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欧洲越桔花青素提取物对小鼠耐常压缺氧能力的影响



全 文 :欧洲越桔花青素提取物对小鼠耐常压缺氧能力的影响
宝 丽 1 ,姚新生 1, 2 ,吕艳青 2 ,李满妹 2 , ChiaChewSern3 , TsiDaneil3 , 永井元 3 , 栗原博 2
(1.沈阳药科大学中药学院 , 辽宁 沈阳 110016;2.暨南大学药学院 ,广东 广州 510632;
3.食益补太平洋有限公司白兰氏健康科学中心 ,新加坡 048423)
收稿日期:2007-05-28,修回日期:2007-09-28
基金资助:国家科技支撑计划资助项目(No2006BAI06A20-09)
作者简介:宝 丽(1981-),女 ,博士生 ,研究方向:中药及天然药物
的药理活性 , Tel:020-85227791, E-mail:libao0133@ 163.
com;
姚新生(1934-),男 , 中国工程院院士 , 博士 ,教授 ,博士
生导师 ,研究方向:创新药物与中药现代化 , 通讯作者 ,
Tel:020-85225849, E-mail:yaoxinsheng@vip.tom.com;
栗原博(1954-),男 ,博士 ,教授 ,博士生导师 ,研究方向:
应激及神经 -免疫药理学 ,通讯作者 , Tel:020-85221352,
E-mail:Hiroshi Kurihara@ 163.com
中国图书分类号:R-332;R 282.71;R 329.24;R 340.5;
R845.220.23;R845.220.53;R977.9
文献标识码:A 文章编号:1001-1978(2007)11-1458-05
摘要:目的 研究欧洲越桔花青素提取物(MyrtillusEX)对
常压缺氧负荷小鼠抗缺氧能力的影响。方法 采用 HPLC/
HPLC-MS分析 MyrtillusEX中的不同花青素类成分。通过
常压缺氧负荷小鼠模型观察 MyrtillusEX对小鼠存活时间和
耗氧量的影响 , 利用 ORAC法测定血浆 、大脑皮质及肝组织
匀浆中的抗氧化能力指数 , Griess化学法测定 NO含量 , 以及
TBARS法测定血浆 、大脑皮质及肝组织匀浆中的 MDA含
量。结果 MyrtilusEX可以明显提高常压缺氧负荷小鼠的
耐缺氧能力 , 有效降低血浆 、大脑皮质及肝组织匀浆中的
MDA含量 , 并调节血浆 、大脑皮质及肝组织匀浆中的 NO含
量。结论 MyrtilusEX对常压缺氧负荷小鼠显示一定的保
护作用 , 其机制可能与其自由基清除能力和抑制脂质过氧化
作用有关。
关键词:欧洲越桔花青素提取物;HPLC/HPLC-MS;常压缺
氧;抗氧化能力指数;一氧化氮
  欧洲越桔 (VacciniummyrtilusL)属杜鹃花科
Erioaoeae越桔亚科 Vaccinioideae植物 ,英文名为 Bil-
bery,富含花青素 (anthocyanidin)类化合物。花青
素是一类广泛存在于植物中的水溶性天然可食用色
素 ,其基本结构单元为 2-苯基苯并吡喃型阳离子 。
目前已知的花青素有二十余种 , 其中天竺葵色素
(pelargonidin)、矢本菊花色素(cyanidin)、飞燕草花
色素(delphindin)、芍药色素(peonidin)、牵牛花色素
(petunidin)及锦葵花色素(malvidin)等是植物中常
见的花青素。花青素受植物细胞内 pH值的影响呈
现不同的颜色 ,又因其色泽艳丽 ,可用作染料。同
时 ,花青素也是一类具有较强抗氧化活性的天然产
物 , Chen等[ 1, 2]研究发现花青素可以抑制低密度脂
蛋白氧化 ,改善动脉硬化和降低心血管疾病的发病
率;此外 , 迄今为止的研究证明花青素还具有抗
癌[ 3] 、护肝 [ 4] 、改善视力疲劳 [ 5] 、缓解糖尿病及高血
压性视网膜病变等方面的效果 [ 6] 。但尚未有人报
道有关花青素的耐缺氧作用 。近年来 ,随着社会环
境及生活方式的改变 ,导致可引起机体组织缺氧的
心脑及外周血管疾病逐年增多 ,并引起人们的广泛
关注 。小鼠耐常压缺氧实验是一种以测定小鼠缺氧
存活时间和耗氧量为观测指标的实验方法 ,常用于
评价抗缺氧作用。本文拟通过小鼠耐常压缺氧实
