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白藓不同提取液对菜缢管蚜的生物活性研究



全 文 :白藓不同提取液对菜缢管蚜的生物活性研究
顾地周 车喜全 赵玉敏
(通化师范学院,吉林通化,134002)
白藓(Dictamnus dasycarpus Turcz.),是芸香科
白藓属多年生草本植物,根皮(白藓皮)入药,主治
皮肤瘙痒、荨麻疹、湿疹、黄水疮、黄疸、阴部瘙痒等
症,对几种常见害虫也有较好的防效。目前,国内外
利用植物防治病虫害的研究和报道较多[1~5],但对白
藓的研究主要集中在化学成分和药理活性方面,对
防治菜缢管蚜的研究未见报道。菜缢管蚜为蔬菜害
虫,主要吸食汁液,并能传播病毒,严重时导致植株
生长停滞,产量低,品质差。以往防治菜缢管蚜大多
采用乐果等高效、高毒、高残留农药。试验研究了白
藓全草的乙醇、丙酮浸提液及水蒸气蒸馏液对菜缢
管蚜的影响,以期为进一步研究利用白藓和开发新
型的植物源农药提供一定的参考依据。
1 材料与方法
1.1 供试材料
白藓采自吉林通化白鸡腰自然保护区林下,用
清水洗净表面泥土后备用。 选择健康、大小均匀的
菜缢管蚜(捕自蔬菜种植田)供试。
1.2 药液制备
称取白藓的鲜全草 3 份,每份 10 g,放入研钵
中捣成泥状, 其中 2 份分别加入 50 mL 乙醇和丙
酮,(25±2)℃恒温震荡提取 6 h。 另外 1份用蒸馏水
浸泡 12 h 后进行水蒸气蒸馏,后用 2 层纱布过滤,
重复 3次。 将 3次水蒸馏液混合后直接定容;乙醇、
丙酮浸提液的滤液减压浓缩后加入少量 95%乙醇
溶解,以蒸馏水定容,3种药液均制备成质量浓度为
30.0,35.0,40.0,45.0,50.0,55.0,60.0,65.0,70.0,75.0
mg·mL-1的浸提液备用。 试验采用均匀设计(Uni-
form Design)[6~7]。
1.3 测定方法
①触杀作用的测定 采用浸渍法,将菜缢管蚜
放入自制的小培养皿状滤网中, 用不同浓度的乙
醇、丙酮浸提液和水蒸气蒸馏液(3种药液均加入少
量的吐温-80 或洗衣粉作为表面活性剂以确保药
液与菜缢管蚜充分接触) 浸没处理 30 s 后迅速取
出,置于有鲜嫩白菜叶的烧杯(500 mL,杯底垫有保
湿滤纸 3层)中,每个处理放 30只菜缢管蚜,重复 3
次。 对照分别用 30%的乙醇、丙酮和蒸馏水做同样
处理。 将烧杯置于温度(22±2)℃,相对湿度 60%~
75%,光照强度 600 lx的培养箱内观察。
于 24 h、48 h 后观察菜缢管蚜的死亡情况,统
计并计算出死亡率 、 校正死亡率和致死中浓度
(LC50)。 死亡率(%)=(死亡虫数/供试总虫数)×100,
校正死亡率 (%)=[(处理组死亡率-对照组死亡率)/
(1-对照组死亡率)]×100。
②拒食作用的测定 采用浸叶法,将适量的鲜
嫩白菜叶放入供试样品中浸泡 20 s,取出放入杯底
摘 要 应用均匀设计法研究了白藓全草的不同提取液对菜缢管蚜的触杀和拒食作用。 研究结果表明,乙醇浸提液
对菜缢管蚜具有较高的触杀作用,水蒸气蒸馏液对菜缢管蚜具有较强的拒食作用;乙醇浸提液对菜缢管蚜 48 h 的
致死中浓度(LC50)为 26.873 4 mg·mL-1,水蒸气蒸馏液对菜缢管蚜 24 h、48 h 的拒食中浓度(AFC50)分别为 25.952 6
mg·mL-1和 27.894 5 mg·mL-1,丙酮浸提液对菜缢管蚜的触杀和拒食作用不明显。
关键词 白藓 菜缢管蚜 均匀设计 生物活性
基金项目:吉林省教育厅自然科学基金资助项目(吉教科合
字[2003]第 65 号)
顾地周(1973-),男,讲师,主要从事长白山区珍稀濒危植物
和药用植物研究,电话: 0435-3208073。
E-mail:gudizhou@163.com
收稿日期:2008-09-10
DOI:10.3865/j.issn.1001-3547(x).2008.10.026
2008,10b:69-71JOURNAL OF CHANGJIANG VEGETABLES
(学术版)
69- -
垫有 3 层保湿滤纸的烧杯中,于叶片中央接入已饥
饿 12 h 的菜缢管蚜 10 只, 每个处理 30 只菜缢管
