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拟南芥干旱敏感突变体的筛选及其对干旱胁迫的响应



全 文 :第 34卷第 4期
2 0 1 1年 7月
河 北 农 业 大 学 学 报
JOURNA L OF AGRICULT URAL UNIVERS IT Y OF HEBEI
    Vol.34 No.4
Jul .2 0 1 1
文章编号:1000-1573(2011)04-0035-06
拟南芥干旱敏感突变体的筛选及其对干旱胁迫的响应
李琳琳 ,  王凤茹 ,  韩建民 ,  董金皋
* (河北农业大学 生命科学学院 , 河北 保定 071001)
摘要:采用质量浓度为 5 g/ L的 PEG-6000 进行渗透胁迫 , 利用弯根法筛选拟南芥 T-DNA 插入突变体库 , 得到
干旱敏感突变体 36-1。该突变体在 PEG-6000 渗透胁迫下 , 种子萌发率 、根系长度均低于野生型;盆栽试验表
明:水分正常条件下 , 突变体 36-1 与野生型幼苗形态 、根冠比 、叶片含水量等并无明显差异;干旱条件下 , 突变体
36-1叶片相对含水量(62%)明显低于野生型(78%),叶片先于野生型表现出萎蔫症状;根冠比也明显低于野生
型。离体叶片失水试验发现:野生型和突变体36-1 离体叶片在最初 4 h 内叶片失水量并无明显差异 , 而4 h 后突
变体 36-1 离体叶片失水量开始显著高于野生型。采用 TAIL-PCR获得了 T-DNA 插入位点的侧翼序列 ,序列分
析证实 T-DNA 插入基因为 A T2g06025 ,插入位点位于该基因的第 7 个外显子上;表达分析发现 AT2g06025 在
突变体 36-1 中的表达明显低于野生型。
关 键 词:拟南芥;干旱胁迫;突变体;聚乙二醇
中图分类号:Q945.78 文献标志码:A
Screening of drought-sensitive mutant in Arabidopsis thaliana and
responses of drought-sensitive mutant to drought stress
LI Lin-lin, WANG Feng-ru , HAN Jian-min , DONG Jin-gao
(Co lleg e of Life Science s , Agricultural University of Hebei , Baoding 071001 , China)
Abstract:The drought-sensitive mutant 36-1 plant w as obtained under g row ing T-DNA insert-
ed A rabidopsis thaliana on 1/2 M S medium containing 5%PEG-6000 by observing roo t tip ben-
ding .The seed germinat ion rate , ro ot leng th of the mutant 36-1we re low er than w ild-type un-
der plant ing or g row ing on 1/2 M S medium containing PEG-6000.The seedling shape , roo t/
shoo t ratio and relative w ater content of the leaves between mutant 36-1 and w ild-type w ere not
obviously dif ferent under g row ing in pot w ith normal soil w ater content.The ro ot/ shoo t ratio ,
relative w ater content of the leaves in mutant 36-1 w ere obviously low er than in w ild-ty pe and
the leaves in mutant 36-1 seedling w ilt earlier compared w i th wi ld-ty pe seedlings under g rowing
in drought condi tions.The w ater loss of the leaves detached from either mutant 36-1 o r wi ld-
ty pe seedling s w as no t obviously dif ferent during the fi rst 4 h course of the test and af ter that
the w ater loss o f the leaves detached from mutant 36-1 w as beginning obviously higher than
wi ld-ty pe leaves.The flanking sequences of T-DNA inserted site w as amplif ied by TA IL-PCR .
Sequence alignment pro ved that T-DNA inserted the seventh exon of the AT2g06025.RT-PCR
* 收稿日期:2010-12-20
作者简介:李琳琳(1984-), 女 ,河北省保定市人 ,硕士 , 专业方向:植物学.
通讯作者:韩建民 ,教授 , 研究方向:植物抗逆生理.Tel:0312-7528246 , E-mail:hanjianmin64@tom.com
通讯作者:董金皋 ,教授 , 研究方向:植物分子病理学.Tel:0312-7528266 , E-mail:shmdjg@hebau.edu.cn
      河 北 农 业 大 学 学 报 第 34卷
conf irmed that the expression o f the AT2g06025 in mutant 36-1 w as obviously low er than wi ld-
ty pe Arabidopsis thaliana.