验 ,探讨 MyrtilusEX的抗缺氧作用。此外 ,常压缺
氧小鼠也是一种急性应激负荷模型 ,本文在测定缺
氧应激负荷小鼠血浆 、大脑皮质及肝组织抗氧化能
力指数(oxygenradicalabsorbancecapacity, ORAC)、
一氧化氮 (NO)释放能力及丙二醛 (malondialde-
hyde, MDA)水平变化的同时 ,也探讨了 Myrtilus
EX对常压缺氧小鼠的体内抗氧化作用与抗缺氧间
的关系。
1 材料与方法
1.1 动物 清洁级昆明种小鼠 , ♂,体重 18 ~ 22 g,
购自广东省医学实验动物中心 , 许可证号 SCXK
(粤)2003-0002。饲养温度(23±2)℃,照明时间 12
h· d-1(7:00 ~ 19:00)。饲养 1wk后进行实验。
1.2 材料 欧洲越桔花青素提取物(Code9042202
VACC.MyrtilusDRYALC.EX.BatchNo.28770/
M1;MyrtilusEX)购自 IndenaS.p.A(Milan, Italy);
尼莫地平(Nimodipine, Nim批号:060201)购自广东
华南药业有限公司;花青素标准对照品 malvidin-3-
O-gal、malvidin-3-O-glu、cyaniding-3-O-gal、cyaniding-
3-O-glu由 CerebosPacificLtd, (Singapore)提供。甲
醇(色谱纯)为江苏汉邦科技有限公司产品 , 乙腈
(色谱纯)为 FisherScientificCo.Ltd产品。丙二醛
(MDA)测定试剂盒及蛋白定量试剂盒购自南京建
成生物工程研究所(批号为:20041111 , 20041110)。
·1458· 中国药理学通报 ChinesePharmacologicalBuletin 2007 Nov;23(11):1458 ~ 62
6-hydroxy-2, 5, 7, 8-tetramethylchroman-2-carboxylic
acid(Trolox,为维生素 E的水溶性衍生物)、2 , 2′-
azobis(2-amidinopropane)dihydrochloride(AAPH)、
荧光素钠(sodiumfluorescein)均为日本和光纯药株
式会社产品(WakoPureChemicalIndustries, Ltd, O-
saka, Japan)。钠石灰购自广州化学试剂厂 , 甲酸 、
磷酸二氢钠 、磷酸二氢钾及磷酸氢二钾均为国产分
析纯 (天津市大茂化学制剂厂)。
1.3 实验仪器  DIONEX高效液相色谱仪 , DI-
ONEXp680 HPLCPUMP, DIONEXPDA-100Photodi-
odeArayDetector, DIONEXASI-100AutomatedSam-
pleInjector, DIONEXThermostatedColumnCompart-
mentTcc-100, BrukerEsquire2000型质谱仪(Bruk-
er, Switzerland), angilent1100HPLC。 MK3型酶标仪
(Labsystem, Helsink, Finland), GENios系列荧光酶
标仪及 Magelan工作站 (TecanInc, Maennedorf,
Switzerland), ULTRA-TURRAXT8型组织匀浆机
(IKALabortechnik, Stanfen, Germany)及 3-18K型台
式高速冷冻离心机(Sartorius, Götingen, Germany),
BS210S电子分析天平 (Sartorius, Götingen, Germa-
ny),及 WH-861型漩涡混合器(太仓市科教器材
厂)用于本实验。
1.4 花青素分析方法 精密称取花青素标准品
malvidin-3-O-gal、 malvidin-3-O-glu、 cyaniding-3-O-
gal、cyaniding-3-O-glu及 MyrtilusEX各 1.0 mg后 ,
用 10 ∶90甲酸 -水溶液配制 0.50g· L-1的样品溶
液 ,经 0.45 μm微孔滤膜过滤后用于花青素分析 。
花青素分析使用 WatersRP-18 column(4.6 mm×
250mm)色谱柱 ,流动相 A为甲酸 -水(10 ∶90),
