表明 , G C C 盒的
突变几乎使该启动子 区域丧失了应答茉莉素反应 的
活性 , 而其他 2 个结构元件的突变对此应答反应没有
明显的影响 , 这些结果表明 G C C 盒是该启动子区域
应答茉莉素反应的必需顺式作用元件 . 为 了进一步
验证 G C C 盒能否作为增强元件激活异源启动子应答
茉莉素诱导反应 , 我们合成一段含有 4 次重复的
G C C 盒序列 , 并与 c a M v 3 5 最小启动子区域融合
为一个嵌合型启动子 , C a M v 3 5 最小启动子区域含
有一个正常的 工笙 r A b ox 和一个 A SFI 转录因子结合
位点 28[ 〕, 而且在烟草叶片中只具有很低 的启动子活
性 8[] . 烟草叶片中 M eJ A 处理后 , G u s 报告基因的瞬
时表达结果表明 , 该嵌合型启动子能有效地应答茉
莉素反应 , 并驱动 G U s 报告基因的高水平表达 , 证
明 G C C 盒是一种具有应答 M eJ A 诱导反应的顺式作
用元件 .
E R F 蛋白是植物中特有且能与 G c C 盒特异结合
的转录因子 , 该转录因子家族中的多个成员在不同
信号途径交叉反应或应答不 同胁迫反应中发挥重要
的作用 9[ 一 “` 〕. 我们用 G c c 盒作为诱饵 , 通过酵母单杂
交技术从番茄 c D N A 文库中分离出几个属于 E R F 家
族的转录因子基因 , 并命名为茉莉素和乙烯应答反
应 因子臼a s m o n a t e a n d /o r e th y l e n e r e s p o n s iv e f a e t o r s ,
J ERF s/ ET RF s)
. 进一步的研究结果表明 , EJ RF s/ ET RF s
能与 JA , 乙烯或 A B A 相关作用元件结合 [`2, ’ 31. 结合我
们 的研究结果和已有的研究报道 , 我们推测 G C C 盒
可能作为乙烯和茉莉素信号途径的连接 因子 , 它们
激活相关基因表达的协同作用可能汇合于 G c C 盒和
J E R sF T/ E R F
S 的相互作用 . 然后 J E R sF T/ E R sF 通过
调节 PR 基因表达和 (或 )提高植物对多种胁迫的忍耐
性来发挥植物 的防卫 (胁迫 )应答反应 . 我们将进一步
用遗传学 、 分子生物学方法鉴定更多信号分子组分 ,
进而阐明植物防卫反应中信号转导的分子机制 .
致谢 本 工 作 为 国家植物转基 因专 项基 金 (批 准号 :
JY Z o o 4 A o l )和 国家 自然科学基金 (批准号 : 3 04 7 1 0 47 和
30 4 70 9 2 0 )资助项 目 .
参 考 文 献
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,
L I R
,
Q i M
.
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v i v o a n a ly s i s o f Pl a n t Pr o m o t e r s a n d
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.
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,
20 0 0
,
2 2 (6 )
: 5 4 3 、 5 5 1
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一
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,
S h i n sh i H
.
E t h y l e n e
一
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一
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.
P l a n t
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,
19 9 5
,
7 : ] 7 3 ~ 1 82
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C Z H 4 a n d
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.
P lan t M o l B i o l
,
19 9 7
,
3 4 :
3 93 ~ 4 0 2
J a e i n t o T
,
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F r a n e e s e h i V,
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P r o m o t e r c o n fe r s w o u n d
一
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P r e s s i o n o f ht e p
一
g l u e u r o n i d a s e g e n e i n t r a n sg e n i c t o m a t o P l a n t S
·
P l a n t a
,
19 9 7
,
2 0 3 : 4 0 6
一
4 12
S h i n s h i H
,
U s a m i S
,
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一
T a k a g i M
.
I de n t i if c a t i o n o f a n e ht y l e n e
r e sp o n s i v e r e g i o n i n ht e P r o m o t e r o f a t o b a e e o c l a s s 1 e h i t i n a s e
g e n e
.
P l a n t M
o l B i o l
,
19 9 5
,
2 7 : 9 2 3、 9 3 2
W WW
.
S C IC h in s
,
C O m 2 44 7
研 考 立 粗 第 4 9 卷 第 2 3期 2 0 0 4 年 12 月 论 文
6 W a n g S J
,
L an Y C
,
C h e n S F
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th e s w e e t P o t a t o sP o r a m in g e n e P r o m o t e r r e g i o n
.
