免费文献传递   相关文献

不同种类石韦的总多糖含量分析



全 文 :第 35 卷第 1 期
2016 年 2 月
中 国 野 生 植 物 资 源
Chinese Wild Plant Resources
Vol. 35 No. 1
Feb. 2016
收稿日期:2015 - 06 - 18
基金项目:山东中医药大学 2014 年 SRT项目资助(2014362)。
作者简介:高丽丽(1994—),女,山东中医药大学 2012 级中药学本科生。
* 通讯作者:高德民,男,副教授,硕士生导师,研究方向为中药资源与质量控制。E - mail:gdm607@ 126. com
doi:10. 3969 / j. issn. 1006 - 9690. 2016. 01. 010
不同种类石韦的总多糖含量分析
高丽丽,吴 雪,高德民*
(山东中医药大学 药学院,山东 济南 250355)
摘 要 对不同品种石韦的总多糖含量进行比较分析。取 9 种石韦经脱脂、除杂、超声水提、除蛋白、脱色、离心等
得到总多糖溶液,再采用苯酚 -硫酸法,以葡萄糖为对照品,在 490nm 处测定多糖的含量。结果显示,不同品种石
韦多糖含量不同,庐山石韦总多糖含量最高,有柄石韦和石韦含量次之,西南石韦含量最少,其他品种石韦含量不
高但相差不大。
关键词 石韦;苯酚 -硫酸法;总多糖含量
中图分类号:R284. 1 文献标识码:A 文章编号:1006 - 9690(2016)01 - 0035 - 02
Determination of Total Polysaccharide Content in
Different Species of Pyrrosia
Gao Lili,Wu Xue,Gao Demin*
(School of Pharmacy,Shandong University of TCM,Jinan 250355,China)
Abstract Object:To analysis the content of polysaccharide in diferent species of Pyrrosia. After Pyrro-
sia power was degreased,removed impurity,extracted,removing the protein and centrifuged,the total
polysaccharide was obtained. Then taking the glucose as the reference substance to determine the content
of polysaccharide in 490 nm by the phenol - sulfate method. The results showed that the content of total
polysaccharide in different species is significantly different. The polysaccharide content in Pyrrosia
sheareri is highest,followed by Pyrrosia petiolosa and Pyrrosia lingua,the Pyrrosia gralla is lowest and
the others are similar with each other.
Key words Pyrrosia;phenol - sulfate method;polysaccharide content
石韦是水龙骨科(Polypodiaceae)石韦属(Pyrro-
sia)植物庐山石韦[Pyrrosia sheareri (Bak.)Ching]、
石韦[Pyrrosia lingua (Thunb.)Farwell]和有柄石韦
[Pyrrosia petiolosa(Christ)Ching]的干燥叶,始载于
《神农本草经》,具有利尿通淋,清肺止咳,凉血止血
的功效,用于治疗热淋,血淋,石淋,小便不通,淋沥
涩痛等[1]。其主要活性成分为酚酸类,黄酮类以及
多糖等。目前,人们对前两种成分研究较为广泛而
关于多糖的研究文献较少,且多糖具有多方面的生
物活性,如抗肿瘤活性、抗病毒作用、抗炎作用、降血
糖作用,特别是对机体免疫功能的调节作用尤为突
出[2-3]。为此,本实验对不同产地及不同部位中石韦
的多糖含量进行初步测定与比较,以期为中药石韦
的合理开发利用提供依据。
1 仪器、试剂与材料
1. 1 仪器
上海菁华 754PC紫外 -可见光分光光度计、上
海菁海 FA2004N电子天平、昆山 KQ - 250E 型医用
超声波清洗器、菏泽鑫源 SHB - III 循环水多用真空