流动相 B为甲醇 -乙腈 -水 -甲酸(22.5 ∶22.5
∶40 ∶10),流速为 1.0ml· min-1 ,梯度洗脱设定为
0 ~ 45 min,流动相 A为 91%, 45 ~ 90 min流动相 A
由 91%变为 65%。柱温设定为 30℃,检测波长为
535nm。质谱扫描方式为正 、负离子扫描 ,电喷雾电
离源 ,扫描范围是 150 ~ 1500amu。
1.5 MyrtilusEX对常压缺氧小鼠的影响 在小
鼠常压耐缺氧实验中 ,参照徐济良等 [ 7] 的方法 ,将
小鼠在室温 (23±2)℃条件下随机分为正常对照
组 、常压耐缺氧模型组 、MyrtilusEX200、100、50 mg
· kg-1剂量组及 2 mg·kg-1尼莫地平组 ,共 6组 ,每
组 10只 。各给药组每天 1次 、每次 0.1 ml· (10
g)-1灌胃给药 ,连续 5d,正常对照组小鼠灌胃给予
等容量的水 。末次给药 30 min后 ,将小鼠放入经过
标定的容积为(5.5 ×11)cm的 125 ml广口瓶内 ,
以橡皮塞密封 。瓶内盛有 10 g钠石灰 ,另备内盛
100 ml水的(2.8×23)cm量桶 ,将与一段胶管相连
的玻璃管放入量桶中 ,胶管的另一端与通入缺氧瓶
的玻璃管相连 。随时间的推移 ,当瓶内小鼠耗氧时 ,
装置的玻璃管内液面因瓶内负压而上升 ,量桶内液
面下降的毫升数即为小鼠的耗氧量。从密闭开始至
呼吸停止 ,记录小鼠存活时间 ,同时观察 10、15、20、
30 min小鼠的耗氧量 。
小鼠缺氧死亡后迅速由心脏取血 ,并置于肝素
处理过的离心管中以 5 000 r· min-1离心 5 min后
回收血浆 , 用于测定 ORAC、NO和 MDA含量。并
参照文献方法断头 [ 8] ,于冰盘上迅速取小鼠大脑皮
质及肝组织以生理盐水制成 5%匀浆 , 12 000 r·
min-1离心 15 min后取上清液 ,用于测定 ORAC、NO
及 MDA含量。
1.6 抗氧化能力指数(ORAC)的测定 本实验参
照 Davalos等[ 9]方法并加以改进 。其原理为荧光素
钠在 485 nm光激发下 ,发射 527 nm荧光 , 可以被
AAPH释放的过氧自由基氧化而使荧光特性消失。
当抗氧化剂存在时 ,可与荧光素钠竞争氧化剂 ,减缓
其荧光消退的速度。根据这一特性 ,可用来测定样
品氧自由基清除活性。实验结果表达为荧光衰退曲
线下积分面积 ,扣除无抗氧化剂的空白曲线下面积 ,
得出抗氧化剂的保护面积。不同抗氧化剂的保护面
积统一换算成 1 μmol· L-1 Trolox的保护面积进行
比较 。具体测定方法是将 96孔板每个微孔中加入
待测样品溶液 20 μl,再加入磷酸钾缓冲液 20 μl和
AAPH140μl(终浓度 12.8 mmol· L-1),最后添加
荧光素钠 20μl至终浓度为 63 nmol· L-1 ,立即启
动反应并迅速将酶标板置于预温 37℃的荧光酶标
仪中开始测定 。采用动力学方式 ,每 2 min测定一
个点 ,至荧光强度衰减为零为止。
1.7 Griess化学法测定 NO的含量 取 40μl的样
品 ,加入 160 μl的 Griess试剂(0.1%萘乙二胺溶液
与 1%磺胺(5%)磷酸溶液 ,使用前 12 h内等体积
混合)后静置 20 min, 550 nm波长测定溶液光密度
值(OD值),根据 NO标准曲线计算 NO含量(μmol
·L-1)。
1.8 TBARS法测定 MDA含量 小鼠血浆和大脑
皮质 、肝组织匀浆的 5%生理盐水匀浆液在 4℃条件
下以 3 000r· min-1离心 10 min, 取上清液稀释成
2%后以考马斯亮蓝蛋白试剂盒测定蛋白含量。小
鼠血浆和大脑 、肝组织匀浆中 MDA含量使用 MDA
检测试剂盒测定。测定原理利用 MDA可与硫代巴
比妥酸(TBA)缩合 ,形成在 532 nm处有最大吸收峰
性质的红色产物 ,通过比色法进行测定并计算 MDA
·1459·中国药理学通报 ChinesePharmacologicalBuletin 2007 Nov;23(11)
含量。
1.9 统计学处理 实验数据以 x±s表示 ,采用
Student′st检验进行统计学处理 。
2 结果
2.1 MyrtilusEX的分析结果 精密吸取 20 μl对
照品溶液 ,按 1.4所述色谱条件测定 ,以色谱峰面积