P l a n t M o l B i o l
,
2 0 0 2
,
4 8 : 2 2 3砚 3 1
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2 0 0 3
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5 ] : 83 1~ 8 3 8
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e i if c a e t i v a t i n g s e qu e n e e P l a n t M
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,
19 94
,
2 6 (2 ) : 7 4 7~ 7 5 6
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v a t o r s o r r e P r e s s o r s o f G C C b o x
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m e d i a t e d g e n e e x P r e s s i o n
.
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2 0 0 0
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12 : 3 9 3科 0 4
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C h ar a c t e r i z a t i o n o f
g e n e e x P r e s s i o n o f N S ER F s
,
t r a n s c r i P t i o n f a e t o r s o f b a s i e P R
g e n e s fr o m N i c o t i a n a 划 j v e s t r i s . P l a n t C e l l P h y s i o l , 2 0 0 0 , 4 1 :
8 17、 8 2 4
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.
N e w m e m b e r s
o f t h e t o m a t o E R F fa m i ly sh o w s Pe e i if e e x P r e s s i o n P a t t e r n an d
id v er s e D N A
一
bi n d i n g e aP a e i t y t o ht e G C C b o x e l e m e n t
,
F E B S
L e t t
,
2 0 0 3
,
5 5 0 : 14 9~ 15 4
12 认几tn g H , H u a n g Z J , C h e n Q , e t a l
.
E e t o P i e o v e r e x Pr e s s i o n o f t o
-
m a t o J E R F 3 i n t o b a e e o a e t i v a t e s do w n s t r e am g
e n e e x P r e s s i o n a n d
e n h a n e e s s a l t t o l e r a n c e
.
P l a n t M o l B i o l
,
2 0 0 4
,
5 5 : 1 83 ~ 19 2
13 H u a n g Z
,
Z h a n g Z
,
Z h a n g X
,
e t a l
.
oT m
a t o T E R F I m o d u l a t e s e t h
-
y l e n e r e sP o n s e a n d e n h a n e e s o s m o t i e s t r e s s t o l e r a n c e b y a e t i v a t i n g
e x P r e s s i o n o f d o w n s t r e a m g e n e s
.
F E B S L e t t
,
20 0 4
,
57 3 : 1 10~ 1 16
14 G u Y Q
,
W i ld e r m u t h M C
,
C h a kr a v a r t hy S
,
e t a l
·
oT m
a t o t r a n
-
s e r i P t i o n fa e t o r s P t i 4
,
P t i s
,
a n d P t i 6 a e t i v a t e d e fe n s e r e s P o n s e s
w h e n e x pr e s s e d i n A r a b汇d op s i s
.
P l an t C e l l
,
20 0 2
,
14 : 8 17 ~ 8 3 1
15 S o l a n o R
,
S t e P a n o v a A
,
C h a o Q
,
e t a l
.
N u c l e a r e v e n t s i n e t h y l e n e
s i g n a l i n g : A t r a n s e r iP t i o n a l e a s e a d e m e d i a t e d b y E T H Y L EN E
-
IN S E N S IT I V E 3 a n d E T H Y L E N E
一
R E S P O N S I V E R 、 C T O R I
G e n e s D e v
,
19 9 8
,
12 : 3 7 0 3~ 3 7 1 4
16 P e n n i n e k x I A M A
,
T h o m m a B P H J
,
B u e h a l a A
,
e t a l C o n e o m i
-
t a n t a e t i v a t i o n o f j a s m o n a t e a n d e t h y l e n e r e s P o n s e P a th w a y S 15
r e q u i r e d f o r i n d u e t i o n o f a P l a n t d e fe n s i n g e n e i n A r a b i d oP
s i s
,
P l a n t C e l l
,
19 9 8
,
10 : 2 10 3 ~ 2 1 14
17 R a o M V, L
e e H
,
C r e e lm a n R A
,
e t a l
.
J a s m o n i e a e i d s ig n a l i n g
姗 d u工at e s o z o n e 一i n du e e d h y P e r s e n s i it v e e e l l d e a th . P l a n t C e l l ,
2 0 0 0
,
1 2 : 16 3 3~ 1 6 4 6
18 K u n k e l B N
,
B r o o k s D M
.
C r o s s t al k b e tw e e n s i g n a l i n g P a th w a y s
i n P a t h o g e n d e fe n s e
.
C u r O Pi n P l a n t B i o l
,
2 0 0 2
,
5 : 3 25 、 3 3 2
19 S e h e n k P M
,
K a z a n K
,
W i l s o n l
,
e t a l
.
C o o r d i n a t e d P l a n t d e f e n s e
r e s P o n s e s i n A ra b i己ol j s i s r e v e a l e d b y m i e r o a r r a y a n a l y s i s
.
