全 文 ： 2007, Vol. 28, No. 10 食品科学 ※分析检测460
而普通分光光度法在0.5～10.0μg铜/10ml萃取液的范围
内却不能保持良好的线性关系(R=0.9322)，说明示差光度
法能够使工作直线的有效范围向下延伸，能够测量更低
含量的样品。
2.4样品测量与回收实验
取适量市售大米粉碎，过20目筛子，混匀。用
分析天平准确称取3～5g试样，置于瓷坩埚中，加5ml
硝酸，放置0.5h，小火蒸干，继续加热炭化，移入
马弗炉中，500±25℃灰化1h，取出放冷，再加1ml
硝酸浸湿灰分，小火蒸干。再移入马弗炉中，500℃灰
化0.5h，冷却后取出，以1ml硝酸(1+4)溶解4次，移
入25ml容量瓶中，用水稀释至刻度。同时制取试剂空
白液。分别吸取10ml样品硝解液和同量的试剂空白液，
按实验方法操作，并采用加标回收的方法测定回收率，
结果见表1。
样品 样品平均值(μg/g)加标量(μg/g)测得总量(μg/g)回收率(%)
1 1.0 1.84 96.0
2 1.0 1.91 103.0
3 0.88 1.5 2.40 101.3
4 1.5 2.33 96.7
5 2.0 2.87 99.5
表1 样品的回收率
Table 1 Recovery rate of sample
3 讨 论
提高紫外可见吸收光谱法灵敏度的方法有不少，比
如通过样品浓缩富集、采用催化光度法等，但是方法
的操作难度和分析成本也提高了。本实验是对国家标准
方法“二乙基二硫代氨基甲酸钠法”的改进，仅仅通
过0%透光率的调整方法的改变，就提高了方法的灵敏
度，方法简便易学，容易操作，值得推广。
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收稿日期：2007-06-19 * 通讯作者
基金项目：吉林省科技厅农业重点研究项目(20050567)
作者简介：王二雷(1981-)，男，硕士研究生，研究方向为营养与功能食品。
笃斯越桔中花青素含量分析
王二雷，林松毅，刘静波*，张 巍
(吉林大学军需科技学院营养与功能食品研究室，吉林 长春 130062)
摘 要：笃斯越桔花青素是一类水溶性黄酮类化合物，具有多种生理保健功能，本实验以长白山笃斯越桔为研究
对象，在确定笃斯越桔花青素含量检测方法的基础上，对不同部位花青素含量进行了分析研究，为深入研究长白
山笃斯越桔花青素提取纯化技术及其保健功能特性奠定研究基础。
关键词：笃斯越桔；花青素；检测方法；不同部位
Study on Content Analysis of Anthocyanidin in Vaccinium uliginosumL.
WANG Er-lei，LIN Song-yi，LIU Jing-bo*，ZHANG Wei
(Laboratory of Nutrition and Functional Food, College of Quartermaster Technology, Jilin University, Changchun 130062, China)
Abstract ： n hocyanidin in Vaccin um uliginosumL. is a kind of water-soluble flavanoid , which is great help to physiological
functions of human beings. After a method was established to determine the content of anthocyanidin in Vaccinium uliginosu
461※分析检测 食品科学 2007, Vol. 28, No. 10
L., the content of anthocyanidin in different parts of Vacc n um uliginosumL. was studied respectively, furthermore, it laid a
foundation for a further research on the purifying technology as well as the functional characteristics about Vaccinium uliginosum
