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稀土在球兰组织培养技术中的促根研究



全 文 :现代农业 2015 年 6 期
给读者提供学术资源,还要引导读者选择其所需要的
学术资源。 由于各数据库之间重复的信息资源较多,
需要图书馆期刊馆员对各个数据库进行分析对比,提
供各数据库较为详细系统的资料,最后进行提炼筛选
提供给读者,节省读者的时间。 同时馆员还要对读者
进行培训来提高数据库的使用效率。 其次,对现有的
馆员进行轮班参观培训, 走出去向先进的同行学习、
交流,开阔视野,增加干劲。请进来相关专家进行现场
培训和指导。送出去接受图书馆的业务的培训。总之,
高职院校的期刊管理人员要不断提高自身素养,提高
从事图书馆现代化服务的能力和信息处理技术能力,
语言编程能力,还要具备一定的外语水平和广博的知
识。这样图书馆的期刊资源就能切实发挥其巨大潜力
和优势,有了这样一支高水平、高技术的服务队伍,高
职院校图书馆的期刊工作一定会越来越好。
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参考文献:
[1]张红.王石平.基于成本控制的高校图书馆期刊管
理策略[J].大学图书馆学报.2011(2)64-67.
[2]蔡玉敏.提高图书馆学术期刊质量的思考[J].图书馆
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[4]王蓉.地方高校图书馆特色数据库建设实践与思考
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稀土在球兰组织培养技术中的促根研究
唐 敏
成都农业科技职业学院
[摘 要] 目的:研究不同种类的稀土对观赏植物球兰组培苗生根的影响,为稀土元素在植物生根上的运
用提供参考。 方法:利用植物组培培养技术,建立球兰的无菌系,在生根培养阶段添加不同浓度的氯化镧、硝酸
镧,并以零添加为对照,确定生根培养基中添加稀土的最佳浓度。 结果:0.2毫克 /升氯化镧和 0.4~0.6毫克 /升硝
酸镧促进球兰根系生长效果最佳。 结论:氯化镧和硝酸镧对球兰根系的作用在浓度上有所区别。 氯化镧促根作
用浓度较低;而硝酸镧的浓度则相对高一些,而当两者浓度达到峰值时,其浓度越高,抑制生长作用越强。
[关键词] 稀土 球兰 组织培养技术 生根率
球兰(拉丁学名:Hoya carnosa(L.f.R.Br),又名:
马骝解、狗舌藤、铁脚板等,属捩花目萝藦科球兰属植
物。 攀援灌木,附生于树上或石上,茎节上生气根。 分
布于云南、广西、广东、台湾;热带及亚热带其他地区
也有栽培或野生。球兰开花时绽放一簇簇伞形的腋生
聚伞花序,常常由 12~30朵星状小花聚集成球形,故名
球兰[1]随着植物组织培养技术的发展,球兰通过组培
技术进行商业化批量培育生产已是趋势。传统的球兰
的培育几乎都是通过扦插繁殖法, 但此繁殖法生根
慢,成活移植后,发苗势不旺,生长也比较缓慢。因此,
通过组织培养技术来繁殖球兰,是解决以上繁殖问题
的重要技术手段。 目前,球兰的组织培养技术在实验
室阶段性实验已有报道,有了建立起无菌系并能扩繁
的先例, 然而此技术日前还只停留在实验室可行阶
段,只是提供了应用组织培养技术的手段,而非是良
好运用组织培养技术的方法。 随着市场的需要,组织
培养技术应用在球兰的培育上,主要是期望能进行批
量生产并提高瓶苗的移栽成活率,这也是目前亟待解
决的重点问题。 而要提高瓶苗的质量和移栽成活率,
在球兰组织培养的过程中,组织培养的生根培养基配
方是关键。本实验在球兰的生根基础培养基配方中添