P r o c
N a t l A e a d S e i U S A
,
2 0 0 0
,
9 7 : 116 5 5 、 ] 16 6 0
2 0 N o r m a n
一
S e t t e r b l a d C
,
Vi d a l S
,
P a l v a E 工 In t e r a e t i n g s i g n a l P a t h -
w a y s e o n tr o l d e fe n s e g e n e e x P r e s s i o n i n A ar b id oP
s i s i n r e s P o n s e
t o e e l l w a l l
一
d e g r a d in g e n z y m e s fr o 扭 E r w i n i a c a r o t o v o r a . M o l
P l a n t M i
e r o I n t e r
,
2 0 0 0
,
1 3 : 4 3 0碑 3 8
2 1 P e n n i n e k x 1 A M A
,
E gg e rm o n t K
,
eT
r r a s F R q
e t al
.
P a ht o
-
g e n
一
i n d u e e d s y s t e m i c a e t i v a t i o n o f a P l a n t d e fe n s i n g e n e i n
A r a b id口P s i s fo l l o w s a s a l i e y l i e a e i d
一
i n d e P e n d e n t P a t h w a y
.
p l a n t
C e l l
,
19 9 6
,
8 : 2 3 0 9砚 3 2 3
2 2 M a n n e r s J M
,
P e n n i n c kx 1 A M A
,
Ve
r m a e r e K
,
e t a l
.
T h e Pr o
-
m o t e r o f ht e P l a n t d e fe n s i n g e n e P D F I忍 fr o m A ra b id op s i s 15 s y s -
t e m i e a l l y a e t i v a t e d b y fu n g a l P a th o g e n s a n d r e s P o n d s t o m e th y l
j a s m o n a t e b u t n o t t o s a l i e y l i e a e i d
.
P l a n t M
o l B i o l
,
19 9 8
,
3 8 (6 ):
10 7 1 ~ 10 80
2 3 J e fe
r s o n R A
,
K a v a n a g h T A
,
B e v a n M W G U S fu
s i o n s :
B
一
G l u e u r o n i d a s e a s a s e n s i t i v e a n d v e r s a t i l e g e n e fu s i o n m a r k e r in
h i g h e r P l a n t S
.
EM B O J
,
19 8 7
,
6 : 3 9 0 1~ 3 90 7
2 4 V ij a y a n P, S h o e k e y J
,
L e v e sq u e C A
,
e t a l
.
A r o l e fo r j a s m o n a t e i n
P a山 o g en d e f en s e o f A rab i d oP s i s
.
P r o e N a n A e a d Se i U S A
,
19 9 8
,
9 5 : 7 20 9 ~宁2 14
2 5 S t in t z i A
,
B r o w s e J
.
T h e A r a b idOP
s i s m a l e
一
s t e r i l e m u t a n t
,
o P r 3
,
l a e k s th e 1 2
一
o x o P h y t o d i e n o i e a e id r e d u e t a s e r e q u i r e d fo r j a s
-
m o n a t e s y n t h e s i s
.
P r o e N a t l A e a d S e i U S A
,
20 0 0
,
9 7 :
1 0 62 5 ~ 10 6 3 0
2 6 Z h o u J M
,
aT
n g X 丫 M ar ti n G B . T h e P t o ik n a s e e o n fe r r i n g r e s i s -
t a n e e t o t o m a t o b a e t e r i a l s P e e k di s e a s e i n t e r a e t s w i t h P r o t e i n s th a t
bi n d a c i s
一
e l e m e n t o f p a th o g e n e s i s
一
r e l a t e d g e n e s
.
EM B O J
,
19 97
,
1 6 : 3 2 0 7~ 3 2 18
2 7 C h i r o n H
,
D r o u e t A
,
L i e u t i e r F, e t a l G e n e i n d u c t i o n o f s t i l b e n e
bi o s y n t h e s i s i n s e o t s Pi n e i n r e s P o n s e t o o z o n e t r e a tm e n t
,
w o u n d
-
i n g
,
a n d fu
n g a l i n fe e t i o n P l a n t P h y s i o l
, 2 00 0
,
12 4 : 8 65 ~ 8 7 2
2 8 F an g R X
,
N a g y F
,
Si v ab r a m an i am S
,
e t al
.
M u l it P l e e 汇5 r e g u l a t o r y
e l e m e n t s f o r m a x im a l e x P r e s s i o n o f th e e a u l i fl o w e r m o s a i e v i r u s
3 5 5 P r o m o t e r i n tr a n s g e n i e P l a n t s
.
P l a n t C e l l
,
19 8 9
,
l : 14 1~ 1 50
( 2 0 0 4
一
0 7
一加 收稿 , 20 0 4 一 x l 一 0 8 收修改稿)
24 4 8 WW W
.
S 0 iC h i n a
.
C O m