全 文 ： 收稿日期：2003-06-03
作者简介：吴菁华（1978-），女，安徽安庆人，硕士研究生，从事植物生物技术研究。
注：吕柳新为通讯作者。
多花水仙若干品种类型的亲缘关系与进化研究
I．POD同工酶分析
吴菁华 1，张志忠 2，吕柳新 2，林金文 2
（1.福建农林大学 生命科学学院，福建 福州 350002; 2.福建农林大学 园艺学院，福建 福州 350002）
摘 要：以 7 个水仙品种为材料，用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳，分析在同一生长时期的过氧化物酶同工
酶。结果表明，酶谱中不同品种的酶带分布有区别。但 I-1、I-2和 III-3相似，II-1和 II-2相似，平潭水仙和
漳州水仙相似。
关键词：水仙；POD同工酶；聚丙烯酰胺凝胶电泳
中图分类号：S682.2+.1; S338 文献标识码：A 文章编号：1009-7791(2003)04-0011-04
A study on genetic relationship and evolution of Narcissus cultivars
Ⅰ. The analysis of peroxidase isozyme
WU Jing-hua1, ZHANG Zhi-zhong2, LU Liu-xin2, LIN Jin-wen2
(1.College of Life Science, Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002, Fujian China; 2.College of Horticulture,
Fujian Agriculture and Forestry University, Fuzhou 350002, Fujian China)
Abstract：The peroxidase isozyme of seven Narcissus cultivars was studied by means of
polyarcylamide electrophresis. Characteristics and similarities of isozyme pattern were analyzed.
The result showed that the peroxidase isozyme varied in different cultivars; it was similar between cv.
Ⅰ-1, cv.Ⅰ-2 and cv.Ⅲ-3, and cv.Ⅱ-1 was similar to cv.Ⅱ-2, cv. Zhangzhou similar to cv. Pingtan.
Key words: Narcissus; peroxidase isozyme; polyarcylamide electrophresis
多花水仙（Narcissus tazetta）属石蒜科水仙属植物，具有很高的观赏价值，是重要的创汇经济作
物之一。福建是多花水仙的主要产地，栽培历史悠久，但品种单调，远不能满足观赏消费的要求。上
世纪 80年代，福建农业大学漳州分部开展了水仙农家品种和野生资源的收集，共收集到资源 50余份。
根据各品种类型的植物学特征进行整理，归为三大类，即：黄花类、白花类和花冠白色副冠橙黄色的
两色花类，大大丰富了多花水仙的品种资源。对这些品种类型进行核型分析，发现各类型的染色体数
目和组型存在很大差异[1]。本研究试图从分子水平（包括同工酶分析、RAPD分析、DNA原位杂交等）
开展工作，以进一步探明它们的亲缘与进化关系，为多花水仙的育种提供基础资料。同工酶作为一种
简便的分子标记，在植物的形态、性状、遗传、发育、亲缘关系、雄性不育、种子纯度检测、杂种优
势等研究中已得到广泛应用[2-6]。本文报道多花水仙若干品种类型 POD同工酶的分析结果。
1 材料与方法
1.1 供试材料
供试材料包括 3种花色类型的 7个品种，按花色和其它性状差异分组编号（表 1）。
2003,32(4):11-14.
Subtropical Plant Science
第 32卷 ﹒12﹒
表 1 供试材料的性状差异及分组编号
类 型 品种编号 主 要 特 征 染色体数 倍 性
I-1 花冠与副冠均为白色 2n=22 二倍体
白花类型
I-2 花色同上，花形较大 2n=22 二倍体
II-1 花冠黄色，副冠橙黄色 2n=20 二倍体
黄花类型
II-2 花形、花色同上，植株较高 2n=30 三倍体
III-1(漳州水仙) 花冠黄色，副冠橙黄色 2n=30 三倍体
III-2(平潭水仙) 花冠黄色，副冠橙黄色 2n=30 三倍体 两色花类型
III-3 花冠白色，副冠浅黄色 2n=32 同源异源三倍体
1.2 方法
于 11月将材料同期播种，12月从每品种取第二片新叶 2g，按 1﹕2比例加入Tris-HCl缓冲液（pH6.7）,
冰浴研磨成匀浆，8 000r/min离心 10min，取上清液再用 14 000r/min离心 20min，取上清液保存于冰箱
中备用。采用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳法，分离胶浓度为 7%，浓缩胶浓度为 4%，凝胶厚度为 1.5mm,
过氧化物酶同工酶电泳染色采用醋酸联苯胺法，染色后的胶板用 7%冰醋酸固定 5～10min，自来水冲
洗数次，蒸馏水漂洗后纪录、拍照[7]。
1.3 数据处理
同工酶区带的相对泳动率 Rf 值计算参照刘芳等 [8]的方
法：Rf＝酶带迁移距离/溴酚蓝迁移距离。聚类分析采用相似
系数聚类法。
2 结果与分析
2.1 不同品种水仙过氧化物酶同工酶酶谱比较
3个类型7个品种多花水仙幼叶过氧化物酶同工酶酶谱带
数及各酶带的迁移率 Rf值列于表 2。根据迁移率绘制酶谱模
式图如图 1所示。从负极到正极酶谱大致分为三个带区，即 A
区（Rf = 0～0.2），B区（Rf = 0.2～0.4），C区（Rf = 0.4～1.0）。
从表 2和图 1可以看出，7个品种同一生长期的幼叶，过
氧化物酶同工酶带型复杂，最多可显九条带，少的只有五条。
比较这 7 个品种带型特征可以看出，在 A 区，各个品种的酶
带数都较多，都有一条迁移率几乎一致的酶带和两条迁移率接
近的酶带，只是在着色强度上不同，反映了这 7个品种具有相
似的遗传基础。
从酶带数与迁移率综合比较，7个品种大致可分为三组：第一组，包括 I-1、I-2和 III-3三个品种，
带型基本相同，只是带强弱稍有差异，但 III-3 在 C 区的两条带在迁移率上与 I-1 和 I-2 略有差异；第
二组，包括 II-1和 II-2 两个品种，带型基本相似，但在 A区 II-2比 II-1少一条带；第三组，包括漳州
水仙和平潭水仙，它们酶带基本相同。
2.2 各品种间酶谱的聚类分析
本文的聚类分析采用相似系数来描述样品之间的关系。亲缘关系越近，相似系数越接近 1，亲缘关
系越远，相似系数越接近 0。酶谱相似系数计算式为：酶谱相似系数＝两个分类群中相同的酶带数/两
个分类群中总的酶带数。各品种间酶谱的相似系数见表 3。
图 1 7个品种水仙幼叶过氧化物酶
同工酶酶谱模式图