全 文 ：用组织培养技术繁殖巨按和亮果按
维特 凡特斯 兰 大学植物学 系
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u r z e和 C . F . C r e s s w e l l
摘 要
卞文叙述 了巨按 ( 三cu al 了p t o s g : a n id s ) 和亮果按 ( E . in t e n s ) 实生苗 以 及 巨 按萌
芽 枝节之外 咬休进 行组织培养时 , 对培养基和植物生长调节剂的要求 。
引 言
按树被认为是一种生长迅速 、 适应性强和高产的森林树种 , 在南非为了提高产量 曾研究
了一种增加森林生严率的方法 , 尤其适合于木材生产不高的地区 。
按树林的夭然更新主要靠萌芽更新和种子繁育 , 但是这个繁殖过程缓慢 , 因为按树开花
前的幼年期较长 。 ’片枚树达到林学家和遗传学家认为的能容易增殖的生 长阶段之前 , 其无性
繁殖同样也是困难的 。 虽然嫁接和常规的无性繁殖方法如插条和压条等具有营养繁殖的可能
性 , 但 由于成熟的组织不能很成功的得到 , 因而用组织培养微型繁殖法则能提供一种可供选
择的无性繁殖方法 。
然而在南非这个部门已展开了小型研究 。 这类文章叙述了巨按以幼芽和根部萌芽以及亮
果按 以幼芽为外植体的繁殖技术 。 亮果按是最抗冻 的树种之一 , 它有一个非常重要的因素是
能在高草原上生长 , 因为在这种地方对于按树生长是一个限制性的因子 。 另外 , 亮果按结子
较其它树种晚 , 同样嫁接成活率也低 , 因此其繁殖是困难的 。 巨按是最适合于南非生长的按
树 , 它占据 了按树林面积的7 % 。 因此选择具有较好基因型 , 尤其是树千通直的树木 , 对增
加其产量在经济上就具有非常的重要性 。
一些繁殖步骤包含用植物组织培养产生小苗 , 本文有所叙述 。 即用腋芽为外殖体 . 进行
培养 . 使其分化 、 尘根 、 长成幼苗和进行移植等等 。
材料 、 方法和结果
巨按和亮果按种子发芽在室内进行 ,受温度控制 。 生根萌芽 条由D . R . de w e t森林研究
中心 S a b沁进行 , 同样在室 内保持 湿润 。 由二个月左右幼苗的萌生嫩芽 _仁切取长 l , l m的茎 ,
包括两片已剪去 去的叶片和叶柄 。 听取外植体表面先用 10 %次氯酸钠盐消毒十分钟 , 再用无
菌蒸馏水洗三次 , 然后垂直地放在 2 5 x 扮 。m m 试管中的固体培养基上 。 所有程序在 一卞无菌
装置箱内进行 。
在培养基中有各种不同浓度的生长调节剂和激素 , 如玉米素 、 激动素 、 6 一苯基喋吟 、
赤霉素 、 蔡乙酸和叫噪 乙酸 , 在不同生长阶段进行试验 。
初期 ( 开始的头七天 ) 培养基置于暗处 , 温度保持在 2 5 ℃ 。 然后转移到培养室 , 维持温
度 25 ℃和每天 16 小时的光照 。 最初的暗期是为抑制酚类物质的产生所必需的 。 因为 酚类极易
对按树造成损害 , 因而对按树 的外植体是 无益的 。 三个星期后 , 最初接种在培养基上的带腋
芽的外植体 , 开始从叶柄的基部长出 。 到那时再将腋芽切除并培养在新鲜的培养基上 以扩大
繁殖 ` , 这个分化培养基中的细胞激动素的浓度要 比开始时高 ( 。 . 2 : n g / L ) , 而同时与余下的
植物生长素的浓度要大致上相等 。 隔三周后 , 当外植体长出团状密集的愈伤组织后就再转移
到新的分化培养基上 。 这时已见不到单个的芽了 , 只能见到成团状或成丛生长 的 愈 伤 组织
了 。 这样 , 就为 即使是繁殖率低的按树品种提供了快速繁殖的机 会 。
在增殖阶段不是所有的插条都能充分地伸长时 , 就应该把那些未伸 一长的抽条移植于 含有
6 一苯基嘿吟 ( 。 . l m g / L ) , 蔡 乙酸 ( o . 01 m g / L ) , 赤霉素 ( 吵 . 孙 : g / L ) 和活性炭 ( 1 5 9 /
l一 ) 的培养基中 。 当芽的长度为 10 ~ 20 m m 时 , 就应该转换生根培养基 。 生根培养墓 含 有价
的粉分 ( 巧 % ) 。 含有生长素 , 如叫噪丁酸 ( 1 m g / L ) 。 芽的发生 , 初期以 7 一功 天 的暗