泵、上海树立 FXB101 - 1 型电热鼓风干燥箱、上海
苏阳移液器、上海顶帅 DS - T250 型高速多功能粉
碎机、济南启科 HH - S 数显恒温水浴锅。
1. 2 试剂与材料
葡萄糖标准品、浓硫酸、苯酚、乙醇溶液、H2O2、
浓氨水、石油醚、蒸馏水。石韦样品均经山东中医药
大学高德民副教授鉴定。
—53—
中 国 野 生 植 物 资 源 第 35 卷
2 方 法
2. 1 总多糖溶液的制备
精密称取石韦粉末 10 g,置锥形瓶中用石油醚
浸泡过夜。将药品粉末以料液比 1∶ 20 加入 80%乙
醇,在 50℃下超声 40 min,过滤后晾干。再加入蒸
馏水 40 mL,40℃下超声提取 20 min[4],放置至室
温,过滤,收集滤液。加 15% 的 H2O2,并用氨水调
pH至 8. 0,水浴脱色 1 h[5-6]。用 Sevage 法(氯仿 -
正丁醇 4∶ 1)除蛋白[7 - 8],得到供试品溶液备用。
2. 2 总多糖含量的测定
依据苯酚硫酸法[9],利用紫外可见分光光度计
在 490 nm处的吸光度与浓度的关系制备标准曲线,
得回归方程为 A = 95. 017C + 0. 030 2,R2 =
0. 998 8。依照上述方法测定样品中总多糖溶液的
吸光度并计算其含量。
3 结果与分析
结果显示,不同品种石韦多糖的含量存在较大
的差异 (表 1)。其中以庐山石韦中的多糖含量最
高(3. 526%),是绒毛石韦和毡毛石韦多糖含量的
近 2 倍,有柄石韦及石韦中的多糖含量次之,中越石
韦、华北石韦和纸质石韦多糖含量相差不大,约为
2%左右,西南石韦中多糖含量最低(1. 382%)。
表 1 不同品种石韦的总多糖含量
样品 产地 经纬度 采集时间 总多糖含量(%)
庐山石韦 Pyrrosia sheareri 四川 — 2014. 06 3. 526
有柄石韦 P. petiolosa 山东 N35°3959″ E119°0543″ 2014. 05 2. 839
石韦 P. lingua 福建 N25°1315″ E116°4959″ 2014. 07 2. 812
中越石韦 P. tonkinensis 广西 N24°3238″ E108°4047″ 2014. 07 2. 267
华北石韦 P. davidii 山东 N36°2912″ E117°1054″ 2013. 10 2. 002
毡毛石韦 P. drakeana 安徽 — 2013. 08 1. 562
绒毛石韦 P. subfurfuracea 云南 — 2014. 07 1. 737
西南石韦 P. gralla 云南 N25°1456″ E102°4424″ 2014. 06 1. 382
纸质石韦 P. porosa 贵州 — 2014. 09 1. 969
注:西南石韦现已被中国植物志合并为华北石韦,但根据二者形态有所差别,本次实验仍将二者分开进行含量测定。
4 讨 论
石韦中的多糖具有增强免疫力、降血糖等多方
面的生物功能。本实验结果表明,除了药典记载的
庐山石韦、有柄石韦及石韦外,民间习用的毡毛石韦
和华北石韦等不同品种的石韦中也含有一定的多
糖,这为民间用药提供了理论基础。同时,通过对这
9 种石韦多糖含量的测定,说明石韦属中的不同品
种石韦多糖含量存在一定的差异,因此,建议对石韦
属中的多种石韦进行更深层次的研究,以最大限度
地利用石韦这一常用中药资源。
参考文献:
[1] 国家药典委员会.中国药典:一 部[S]. 北京:中国医药科技出
版社,2010:83 - 84.
[2] 王兵,黄传贵. 石韦多糖降血糖作用的实验研究[J]. 亚太传
统医药,2008,4(8):33 - 34.
[3] 方积年,丁侃. 多糖的主要生物活性及分离方法[J]. 中国天
然药物,2007,5(5):338 - 340.
[4] 程丹丹,高德民.有柄石韦中多糖提取工艺的优化[J]. 中国
野生植物资源,2014,33(3):16 - 17.
[5] 陆颖,任爱农. 用过氧化氢对野菊花碱溶性多糖进行脱色的工
艺研究[J]. 中南药学,2012,10(3):185 - 188.
[6] 张丽萍,盛义保,马惠玲,等. 苹果多糖除杂脱色工艺的筛选
[J]. 西北林学院学报,2007,22(1):141 - 144.
[7] 万琴,萧伟,王振中,等. 女贞子多糖除蛋白工艺的研究[J].
中草药,2010,41(3):408 - 410.
[8] 王婷婷,付超梅,李钰婷,等.麦冬粗多糖除蛋白工艺研究[J].
中国新药杂志,2008,17(9):769 - 771.
[9] 杨勇杰,姜瑞芝,陈英红,等. 苯酚 -硫酸法测定杂多糖含量的
研究[J]. 中成药,2005(6):706 - 708.
—63—