Key words:Arabidopsis thaliana ;doruhgt st ress;mutant;PEG-6000
  干旱在我国诸多的自然灾害中占据首位 ,严重
影响农作物的生长发育。培育抗旱作物品种是缓解
干旱危害的一条经济而有效的方法 。植物抗旱分子
机制研究的不断深入和转基因技术的日趋完善 ,为
培育高效抗旱作物新品种开创了一条崭新的途
径[ 1] 。拟南芥做为生物研究的模式植物 ,发现和研
究其干旱相关基因成为目前研究的热点。利用 T-
DNA 插入 、激活标签等方法得到了许多拟南芥干旱
诱导基因的突变体[ 2] ,对这一些突变体的特性进行
了广泛深入的研究 ,发现不同干旱相关基因的突变
体对干旱胁迫的反应不同 ,干旱相关基因的结构和
功能有很大差异 ,所以筛选新的拟南芥干旱相关突
变体 ,克隆突变基因 ,进一步研究突变基因编码蛋白
的本质及其在拟南芥对干旱响应过程中所起的作
用 ,对全面深入地认识拟南芥的抗旱机理有着重要
的意义。目前已从拟南芥中鉴定出 299个干旱诱导
基因[ 3] ,并利用这些基因成功地培育出一些抗旱作
物品种 ,例如拟南芥 H ARDY[ 4] 基因和 NCED3[ 5]
在水稻中的过量表达提高了水稻的水分利用率和光
合效率 ,从而增强了水稻对干旱的耐受性和产量 。
这些研究成果为其它植物的转抗旱基因研究带来了
广阔的应用前景 。本试验采用质量浓度为 5 g/ L 的
PEG-6000进行渗透胁迫 ,利用弯根法筛选拟南芥
T-DNA 插入突变体库 ,得到干旱敏感突变体 36-1。
研究了该突变体对干旱胁迫的反应并克隆了突变基
因 ,为进一步研究该基因在拟南芥抗旱过程中所起
的作用打下了基础。
1 材料与方法
1.1 材料
拟南芥(Arabidopsis thal iana)columbia 生态
型由美国 Donald Danforth Plant Science Center 夏
亦荠博士提供;T-DNA 插入突变体库由中国科学
院遗传所左建儒研究员提供。
1.2 方法
1.2.1 拟南芥干旱敏感突变体的筛选 采用聚乙
二醇(PEG-6000)造成渗透胁迫 ,利用弯根法[ 6] 筛选
拟南芥干旱敏感突变体。具体方法:把长出 4片真
叶的野生型拟南芥幼苗转移到含有不同浓度 PEG-
6000 的 1/2M S 培养基上(根尖朝上 , PEG-6000浓
度分别为0 ,3 ,5 ,7 g/L),放在光照培养室(22 ℃,光
照强度约 7 000 lx ,16 h/8 h光暗周期)中培养 ,5 d
后观测根尖发生弯曲情况 ,以根尖弯曲(与对照相
比)未受到明显影响的 PEG-6000最高浓度为筛选
浓度。最终确定野生型幼苗根尖生长未受到明显影
响的最高 PEG-6000质量浓度为 5 g/L ,并以 5 g/L
作为筛选拟南芥干旱敏感突变体的筛选质量浓度 ,
结果成功筛选到干旱敏感突变体 36-1(图 1)。
1.2.2 拟南芥基因组 DNA 的提取 用 CTAB法
提取拟南芥干旱敏感突变体 36-1和野生型幼苗单
株基因组 DNA 。具体步骤参参照安鑫龙[ 7] 的
CTA B法
1.2.3  TAIL-PCR 反应的体系及程序  采用
TAIL-PCR扩增 T-DNA 侧翼序列 ,确定突变基因。
TAIL-PCR分为 3轮 ,第 1轮反应体系为 10×PCR
Buf fer 2.0μL ,dNTP(2.5 mmol/L)1.6 μL , genom-
icDN A 1.0μL , LexA2(2 μmol/L)2.0 μL , AD3(50
μmo l/L)1.2 μL , Taq酶(5 U /μL)0.2 μL , ddH20
12 μL。第 1轮反应产物稀释 50倍作为第 2轮反应
的模板 , 反应体系为 10 ×PCR Buf fe r 2.0 μL ,
dNTP 1.6 μL , 第 1 轮反应产物稀释物 1.0 μL ,
LexA3 (2 μmol/L)2.0 μL , AD3 0.8 μL , Taq 酶
0.15 μL , ddH 20 12.45 μL。第 2轮反应产物稀释
50倍作为第 3轮反应的模板 ,反应体系为 10×PCR
Buf fer 2.0 μL , dN TP 1.6 μL ,第 2 轮产物稀释物
1.0μL , LexA 4(2 μmol/ L)2.0 μL ,AD3 0.8 μL ,