期为 条件 , 如根盯〔始组织在暗期中进行刺激一样 。 根尖一形成就应把小苗移植至奸石中或 二是
转移至根生长培养基中 。 后面 的培养步骤就略去不谈了 。
一旦移植到蛙石中的小苗在可 以移栽之前 , 还要经受 一 个锻炼时期 。 这少幼百口川塑料
薄膜覆盖以维持高的温度和避免强光照射 。 以后逐渐减少塑料覆盖 以降低湿度 . 以后就可 以
吞卜杭 一 I’ 。
结 果 和 讨 论
在各种各样的培养墓试验 中 , B o ul a y 培养基对腋芽的生长是最好的 。 该起始培 养 基 六
有 0 . l m g / L 的 6 一苯基嘿吟和 。 . 叭 :吃 / L 之蔡 乙酸 。 细胞分裂素 、 激动素也引起芽原墓 价 一 `
一长效应 , 但培养墓中如含有玉米素则抑制芽灼生长 。 同样对大量的愈伤组织的形成也几小适
合的 。 增殖率 的测定按照腋芽在培养基上的个数迸行 。 按照这个比率 , 巨技和亮采 汝从单节
外植体在六个月中分别地可能获得 3 。万到 2 5 万个优 良成熟的小苗 。 应用相同的培乔条件 卜 ,
巨按 比亮果按显出有较高的繁殖率 。 但是 , ,万日于生根和经受锻炼时期的损失 , 实际上植株阴
数目量要比这个潜在的芽之数 目将要少些 。 己经形成了根的出芽百分数 , 巨按和充采按分别
为 9 0% 和 80 % 。 经受锻炼后 , 巨按和亮果按 的生根苗之成活率约有 90 炜 。
从研究结果看 , 运用微型 繁殖方法可以从一个巨按外植体培养出大量 的植株 。 从 巨桂失
生苗和萌芽苗的地上部分获得 的外植体 , 用组织培养方法具有相类似的效应 。 幼苗组织培养
的好处是能够有计划的进行繁殖 。 组织培养法 免除了种子育苗工序 , 因而经选择后用组织培
养法 l ~ 2年就能得到基因型的商品生产幼苗 , 相反用传统繁殖方法则要 4 一 1。年时间才能
得到 。 因而 , 组织培养总是十分重要 的 , 特别对于能多次选育新基因型进行培育的将更是如
此 。 萌芽条的微型繁殖一般总能够形成优 良成熟的萌芽林 。 那些优良的无性系林木不能萌芽
则将取决于材料的成熟程度 。 成熟组织的更新可经连续的嫁接 、 矮化和应用细胞分裂素而达
到 目的 。 关于这方面的繁殖技术将在 以后的论文中叙述 。 最近应用分生组织培养进行成熟组
织的繁殖 , 外植体用体细胞胚胎发生来进行繁殖则有另外的未发表的方法 。 这些技术目前正
流行地进行若研究 。 组织培养是一个整体 , 它包含三个程序 。 我们期望组织培养的技术很快
地会在南非森林工业中处于买用阶段 。
徐声杰译 自《南非林业杂志 》
1 9 8 5年 1 3 5期 2 0一 2 3
古 炎 J中校
按壳褐针抱菌 : 马拉维按树的
一种新病原体
马拉维林业研完院
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C h i P o m P h a
搞 要
一种新发现的真菌性病原体一按壳褐针抱菌 ( P h ae o se tP or ia e u 。 a l y tP i ) , 见于马拉 维
赤按 ( E : i e a l y p t u s C a m a l d u l e n s i s ) 和细叶按 ( E . t e r e t i c o r o i s ) 上 , 它引起R u m p h i 辖
区幼树的死亡 。 观察表明 , 按壳褐针泡菌是传染性的病原体 , 它与宜林地之间有联系 , 怀疑
病原体从宜林地传播到按树上 。 本文讨论了防治措施 , 推荐已在 R u m p hi 使用的卫生消除病
枝法 。 按壳褐针抱菌 一首次在非洲报道 。
月lJ 舌
按树是马拉维主要的造林树种 。 用其生产薪材 、 杆材和建筑用木料 。 受感染的按叶标本
是 1 9 8 1年从马拉维林业研究 院几个研究薪材 、 杆材的试验林和木材能源人工林中搜集的 。 大
部分标本采 自1 9 79 和 1 9 8。年栽植 的幼林 。 从 R u m p hi 辖区的报告和随同自加际本中可看出 , 大
量树木的死亡是感染病原体所致 , 尤其是 1 9 8 0年栽植的幼树 。 在树叶下而出现真菌的黑色煤
烟状物与纤细菌丝缠绕在一起 。 怀疑这些煤烟状物会阻塞叶的气孔 , 在一定程度上妨碍光合
作用 。