加了稀土元素,在实验结果中得到了明显的效果。
一、材料与方法
1.外植体选取
从市场上买入较好的球兰品种, 选择长势较好,
无病虫害的若干成熟叶片作为外植体。 氯化镧 Lacl3
和硝酸镧 La(NO3)3 为国产分析纯。
2.外植体消毒灭菌
将外植体的叶片用洗衣粉溶液洗涤,然后用清水
冲洗 20 分钟;在超净工作台上,用体积分数为 75%
乙醇溶液浸泡 15 秒,无菌水冲洗 2 次,再置于 0.1%
升汞溶液中浸泡 10分钟,最后用无菌水冲洗 4~5次,
滤干水分;用解剖刀将经表面灭菌的叶片切成 0.5 平
方厘米的小块,待接种。
学 术 园 地
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DOI:10.14070/j.cnki.15-1098.2015.06.078
现代农业 2015 年 6 期学 术 园 地
3.培养基制备
(1)基本培养基的制备。 根据 MS 和 White 母液
成分及用量称取药品,使其充分溶解,并按相应浓度
分别依次取用,先量取大量元素母液,再依次加入微
量元素母液、铁盐母液和有机成分。
(2)按外植体诱导培养基、增殖继代培养基、芽分
化培养基及生根培养基来加入激素, 其分别添加为:
外植体诱导培养基: MS+KT 0.5 毫克·升 -1+6-BA
0.5 毫克·升-1+NAA 0.5 毫克·升-1;增殖继代培养基:
MS+6-BA 1.5 毫克·升-1+NAA 0.2 毫克·升-1;芽分化
培养基: MS+ KT 0.5 毫克·升 -1+ NAA 0.5 毫克·
升-1+ GA 1.0毫克·升-1; 生根培养基:White+GA 0.5
毫克·升-1+Lacl3或者是 La(NO3)3,其分别设置添加有
8 个不同浓度氯化镧和硝酸镧, 即: 氯化镧(0、0.2、
0.4、0.6、0.8、1、5、10 毫克·升 -1)+硝酸镧(0、0.2、0.4、
0.6、0.8、1、5、10 毫克·升-1)。
(3)溶化琼脂。称取琼脂 7克·升-1,用蒸馏水加热
烧开熔化琼脂,待琼脂完全熔化后,把调配好的激素
和稀土元素溶液加入,用 pH 试纸测 pH 值,并用 0.1
摩尔·升-1的 NaOH 或 Hcl 调节 pH 值为 5.8, 最后加
水定容至所需体积。
(4)分装。将配好的培养基分装于培养瓶中,分装
时注意不要把培养基倒在瓶口上, 以防引起污染,然
后用封口膜或瓶盖封口,装入高压蒸汽灭菌锅进行灭
菌。
4.组织培养
将外植体在超净工作台上接种于外植体诱导培
养基上,培养 30天后,将形成的愈伤组织用解剖刀进
行分切, 分别转接于增殖继代培养基上进行培养;愈
伤组织进行增殖继代培养后,再将其转接于芽分化培
养基上进行丛生芽和芽点的促生培养; 当芽生长至
2~3 厘米高的壮苗时,从瓶中取出,转入生根培养基
中进行生根培养。 以 0毫克·升-1作对照,生根苗每处
理 10 瓶,每瓶接种 5 株无菌幼苗,于光照强度 1500~
2000 勒克斯,光照时间 12 小时·天-1,温度(25±2)℃
的条件下培养,60 天后观察实验结果并对数据进行
统计分析。
5.移栽
将生根后的球兰组培苗进行炼苗后移栽。
6.数据测定与方法
接种 60 天后统计球兰生根数、生根率(生根率=
生根的丛生数 /接种的丛生数×100%)、根长(游标卡
尺测定) 以及存活率 (存活丛生数 /接种丛生数×
100%)。 每个指标重复 3次测定。
7.试验数据采用 spass16.0 软件进行单因素方差
分析。
二、结果分析
1.氯化镧对球兰组培苗的生根及抗性影响
表 1 氯化镧对球兰组培苗生根率及移栽成活率影响