Taq酶 0.15 μL , ddH2 0 12.45 μL。 TAIL-PCR扩
增所用引物的序列如下:LexA2 5′-CTAA TCG-
CAT TATCA TCCCCTCG-3′; LexA3: 5′-A T-
CATCCCCTCGACG TACTGTAC-3′;LexA4 :5′-
CTGGT T TTA TATACAGCAG TCGACG-3′;AD3
:5′-(A/ T)GTGNAG (A/T)ANCANAGA-3′。
TAIL-PCR反应程序如下:
36
 第 4期    李琳琳等:拟南芥干旱敏感突变体的筛选及其对干旱胁迫的响应
Reaction F ile No. Cycle No. Thermal condition
P rimary 1 1 95 ℃(2 min)
2 5 94 ℃(30 s), 62 ℃(1 min), 72 ℃(2.5 min)
3 1 94 ℃(30 s), 25 ℃(3 min), ramping to 72 ℃(3.5 min)
72 ℃(2.5 min)
4 20 94 ℃(15 s), 68 ℃(1 min), 72 ℃(2.5 min)
94 ℃(15 s), 68 ℃(1 min), 72 ℃(2.5 min)
94 ℃(15 s), 44 ℃(1 min), 72 ℃(2.5 min)
5 1 72 ℃(5 min)
Secondary 6 15 94 ℃(15 s), 65 ℃(1 min), 72 ℃(2.5 min)
94 ℃(15 s), 65 ℃(1 min), 72 ℃(2.5 min)
94 ℃(15 s), 44 ℃(1 min), 72 ℃(2.5 min)
5 1 72 ℃(5 min)
Ter tiary 7 28 94 ℃(15 s), 44 ℃(1 min), 72 ℃(2.5 min)
5 1 72 ℃(5 min)
1.2.4 拟南芥植株总 RNA 的提取及反转录 突
变体和野生型总 RNA 的提取和纯化参照改良的
T rizol法[ 8] 。纯化后的 RNA 以 Olig o(dT)为引物
进行反转录合成 。
1.2.5 RT-PCR分析 AT2g06025基因的表达水平
 按上述方法分别提取野生型 、突变体 36-1 的总
RNA ,以 AT2g06025 基因特异引物(正向引物序
列:5′-GATG TAAAGGGATGCAAGG-3′;反向引
物序列:5′-TCA AAT TTACCTG TT TCAACA-3′)
进行 RT-PCR扩增 。用 18S rRNA 引物(正向引物
序列:5-TTCTTCTCG TAT TTCTCTCCGCC-3,反
向引物序列:5-GCCT TTCTTCACCATCTCA T-
TCC-3)所扩条带检测所提取的 RNA 的完整性以
及电泳时各样品间 cDNA 上样量的一致性 。以调
好浓度的样品 cDNA 作为模板 ,按 18S rRNA 扩增
的模板量加入 PCR反应体系 ,检测目的基因的转录
表达水平 。PCR的反应体系为 cDN A1.0 μL , 10×
PCR Buffer 2.5μL , dN TP(2.5 mmol/ L)2.0 μL ,
正向引物(10 μmol/ L)1.0μL ,反向引物(10μmol/
L)1.0μL , Taq酶(5 U/μL)0.3μL , ddH2O 17.2μL
。PCR反应程序为 95 ℃预变性5 min;94 ℃30 s ,
60 ℃35 s , 72 ℃ 35 s , 28 个循环 , 72 ℃延伸 10
min。用 1 g/L 的琼脂糖凝胶电泳观察 PCR的扩增
结果 。
1.2.6 相对含水量 、叶片失水量 、种子萌发和根冠
比的测定
(1)叶片相对含水量测定 。拟南芥野生型和突
变体播种于 1/2M S培养基上 , 7 d后移栽到装有蛭
石的塑料盒中 ,每个盒中移 4株苗 ,野生型和突变体
各10盒 ,于 22 ℃、16 h光照下培养 ,期间正常浇水 。
培养 2周后 ,干旱处理组(野生型及突变体各 5盒)
停止浇水 ,对照组仍正常浇水 。10 d后 ,取 1株上的
所有叶片(8 ~ 10片)进行相对含水量测定[ 9] ,每个
处理 3株 。具体方法为:剪取 1株上的所有叶片 ,称
重 ,然后用去离子水浸泡 12 h ,取出 ,将叶片表面上
的水用吸水纸吸干 ,称重 ,然后将叶片放于 105 ℃烘
