全 文 ：China Pharmaceuticals
2015年 1月 5日 第 24卷第 1期
Vol． 24，No． 1，January 5，2015
B
A
a． 205． 1 / 148． 9 b． 205． 1 / 121． 0 c． 205． 1 / 93． 0 d． 205． 1 / 65． 0
A． 对照品溶液 B． 阴性样品溶液
图 1 多反应监测离子对色谱峰
双胍对照品溶液(24． 08，48． 16，120． 4 ng /mL)50 mL，每个浓度平
行制备 3 份，按供试品溶液同法制备，按上述条件测定，计算回收
率。结果低、中、高浓度溶液的平均加样回收率分别为 85． 6%，
87． 2%，89． 6%，ＲSD分别为 2． 1%，1． 9%，1． 6%(n = 3)。
2．4 样品检测结果
按拟订的 LC － MS /MS条件进行测定，阳性样品与对照品苯
乙双胍显相同保留时间的多反应监测离子对色谱峰。结果见图 1。
3 讨论
中成药非法添加化学药品的目的是为了提高疗效、占有市场
份额，但忽视了患者的健康安全，严重者可能危害生命。因此，监
管部门应引起重视，加强宣传与管理。本试验中采用 LC － MS /MS、
多反应检测扫描方式进行样品检测。多反应监测模式可以看成 2
个 SIM，试验时尽可能多选几个离子对，基质干扰时可更换相应
的离子对，以提高专属性。判定阳性样品时，除阳性样品与对照品
多反应监测离子对完全一致时，还应计算样品和对照品非定量离
子对与定量离子对色谱峰的比值，仅当两者数值的相对偏差小于
15%时方可判定两者为同一物质。另外，可利用定量离子计算阳
性样品的含量。试验时，优化多反应监测离子对参数喷雾电压、去
集簇电压、碰撞能量等条件，可提高灵敏度。
参考文献:
[ 1 ] 刘淑梅，韩淑英，崔国金，等 ． 甜荞麦叶总黄酮降糖、降脂作用及机
制 [ J ] ． 第四军医大学学报，2003，24( 9) : 1 815．
[ 2 ] 杨 钊，陈安珍，吴爱英，等 ． UPLC － MS /MS测定降糖类中成药及保
健品中 11 种化学药 [ J ] ． 药物分析杂志，2009，29 (12 ) : 2 127．
[ 3 ] 刘福艳，蒋 俊，谢元超，等 ． 液相色谱 －质谱联用法检测中药制
剂中掺入的双氯芬酸钠和醋酸泼尼松 [ J ] ． 药物分析杂志，2009，
29 (12 ) : 1 231．
(收稿日期:2014 － 06 － 30 )
经血宁胶囊由白背叶和扶芳藤组方，为妇科止血药，适用于
瘀血阻滞月经过多、经色紫黑有块、腹痛拒按等症，也用于轻度消
化道出血的辅助治疗 [ 1 ]。白背叶是方中君药，为大戟科植物白背
叶 Mallotus apelta ( Lour． ) Muell － Arg． 的干燥叶 [ 2 ]，主要有止血、
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高效液相色谱法测定经血宁胶囊中伞房决明苷含量
罗 轶，丘明明
(广西壮族自治区食品药品检验所，广西 南宁 530021)
摘要:目的 建立测定经血宁胶囊中伞房决明苷含量的高效液相色谱法。方法 采用 Capcell Pak C18柱( 250 mm × 4． 6 mm，5 μm)，以磷酸
盐混合溶液 (称取磷酸氢二钠 1． 8 g，磷酸二氢钾 2． 8 g，和庚烷磺酸钠 1． 0 g，加水稀释至 1 L，混匀，用磷酸调节 pH至 6) －甲醇 (75 ∶ 25 )
为流动相，检测波长为 335 nm，柱温 30 ℃，流速为 1． 0 mL /min。结果 伞房决明苷进样量在 0． 001 991 ～ 0． 995 5 μg范围内与峰面积线
性系良好 ( r = 0． 999 6 )，平均回收率为 99． 08%，ＲSD = 1． 88% ( n = 9 )。结论 该法专属性强、重现性好，适用于经血宁胶囊中伞房决明
苷的定量分析。
关键词:经血宁胶囊;伞房决明苷;高效液相色谱法
中图分类号:Ｒ284． 1;Ｒ286． 0 文献标识码:A 文章编号:1006 － 4931 (2015 )01 － 0051 － 02
Determination of Cassia Corymbosa Glycoside Content in Jingxuening Capsules by HPLC
Luo Yi， Qiu Mingming
( Guangxi Zhuang Autonomous Ｒegion Institute for Food and Drug Control， Nanning， Guangxi， China 530021 )
Abstract: Objective To establish a HPLC method for the determination of Cassia corymbosa glycoside content in Jingxuening Capules．
Methods The analytical column was a Capcellpak-C18 (250 mm × 4． 6 mm，5 μm) ． The mobile phase consisted of methanol-phosphate
