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大岩桐快速繁殖的研究



全 文 :0 0 25 年 9 月
第 3期 J o um a l
黔西南民族师范高等专科学校学报
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C o l l e ge o fr
S e P t
.
2() 0 5
Na tio n a li ti e sNo
.
3
大岩桐快速繁殖的研究
周 丽
(黔西南民族师范高等专科学校化生系 , 贵州 兴义 56 24 0 0)
摘 要 : 用植物组织培养的方法 , 采用六 个处理 , 对大岩桐繁殖的情况进行研究 。 结果表明 : M S 十
B A Zm g
·
L
一 ’ + N A A O
.
Zm g
·
L
一 ` + GA l m g
·
L
一 ’ 对 芽丛 的增 殖效 果 最好 , 而 M S + B A Zm g · L 一 ’ +
N AA O
.
Zm g
·
L
一 ’ 有利于壮苗 。 生根培养基 中 M S + N AA O . s m g · L 一 ’ 生根数量少 。 但是有利于块茎的形
成 , 具有块茎的小苗炼苗移栽后成活率高 。
关键词 : 大岩桐 ;快速繁殖 ;增殖 ;培养基
文章编号 : 10 0 9一刁6 7 3《2 0 0 5 )0 3一0 0 84一代)4 中图分类号 : 5 604 十 . 3 文献标识码 : B
大岩桐 ( iS n ign ia s pe ic os a )苦芭苔科球根花卉 。原产南美巴西 18 14 年引人欧洲园艺品种有洋红色 、
紫色 、 粉红色 、蓝色等各色 , `” `2lP ” 并有斑点 、 斑纹 、 镶边等变化 , 重瓣类品种具有四层波状花瓣 。 大岩桐
不仅花色绚丽多彩 ,而且叶质健壮 ,耐运输 ,极适于生产栽培 。
大岩桐花柱高出花药 , 且雄蕊早熟 , 有些重瓣品种还存在花粉退化的问题 , 所以不能自花授粉 , 不
易得到种子 ,一般不用种子繁殖 。 采用扦插法和分球法繁殖 ,需要材料多 ,而且繁殖系数太低 。 采用组织
培养的方法不仅可克服上述问题 , 而且可以在短时间内得到大量优质组培苗 。 本文着重报道丛生芽增
殖和生根方面的研究情况 ,其结果对工厂化生产优质组培苗有参考意义 。
一 、 无菌材料的获得
在生长健壮 ,无病虫害的植株上剪取较嫩的成熟叶片 ,用洗洁精洗净后 , 自来水冲冼 30 分钟 。 在超
净工作台上先用 75 % 酒精消毒 30 秒 ,再用 0 . 1% 升汞消毒 8 分钟 ,最后用无菌水冲洗 3一4 次每次 5 分
钟 ”` `” 5 5 ’ 。 然后在无菌滤纸上将外植体切成 0 . sc m x 0 . sc m 小块接种在愈伤组织诱导培养基 ! M S 十 Kr rZ
m g
·
L 一 l( 单位下同 ) + NA A o . 2 + 2 、 4 一 D O . l] 上 , 置于培养室中培养 。 3一20 天内注意检查 , 查出被带
菌外植体污染的培养瓶 ,便可得到无菌材料 。
二 、 愈伤组织诱导及芽的分化
接种在愈伤组织诱导培养基上的叶片 10 天后切口膨大 , 并逐渐从切口处长出白色紧密的愈伤组
织 。 愈伤组织若不转接一个月后会长出少量较弱的小苗 , 若将其转接于分化培养基 (M s + 6 一 B A 3 十
N A AO
.
3) 上经 2 0 多天的生长可从外植体表面及周边直接分化出密集的芽丛 。
三 、快速繁殖的研究
1
、研究方法
收稿 日期 : 2 0 0 5一 0 5一3 0
作者简介 : 周丽 ( 19 7 8一 ) , 女 , 贵州兴义人 ,黔西南民族师范高等专科学校化生系教师 , 主要从事
生物学教学 , 园艺植物快速繁殖的研究 。
2 5 0 0年 周 丽 大岩桐快速繁殖的研究 第 2 期
将分化培养基上得到的一定数量的丛生芽 ,分割成单个小芽接种于 B 类培养基上进行快速繁殖的
试验 。 每瓶接 5 个芽 , 每个处理 5 个重复 。 试验处理见表 1 ,以 M S 为基本培养基 , p H值为 5 . 8 。 培养条
件 : 温度 25 土 1℃ ,每天光照 16 小时 ,黑暗 8 小时 , 光照强度 30 0 1: 。 接种后每两周观察记录一次 。
表 1 快速繁殖研究用的 B类培养基
处理 基本 激素组合 ( m g · L 一 ’ ) 活性炭 蔗糖 琼脂
培养基 mg · L 一 1 (% ) (% )B A N AA G A
B
-
M S 2 0
.
2 l 4o 3 0
.
6
B
2
M S 0
.
5 l l 4o 3 }
0
.
6
B 3 M S 1 0
.
5 l 4o 3 0
.
6
B
4
M S 0
.
5 l 0 4o 3 0
.
6
B
,
M S 2 0
.
2 0 4o 3 0
.
6
B。 M S l 0
.
5 0 4 o 3 0
.