箱内杀青 10 min ,于 75 ℃下烘干至恒重 ,称干重 ,
按下式计算相对含水量 。
叶片相对含水量(%)=(鲜重-干重)/(饱和鲜
重-干重)×100
(2)离体叶片失水量的测定。拟南芥幼苗培养
同上。从正常浇水的对照组中取样。取 1株上的所
有叶片 ,称鲜重 ,然后将叶片放于培养箱内 ,每隔1 h
称重 ,到 12 h 时 ,将叶片放于烘箱内 105 ℃杀青
5 min ,再于 75 ℃连续烘考8 h ,称干重 ,按下式计算
失水速率[ 10] 。野生型和突变体各取 5株。
离体叶片失水量=(鲜重-当时重)/(鲜重-干
重)×100%
(3)种子萌发的观测 。拟南芥野生型和突变体
的种子播种于含不同浓度 PEG-6000 培养皿上
(PEG-6000质量浓度分别为 0 , 5 , 10 , 15 , 20 , 25 g/
L),每个培养皿放 30粒种子 ,每个浓度设置 3次重
复 。置于 4 ℃的冰箱中春化 48 h , 然后转到光照培
养室中培养 ,3 d后 ,观察野生型和突变体的种子的
萌发情况 ,统计发芽率[ 11] 。
(4)根冠比的测定 。把拟南芥野生型和突变体
的种子播种于蛭石上 ,在水分充足条件下生长 10 d
后 ,测定野生型和 36-1 幼苗的根冠比[ 12] ,然后停止
浇水 ,分别在停止浇水后7 d和14 d天测定根冠比。
每个处理测定 5株 。
(5)根系生长的观测 。把拟南芥野生型和突变
体的种子逐行播种于含有不同浓度 PEG-6000的1/
2M S培养基上(PEG-6000 浓度分别为 0 , 5 , 10 , 15
g/L),每个浓度设置 3次重复 ,置于 4 ℃的冰箱中
春化 48 h , 然后将培养皿竖直放到光照培养室中培
养 ,7 d后 ,用毫米刻度尺测量野生型和突变体主根
的长度 。
37
      河 北 农 业 大 学 学 报 第 34卷
2 结果与分析
2.1 干旱敏感突变体的筛选
将在 1/2MS 培养基中生长 7 d的拟南芥野生
型和突变体幼苗转移到 PEG-6000浓度分别为 0和
5%的 1/2M S 培养基上 , 根尖朝上 ,继续生长 5 d
后 ,观察根系生长情况 。发现在不含 PEG-6000 培
养基中培养时 ,突变体 36-1和野生型幼苗根尖都发
生明显弯曲(图 1A ,B),而在含 5 g/L PEG-6000的
1/2M S培养基中培养时 ,野生型幼苗根尖依然有较
明显的弯曲 ,36-1幼苗的根尖没有明显弯曲(图 1C ,
D)。表明突变体 36-1幼苗根尖生长受到明显的抑
制。
A , B分别为拟南芥野生型和突变体 36-1幼苗在 1/ 2MS培养基中生长
5 d后根尖发生弯曲情况;C , D分别为拟南芥野生型和突变体 36-1幼
苗在含 5 g/ L PEG-6000培养基中生长 5 d后根尖发生弯曲情况
图 1 拟南芥野生型和突变体根尖在普通MS培养基和
含 5 g/ L PEG的MS培养基上生长情况
Fig.1 Comparison of root growth between wild type and
mutant 36-1 seedings grown on1/ 2 MS or 1/ 2MS containing
5g/ L concentration of PEG-6000
拟南芥野生型和突变体 36-1植株在水分正常
条件下生长时 ,生长状态没有明显区别(图 2A , B);
停止浇水 14 d 后 ,突变体 36-1 叶片发黄 ,出现萎
蔫 ,下部叶片尤为明显;野生型植株叶片虽然也表现
出发黄萎蔫 ,但比突变体轻微的多(图 2C ,D)。
A正常培养条件下生长 10 d的拟南芥野生型植株;B正常培养条件
下生长 10 d的突变体 36-1植株;C停止浇水 14 d的野生型植株;D
停止浇水 14 d的突变体 36-1植株
图 2 干旱条件下拟南芥野生型和突
变体 36-1 植株生长情况的比较
Fig.2 Comparison of growth between wild-type and
mutant 36-1 seedings under drought condition
2.2 突变体 36-1 T-DNA插入位点的确定
为了确定 36-1 中 T-DNA 的插入位点 , 利用
TAIR-PCR对 T-DNA 侧翼序列进行了扩增 ,得到
了一条 750 bp 左右的片段 ,将所获得的序列与
