免费文献传递   相关文献

水分胁迫对大岩桐生理生化指标的影响



全 文 :2013 年第 1 期 35
收稿日期:2012-10-07
作者简介:王存纲 (1977 -) ,男,河南信阳人,讲师,本科,从事园艺专业教学及相关研究工作。E-mail:hbwcg528@ 163. com。
文献著录格式:王存纲,郭丽 . 水分胁迫对大岩桐生理生化指标的影响 [J]. 浙江农业科学,2013 (1) :35 - 37,43.
水分胁迫对大岩桐生理生化指标的影响
王存纲1,郭 丽2
(1. 鹤壁职业技术学院,河南 鹤壁 458030;2. 河南农业职业学院,河南 郑州 475470)
摘 要:以大岩桐组培苗为试材,在 5%,15%,25%,35%的聚乙二醇 (PEG-6000,以下简称 PEG)人工
模拟干旱条件下进行干旱胁迫试验,对叶绿素含量、膜透性等几个生理生化指标进行测定研究。结果表明,大
岩桐对干旱胁迫非常敏感。在 PEG 5%浓度处理时,部分植株叶片就发生萎蔫甚至死亡。随着干旱胁迫浓度的升
高,叶绿素含量呈下降趋势,丙二醇和质膜透性呈上升趋势,过氧化物酶呈先升后降趋势。
关键词:大岩桐;干旱胁迫;抗性指标
中图分类号:S 68 文献标志码:A 文章编号:0528-9017(2013)01-0035-03
大岩桐原产南美洲巴西的热带雨林,属于温室
盆栽球根花卉。将试验获得的大岩桐组培苗利用聚
乙二醇 (PEG-6000,以下简称 PEG)人工模拟干
旱条件,从生理的角度对其抗旱性进行研究,测定
叶绿素、膜透性等生理生化指标的变化。
1 材料与方法
1. 1 供试材料
重瓣大岩桐品种由西南大学园艺园林学院花卉
实验室保存。
1. 2 供试材料的培养与处理
将生长均匀的大岩桐不定芽接种于 1 /2MS 固
体培养基上,在 24 ~ 26 ℃,光照 16 h·d - 1,光强
1 500 ~ 2 000 lx 条件下培养。
当生长均匀的组培苗长出大量根系时,将其上
部的培养基洗净放入干净的培养瓶中,分别加入
20 mL 浓度分别为 5%,15%,25%,35% 的 PEG
进行根际水分胁迫处理 24 h,以去离子水为对照,
重复 3 次。
均匀剪取组培苗叶片,用去离子水冲洗干净,
再用干净吸水纸吸干,混匀称重,进行叶绿素含量
(参考高俊凤[1]方法)、丙二醛 (MDA)含量 (硫
代巴比妥酸显色法[2])、电导率 (电导仪法[3],用
相对电导率表示)和过氧化物酶 (POD)活性
(愈创木酚比色法[1 - 3])测定。
2 结果与分析
2. 1 不同 PEG 浓度处理对抗旱性的影响
24 ~ 26 ℃组培室培养的大岩桐在 40% PEG 处
理 24 h,叶片完全干枯。因此试验设 PEG 5%,
15%,25%,35%不同处理浓度。35%处理使受试
植株几乎全部失水死亡,在 5%时部分植株叶片就
发生萎蔫,甚至死亡。这表明大岩桐植株对干旱非
常敏感。
2. 2 不同 PEG 浓度处理对叶绿素的影响
叶片叶绿素含量与光合作用密切相关。叶绿素
含量的测定无论是在生理、品种选育及抗性研究等
方面都很有必要,其含量多少直接影响叶片的光合
能力。
图 1 不同浓度 PEG 对幼苗叶绿素
含量的影响
从图 1 可知,不同 PEG 浓度处理下,叶绿素
含量随着 PEG 浓度的增大而降低,5% PEG 处理与
对照差异不显著,比对照含量减少了 0. 86%;
25. 0% PEG 处理比对照含量少了 19. 6%,35. 0%
PEG 浓度处理比对照含量减少了近 1 /2。这可能是
由于在各种逆境胁迫下,植物光合作用呈现出下降
的趋势,同化产物供应减少,如干旱、寒冷、高温