6
2
、结果与分析
( l) 愈伤组织的诱导
外植体接种后 , 在切 口处或损伤操作处形成无序生长薄壁细胞团— 愈伤组织 。 H ar be lr an dt 认为受伤植物细胞释放出一种 “ 损伤激素 ” , 损伤激素与外植体里的另一种激素互相作用促进伤口处形成愈
伤组织 。 当其中一种激素停止供应 ,细胞分裂停止 ,愈伤组织的形成量不再增加 。 因而 , 在早期生长旺盛
的愈伤组织一般呈乳黄色 、 白色 、 浅绿色或绿色 , 有光泽 : 而老化的愈伤组织多转变为黄色甚至褐色 ,不
及时转接培养还会死亡 。 将愈伤组织在分化培养基上继代培养便可得到丛生芽 。
( 2 )芽的增殖
将单芽接种在 B类培养基上 , 一周内变化不大 , 两周后先是切口处的横切面膨大 , 芽长出并在叶腋
处长出定芽 ; 随着培养时间的增长 , 切口膨大处形成愈伤组织并不断分化形成不定芽 , 定芽的生长也不
断增加 。 根据最后一次试验记录对每种处理中生成芽总数进行统计分析 ,方差分析结果 (见表 2) 表明在
六个处理中 B . 的增殖效果显著高于其它五种处理 , 芽的增殖总数 、 增殖系数均为最高值 , 芽的健壮程
度仅次于 B , ; B 3对芽增殖的效果较好 ,芽较壮 ,但在芽总数和增殖系数方面仍与 B : 有一定的差距 ;在 B4
中 , 外植体的重量有所增加 , 形成愈伤组织 , 但芽增殖总数和增殖系数均为最低 ,芽生长势弱 ; B , 中芽长
得很壮 ,后期长出的叶片也要大一些 , 只是芽的增殖量要少一些 ,在生产中利于生产优质壮苗 。
表 2 不同培养基对丛生芽增殖的影响
处 理 接种芽数 (个 ) 增殖总数 (个 ) 增殖系数
B 1 2 5 30 2 12
.
0 8

B 2 2 5 2 3 8 9
.
5 2 b
B 3 2 5 2 6 9 10
.
7 6 、
B 4 2 5 2 1 7 8
.
6 8 、
B 5 2 5 2 5 1 10
.
0 8 、
B 6 2 5 1 8 7 7
.
4 8 、
(3) 分析讨论
从外植体重量的增加来看 (见图 1 ) , B : 与 B , 的相差并不是很多 ,但实际效果则是 B : 有利于芽的增
20 5 年 黔西南民族师范高等专科学校学报 第 3 期
殖 , 而 B , 有利于壮苗 ,两种培养基的差别在于 GA 的含量 , G A 在叶的培养过程中 , 可从细胞分裂和细胞
扩大两方面引起叶面积扩大13 ,所以在培养前期 ,重量的增加来源于细胞数目的增加和细胞体积的增大
两方面 , 细胞数目增加了 , 分化的芽数量也会多一些 : B A对离体叶片组织的生长有促进作用 , 表现为叶
面积或鲜重的增加 , 但这种生长不是通过细胞分裂而是通过细胞体积扩大进行的 , 因而 B , 中增殖的胞
不如 B : 中的多 ,芽的增殖数也不及 B , 多 ,但是由于营养物质充分 ,所以芽长得壮 。 B ,和 B 3 ,对芽的增殖
效果 比的 B : 好 , B , 和 B` 对芽的增殖效果比 B ` 的好 ,这是因为 BA 在高浓度下促进芽的形成 ,这种作用
在低浓度的 N A A 共存的条件下得到加强 13 `几 5) 。
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图 1培养过程中外植体重量的变化图
除了激素种类及用量外 , 芽的切割部位 、 分化程度对芽的增殖也存在一定的影响 , 在试验过程中尽
量减少人工操作引起的误差 。 方差分析的结果表明 ,所做的六个处理存在显著差异 , B : 增殖系数最高有
利于快速萦殖 , B , 有利于壮苗 。 从芽的分化速度来看 (见图 2) 。 芽在前四周增殖速度快 ,后来虽能增殖
但速度减慢且芽较弱 ,这可能与培养基中的营养被消耗有关 。 所以增殖培养的时间应在一个月左右 。 一
个月后取一部分芽继代培养继续增殖 ,另一部分可用于生根。
图 2 培养过程中芽总数的变化
四 、生根移栽
待增殖所得芽长到一定大小后切割成单芽接种于生根培养基上生根 。 在生根培养基中 NA A 和 BI A
的组合生根多而粗 , 一周后开始长根 , 3一4 周便可移栽 , 若生根培养时间长 , 根老化后移栽成活率有所
降低 ; 仅加 N A A 的培养基中 , 3 周开始长根 , 根少而细 , 5一6 周后可在根茎部形成较小的块茎 , 随培养
时间的增加小块茎会长大 , 具有小块茎的小苗移栽后很易成活 , 即使地上的茎叶被虫吃掉 , 只要块茎还
250 0年 周 丽 大岩桐快速繁殖的研究 第 3期
在仍能发芽。 移栽基质 :蘑菇泥 : 腐殖土 : 珍珠岩 < 1: 2: l )掺有少量发酵有机肥 , 以渗透吸水方式浇透水 ,
用薄膜覆盖 7 天后打开 (室内移栽可不用 ) 。
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责任编辑 : 李隽群
(上接第 68 页 )的正三角形可作出 。 今后遇见 “ 求作合乎某一条件的正多边形 ” 时 ,可考虑采用旋转变换
寻求作图的线索。
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责任编辑 : 王家鑫
(上接第 7 页 )
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责任编辑 : 李隽群