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大波斯菊种子水提物对Ⅰ型糖尿病模型小鼠肝肾功能及生化指标的影响



全 文 :C h i nes eJo u rn alo fV et er i n a ryMed i c i n e中国兽医杂志20 1 6 年 (第 5 2卷 )第2 期9 9
大 波 斯 菊 种 子 水提 物 对 丨 型 糖 尿 病 模 型
小 鼠 肝 肾 功 能 及 生 化 指 标 的 影 响
朱 浩 , 王 雪 飞 , 刘 丹 丹 ' ’ 2 , 贾 丽红 , 杨 英
( 1 . 内蒙古农业大学兽医学 院 , 内蒙古 呼 和浩特 0 1 00 1 8 ;
2 . 农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室 , 内蒙古 呼和浩特 0 1 0 0 1 8 )
摘要 : 为 了研究大波斯菊种子水提物对 丨 型糖尿病模型小鼠肝肾功能及生化指标的影响 。 对阴性对照组 (健康 ) 、
阳性 对照组 ( 糖尿病 ) 、高浓 度组 ( 2 .0g/mL ) 、 中浓度 组 ( 1 .0 g/mL ) 、低浓 度组 ( 0 . 5g/mL )分别 连续 30 d灌服生理盐水 及不
同浓 度大波斯菊种子水提物 , 并进行肝肾 及相关生化指标的测定 。 结果高浓度组较 阳性对照组 : 肝脏 、 肾 脏 中 MD A含
量显 著降低 , 而肝脏 、 背脏 中 SOD 和 GSH 含量显 著升高 , 血液生化指标 人 1^ 、 人31\ 1 '(: 、 8 11 ]\显著降低 。 表 明大波斯菊种
子水提物可延缓糖尿病小鼠肝肾损伤状况 。
关键词 : 大波斯菊种 子水提物 ; 丨 逛糖尿病模型小 鼠 ; 肝肾功能 ; 血液生化指标
中 图 分类号 : S8 53 . 74文献标 志码 : A文章 编号 : 0 529-60 05 ( 20 1 6 )0 2- 00 99-0 3
EffectsofWa terExt ractfromCosmoshipinna tusseedontheFunc t ions
ofl iverandkidneyandB iochem ica lParam etersintypeIdia bet i cmi ce
ZHUHao ' 2 ,WANGXue -fe i 1 2 ,L IUDan -dan '2,J I AL i- hong 1 ' 2 ,YANGY ing 1 2
( 1 .Co ll egeofVeter in aryMed ic i ne , Inner Mongol i aAgricu l turalUn ivers ity ,Hohhot0 1 00 1 8 ,China;
2 .Ex per i men tRes earchCe nte rofA n ia lS c i en cea ndV e ter inary M edi c i ne , Ho hh o t0 1 00 1 8, C h i na )
A bs t ra c t : The e xperi men twasd e s ig ned tost ud yt heeffec ts ofCosmosb ipinna tiis seedw a ter ex t rac t ontyp e Idi abet icm ic ein ?
c lu di ngbi o ch emi ca lp a rame t erandtheF un c t io nso f l i ve ran dk id ney . Th enega t i vecon tro lg ro up ( h ea l thy ) an dt heposi t iv e con tro l
g roup (DM )werefedw i thsa l i ne0 .2m Leve iyd ay . Th eh ighcon cen tra t i ongrou p , m id dl ec oncen tra ti ongrou p, and l owco nc en tra t ion
g roup we red a i l yfedwi thcosm os s ee dex t rac t0 . 2m l . a tthecorres pond i ngconcen tra t io n2 .0 g/mL , 1 .0 g/mL , and0 . 5g/mLevery?
dayfor30succes si ve clays , resp ec ti v el y .B ioch emi ca lp arame te rs andI nd exes of l iverandk id n eyweremeas ured . Th eM D Acon t en t