L. from Changbai Mountain in Jilin Province.
Key words：Vaccinium uliginosum L.；anth cyanidin；determination；different part
中图分类号：TS207.3 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2007)10-0460-04
笃斯越桔隶属于杜鹃花科，约有300多种，国外
广泛作为食品、酿酒和提取天然色素的原料。笃斯越
桔中所含花色甙常见的主要有1 5种，即矢车菊素
(cyanidin)，翠雀花素(delphinidin)、锦葵花素
(malvidin)、芍药花甙元(peonidin)和矮牵牛甙元
(petunidin)等5种甙元与葡萄糖、阿拉伯糖和半乳糖3种
糖基所组成的单糖至三糖甙，不同组间所含甙的种类与
含量不同[1]。此外尚报道有其它甙元，如天竺葵甙元
(pelargonidin)和鼠尾草甙元(salvidin)等[2]。在欧美市售
“越桔生(Myrtocyan)”为笃斯越桔的高纯度提取物制
剂，其主要成分为花色素甙类化合物，含量为36%[3]，
广泛用于治疗微循环失调，抗溃疡、抗炎症等多种药
理活性。本实验在确定笃斯越桔花青素含量检测方法
的基础上，对不同部位花青素含量进行了分析研究，
为深入开发、利用长白山笃斯越桔花青素提供必要的
理论基础。
1 材料与方法
1.1材料与仪器
笃斯越桔：采摘自吉林省长白山白河林业局。
锦葵色素标准品：Malvinidin Sigma公司；盐酸
(AR)、甲醇(AR)、乙醇(AR)等 北京化工厂生产。
752紫外可见分光光度计、万能粉碎机、赛多利斯
电子分析天平、恒温水浴锅、微量进样器均由吉林大
学军需科技学院营养与功能食品研究室提供。
1.2花青素检测方法
1.2.1检测波长的确定
精密称取定量锦葵色素标准品溶液至10ml容量瓶
中，用2 %的盐酸甲醇溶解，并定容到刻度，即得到
0.1mg/ml的锦葵色素标准品的溶液，以2%的盐酸甲醇
溶液为空白，通过紫外可见光光度计的全波长扫描，确
定花青素的最大吸收波长。
1.2.2回归方程的建立
配制0.1mg/ml的锦葵色素标准品的母液如表1所
示。分别精密移取上述溶液0、0.4、0.8、1.2、1.6、
2.0、2.4ml到10ml容量瓶中，用2%的盐酸甲醇定容至
刻度。锦葵色素标准品的浓度分别为0、4、8、12、
16、20、24μg/ml。用2%的盐酸甲醇作空白。
1.2.3精密度实验
精密吸取标准品母液0.4ml，用2%的盐酸甲醇定容
到10ml，在546nm处测其吸光度值，重复五次实验。
1.2.4重现性实验
取同一批次笃斯越桔果实冻干粉末0.2g(5份)，精密
称定，按供试品溶液制备方法平行制备样品供试液5
份，各取0.4ml按显色检测液制备方法测定吸光度。
1.2.5稳定性实验
取处理好的笃斯越桔果实样品供试品溶液3ml，按
供试品溶液和显色检测液制备方法制备，每隔1h，以
2 %盐酸甲醇为空白对照，测定吸光度值，连续测定
6h。
1.2.6加样回收率实验
精密吸取0.8ml浓度为7.274μg/ml的花青素对照品溶
液6份，分别加入6份已知花青素含量为10.992μg/ml的
越桔果实提取液，测定吸光度，根据回归方程计算回
收率。
1.3花青素提取方法
先对笃斯越桔的枝干，叶子，果实进行预处理。
枝干和叶子可采用万能粉机粉碎后过120目筛，果实
可采用真空冷冻干燥后研成粉备用。参照Chiriboga
和Francis的实验方法[4]略加改进，采用提取溶剂为
0.25mol/L的HCl与体积分数为95%的乙醇(体积比15:85)
的混合溶液，提取时间为1h，提取温度为60℃，提取
次数为两次，然后过滤，取滤液进行含量测定。
1.4样品液中花青素含量计算
分别对枝干、叶子、果实中的花青素含量进行测
定，平行测定三次，取平均值。从样品提取液V2中
精密称定V3到容量瓶V1中，2%的盐酸甲醇溶解并定
容到刻度。2%的盐酸甲醇作空白。在546nm处测定其
吸光度值。花青素含量按公式(1)计算：
A V 1
花青素含量(%)=——×V1×——×—————×100
K V3 W×10
6
(1)
式中，A为最大吸收峰位置处的吸光度；K为标
母液吸取量(ml) 0 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0 2.4
2%盐酸甲醇加入量(ml)16 9.6 9.2 8.8 8.4 8.0 7.5
定容后浓度(μg/ml) 0 4 8 12 16 20 24
表1 笃斯越桔花青素标准曲线制作中所用到的溶液配比
Table 1 Ratio of solution used in drawing the standard cure
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准曲线斜率；V1为供试液体积(ml)；V2为提取液总体积
(ml)；V3为吸取V2中吸取用于检测的提取液体积(ml)；
W为样品的初重(g)。
2 结果与分析
2.1花青素标准品的光谱扫描结果
通过紫外可见光分光光度计的全波长扫描花青素标
准品可知其最大吸收波长在546nm处，且将从笃斯越桔
中提取物进行扫描可知提取物质属于花青素类。
品溶液在4～24μg/ml浓度范围内，线性良好，符合比
尔定律，标准曲线如图2所示。
2.2回归方程的确定结果
将所得的数据进行回归处理，得回归方程
y=0.0258x－0.0016(R=0.9998)，结果表明，花青素对照
样品号码 精密度 重现性 稳定性
1 0.101 0.235 0.237
2 0.103 0.243 0.242
3 0.102 0.243 0.238
4 0.104 0.244 0.240
5 0.102 0.238 0.241