/

 


/

%

%
CK 1.630.22de 2.240.13c 85.1020a 100.00a
0.2 2.860.54a 2.830.21a 100.00a 100.00a
0.4 2.620.16ab 2.630.13ab 100.000a 100.00a
0.6 2.440.12bc 2.440.12bc 93.3320a 93.3320a
0.8 2.240.11cd 2.330.15bc 86.6711.55a 86.6720a
1 1.960.16ee 1.520.17d 80.0020a 80.0020a
5 1.320.17f 1.330.16d 73.3320a 80.0020a
10 0.810.18f 0.910.15e 40.0011.55b 46.6711.55b
注:同列数值后不同小写字母表示差异达 5%显著水平
从表 1 看出,当 Lacl3的浓度为 0.2 毫克·升-1时,
球兰的根长、生根数、生根率及存活率都是最佳,分别
数值为:2.86、2.83、100及 100。由此得出,适当的添加
Lacl3,对球兰的生长是有利的,但当超过一定量值时,
随着浓度的增加,其效果越不理想。 Lacl3添加的最佳
浓度为 0.2毫克·升-1.。
2.硝酸镧对球兰组培苗的生根及抗性影响
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现代农业 2015 年 6 期
表 2 硝酸镧对对球兰组培苗生根率及移栽成活率影响
从表 2 得出结论, 当 La (NO3)3的浓度为 0.6 毫
克·升-1 时,球兰的根长生长指数最佳,为 3.53,而当
La(NO3)3的浓度为 0.4 毫克·升-1时,生根数为最佳值
3.66。当 La(NO3)3的浓度为 0.2~0.6毫克·升-1时,生根
率及存活率都是最佳,数值均为 100。由此得出,当 La
(NO3)3的浓度为 0.2~0.6毫克·升-时,对球兰的生长是
有利的,但当超过 0.6 毫克·升-时,随着浓度的增加,
其效果越不理想。La(NO3)3添加的最佳浓度为 0.4~0.6
毫克·升-1。 在促进球兰的根长生长时,La(NO3)3的浓
度以 0.6毫克·升-为最佳, 而较低的浓度则有利于根
系的数量增长, 当 La (NO3)3的浓度为 0.4 毫克·升-1
时,其生根数较多。
三、讨论
大量研究表明,稀土元素具有一定的生理调控特
性,对植物生长发育和品质改善具有促进作用,但根
据相关文献资料看出,不同材料所用稀土种类、浓度
和不尽相同,因此确定特定植物、组织、器官的最佳稀
土种类、浓度需要不断摸索[2,3]。
从以上表中看出, 稀土浓度较低浓度时, 即在
0.2~0.6 毫克·升-1 时对球兰根系的生长有一定促进
作用,但随着浓度的不断升高,反而起到了抑制作用,
与段晓宇等 [4]在稀土对细茎石斛组培苗影响的研究
结果有一致性。 据文献,稀土元素具有一定的生理活
性,影响植物的外部形态和生长发育,对植物有较好的
抗逆效应[5],可促进植物根系生长发育,影响酶活性[6]。
在本实验中,稀土对根的促进作用很明显。在表 1中,稀
土 Lacl3 对球兰的促根作用峰值为浓度达 0.2 毫克·
升-1,其根长和数量都达最佳。 在表 2中,稀土 La(NO3)3
对球兰的促根作用峰值为浓度达 0.6毫克·升-1时,其
根长是最佳值,在一定范围内,较高浓度有利于根的伸
长生长;促根数量最佳浓度峰值为 0.4毫克·升-1。周青等
[7]在对 La在大豆幼苗作用的研究中得出,其机制在于
La能促进植物光合作用 ,增加叶绿素含量 ,提高硝酸
还原酶和脱氢酶活性,促进根系生长。
本实验研究发现,氯化镧和硝酸镧对球兰根系的
作用在浓度上有所区别。 氯化镧在浓度为 0.2 毫克·
升-1时, 球兰的根在长度和数量上都达到了显著;而
硝酸镧的浓度则相对高一些, 在达到 0.4~0.6 毫克·
升-1时,其促根作用才得到显著表现。
本研究中,稀土对球兰组培苗的生根率和存活率
(抗逆性)有一定影响,在一定浓度范围内有所良好表
现,但差异不显著,但是超出了一定浓度,氯化镧在超
过 0.6毫克·升-1和硝酸镧超过 0.8毫克·升-1时,表现
出抑制作用。 据文献报道,使用稀土,可增强作物对不
良环境条件的抵抗能力, 但高浓度稀土则效果不明
显,甚至产生药害。 对于稀土元素能增强作物的抗逆
性, 宁加贲认为在于稀土离子能与细胞膜的磷脂结
合,调节钙的代谢,并取代 Ca2+离子,参与与 Ca2+有关的
许多生理过程。 所以,稀土离子能维持细胞膜的通透
性和稳定性,提高细胞膜的保护功能,增强作物对不良
环境的抵抗能力。
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参考文献:
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 /      / % %
CK 1.620.19c 2.230.17d 80.0020a 100.00a
0.2 3.150.21b 3.400.22a 100.00a 100.00a
0.4 3.330.15a 3.660.21a 100.00a 100.00a
0.6 3.530.19a 3.450.15a 100.00a 100.00a
0.8 3.180.21b 2.960.18bc 93.3320a 93.3320a
1 2.410.17b 2.730.17c 86.6720a 86.6720a
5 1.590.19cd 2.350.15d 80.0020a 86.6720a
10 1.280.17d 1.620.21e 46.6711.55b 66.6720b
注:同列数值后不同小写字母表示差异达 5%显著水平
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