of l i v er andk id n eyand l ) loodA LT ,AST ,BU NandTC inh i ghco ncen t ra t i ongrou pwass ign if ic an t lydecreas edcomparedwi thth e
pos i t ivecon trolgrou p , wh i l e theSO Dand GSHcont en twass ign if ican t l y i nc rea sed . W a terExt rac tfr omCosmos bip i nnat u sseedcan
de l ayd iabe tesm icel iverandk idn eydamag es .
K eywo rds : W a terE xtrac tfromCosm osbipinnat iisseed;typ eI d iab et i cm ice; l i ver a ndk idneyFu nc t ion ;b loodbioch emi ?
cal in dex
Co rrespond i nga utho r : YANGY i ng
大 波斯菊 ( C osm o sb i p l i nnat usCa v ) 又 名 波 斯鼠方面 的药用 价值 。
菊 ,原产于美洲墨西哥 ,现在我 国 北方内蒙 古 、青彳
海 、西 藏等大部分地 区广泛栽培 。 如今大波斯 菊
已被广泛細于栽培? ,酿細价值也M丨 . 丨 药^ 大錢賴 子采 自 力蒙古 呼和 浩特 ,
逐步发掘 , 但在 '冶疗糖尿鑛鮮方面赚购&巾胃E 鉴定 。
罕 见报道 , 国 内外 文献更无大波斯菊 对糖尿病预 1 .2 主要^剂及实验动物 四氧啼 陡U igma
-ab -
防治疗作用方面的研究 , 为此本文 以 资源丰富 的 r ich ) 等 。 试剂 盒 : SO D 活性测 定试剂盒 、 GSH 活
大波斯菊为试验材料 ,通 过观察大波 斯菊种子水 性测定试剂 盒 、 MDA f」j 定试剂盒 、 ALT测 定试剂
提物 对 I 型糖尿病模型小 鼠肝肾功 能 及生 化指 盒 、 AST测定 试剂盒 、 TC测定试剂盒等 , 购 自 南京
标的影 响 , 旨在探讨其在紐 丨 麵尿鎌 生物 :1 . 程職所 。 昆_賴年小 鼠 , 体重
收 ” 丨 ! 5 )20 1 4 丨 〇2 (T20?25g , 由 内 蒙古大学实验动物中 心提供 。
作^ 简介 :朱浩 ( 1 990- ) , 男 , 硕 士生 , 主 要从事 中药药理与 1 .3 知]养环 女兒 按
'桌 规词养 力 法进行分 笼柯 养
免疫晒究 , E-m ai l  :― 024@ lw tma i l .ram管理 。 室温 24 T; ±2 丈 , 供以 标准小 鼠词 料 , 自 由
通 讯作者 : 杨英 , E-m a i l :ya ngy i ng zsy@ l 26 . com 饮水 。
100中国兽医杂志20 1 6年 (第 5 2卷 ) 第 2 期C h ines eJournal ofVet erinaryMedici ne
1 .4 动物模型及分组 本试验采用 尾静脉注射1 .6 指标测定与方法 血液免疫球蛋 白 ( IgG ) 、
四氧嘧 啶 的方法 , 使小鼠患有 I 型糖尿病 , 空腹血液生化指标的 测定 : 按试剂盒说明 书进行操
血糖值§ 1 1 . 1rmno l/L 为造模成功M。 试验共设 5作 。 肝 肾功能 的测定 : 取组织块 1g , 在 冰冷 的
组 , 每组 1 2 雌雄各半 。 分别 为 阴性对照组 (健康0. 9%生 理盐水漂洗 , 除去血液 , 滤纸拭 干并称
鼠 ) , 阳性 对照组 ( 糖尿病 鼠 ) , 高浓度组 ( 2 .0g/重。 将剪碎的组织置于玻璃勻 浆器中 ,加人冷生
mL ) 、 中浓度组 ( 1 . 0g/mL ) 、低浓度组 ( 0 .5g/mL ) ,理盐水研磨成 1 0%勻浆 , 3000r/m in离心 1 2m in ,
阴 阳性对照组每 日 分别灌服生理盐水 〇. 2mL 。 给取上清液 , 根据试剂盒说明书进行操作 。
药组每 日 分别灌 服相应浓度的大波斯菊种子水1 .7 数据处理 数据统计采用统计学软件 SPSS20.0
提物 0. 2mL ,连续给药 30d 。进行处理分析 ,各组数据以平均值±标准差表示 ,差
1 .5 样品采集与处理 连续词喂给药 30d , 于最后 异显著性检验采用方差分析 。
一次给药 l h后每组小鼠分别随机抽取 10 只 (雌雄#&各 5 只 ) 眼球采血 。 将血液收集于 1mL EP管中 , 2果分析与Vt论
3 000 r/min离心 5? 10min , 取血清冷冻于-20T ;保2 . 1 大波斯菊水提物对 I 型糖尿病模型小 鼠血
存备用 ^液免疫球蛋 白 ( IgG )的影响 见表 1 。
表 1 大波斯菊水提物对糖尿病模型小鼠血液免疫球蛋白 ( IgG ) 的影响( n= 1 0 )
组别