为纵坐标 ,对照品质量浓度为横坐标作线性回归 ,得
到 cyaniding-3-O-glu的标准曲线 Y =0.5659X+
0.0836(r=99.96%)。同时取 20 μl样品溶液进
样 ,结果表明在 MyrtilusEX中检测到 15个主要峰
(Fig1),与文献[ 10]报道的完全一致 , MyrtilusEX中
花青素成分定性定量分析的结果见 Tab1,按照 cya-
niding-3-O-glu的标准曲线计算各种花青素的相对
含量。
Fig1 HPLCchromatographofMyrtilusEXat535nm
2.2 MyrtilusEX对常压缺氧负荷小鼠存活时间
和耗氧量的影响  如 Tab2所示 ,与常压缺氧负荷
小鼠相比 , 给予 200, 100及 50 mg· kg-1 Myrtilus
EX和尼莫地平 ,均可以明显延长常压缺氧负荷小鼠
的存活时间 ,并降低整体耗氧量及提高小鼠的耐缺
氧能力 。欧洲越桔花青素提取物的耐常压缺氧作用
呈现一定的剂量依赖性关系。
2.3 MyrtilusEX对常压缺氧负荷小鼠血浆 、大脑
皮质及肝组织匀浆 ORAC活性的影响 如 Tab3
所示 ,与正常对照组小鼠相比 ,常压缺氧负荷小鼠血
浆 、大脑皮质及肝组织中 ORAC值均有一定程度的
减少。给予 Myrtilus/EX.可以改善常压缺氧负荷引
起的 ORAC值的下降 , 并存在一定的剂量依赖关
系。与常压缺氧负荷小鼠组织中 ORAC值相比 ,尼
莫地平显示一定的改善作用 ,其中对血浆 ORAC值
的影响明显(P<0.05)。
2.4 MyrtilusEX对常压缺氧负荷小鼠血浆 、大脑
皮质及肝组织匀浆 NO水平的影响  如 Tab4所
示 ,与正常组相比 ,常压缺氧负荷小鼠肝组织 NO水
平有升高 ,给予 MyrtilusEX后明显逆转常压缺氧所
致血浆 NO水平的降低。对大脑皮质和血浆 NO水
平影响不明显 。
2.5 MyrtilusEX对常压缺氧负荷小鼠血浆 、大脑
皮质及肝组织匀浆 MDA含量的影响 MyrtilusEX
可明显抑制常压缺氧小鼠血浆 、大脑皮质及肝组织
中 MDA水平的升高 ,并存在一定的量效关系(Tab
5)。
3 讨论
  脑重量虽然只占人体体重的 2%,而脑血流及
耗氧量却分别为人心输出量的 15%及总耗氧量的
20%以上 。因此脑组织对缺氧十分敏感 ,且耐受性
Tab1 Qualitativeandquantitativeanalysis
of15anthocyaninsinMyrtilusEX
Peak
No
MSdata
+MS -MS Anthocyanins
Anthocyanincontent
Percentageintermsof
Cyanidin-3-O-Glu/%
1 303, 465 300, 463 Delphinidin-3-O-Gal 11.69
2 303, 465 301, 463 Delphinidin-3-O-Glu 12.90
3 287, 449 285, 447 Cyanidin-3-O-Gal* 9.52
4 303, 435 300, 433 Delphinidin-3-O-Ara 11.69
5 287, 449 285, 447 Cyanidin-3-O-Glu* 9.95
6 287, 419 285, 417 Cyanidin-3-O-Ara 7.66
7 317, 479 315, 477 Petunidin-3-O-Gal 4.26
8 317, 479 315, 477 Petunidin-3-O-Glu 9.16
9 301, 463 299, 461 Peonidin-3-O-Gal 1.02
10 317, 449 315, 447 Petunidin-3-O-Ara 3.19
11 301, 463 299, 461 Peonidin-3-O-Glu 3.78
12 331, 493 329, 491 Malvidin-3-O-Gal* 3.14
13 - - Peonidin-3-O-Ara 0.40
14 331, 493 329, 491 Malvidin-3-O-Glu* 9.54
15 331, 463 329, 461 Malvidin-3-O-Ara 2.07
  *havebeencomparedwithstandardsamples