mixed solution ( dissolving disodium hydrogen phosphate 1． 8 g，potassium dihydrogen phosphate 2． 8 g and heptane sulfonic acid sodium
1． 0 g in water and adding water to 1L，adjusting to pH 6． 0 by phosphoric acid ) (25 ∶ 75 ) ． The detection wavelength was 335 nm． The
column temperature was 30 ℃ and the flow rate was 1． 0 mL /min． Ｒesults The linear range of Cassia corymbosa glycoside was in the
range of 0． 001 991 － 0． 995 5 μg， r = 0． 999 6， the average recovery rate was 99． 08% with ＲSD 1． 88% ( n = 9 ) ． Conclusion This
method has strong specificity and good repeatability， and is suitable for the content determination of Cassia corymbosa glycoside in
Jingxuening Capules．
Key words: Jingxuening Capules; Cassia corymbosa glycoside; HPLC
檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨檨
·药物鉴定·
Drug Identification
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China Pharmaceuticals
2015年 1月 5日 第 24卷第 1期
Vol． 24，No． 1，January 5，2015
1． 伞房决明苷
A． 阴性对照品溶液 B． 对照品溶液 C． 供试品溶液
图 1 高效液相色谱图
A B C
表 1 伞房决明苷加样回收试验结果( n = 9)
取样量( g)
0． 256 6
0． 252 3
0． 256 4
0． 255 9
0． 255 8
0． 258 8
0． 254 0
0． 251 2
0． 257 4
样品含量( μg)
115． 83
113． 89
115． 74
115． 51
115． 47
116． 82
114． 66
113． 39
116． 19
加入量( μg)
59． 75
59． 75
59． 75
119． 45
119． 45
119． 45
199． 10
199． 10
199． 10
测得量( μg)
174． 34
173． 45
173． 73
231． 84
232． 51
238． 88
312． 75
316． 02
311． 72
回收率(% )
97． 93
99． 68
97． 06
97． 39
97． 98
102． 18
99． 49
101． 77
98． 20
X (% )
99． 08
ＲSD(% )
1． 88
抑菌、抗肝纤维化、抗癌等作用 [ 3 ]。白背叶的乙醇提取物中能分离
得到多种黄酮类成分 [ 4 ]，伞房决明苷(corymboside)为其中一种，目
前尚未见报道白背叶中该成分的含量测定方法。为此，笔者采用
高效液相色谱法测定了经血宁胶囊中伞房决明苷的含量，现报道
如下。
1 仪器与试药
Agilent 1200 型高效液相色谱仪。伞房决明苷对照品(由广西
师范大学鉴定并提供，在 335 nm 波长下，经归一化法检查，纯度
为 97． 79%);甲醇为色谱纯，水为高纯水，聚酰胺(30 ～ 60 目)及
其他试剂均为分析纯。经血宁胶囊(广西金秀圣堂药业有限责任
公司，批号分别为 20120901，20120902，20120903)。
2 方法与结果
2．1 色谱条件
色谱柱:Capcell Pak C18 柱(250 mm × 4． 6 mm，5 μm);流动
相: 磷酸盐混合溶液(称取磷酸氢二钠 1． 8 g，磷酸二氢钾 2． 8 g，
和庚烷磺酸钠 1． 0 g，加水稀释至 1 L，混匀，配成含庚烷磺酸钠
1 g / L 的磷酸盐缓冲液，磷酸调节 pH 至 6)－甲醇 ( 75 ∶ 25 ); 柱
温:30 ℃;流速1． 0 mL /min;进样量:10 μL;检测波长:335 nm。理
论板数以伞房决明苷峰计算应不低于 2 000。
2．2 溶液制备
精密称取伞房决明苷对照品 10． 18 mg，置 50 mL容量瓶中，加