阴性对照组

阳性对照组

低浓度组

中浓度组

高浓度组


0D
值 0. 1 26±0 .0 74a

0 . 08 8±0 .074-

0 . 098士0 . 30 1 a

Q . 102±0.065 a

0. 1 13 ±0 .04 8H
注 :表中同一行数据肩标字母相同者差异不显著 (尸 > 〇 .〇5 ) , 同一行数据肩标字母不相同者差异显著 (P < 0.05 ) ,下表同
糖尿病与免疫的关系 已经有诸多研究 , 大量表 3 大波斯菊水提物对糖尿病模型小鼠
研究表明 , I 型糖尿病的发病机制与 P细胞 自 身肾_。八 '30。 和 GSH的黝向U= 10 )
抗原 、 巨暖细胞 、树突状细胞 、 B淋 巴 细胞和 T 淋组别MDA ( nmo I/mg )SO D ( umoI/mgpr〇] )GSH (m§/gpro l )
巴细胞等有关 表 2 中 阳性对照组较阴性对照P月性对照组 14 -58± 1 . 83 ^23 . 87麟43 . 1 4±3 .4〇-
组糖尿病小鼠 I gG 含量显著下降 , 其降低提示 I 1 835± 5 ' 59
’ 1 2 1 6± 6 3〇h1 3 '42±8 - 94b
.丄_ ,^ t一 —? , , 从" , ,低浓度组 17 . 1 5±5 .47 a 1 2 .64 ±2 . 30b1 2 .72±5 . 68 b型糖尿病小鼠免疫功 目旨 已发生改变 ,可 目匕长期L中浓度组 15 .45± 0 . 28 h1 4 . 30±5 .52^10 . 89±4. 88 b
于 局血糖水平状态 , 白 细胞趋化 、 吞_作用 以及高浓度组 1 5 . 53± 3 .69 h

1 5 . 29±3 .9Qb , ;

1 8 . 20± 1 . 1 广
ff=mda 等主要練化指标进行检测 , 发織抗氧化木
纟 指标均有所改善 。 试验 中大波斯菊水提物高 浓
f 賴对糖尿病小 鼠肝肾 的 s〇D 活性效果 比较明

斯 显 ,分别 比 阳性对照组提高 了36 .5%和 47 . 6% ,并病小 含量 , 对其免疫力有很好的 雜尿病小 鼠肝 肾 gsh活性随着大波斯菊种子
2 .2 大波斯菊种子水提物对 I 型糖尿病模型小 #提物浓度 的增加都有所提高 是高浓度组
鼠肝肾功能的影响 见表 2 、 表 3 。_____浓度组升高 ,结果说明X波斯菊水提物具有清除肝肾 自 由基的作用 , 可保m 2护 内 皮细胞免受其害 , 从而维持细 胞 的 正常代小鼠肝脏MDA、SOD和GSH 的影响 ( n= 10 ) l, OvU trv /rr^ iE3 n-r i tit谢 ;大波斯菊种子水提物能降低糖尿病小鼠肝肾

m ,iMDA C n.noymg )SOD
_
( um〇 l/mgpro l )GSH ( mg /gprol )的 MDA含量 , 且效果显著 , 高浓度组降低肝和 肾
阴性对照组l lM ztZO l 1 .24 . 20±5 .27 -28 . 1 3±4. 5〇 -^人 白
阳性对照组1 7 .3 5±5 . 59 "1 7 . 16±6 .30h 1 0 . 29±4 . 13 r 的MDA自 里分 另J达3 1 .5% 和56 .7% , 表J 大波斯
低浓度组 1 4 . 30±2 . 1 7h 12M±2 .30r1 1 .64±0 .90 r菊水提物能有效抑制脂质过氧化活性 , 降低细胞
中浓度组 1 3 . 3 1 ± 1 .39" 17 . 30+ 5 .5 3"1 2 .60± 8 . 24'遭受氧化损伤风 险 。
g■组__1 1 86土3-.6g1 8 - 29± 3 9〇b1 5 -7 8± 3  ̄ 3 9"2. 3 大波斯菊水提物对 I 型糖尿病模型小鼠血
SOD 、 MDA 、 GSH 等具有很强 的抗氧化能 力 , 液生化指标的影 响 见表 4 。
是 常用 的抗氧化指标 16 _' 本试验对大波斯菊种长期 高血糖能引起小鼠肝脏功 能减退 ,糖尿
子 提取 物 灌 胃 小 鼠肝脏 和 肾脏 的 SOD 、 GSH 、病肝组织的氧化损伤 , 多表现为与肝功能密切相
Ch ineseJournalof Vet erina ryMed ic ine中国兽医杂志20 1 6年 (第5 2卷 )第2 期1 〇 1
表 4 大波斯菊水提物对糖尿病模型小鼠血液生化指标的影响U =1 0 )