DOI:10.16178/j.issn.0528-9017.2013.01.038
36 2013 年第 1 期
等均可使叶绿素含量下降,光合作用酶活性下降,
钝化或气孔关闭,造成 CO2 供应不足而使光合速
率下降,同化物形成减少,叶绿素含量下降。
2. 3 不同 PEG 浓度处理对 MDA 的影响
MDA 是植物脂质过氧化的产物,是检测植物
膜伤害的一个重要的指标,其含量可以表示脂膜过
氧化的程度。
从图 2 看出,随 PEG 浓度的增大,大岩桐叶
片细胞内 MDA 含量的变化幅度有较大差异。在
5%,15%,25%浓度处理后,MDA 比对照分别增
加 48. 6%,108. 0%和 201. 5%,而 35% 浓度处理
后,MDA 比对照增加 325. 5%。MDA 含量的变化
在一定程度上反映了大岩桐对水分胁迫敏感程度的
差异。
图 2 不同浓度 PEG 对幼苗 MDA
含量的影响
2. 4 不同 PEG 浓度处理对相对电导率的影响
植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢
起着重要的作用。正常情况下,细胞膜具有选择透
性。当植物受到逆境胁迫影响时,如干旱和盐胁迫
下,细胞膜遭到破坏,膜透性增大,从而使细胞内
的电解质外渗,使植物细胞浸提液的电导率增大。
因此,质膜透性的变化是植物细胞结构和功能完整
性的可靠指标[4]。
在 PEG 渗透胁迫下,大岩桐幼苗膜透性随着
PEG 浓度的增加而呈上升趋势 (图 3)。5%,
15%,25%,35% PEG 浓度处理后,相对电导率
比 对 照 分 别 增 加 6. 3%, 12. 5%, 146. 9%
和 259. 4%。
在 5%,15% PEG 浓度处理下,与对照相比差
异不是太大,但 25%,35% PEG 浓度处理下,相
对电导率与对照相比发生极显著变化,出现了急剧
升高,说明在 PEG 渗透胁迫下,大岩桐幼苗细胞
受到了一定的伤害,而且渗透胁迫强度越大,受到
的伤害越严重。
图 3 不同浓度 PEG 对幼苗相对
电导率的影响
2. 5 不同 PEG 浓度处理对 POD 的影响
正常情况下,由于植物体内存在着活性氧,清
除系统细胞内活性氧含量处于动态平衡的状态,因
此不会引起对植物的伤害。植物细胞中活性氧的清
除主要是通过有关酶和一些抗氧化物质。细胞的保
护酶主要有超氧化物歧化酶 (SOD)、POD、过氧
化氢酶 (CAT)等,非酶类的活性氧清除剂包括类
胡萝卜素、Vc、Ve 等[5]。
从图 4 可知,不同 PEG 浓度处理后,POD 活
性呈先升后降趋势。5%浓度处理后,POD 活性呈
上升趋势,明显高于对照;15%,25%,35%处理
后,POD 活性均呈下降趋势。15% 处理虽 POD 活
性高于对照,但却低于 5%处理,35%时 POD 活性
甚至低于对照。所以轻度胁迫能促进 POD 活性增
高,但随着胁迫强度的增大,酶活性变化呈下降趋
势,可能使其酶系受到破坏。王启明等[6]研究表
明,随着干旱胁迫天数的增加,大豆酶活性变化趋
势均呈先升后降,达到峰值后迅速下降,说明抗旱
机制也仅维持到此而已。
图 4 不同浓度 PEG 对幼苗 POD
活性的影响
3 小结和讨论
植物遭受逆境胁迫或在衰老的进程中都伴随细
胞膜系统的逐步破坏。Fridovih 提出生物自由基伤
王存纲,等:水分胁迫对大岩桐生理生化指标的影响 37
害是细胞系统破坏的主要原因,认为植物体内大量
自由基产生的毒害引发膜脂过氧化作用,从而造成
细胞膜系统的破坏[7];细胞内同时存在清除超氧
自由基的保护系统,如 CAT,POD 和 SOD 等。水
分胁迫造成的膜系统伤害就是由细胞内活性
(O -2 )的产生与清除的不平衡引起的。植物处于