蚜,浸提液和蒸馏液对照分别用 30%的乙醇、丙酮
和蒸馏水做同样处理。将烧杯置于温度(22±2)℃,相
对湿度 60%~75%,光照强度 600 lx的培养箱内观察。
于 24 h、48 h后分别统计对照组和处理组叶上
菜缢管蚜的栖息数。 计算栖息率和拒食率。 根据平
均栖息率计算出拒食率和拒食中浓度(AFC50)。 栖
息率=(处理组虫栖息数/每个处理虫总数)×100%,
拒食率(%)=[(对照组虫栖息数-处理组虫栖息数)/
每个处理蚜虫总数]×100%。
1.4 数据分析
回归分析均采取全回归(后退法)。
2 结果与分析
2.1 白藓对菜缢管蚜触杀作用的影响
由表 2 可知,乙醇浸提液对菜缢管蚜有较好的
触杀作用,随着乙醇浸提液浓度的增大校正死亡率
升高;当乙醇浸提液浓度为 75.00 mg·mL-1时,其 48 h
的校正死亡率可达 97.5%,LC50为 26.873 4 mg·mL-1。
菜缢管蚜接触乙醇浸提液后,先是迅速无方向的四
处爬动, 然后爬动速度逐渐减慢直至静止不动,虫
体瘫痪或麻痹, 大部分虫体不能恢复正常状态,直
接死亡,死亡状态为静止萎缩;24 h 时,少数菜缢管
蚜虽经历瘫痪或麻痹一段时间后还可以恢复,但表
现出明显的不取食现象,直至死亡。 回归方程分析
的结果表明,丙酮浸提液和水蒸气蒸馏提取液对菜
缢管蚜的触杀作用与对照差异不显著。
2.2 白藓对菜缢管蚜拒食作用的影响
从表 2 和 24 h 的回归方程看出, 水蒸气蒸馏
液对菜缢管蚜有较强的拒食作用,随水蒸气蒸馏液
浓度的增大拒食率增高,乙醇浸提液和丙酮浸提液
对菜缢管蚜的拒食作用与对照差异不显著。从 48 h
的回归方程和表 2 也看出,水蒸气蒸馏液对菜缢管
蚜保持明显的拒食作用,随浓度的增大和时间的延
长拒食率升高,菜缢管蚜在处理叶片上的栖息数比
对照叶片上少,在高浓度处理叶片上比低浓度处理
的叶片上明显减少,24 h 和 48 h 的水蒸气蒸馏液
AFC50值分别为 25.952 6 mg·mL-1和 27.894 5 mg·mL-1;
不同处理时间的拒食率不同,48 h 的拒食率均明显
高于 24 h的拒食率。
3 结论与讨论
试验结果表明,白藓全草中含有对菜缢管蚜具
有明显抑制生物活性的物质,主要表现在对菜缢管
蚜的触杀和拒食作用。
在触杀试验中, 通过对 24 h 的毒力回归方程
分析结果和表 2 可知,乙醇浸提液对菜缢管蚜具有
表 1 U10(103) 均匀设计试验安排及结果
处理
提取液/mg·mL-1 24 h 48 h
X1 X2 X3 致死率(Y1) 拒食率(Y2) 致死率(Y3) 拒食率(Y4)
1 30.0 50.0 60.0 65.0(65.0) 86.5 68.9(68.4) 87.8
2 35.0 75.0 40.0 68.7(68.7) 80.0 72.2(71.5) 72.3
3 40.0 45.0 75.0 72.0(72.0) 97.8 75.0(75.0) 98.8
4 45.0 70.0 55.0 76.2(75.5) 82.5 78.5(78.5) 84.0
5 50.0 40.0 35.0 79.0(78.8) 67.0 81.5(81.0) 68.5
6 55.0 65.0 70.0 83.6(82.5) 94.0 85.0(85.0) 95.5
7 60.0 35.0 50.0 86.2(85.8) 78.5 87.8(87.8) 80.2
8 65.0 60.0 30.0 89.9(89.0) 63.3 92.3(91.3) 64.8
9 70.0 30.0 65.0 93.4(92.6) 90.0 94.8(94.8) 91.7
注:X1为乙醇浸提液,X2为丙酮浸提液,X3为水蒸气蒸馏液,括号内数值分别代表 Y1、Y3在 24 h和 48 h的校正触杀致死率
表 2 白藓对菜缢管蚜的触杀和拒食活性回归分析结果
间/h 毒力回归方程 复相关系数 剩余标准差 检验值 Ft 毒力回归方程 复相关系数 剩余标准差 检验值 Ft
24 Y1=45.5+0.664 X1 0.998 4 0.595 2527 Y2=44.0+0.714 X3 0.969 0 2.920 123.3
统计时 触杀活性 拒食活性
48
