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关玉竹与湘玉竹多糖含量比较研究



全 文 :人参研究 GINSENG RESEARCH 2014 年第 4 期
关玉竹与湘玉竹多糖含量比较研究
田文志 1 李赫男 2 孙 涛 3
(1.吉林省白石山林业局·吉林 蛟河·132503;2.吉林农业科技学院·吉林 吉林·132101;
3.吉林人参研究院·吉林 通化·134001)
摘 要:本试验以不同地区不同品系玉竹为研究材料,采用水提醇沉法提取玉竹多糖 ,运用可见-紫外分
光光度仪进行多糖含量测定,并通过精密度、重复性、稳定性 、回收率试验对此方法进行验证。 从
而测出圆叶玉竹多糖含量最高为 8.1%, 比长叶玉竹多糖含量高 10.4%, 比湘玉竹多糖含量高
14.7%,比小玉竹多糖含量高 23.8%。
关键词:关玉竹;湘玉竹;多糖;含量
Studies on the Comparation For Polysaccharide between Guan
polygonatum and Hunan polygonatum
TIAN Wenzhi1 LI Henan2 SUN Tao3
(1.Baishishan Forestry Bureau in JiLin province JiaoHe 132503;2.JiLin Agricultural Science and Technology College . JiLin 132101;
3.Jilin Ginseng Institute,Jilin Tonghua 134001)
Abstract:The polysaccharide in the different strains of different areas polygonatum was extracted by water
extraction and alcohol precipitation.The content was determined by UV, theprecsion test repetitive
experiment,as well as stability experiment and recovery experiment was used to detect
methodological study.The result showed that polysaccharide content of the circle leaf polygonatum
was more 10.4% than the long leaf polygonatum polysaccharide,more 14.7% than that of Hunan
polygonatum polysaccharide,more 23.8 % than that of small polygonatum
Key words: Guan polygonatum;Hunan polygonatum;polysaccharides;content
关玉竹(Polygonatum odoratum (Mill.) Druce),又名
玉术、尾参、山玉竹、铃档菜、西竹、玉参等,主要分布
东北。 湘玉竹又称肥玉竹、制玉竹、藏蕤,主要产于湖
南。 为百合科多年生草本植物玉竹的根茎入药。 有养
阴润肺,益胃生津之效。是多年生草本植物,既是食用
的佳蔬,又是良好的药材 ,常被中医用做补阴药,可食
用其幼苗和根茎,营养丰富 [1],玉竹有祛寒去热、治疗
跌伤、美容、降血糖等功效人们将其奉为上品,大量研
究发现,其能显著提高巨噬细胞的吞噬指数和吞噬百
分数,能极大缓解动脉粥样斑块的形成,还能扩张冠
脉和外周血管,延长耐缺氧的时间、强心、抗氧化、抗
衰老、降血糖、降血脂等作用。
目前国内对关玉竹的化学成分研究较多,但对湘
玉竹研究较少。本试验是以不同产地不同品系的 3年
生玉竹多糖进行含量分析,以期能够为临床合理使用
玉竹提供一些理论依据。
1材料与方法
1.1试验材料与仪器
关玉竹:长叶玉竹、圆叶玉竹、小玉竹。
湘玉竹由吉林农业科技学院奚广生教授鉴定。
752-紫外可见分光光度计(上海奥普勒仪器有限
公司);电子天平;旋转蒸发仪(上海爱郎仪器有限公司
N-1100);真空干燥箱;离心机(TG-16K)等。
1.2 试验方法
1.2.1 玉竹前处理
将新鲜的 3 年生关玉竹与湘玉竹洗净, 阴干,粉
碎,过 40目筛,备用。
1.2.2 玉竹多糖的提取
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人参研究 GINSENG RESEARCH 2014 年第 4 期
选取长叶玉竹、圆叶玉竹、湘玉竹、小玉竹粉末 ,
分 别 称 取 20.09g、20.04g、20.08g、20.10g 分 别 加 入
400mL 蒸馏水置于 1000mL 圆底烧瓶中,将圆底烧瓶
放入 85℃的恒温水浴中,边搅拌,边提取,提取时间为
120min。提取液用 3层纱布过滤,取滤液,残渣再加入
20倍蒸馏水,重复上述过程,过滤第 2 次所得提取液,
将两次的滤液合并。 缓慢加入无水乙醇,使乙醇的体
积分数分别达到 70%、75%、80%、85%、90%、95%,室
温静置 24h,离心倾去上清液,将所得沉淀放入真空
干燥箱中于 50℃干燥 5h, 准确称量 1、2、3、4、5、6、7
中多糖质量。
1.2.3 玉竹多糖样品测定液的制备
控制温度,将上述所得的关玉竹与湘玉竹的滤液
分别减压浓缩到约原来体积的 1/4, 取蒸馏后的剩余
液。 冷却后, 分别加入无水乙醇, 使乙醇浓度达到
85%, 静置 24h, 用台式离心机以 3000rp/min 离心
10min后去除上清液,加入 85%乙醇 5ml 进行洗涤,重
复操作洗涤 3次。沉淀用适量蒸馏水溶解并分别定容
至 100mL 容量瓶中, 即得关玉竹与湘玉竹的多糖样
品测定液,放入冰箱备用。利用苯酚-硫酸分光光度法
测定玉竹多糖含量[2]。