平均值 0.102 0.241 0.240
RSD 0.011 1.626 0.777
表2 笃斯越桔花青素精密度、重现性、稳定性实验结果
Table 2 Results of precision, reproducibility and stability
0.8
0.6
0.4
0.2
0
0 4 8 12 1620 2428
吸
光
度
花青素标准液浓度(μg/ml)
图2 笃斯越桔花青素标准曲线
Fig.2 Standard cure of anthocyanidin in Vaccinium uliginosum L
取样量(ml) 原含量(μg) 标准样加入量(ml) 标准样含量(μg) 平均吸光度 实测量 加样回收率(%)
1 0.8 7.274 0.8 8.793 0.259 16.161 100.581
2 0.8 7.274 0.75 8.244 0.251 15.175 97.792
3 0.8 7.274 0.7 7.694 0.248 14.511 96.947
4 0.8 7.274 0.65 7.144 0.242 13.690 94.949
5 0.8 7.274 0.6 6.595 0.252 13.761 99.220
6 0.8 7.274 0.55 6.045 0.238 12.537 94.125
表3 加样回收率实验数据
Table 3 Results of recovery
2.3精密度、重现性、稳定性实验结果
从表2数据可以看见，用分光光度法测定笃斯越桔
中花青素含量，精密度、重现性、稳定性实验结果都
表明相对标准偏差较小，说明该方法的精密性良好，测
定结果较满意，测定条件易控制，能够满足长时间的
样品液处理而不变质。
2.4加样回收率实验
根据回归方程计算回收率，所得的实验数据结果见
表3所示。
由表3可见，本实验的回收率结果比较好，说明
了本测量方法的误差小，可以做为本实验的检测方法。
2.5笃斯越桔中不同部位花青素含量测定实验结果
463※分析检测 食品科学 2007, Vol. 28, No. 10
按照花青素的检验方法分别对笃斯越桔中的果
实，叶子，枝干中的花青素含量进行分析的结果如表
4所示。

样品初重(g) 吸光度
检测样品 花青素含量 花青素含量
液体积(ml) (%) 平均值(%)
0.50040.251 0.4 2.446
0.50080.254 0.4 2.473
果实初重
0.50020.249 0.4 2.427
2.424
0.50220.242 0.4 2.350
0.50920.245 0.4 2.346
0.50270.258 0.4 2.502
1.00180.132 0.8 0.323
1.00040.128 0.8 0.314
叶子初重
1.00160.176 0.8 0.430
0.351
1.00990.156 0.8 0.378
1.00830.145 0.8 0.352
1.00720.128 0.8 0.312
1.00020.014 0.8 0.038
1.00040.01 0.8 0.028
枝干初重
1.00020.018 0.8 0.047
0.038
1.0030.013 0.8 0.035
1.0030.014 0.8 0.038
1.00420.015 0.8 0.040
表4 笃斯越桔不同部位花青素含量分析表
Table 4 Analysis of content of anthocyanidin in different part of
Vaccinium uliginosum L
量，约占0.351，含量最低的是枝干中，几乎非常少。
3 结 论
3.1首次设计了用酸化的盐酸甲醇做检测液，利用分
光光度法对笃斯越桔中的花青素含量进行了测定，弥补
了仅用高效液相测定花青含量的空白，方便了花青素含
量的初步测定。
3.2对笃斯越桔不同部位的花青素进行含量测定，
测得的结果为果实冻干粉占2.424%，叶子中含量占
0.351%，枝干中占0.038%。
3.3野生笃斯越桔在我国东北地区分布广泛，但一直
未被完全重视起来，存在着大量的资源浪费。对笃斯
越桔中花青素的具体成分的研究，还需要进一步的探
索，为广泛开发其在食品医药领域意义重大。
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从表4中可以看出，花青素含量最多的是果实中的
含量，约占果实冻干粉的2.424%，其次是叶子中的含
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信 息
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美科学家发现气味感知基因
美国杜克大学和洛克菲勒大学研究人员发表报告称，人体的一种气味感知基因决定着人们对人体汗液气味的
“看法”。人类对气味的感受存在个体差异的谜团就此揭开。
这项研究结果于9月16日在《自然》杂志网站上公布。由于它认为人类气味感知基因决定着人们对气味的不
同感受，这项研究成果成为生物学气味感知研究领域的一大突破。
研究人员从人体汗液中的雄脂酮入手，成功找出造成人类气味感受个体差异的关键因素——气味感知基因。
雄脂酮是睾丸激素分解后形成的一种化学成分，通常存在于男性和女性分泌的汗液中，但在男性汗液中的含量
更高。
杜克大学研究人员松南宏明(音译)和同事首先选择了400种已知能够辨别气味的感知基因，并对它们中分辨男性
汗液气味的化学成分进行研究。
他们随后发现，一种名为OR7D4的基因表现“抢眼”，对随汗液分泌的男性荷尔蒙雄脂酮反应强烈。
经过对400名测试者血样中的脱氧核糖核酸(DNA)进行排序比对，研究人员发现，基因OR7D4的个体差异决定
着人们对雄脂酮气味的感受。这也正是为什么对于同一种汗液，有人会觉得刺鼻，有人会觉得像香草般香甜，而
有人则什么感觉也没有。