正常水分状态时,机体原有的各种氧代谢生理过程
处于平衡状态,所产生的氧自由基能够得到及时的
清除;在水分严重亏缺的条件下,植物机体各种代
谢过程发生紊乱,从各代谢途径产生的氧自由基增
加,机体由于代谢受阻不能及时清除而发生积累。
大量积累的氧自由基以强烈的氧化作用诱发细胞膜
中的不饱和脂肪酸,其产物是具有强氧化性的脂质
过氧化物的各种小分子的降解物,尤其以 MDA 含
量增高最为显著。因此,植物的抗旱性与活性氧清
除酶类的活性密切相关。
关于植物抗旱机理,自由基引起的伤害学
说[8 - 9]已受到人们的广泛重视,植物机体在正常生
理 代 谢 过 程 中,通 过 多 种 途 径 产 生 活 性 氧
(ROS)[10]。ROS 是成对电子,其化学性质极其活
泼,几乎可与植物体内全部生物大分子进行反应,
破坏这些大分子的活性构象,影响细胞正常代
谢[11]。正常情况下,植物体依赖体内 ROS 清除系
统包括 SOD、POD、CAT、甘露醇、甘氨酸、抗坏
血酸、类胡萝卜素等维持自由基生成与清除的动态
平衡,但在植物的衰老劣变过程中,特别是当植物
处于干旱、盐害和环境污染等逆境下,体内 ROS
生成大于清除,ROS 的大量积累与膜脂反应造成
膜伤害[12 - 15]。很多试验证实,轻度水分胁迫后,
SOD、POD、CAT 活性有增加趋势[16 - 17]。张振镒
等[18]发现,干旱胁迫可提高抗旱玉米叶片细胞保
护酶 SOD、POD 的活性,但随着干旱胁迫时间延
长,玉米叶片细胞保护酶活性不同程度地下降。
本试验结果表明,干旱胁迫明显地影响大岩桐
组培苗叶片活性氧的产生与活性氧清除系统 (即
细胞保护系统)之间的动态平衡。随着干旱胁迫
强度增加,POD 活性增大,这是大岩桐组培苗适
应干旱的一种应激保护反应。而当水分胁迫强度继
续增大,其活性下降,这是因为在高度的水分亏缺
环境下,植物严重脱水,POD 受到破坏而导致活
性降低,有机体内活性氧的产生与清除平衡系统遭
到破坏。如在 35% PEG 浓度处理下,POD 活性低
于对照。
膜脂过氧化是一个复杂的过程,而 MDA 含量
的高低表示了膜脂过氧化作用的程度[19 - 20]。本试
验结果表明,在水分胁迫下,O -2 和 H2O2 含量越
高,膜脂过氧化的终产物 MDA 也越高,说明水分
胁迫下活性氧的产生和积累是引起 MDA 含量增加
的主要因素。蒋明义等[21]的研究表明,抗旱性强
的品种具有较强抗氧化能力,膜脂过氧化程度低;
抗旱性弱的品种抗氧化能力较弱,膜脂过氧化程度
较高。MDA 含量随水分胁迫浓度增加上升,造成
膜伤害,增大细胞膜的透性,引起细胞内物质外
渗。细胞液外渗液增加,即表现为电导率增大。干
旱对细胞膜的伤害随着胁迫程度的提高而加大,且
胁迫程度越高,电导率就越大[22]。
光合作用是植物代谢的基础,而叶绿素是光能
吸收和转换的原初物质,因此,影响叶绿素代谢的
逆境因素都将直接影响植物的生长发育。植物在遭
受水分胁迫时抗旱性强的品种叶绿素含量比抗旱性
弱的品种叶绿素含量高,又进一步证明了抗旱性强
的品种受伤害程度越小。而在持续水分胁迫下,由
于活性氧的产生和清除平衡被打破,尽管植物体内
SOD、POD 活性上升到较高水平,但 O -2 和 H2O2
仍较快积累,MDA 含量持续升高,膜脂过氧化加
剧,进而影响光合、呼吸等生理过程,最终影响产
量和品质。
大岩桐的抗旱性是个复杂性状,其适应干旱环
境的机理尚不十分清楚,不同生育阶段对水分胁迫
的响应,活性氧积累诱发植物伤害的最低浓度以及
活性氧诱导保护系统的机理等还有待深入研究。
参考文献:
[1] 高俊凤 . 植物生理学实验技术 [M]. 杨凌:西北农业大
学,2000.