Tab2 EffectsofMyrtilusEXonthesurvivaltimeandoxygenconsumptioninmicesubjectedtonormobarichypoxia( x±s, n=10)
Treatedwith
/mg· kg-1
Survivaltime
/min
Accumulativemoxygenconsumption/ml· mice-1
10min 15min 20min 30min
Normalmice - - - - -
Acutehypoxiacontrol 30.70±0.95 11.50±0.50 18.50±0.54 27.70±0.42 35.67±0.52
Nimodipine(2mg· kg-1) 38.75±1.22## 7.50±0.40## 15.00±0.68## 21.00±0.75## 30.20±3.19
MyrtilusEX(200mg· kg-1) 40.66±1.55** 4.10±0.79** 8.10±1.28** 12.30±1.51** 18.50±1.73**
MyrtilusEX(100mg· kg-1) 35.95±1.08** 10.10±0.75** 16.40±0.75* 21.50±0.93** 28.44±0.79**
MyrtilusEX(50mg· kg-1) 33.41±0.38* 10.70±0.50** 16.80±0.66 23.30±0.77** 30.40±0.93**
  ##P<0.01vsnormalcontrol;*P<0.05, **P<0.01vsacutenormobarichypoxiacontrol
·1460· 中国药理学通报 ChinesePharmacologicalBuletin 2007 Nov;23(11)
Tab3 EffectsofMyrtilusEXonORACinplasma,
braincortexandlivertisue( x±s, n=10)
Treatedwith/mg· kg-1 ORAC(Troloxequivalents)Plasma Braincortex Liver
Normalmice 2.33±0.27 4.29±0.33 4.46±0.31
Acutehypoxiacontrol 1.79±0.28 3.49±0.17 4.25±0.55
Nimodiping(2mg· kg-1) 4.43±0.77* 6.16±0.38 5.39±0.52
MyrtilusEX(200mg· kg-1) 4.99±0.45* 6.50±0.41 6.55±0.28
MyrtilusEX(100mg· kg-1) 3.75±0.61* 6.42±0.44 6.22±0.43
MyrtilusEX(50mg· kg-1) 2.11±0.23 6.14±0.46 5.13±0.39
  *P<0.05vsacutenormobarichypoxiacontrol
Tab4 EffectsofMyrtilusEXonNOlevelsinplasma,
braincortexandlivertissue( x±s, n=10)
Treatedwith/mg· kg-1 NO/mmol· L
-1
Plasma Braincortex Liver
Normalmice 14.65±2.02 1.89±0.21 1.47±0.32
Acutehypoxiacontrol 16.24±0.33 1.97±0.34 2.65±0.22#
Nimodipine(2mg· kg-1) 15.68±0.78 1.86±0.32 2.06±0.28
MyrtilusEX(200mg·kg-1) 15.01±1.05 1.83±0.15 1.36±0.11*
MyrtilusEX(100mg·kg-1) 15.72±1.07 1.85±0.13 1.54±0.20*
MyrtilusEX(50mg· kg-1)16.19±1.00 1.95±0.40 1.71±0.15
  #P<0.05vsnormalcontrol;*P<0.05vsacutenormobarichypoxia
control
Tab5 EffectsofMyrtilusEXonMDAlevelsinplasma,