甲醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，制成质量浓度为 199． 1 μg /mL
的伞房决明苷对照品溶液。取本品内容物，研细，取约 0． 5 g，精密
称定，精密加入甲醇 50 mL，称定质量，加热回流 15 min，取出，放
冷，再称定质量，用甲醇溶液补足减失的质量，摇匀，滤过，精密量
取续滤液 25 mL，蒸干，残渣用水 20 mL 使溶解，加在聚酰胺柱
(30 ～ 60 目，直径 1． 5 cm，高 10 cm)上，用水 8 mL洗脱，弃去洗脱
液，用 30%乙醇 100 mL 洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣用甲醇使
溶解，转移置 10 mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取
续滤液，作为供试品溶液。
2．3 方法学考察
专属性试验:取缺白背叶的阴性样品，照供试品溶液的制备
方法制成阴性对照品溶液并测定。结果在伞房决明苷对照品保留
时间处未出现色谱峰，表明阴性对照品溶液中的组分不干扰伞房
决明苷的测定。见图 1。
线性关系考察:精密量取伞房决明苷对照品溶液(199． 1μg /mL)
0． 5，0． 5，1． 0，1． 0，2． 0，2． 0 mL，分别置 50，20，20，10，10，4 mL容
量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，分别进样 10 μL，测定峰面积，
以峰面积为纵坐标、对照品进样量 (μg )为横坐标进行线性回归，
回归方程为 Y = 17 122 X + 1． 889 6，r = 0． 999 6(n = 6)。结果表
明，伞房决明苷进样量线性范围为 0． 001 991 ～ 0． 995 5 μg。
精密度试验:精密吸取同一份对照品溶液10 μL，重复进样 6
次，测定峰面积。结果峰面积积分值的 ＲSD为 0． 21%(n = 6)，表
明仪器精密度良好。
稳定性试验:取同一供试品溶液，分别于0，6，10，17，29 h时
进样 5 次，测定峰面积。结果峰面积积分值的 ＲSD 为 0． 49%
(n = 5)，表明供试品溶液在 29 h内稳定。
重复性试验:取同一批(批号为 20120901 )样品 6 份，照供试
品溶液的制备方法处理并依法测定。结果伞房决明苷含量的平
均值为 0． 451 4 mg / g，ＲSD 为 2． 54%(n = 6)，表明方法重现性
良好。
加样回收试验: 称取已知含量(伞房决明苷的含量为
0． 451 4 mg / g)的同一批 (批号为 20120901 )样品约 0． 25 g，精密
称定，共 9 份，分成 3 组，每组分别按 50%，100%，150%的比例
精密加入伞房决明苷对照品，照供试品溶液的制备方法处理并依
法测定，计算回收率。结果见表 1。
2．4 样品含量测定
取批号为 20120901，20120902，20120903 的样品，每批平行
操作 2 份，依法制备供试品溶液并测定含量，结果每粒样品中伞
房决明苷含量分别为 0． 19，0． 22，0． 13 mg。
3 讨论
以甲醇、乙酸乙酯、正丁醇为提取溶剂，考察加热回流与超声
处理两种提取方法，结果以甲醇加热回流提取含量最高;为了进
一步纯化样品，比较 D101 型大孔树脂、中性氧化铝、聚酰胺等 3
种柱净化方式，结果聚酰胺能有效去除相关杂质，达到纯化效果。
对 Capcell Pak C18柱、Ultimate XB － C18 柱、Kromasi C18柱 3 种
不同品牌的色谱柱进行了考察，结果被测成分均能达到基线分
离，测定结果的 ＲSD为 2． 55%。流动相比较了甲醇 － 0． 2%磷酸
溶液、甲醇 － 0． 1%冰醋酸溶液、乙腈 － 0． 05 mol / L磷酸二氢钾溶
液和文中采用的流动相，结果文中采用的流动相峰形对称性较
好。用二极管阵列检测器对伞房决明苷对照品溶液、经血宁胶囊
溶液进行光谱扫描，伞房决明苷对照品在 335 nm 波长处有最大
吸收，同时经血宁胶囊样品 HPLC图中与伞房决明苷对照品保留
时间一致的色谱峰在 335 nm 波长处也有最大吸收，因此确定检
测波长为 335 nm。
作者简介:罗轶，女，副主任药师，主要从事中药民族药材及
中成药的检验研究工作，(电子信箱)13877171269mingming．
q5885@ 163． com。
参考文献:
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[ 3 ] 江苏新医学院 ． 中药大辞典 [M ] ． 上海:上海人民出版社，1977: 731．
[ 4 ] 韦 松，曲 磊，郑作文 ． 白背叶黄酮类化学成分研究 [ J ] ． 中成药，
2012( 4) : 691 － 693．
(收稿日期:2014 － 05 － 28 )
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