TAIR中的已知基因进行同源性分析。结果发现 ,
T-DNA 插入片段的侧翼序列属于拟南芥的
AT2g06025基因 , T-DNA 插入位点位于该基因第
7个外显子上 ,如图 3所示。
图 3 突变体 36-1 中 T-DNA插入位点的鉴定
Fig.3 Analysis of insertion site of T-DNA
2.3 突变基因的表达
为了验证所筛选到的突变体是否为 T-DNA 插
入突变体 ,利用 RT-PCR检测了插入基因的表达情
况 。如图 4所示 , 36-1 中插入基因 AT2g06025 的
表达量出现下调 ,证明 36-1 确实为 T-DNA 插入突
变体。
图 4 拟南芥野生型和突变体 36-1 中
AT2g06025 基因表达量的比较
Fig.4 Expression of AT2g06025 gene in mutant
36-1 and wld-type seedings
2.4 叶片相对含水量 、离体叶片失水量 、种子萌发
及根系生长情况
2.4.1 叶片相对含水量 在水分充足条件下生长
的拟南芥野生型和突变体植株的叶片相对含水量分
别为 88.7%和 88.1%,停止浇水 10 d 后拟南芥野
生型和突变体植株的叶片相对含水量分别为 78%
和 62%,表明干旱条件下突变体 36-1叶片相对含水
量明显低于野生型 。
2.4.2 离体叶片失水量 分别取正常条件下生长
的野生型和突变体整株的叶片 ,称其鲜重;在室温下
分别放置 1 、2 、3 、4 、5 、6 h后 ,再称其重量 ,换算成失
水量 。结果发现在离体后 4 h内两者叶片失水量没
有显著差异 ,第 5小时时 ,突变体 36-1 叶片失水量
为 70.1%,明显高于野生型叶片失水量(图 5)。
38
 第 4期    李琳琳等:拟南芥干旱敏感突变体的筛选及其对干旱胁迫的响应
图 5 拟南芥野生型和突变体 36-1
离体叶片失水量的比较
Fig.5 Comparison of water loss from detached leaves of the
wild-type and 36-1 plants.Water loss is expressed
as the proportion of initial fresh weight
2.4.3 种子萌发情况 把拟南芥野生型和突变体
36-1的种子播种在含不同 PEG-6000浓度的培养基
上 ,观察种子萌发情况 。结果发现 PEG-6000 对拟
南芥种子萌发具有抑制作用 ,浓度越高抑制作用越
强(图 6)。在 5 ~ 15 g/ L 的 PEG-6000浓度范围内 ,
野生型种子萌发率明显高于突变体 36-1 。
图 6 不同 PEG-6000 浓度对拟南芥野生型
和突变体 36-1 种子萌发的影响
Fig.6 Ef fect of different PEG concentrations on seed
germination of the wild-type and 36-1 plants
2.4.4 根系生长情况 在正常生长条件下 ,拟南芥
野生型的根要比突变体 36-1的根稍长 ,但两者并无
显著的差异;在含不同浓度 PEG-6000的培养基上
生长时 ,根的生长都受到了抑制 ,但 36-1受抑制程
度更大(图 7)。
图 7 不同浓度 PEG-6000 对拟南芥根长的影响
Fig.7 Ef fect of dif ferent PEG concentrations on root
length of the wild-type and 36-1 plants
2.4.5 根冠比的变化 把拟南芥野生型和突变体
36-1的种子播种于蛭石上 ,在水分充足条件下生长
10 d后 ,测定野生型和 36-1幼苗的根冠比 ,然后停
止浇水 ,分别在停止浇水后 7 d和 14 d天测定根冠
比 。由表1结果可知 ,在正常生长条件下突变体 36-
1和野生型幼苗的根冠比没有明显的区别 ,随着停
止浇水时间延长 ,突变体 36-1和野生型幼苗的根冠
比都在增加 ,但野生型幼苗根冠比的增加明显大于
突变体 36-1。
表 1 拟南芥野生型和突变体 36-1 幼苗根冠比的比较
Table 1 Comparison of root/ shoot ratio between
wild-type and 36-1 plants.