[2] 候福林 . 植物生理学实验教程 [M]. 北京:北京科学出版
社,2004.
[3] 李合生 . 植物生理生化实验原理与技术 [M]. 北京:高等
教育出版社,2000.
[4] 王荣华,石雷,汤庚国,等 . 渗透胁迫对蒙古冰草幼苗保
护酶系统的影响 [J]. 植物学通报, 2003, 20 (3) :
330 - 335.
[5] 姚允聪,曲泽洲,李树仁 . 不同浇水处理过程中柿幼树
SOD、CAT 和脂质过氧化作用的变化 [J]. 北京农学院学
报,1994,9 (1) :23 - 27.
[6] 王启明,郑爱珍,吴诗光 . 干旱胁迫对花荚期大豆叶片保
护酶活性和膜脂过氧化作用的影响 [J]. 安徽农业科学,
2006,34 (8) :1528 - 1530.
[7] 陈洪 . 木麻黄抗旱生理生化部分特性的研究 [J]. 福建农
业大学学报,2000,15 (1) :48 - 54.
(下转第 43 页)
陈加红,等:啶虫脒防治甘蓝蚜虫药效试验 43
d,40%啶虫脒水分散粒剂和 20%啶虫脒可湿性粉
剂的防效均为 100%,表明 2 种药剂对甘蓝蚜虫持
效期在 14 d 以上,且不同浓度 40%啶虫脒水分散
粒剂与 20%啶虫脒可湿性粉剂处理无显著差异。
表 1 不同处理药后对甘蓝蚜虫的防效
处理
药前虫
害指数
药后 1 d 药后 3 d 药后 7 d 药后 14 d
虫害
指数
防效 /
%
差异
显著性
虫害
指数
防效 /
%
差异
显著性
虫害
指数
防效 /
%
差异
显著性
虫害
指数
防效 /
%
差异
显著性
40%啶虫脒水分散粒剂 7. 500 g 100 0. 6 99. 4 a A 0 100 a A 0 100 a A 0 100 a A
40%啶虫脒水分散粒剂 8. 475 g 100 0. 3 99. 7 a A 0 100 a A 0 100 a A 0 100 a A
40%啶虫脒水分散粒剂 9. 375 g 100 0 100 a A 0 100 a A 0 100 a A 0 100 a A
20%啶虫脒可湿性粉剂 14. 000 g 100 0 100 a A 0 100 a A 0 100 a A 0 100 a A
清水 (CK) 100 100 0 100 0 100 0 100 0
注:处理栏单位面积以 667 m2计。同列数据后标有相同字母者表示差异不显著,标有不同小写字母者表示差异显著,标有不同大写字
母者表示差异极显著。
3 小结与讨论
试验结果表明,40%啶虫脒水分散粒剂对蚜虫
防效较为理想,该药剂渗透性好,且有速效性和持
效性,药后 1 d 可杀死叶片上的全部蚜虫,持效期
可达 14 d 以上,对作物生长安全。
生产上用 40% 啶虫脒水分散粒剂来防治甘蓝
蚜虫,适宜在蚜虫盛发期或若虫危害高峰期使用,
每公顷用药 45. 00 ~ 56. 25 g (有效成分含量) ,对
水 750 kg,对作物的叶面进行喷雾施药可达理想的
防治效果 (药液触及虫体效果更佳) ,667 m2用药
液量视作物的大小酌情而定,以均匀喷湿叶面为
宜。同时也应重视面临的抗药性问题,合理选择农
药交替使用。
参考文献:
[1] 刘浩强,李鸿筠,冉春,等 . 啶虫脒 5 种常用剂型对柑桔
蚜虫类害虫的田间药效评价 [J]. 中国南方果树,2010,
39 (4) :40 - 41.