注:样本容量 n=10,显著性水平 α=0.05,临界值 F(0.05,1,8)=5.318,Ft>F(0.05,1,8)
Y3=48.8+0.653 X1 0.999 7 0.276 1.155e+4 Y4=41.9+0.764 X3 0.999 9 0.179 3.755e+4
2008/10(下) 顾地周,等.白藓不同提取液对菜缢管蚜的生物活性研究 70- -
较好的触杀作用,24 h 校正死亡率高达 94.0%,说
明白藓全草中具有触杀作用的生物活性物质能被
乙醇浸提出来。 部分菜缢管蚜虽未死亡,但取食量
明显较对照减少。乙醇浸提液对菜缢管蚜处理 48 h
时校正死亡率可达到 97.5%,LC50为26.873 4 mg·mL-1。
不同浓度下 48 h的致死率均比 24 h 高, 分析原因
可能有 2 种情况:第 1 种情况是白藓全草中起触杀
作用的活性物质极易溶于乙醇且浸提量较多或者
是能在乙醇中保持较好的稳定性;第 2 种情况是白
藓全草中含有多种具有触杀活性的物质,其各自的
触杀作用机理不同,触杀活性物质表现的快慢也不
同。丙酮浸提液和水蒸气蒸馏液对菜缢管蚜的触杀
作用表现不明显,可能是具有触杀作用的物质在丙
酮和水蒸气蒸馏液中含量少。也可能是丙酮浸提液
和水蒸气蒸馏液中的拒食活性物质较乙醇浸提液
中的拒食活性物质易被菜缢管蚜产生抗药免疫力
等原因。
在拒食试验中, 仅水蒸气蒸馏液有显著的效
果,说明白藓全草中具有拒食作用的生物活性物质
能通过水蒸气蒸馏出来。 24 h 和 48 h 的水蒸气蒸
馏液 AFC50 分别为 25.952 6 mg·mL-1 和 27.894 5
mg·mL-1, 不同浓度下 48 h 的拒食率均高于 24 h,
这可能是白藓全草中含有多种具有拒食的活性物
质,只是作用的快慢有差异而已。 也可能是乙醇浸
提液和丙酮浸提液中的拒食活性物质含量少,效果
不明显,还有可能是乙醇和丙酮浸提液中的拒食活
性物质较水蒸气蒸馏液中的拒食活性物质易被菜
缢管蚜产生抗药免疫力等原因。
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Study on Biological Activity against Rhopalosiphum pseudobrassicae with Various
Extraction from Dictamnus dasycarpus Turcz.
GU DiZhou,CHE Xiquan,ZHAO Yumin
(Tonghua Normal University,Tonghua , Jilin 134002)
Abstract:Contacting death and anti-feeding against Rhopalosiphum pseudobrassicae of with various extraction from the
herb of Dictamnus dasycarpus Turcz. was studied through the uniform design. The results showed that the 48 h LC 50 of
death was 26.873 4 mg/mL of ethanol extract, the 24 h and 48 h AFC 50 of antifeedant were 25.952 6, 27.894 5 mg/mL
of wetdistillation liquid. As a result, ethanol extract had high contacting death activity, wet-distillation liquid had strong
antifeedant activity, acetone extracts had indistinctively contacting death and antifeedant.
Key words:Dictamnus dasycarpus Turcz.;Rhopalosiphum pseudobrassicae;Uniform Design;Biological activity
(学术版) 2008 年 10 月下半月刊71- -