braincortexandlivertisue( x±s, n=10)
Treatedwith/
mg· kg-1
MDA/μmol· g-1 Pro
Plasma Braincortex Liver
Normalmice 34.08±1.14 29.63±0.71 28.60±0.39
Acutehypoxiacontrol 51.05±4.76## 35.16±0.73## 50.14±0.85##
Nimodipine(2mg·kg-1) 30.74±2.98** 31.56±0.58** 38.00±1.75**
MyrtilusEX(200mg·kg-1) 30.64±0.45** 28.47±0.30** 36.90±1.91**
MyrtilusEX(100mg·kg-1) 32.46±0.63** 32.53±0.41** 40.15±2.41**
MyrtilusEX(50mg·kg-1) 40.03±2.91** 32.45±0.62** 42.12±2.06**
  ##P<0.01vsnormalcontrol;**P<0.01vsacutenormobarichypoxiacontrol
差 。在供氧不足的情况下 ,组织细胞可通过增强氧
的利用能力或无氧酵解获取能量。严重缺氧时可导
致脑组织机能衰竭 ,抑制呼吸中枢 ,引起呼吸及心搏
骤停而死亡 。
  在常压缺氧实验中 ,我们发现 MyrtilusEX能明
显降低小鼠整体耗氧量 ,延长缺氧负荷的存活时间 ,
证明 MyrtilusEX具有一定的抗缺氧作用。这种作
用可能是通过提高小鼠缺氧条件下对氧的利用能力
和缓解因缺氧负荷引起组织机能损伤实现的。
由于机体内存在多种内源性抗氧化物质 ,可以
发挥清除自由基 、减轻自由基介导的细胞损害的作
用 。因此抗氧化能力指数 ORAC可以作为综合评
价机体的抗氧化能力 ,推测缺氧对机体可能造成的
损伤程度的指标 。实验结果表明缺氧负荷小鼠脑组
织 、血液和肝组织中的 ORAC水平因应激反应而减
少 , MyrtilusEX可剂量依赖性地提高小鼠脑组织血
浆及肝组织 ORAC水平 。上述结果说明 Myrtilus
EX作为一种外源性抗氧化剂 ,通过保护内源性抗氧
化物质 ,减少机体过氧化所致 ORAC的消耗。 Tsuda
等[ 11]研究结果类似。
小鼠在缺氧应激状态下活性氧自由基的生成和
清除失去平衡 [ 12] 。急性缺氧后细胞能量代谢衰竭 ,
细胞膜去极化而导致膜内外离子平衡紊乱 ,最终致
细胞内钙离子超载 ,从而激活细胞的蛋白酶 、磷脂酶
和过氧化系统 , 使蛋白质水解并产生各种自由
基[ 13, 14] 。过剩的自由基与脂质 、蛋白质和核酸反
应 ,引起一系列过氧化损伤。脂质中含有的多不饱
和脂肪酸与氧自由基有高度的亲和性 ,因此脂质最
易受氧化损伤而发生过氧化 ,结果导致脂肪酸链和
细胞膜完整性的破坏[ 15] ,损伤组织细胞。脂质过氧
化反应同时也是自由基产生的重要原因 ,因此自由
基与脂质过氧化反应之间形成恶性循环。 MDA是
脂质过氧化产物 ,其水平可间接反应机体细胞受自
由基攻击的程度。大脑及肝脏是人体血流最为丰富
的器官 ,容易受各种应激刺激的影响 ,对缺氧又极为
敏感 。本实验结果证明 , MyrtilusEX明显改善缺氧
负荷小鼠的血浆 、大脑皮质及肝组织中 MDA含量 ,
提示 MyrtilusEX的抗缺氧作用至少部分与缓解小
鼠缺氧条件下脂质过氧化状态 ,减轻氧自由基对机
体的损伤 ,减少应激性脑损伤的发生相关。此外 ,一
般认为组织缺氧时体内或局部产生的活性物质可诱
发血管内皮细胞释放 NO, NO又可以作为血管调节
因子参与组织局部血流量的调节 。但是 , NO在体
内的生物活性与其浓度有关 。任何来源的过量 NO
均可通过超氧自由基反应促进细胞膜脂质过氧化 ,
且其增加程度与组织损害呈正相关。本研究结果证
明 , MyrtilusEX对常压缺氧负荷引起的肝组织 NO
水平上升有一定的逆转作用 ,但对大脑皮质和血浆
作用并不明显。提示 NO的升高可能是一种机体代
偿调节作用 ,同时也提示 MyrtilusEX的抗缺氧作用
与其抗氧化作用有关只是部分相关 ,不排除增加缺
氧条件下氧的利用能力等抗缺氧机制的存在 。
近年来的研究证明衰老 、肿瘤 、炎症等病理过程
均与氧自由基相关 。因此从天然资源中寻找有效的
抗氧化物质用于防治疾病和维持机体健康一直是研