mm

阴性对照组

阳性对照组

低浓度组

中浓度组

高浓度组

ALT ( u /Ll ) 62 . 85±5 .42 * 1 1 3 . 14±4 . 1 8b 1 20 . 54±3 .2 8k1 1 8 . 35±4 . 36l 98 .4 8± 5 .7 6h
AST( u/L )93 .7 8±4. 52 -1 69 . 83 ±9 .75 k 1 68 .75±6 . 32b 1 59 . 32±3 .47b 1 54.28±7 . 85 ' '
TC (mmoI/L) 2 . 75±0 .65 4 . 3 ] ± 1 .05 4 .4 5±0 .753 . 8 9±0 . 433 .09±0 . 88

BUN (mmoVL )

7 .48±0.58 '

1 3 . 1 2± 1 .2 3h

1 3 .06±3 .4 1 h

1 1 .7 1±4 . 85 ' '

9 . 35±6 .2 T

关的 ALT 和 A ST 活性升高 。 血清 BUN 是肾 功能参考 文献 :
主要指标之一 , 肾脏功能衰竭可使血液 BUN 含量

1 ] 李兰芳 , 马森 ,随彪 . 四氧 啼陡制备小 鼠高血醒麵研
升高 。 本试验阳性对照组与 阴性对照组相 比 ,小究 [J] . 黑龙江畜牧兽医 , 2〇 l2 , 05 : M l- l42 .
鼠 ALT 和 AST 水平极显著升高 ( P < 0 .0 1 ) , 小 鼠[2] 谭壮生 ’ 李芳 , 张懿 . 四 氧喃 陡制备小 鼠糖尿病模型 的影 响
BUN水平显著升尚 ( P <0. 05 ) ,表明四氧嘧 Ifc造模
[3 ] 李蕴 . l ii糖尿病发病及防治 的免疫学研 究进展 [J] . 微生 物
I 型糖尿病会对小 鼠肝 肾组织造成严重损伤 。学免疫学进展 , 2 004 , 0 1 : 4 3-47 .
与阳性对照组相 比 , 大波斯菊种子水提物高浓度 [4] 李敏 ,宋陆军 , 秦新裕 . 1 型糖尿病U ID } 的细胞免疫学发病
组小 鼠 ALT 、A ST 、 BUN水平下降 ,表 日月水提物高^制 的研究进展m . 复旦学报 ( 医学版以亂仍部-徽536 .
浓 度组可缓解糖尿病小鼠肝肾损伤 f I 1 _ I 2 1 ; 中低浓 [5 ] 陈海冰 , 贾伟平 . 糖尿病与 免疫 [ J ] . 临床 内 科杂志 , 2007 , 03 :
度缉与 阳性对照组相 比 , ALT 、 AST 、 BUN 水平基1 59-而 .
本无差异 , 改善肝损伤效果不明 显。 水提物各浓 [6]
_, . ^^^大鼠肝肾功 能的保护作用 [J ] . 卫生研究 , 20 10 , 02 : 1 47- 1 49 .度组 ALT 、 AST相对于 阴性对照组问且有显者差
[7] 韩文兵 . 基于 ‘ ‘肝肾 同 源 , ,理论探讨柴黄益肾颗麵 治糖尿
异 ,说明各浓度组对糖尿病小 鼠肝肾损伤并没有病肝 肾并发症的机制研究 [D ] . 北京 :北京中医药大学 , 20 1 3 .
治愈 , 小 鼠肝 肾损伤 虽有缓解 , 但仍损伤严重 。 [ 8] 舒毅 , 钟历勇 ,石立 . 褪黑 素 、维生 素 E 和还原型谷胱甘肽对
-r n
_u.四氧嘧 啶糖尿病 大 鼠氧化应激影响 的 比 较研究 [J] . 东 南大可见 ,大波斯菊种 子水提物可提高肝 肾功能 , 尤 学学报 ( 医学版 ) , 2006 , 02 : 8 8- 92.
其在肝肾损伤的保护方面 ,但并不 明显 。[ 9]Giya sett inBay das , H alit Cana tan , A bdulbakiTurkog lu . Compara-
TC是糖尿病小鼠肝损伤的一项指标 ,试验各l i v eanal ys i so ftheprot ec tiv e effec tsofm e lat on inandv i tam inE
浓度组 TC水平随着浓度的增加而有所下降 ,但不?^PU^ i rH rK^edd iabe te sme ll it us[U_ aIP inea l
se arch , 2002 , 3 24.显著 , 可见大波斯菊种子水提物对 TC 的改善作用
[ 1 0]AhnTaeho ,Yu nChul -Ho ,OhDoo-Byoung . Ti ss ue- s pec i fi c ef-