幼苗类型
Arabidopsis
type
干旱处理时间/ d
T ime o f drought treatment
7 14
野生型 0.150 a 0.182 a 0.230a
36-1 0.147 a 0.161b 0.178b
  注:表中小写英文字母表示在 5%水平下差异显著。
3 讨论与结论
本研究采用质量浓度为 5 g/L 的 PEG-6000进
行渗透胁迫 ,利用弯根法筛选到拟南芥干旱敏感突
变体 36-1。在水分正常条件下 ,该突变体与野生型
幼苗形态 、根冠比 、叶片含水量等并无明显差异;干
旱条件下 ,突变体叶片相对含水量和根冠比明显低
于野生型 ,叶片先于野生型表现出萎蔫症状;野生型
和突变体离体叶片在最初 4 h内叶片失水量并无明
显差异 ,4 h后突变体离体叶片失水量开始显著高
于野生型。
干旱条件下 ,突变体 36-1叶片相对含水量比野
生型下降迅速 ,先于野生型表现出萎蔫症状 ,原因可
能是叶片上气孔关闭迟缓 ,蒸腾失水较多所致 ,另
外 ,根系吸水减少也是重要原因之一 ,因为干旱条件
下 ,突变体根冠比增加的确小于野生型(表 1)。还
有一种原因可能是突变体叶片表面角质化程度比野
生型的低 ,使得叶片蒸腾速率比野生型大 ,失水快;
离体叶片失水试验显示:野生型和突变体离体叶片
在最初 4 h内叶片失水量并无明显差异 ,4 h后突变
体离体叶片失水量开始显著高于野生型(图 6),这
符合离体叶片最初以气孔蒸腾失水为主 ,随着水分
丢失 ,气孔逐渐关闭 ,通过角质层间隙蒸腾失水成为
叶片失水的主要方式 。与突变体 36-1 相比 ,其他的
一些拟南芥干旱相关突变体对干旱有不同反应 ,如
刘浩等[ 13] 利用远红外成像技术筛选到拟南芥干旱
敏感突变体 doi1 ,干旱处理 15 d 后突变体植株死
亡 ,而野生型植株仍存活;突变体离体叶片失水速率
39
      河 北 农 业 大 学 学 报 第 34卷
比野生型高。宋玉伟[ 14] 筛选到拟南芥干旱敏感突
变体 drs1 ,在水分正常条件下 ,突变体植株比野生型
矮小 ,角果短小 ,生长呈弱势状态;对生长 35 d的植
株进行 14 d的干旱胁迫 ,恢复浇水之后 ,drs1死亡 ,
野生型植株能恢复生长。Temple 等[ 15] 筛选到拟南芥
干旱敏感突变体 athk1 ,水分正常条件下 , athk1的叶
片略圆 ,叶片肥大 ,叶柄短;干旱处理 14 d时 athk1
的叶片开始萎蔫 ,28 d时 ,植株死亡 ,野生型植株干
旱处理 28 d 时 ,叶片开始萎蔫 , 35 d 时植株死亡 。
进一步研究发现:干旱胁迫下 , athk1叶片失水速率
比野生型高 ,气孔导度和叶片水势下降比野生型明
显。陈智忠[ 16] 筛选到拟南芥抗旱突变体 abo1 ,正常
水分条件下 , abo1 植株矮小 ,干旱胁迫下 , abo1 叶
片发生萎蔫的时间比野生型晚 ,叶片失水速率比野
生型低 ,光学显微镜观测发现:abol 叶片上气孔数
量仅有野生型的一半 。由此可见拟南芥不同基因的
突变体对干旱胁迫的反应不同 ,甚至在水分正常条
件下 ,植株的形态 、结构 、生长势等都有明显的改变 。
通过生物信息学分析 ,发现 AT2g06025 基因
编码编码 GNA T 家族蛋白 ,具有 N-乙酰基转移酶
活性 ,与组蛋白的乙酰化密切相关 ,并且广泛参与细
胞的新陈代谢过程 。 AT2g06025基因在突变体中
仍有部分表达 ,可能是由于拟南芥中存在与它序列
相似的基因造成的。
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(编辑:梁 虹)
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