[2] 王树芹,郭玉玲,庞淑婷,等 . 不同类型药剂对 B 型烟粉
虱的毒力作用评价 [J]. 浙江农业学报,2008,20 (5) :
367 - 372.
[3] 夏万青,吴永汉,刘福明,等 . 6 种药剂防治烟粉虱田间
药效试验 [J]. 浙江农业科学,2009 (4) :764 - 765.
[4] 师宝君 . 7 种杀虫剂防治甘蓝蚜虫田间药效试验 [J]. 安
徽农学通报,2011,17 (17) :102 - 103.
(责任编辑:张瑞麟
檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪檪
)
(上接第 37 页)
[8] Bewkey J D. Physiological aspects of desiccation tolerance[J].
Ann Rev Plant Physio,1979,30:195 - 238.
[9] Dhinsa R S,Wandckayim. Drought tolerance in two mosses:
correlated with enzymatic defence against lipid peroxidation
[J]. J Exp Bota,1981,32 (126) :79 - 91.
[10] Elster E F,Harald S. Biological socources of free radical [J].
Free Radical in the Enviro,1994,7:13 - 15.
[11] 王建华,刘鸿先 . SOD 在植物逆境及衰老中的作用 [J].
植物生理学通讯,1980 (1) :1 - 7.
[12] 王俊刚,陈国仓,张承烈 . 水分胁迫对 2 种生态型芦苇
(phragmites communis) 的可溶性蛋白含量 SOD、 POD、
CAT 活性的影响 [J]. 西北植物学报,2002,22 (3) :
561 - 565.
[13] Smirnoff N. The role of active oxygen in the response of plants to
water deficit and desiccation [J]. New Phytol,1993,125:
27 - 58.
[14] Sigha S,Choudhuri M A. Effect of salinity (NaCl) stress on
H2 O2 metabolism in vigna and oryza seedlings [J]. Biochem
Physiol Pflanzen,1990,186:69 - 74.
[15] Tanaka K, Sugahara K. Role of superoxide dismutase
indefence against SO2 toxicity and increase in superoxide
dismutase activity with SO2 fumigation [ J]. Plant Cell
Physiok,1980,21:601 - 611.
[16] 陈由强 . 水分胁迫对芒果幼叶细胞活性氧伤害影响 [J].
生命科学研究,2000,4 (1) :60 - 64.
[17] 林永英 . 水分胁迫对青冈叶片活性氧的伤害 [J]. 福建林
业大学学报,2002,22 (1) :1 - 3.
[18] 张振镒,郭蔼光,罗淑萍 . 水分胁迫对玉米 SOD 和 POD 活
力及同工酶的影响 [J]. 西南农业大学学报,1989,17
(1) :45 - 49.
[19] 唐连顺,李广敏 . 干旱对玉米杂交种及其亲本自交系幼苗
膜脂过氧化及其保护酶活性的影响 [J]. 作物学报,
1995,21 (4) :409 - 512.
[20] 蒋明义,郭绍川 . 渗透胁迫下稻苗中铁催化的膜脂过氧化
作用 [J]. 植物生理学报,1996,22 (1) :6 - 12.
[21] 蒋明义,杨文英,徐江,等 . 渗透胁迫诱导水稻幼苗的氧
化伤害 [J]. 作物学报,1994,20 (4) :733 - 738.
[22] 李培英 . 优良草坪草研究 [M]. 北京:北京农业出版
社,2001.
(责任编辑:张瑞麟)