有待进 * ̄步?T究 。 fe etofascorbicac i dsupp lemen ta tionon theexpress iono fcyt o?
chromeP4502E1andox idativ e stress instreptozo toci n- induced
3 结论 d iab eticrat s[J] .Toxi co logyLette rs , 2006 , 1 66 1 .
讲 ■ /门 、油 1itb 、ifc 同对 ? 许士坦物》坦 [ 1 1 ] 陶明撞 , 王 峰 , 程 光宇 , 等 ? 食用菌提取物对糖尿病小 鼠血_对大祕菊种子如不问浓度水提幢 液和 肾脏誠氧化作用研_ .食品 科 学学报 ,屬 , 29取 ,用 以 灌服小鼠 。 通过试验探讨 , 可初步得知U 1 ) : 6Q 5- 6Q8 .
大波斯菊种子水提物在增强机体免疫力方面具[ I 2 ]MS rin iv as an , MPadmanabha n , PStane lyMa in zenPr inc e . Effec t
有独特优势 ; 在提高肝肾抗氧化能力方面 ,高浓ofaque ousEn ie_mmal i toa leBl ume e xfaot onke yearfx>h y-
.?一 ? 、 , , 《 _一 一 一 ■—" , ,丄 — d ra teme tabo l icenzyme s , li p idpe rox idesanda n tiox idan tsinal-度组作用最 明 I 。 大波斯菊种子水提物在糖尿.oxan- i ndu ced d iab eti crat s[J] .Jouma!ofPhannacya ndPhanna-病方面的药用价值有待于进一步探讨和研究 。 ?kgy , 20 10 ( 4 ) .
(上接第98瓦 ) [ 1 1 ]Vo lkR ,Somer sV . Obes i ty re la tedcard io vasc u lard i sease : im p l i-
ho lic fa tty li ve rd i se ase [J ] .Hepato l In t , 20 1 0 , 4 : 74 1 -74 8 . ca tionso fobs truc tiv es l eepapnea[J] . D iabe tObe sMet  , 2005 , 8 :
25 0— 26 0


]CunshuanX ,Ga ip ingW , YunpengH , et al . Corre la tionAnal ys i s
,[ 1 2 ]Abu-Bak arA ,Arthu rDM, Aganov icS ,e tal .Induc ible b i lirub inB etweenGeneExp ressionPro fi leofRa tLiv erT issue sandHi gh-
o x ida se : An ove lfunc t ionfo rth emous ec yt oc hrom eP4502A 5
F at Emuls ion- InducedN onal cohol icFattyLive r [J] . DigD i sSc i ,[J] . Tox ic olApp lPhramaco l, 20 1 1 , 257 ( 1 ) :  1 4-22.
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[1 0]Targhe rG ,Arc aroG .N on- al coho li cfattyl iverd isease andi n-pa toc ell u larS tress :A nAd aptiv eRespo nse toPerturbat i onsof
c re as edrisko fca rd iovascul ardis ea se[J] .Athe roscl erosis ,2007 ; H emeHomeo st asi s[J] .CUR RDRUGMETAB ,20 1 1 ,1 2( 2 ) :
1 9 1 : 235-240 . 1 86- 197 .