1.2.4 果糖标准曲线的绘制
精密称取果糖标准品 0.1056g 置于 90℃烘箱中
干燥 30min,溶解定容至 1000mL 容量瓶中,配制成果
糖 标 准 溶 液 。 然 后 精 密 吸 取 该 标 准 溶 液
0.0,0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0mL, 依次置于 7 支 10mL
比色管中,分别加入 3mL 浓盐酸,最后用二次蒸馏水
定容至 10mL,沸水浴 10min,冷却后于 286nm 处测定
吸光度,结果见表 3,将吸光度 A 对浓度 C 进行线性
回归,得到回归方程。
1.2.5 玉竹多糖含量测定方法
分别精密量取玉竹多糖样品液 1.00mL 三份,分
别置 10ml 比色管中, 分别加入 3ml 浓盐酸, 定容至
10ml,沸水浴 10min,冷却 15min,于 286nm 处测定吸
光度,然后用标准曲线法计算取平均值。
2 方法学研究
参照彭秧锡等笨硫酸分光光度法测定玉竹中多
糖含量[2]方法进行。
3 结果与分析
3.1 玉竹多糖醇沉试验
由表 1 可知,随着乙醇浓度的增加,玉竹多糖质
量逐渐增加,当乙醇浓度为 85%时,沉淀的多糖最多,
达到 0.529g,当继续增加乙醇浓度时,多糖质量反而
下降。 原因可能是,升高乙醇浓度,其极性发生改变,
从而影响玉竹多糖在其中的溶解度。 因此,采用 85%
的乙醇来沉淀玉竹水提物中的多糖。
表 1 乙醇浓度与多糖沉淀质量对应表
3.2 果糖最大吸收波长的测定
如图 1所示:果糖的最大吸收波长是 286nm。
图 1 果糖紫外吸收光谱
3.3 果糖标准曲线
表 2 果糖的吸光值
得标准曲线方程为 :A=0.0388x +0.0083,R2 =0.9990
图 2 果糖标准曲线
3.4 精密度试验
表 3 精密度实验测定结果
结果表明: 经 5 次测定得平均值 A=0.407,RSD=
0.87% n=5 精密度良好。
田文志等:关玉竹与湘玉竹多糖含量比较研究
乙醇浓度(%) 65 70 75 80 85 90 95
多糖质量(g) 0.324 0.351 0.419 0.487 0.529 0.465 0.450
标准品浓度(ug/ml) 5.12 10.55 15.83 21.11 26.40 31.68
吸光度(A) 0.208 0.409 0.629 0.821 1.053 1.224
编号 1 2 3 4 5 平均值 RSD(n=5)
吸光度 0.411 0.409 0.405 0.408 0.403 0.407 0.87%
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人参研究 GINSENG RESEARCH 2014 年第 4 期
3.5 重复性试验
表 4 重复性实验测定结果
结果表明:重复性良好。
3.6 稳定性试验
表 5 稳定性实验测定结果
结果表明:稳定性良好。
3.7 回收率试验
由公式 回收率=(测得量/加入量)x100%的计算
结果见表 6 。
表 6 回收率试验测定结果
结果表明:加标回收率在 98.12%~101.18%之间,
平均加标回收率达 99.34%,精密度 RSD=1.62%,n=5。
3.8 多糖含量测定结果
表 7 玉竹多糖含量
由此可见 3 年生的圆叶玉竹多糖含量最高为
8.1%,小玉竹的含量最少为 3.3%
4小结
本文采用传统的水提醇沉法对关玉竹和湘玉竹进
行提取,并用可见-紫外分光光度仪对其吸光度进行测
定比较。其结果为,长叶玉竹多糖中果糖含量为 53.8%,
圆叶玉竹多糖中果糖含量为 59.4%,小玉竹多糖中果糖
含量为 48%,湘玉竹多糖中果糖含量为 51.8%。 得出结
论:圆叶玉竹多糖含量最高为 8.1%,比长叶玉竹多糖含
量多 10.4%比湘玉竹多糖含量多 14.7%比小玉竹多糖
含量多 23.8%,小玉竹多糖含量最低。
参 考 文 献
[1] 江苏新医学院.中药大辞典[M].上海:上海人民
出版社,1977:1156.
[2] 彭秧锡,彭月明.苯酚-硫酸分光光度法测定玉
竹中多糖含量[J].化学分析计量,2006,15(5):29~31.
[3] 孙兴力,陈德球,王文渊.不同生长期玉竹中多
糖含量变化的比较研究 [J]. 现代中药研究与实践 ,
2010,(4):9~11.
玉竹品系 编号 1 2 3 4 RSD(n=5)
长叶
玉竹
吸光
度 A 0.196 0.188 0.179 0.194 4.70%
果糖
含量% 55.6 52.7 49.6 54.4 4.70%
5
0.203
56.7
平均值
0.192
53.8
玉竹品系 时间/min 15 30 60 90 120 平均值 RSD(n=5)
长叶玉竹 吸光度 A 0.186 0.193 0.196 0.181 0.201 0.191 4.16%
圆叶玉竹 吸光度 A 0.207 0.215 0.214 0.212 0.214 0.213 4.02%
小玉竹 吸光度 A 0.171 0.170 0.168 0.177 0.174 0.172 3.56%
湘玉竹 吸光度 A 0.194 0.179 0.185 0.181 0.179 0.184 3.43%
组号 吸光度 样品含量
加入量 总量 测得量 回收率% 平均值 RSD%
1 0.316 5.880 2.112 7.893 7.9865 101.18
2 0.405 5.870 4.225 10.290 10.233 99.45
5 0.627 5.873 10.58 16.560 16.270 98.25
3 0.471 5.872 6.338 12.209 11.980 98.12 99.34 1.62
4 0.546 5.871 8.449 14.328 14.289 99.73
品 系 平均含量(%)
长叶玉竹 7.1
圆叶玉竹 8.1
小玉竹 3.3
湘玉竹 5.2
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