究热点。本实验通过 HPLC/HPLC-MS对 Myrtilus
EX的分析证明提取物中富含 15种花青素类化合
物。花青素是自然界最为丰富的一大类含有酚性基
团 、具有清除自由基能力的强抗氧化作用物质 [ 2] 。
细胞和非细胞研究均证明花青素具有防止氧化损
伤[ 16]和维持细胞正常生理功能[ 17] 方面的作用。
MyrtilusEX的抗缺氧作用可能与其抗自由基 、减少
·1461·中国药理学通报 ChinesePharmacologicalBuletin 2007 Nov;23(11)
机体脂质过氧化损伤有关 。欧洲越桔具有安全无毒
的特性和悠久的食用历史 ,在预防和改善氧自由基
引起的各种生活习惯病方面可能具有较好的实用价值。
参考文献:
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6.
Effectsofbilberry(VacciniummyrtilusL)anthocyanins
extractonnormobarichypoxiatoleranceinmice
BAOLi1 , YAOXin-sheng1, 2 , L Yang-qing2 , LIMan-mei2 , ChiaChewSern3 ,
TsiDaniel3 , NAGAIHajime3 , KURIHARAHiroshi2
(1.SchoolofTraditionalChineseMateriaMedica, ShenyangPharmaceuticalUniversity, Shenyang 110016, China;
2.InstituteofTraditionalChineseMedicineandNaturalproducts, JiNanUniversity, Guangzhou 510632, China;
3.DeptofResearchandDevelopment, CerebosPacificLtd, Singapore 237994)
Abstract:Aim Tostudytheefectsofbilberyantho-
cyaninsextract(MyrtilusEX)onnormobarichypoxia
toleranceinmice.Methods ThecontentsofMyrtilus
EXwereanalyzedbyHPLC/HPLC-MS.Theefectsof
MyrtilusEXonsurvivaltimeandoxygenconsumption
wereobservedinmicesuferedfromacutenormobaric
hypoxia, andtheMDA, ORACandNOcontentin
plasma, brainandlivertissuesweredeterminedre-
spectively.Results MyrtilusEXprolongedthesurviv-
altimeanddecreasedoxygenconsumptioninmicesuf-
feredfromacutenormobarichypoxia.Italsoenhanced
ORACanddecreasedlevelsofMDAinplasma, brain
cortexandlivertissues, andmodulatedlevelsofNOin
plasma, braincortexandlivertissues.Conclusions 
MyrtilusEXhadsomeprotectiveefectonmiceladen
withacutenormobarichypoxiatreatment, andthe
mechanismmightberelatedtoitsfreeradicalscaven-
gingactivityandinhibitoryefectonlipidperoxidation.
Keywords:Myrtilusextrant;HPLC/HPLC-MS;nor-
mobarichypoxia;oxygenradicalabsorbancecapacity
(ORAC);nitricoxide
·1462· 中国药理学通报 ChinesePharmacologicalBuletin 2007 Nov;23(11)