全 文 ：北方园艺２０１３（０７）：１３１～１３３ ·生物技术·
第一作者简介：宁静（１９８６－），女，在读硕士，现主要从事植物组织
培养研究工作。
责任作者：顾德峰（１９５６－），男，硕士，教授，现主要从事植物组织培
养研究等工作。Ｅ－ｍａｉｌ：ｇｕ．ｄｆ＠１６３．ｃｏｍ．
收稿日期：２０１２－１２－１９
白藓优良单株的选择及离体快繁技术研究
宁 　 静，赵 和 祥，蕫 　 然，赵 春 莉，陈 立 飞，顾 德 峰
（吉林农业大学 园艺学院，吉林 长春１３０１１８）
　　摘　要：以野生白藓地下幼芽为外植体，进行优良单株的选择和组织培养研究，以期建立其
快繁体系。结果表明：丛生芽诱导的最佳培养基为ＭＳ＋６－ＢＡ　０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　１．０ｍｇ／Ｌ，诱导
率为９０％；最佳增殖培养基为ＭＳ＋６－ＢＡ　０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　０．５ｍｇ／Ｌ，增殖系数为４．６；最佳生根
培养基为１／２ＭＳ＋ＮＡＡ　２．０ｍｇ／Ｌ，生根率为７０％。为提高试管苗的增殖率，其最佳继代周期为
３０ｄ。
关键词：白藓；单株选择；离体快繁
中图分类号：Ｓ　５６７．２３＋９　文献标识码：Ａ　文章编号：１００１－０００９（２０１３）０７－０１３１－０３
　　白藓（Ｄｉｃｔａｍｎｕｓ　ｄａｓｙｃａｒｐｓ　Ｔｕｒｃｚ．）属芸香科白藓属
多年生草本植物，别名八股牛。白藓主要分布在亚欧大
陆，约有５种，我国主产于东北三省、内蒙、河北、江西、贵
州、河南等省区［１－２］，长白山散生于海拔９００ｍ以下的山
坡、林缘、灌木丛或山路旁。白藓是一种新开发的观赏
植物，除观赏外，其全株芳香，是一种待开发的蜜源植
物；根皮入药，具有解毒、祛热、利尿、除湿和杀虫等功
效［３－４］；其皮亦可作为天然防腐剂的原料，故白藓是一种
极具开发潜力的野生花卉。但目前应用的白藓大多是
长白山的野生资源，近些年的采挖破坏，使得现存的白
藓野生资源急剧减少，因此，研究一种快速繁殖的技术
显得尤为重要。
目前对白藓的研究还主要集中在药用方面［５］，对其
选种工作以及在园林绿化中的应用和利用组织培养建
立优良单株无性系的研究还鲜见报道。该研究旨在选
择出具有观赏价值的优良单株并利用离体快繁手段建
立优良的无性繁殖系，为长白山这一珍贵野生资源的开
发利用奠定基础。
１　材料与方法
１．１　试验材料
２００９年５月于长白山西坡，选取生长状态良好开花
艳丽的白藓植株移栽于吉林农业大学苗圃基地。
１．２　试验方法
１．２．１　白癣优良单株的选择　２０１０年４～１０月对引种
白藓进行观察记录，进行复选，选取长势较好的２０株，对
其抗性、花期、花色、株高进行比较，２０１１年再次进行复
选，选择后续试验需要的优良单株。
１．２．２　外植体的选择及灭菌　５～７月选取优良单株的
地下幼芽为外植体，将地下芽置于流水下冲洗１～２ｈ，
置于超净工作台上用７５％酒精浸泡２０ｓ，无菌水冲洗２
遍，然后以０．１％升汞灭菌１０～１１ｍｉｎ，无菌水冲洗６
次，滤纸吸干表面水分，备用。
１．２．３　丛生芽的诱导　试验所用培养基均添加蔗糖
３０ｇ／Ｌ，琼脂１０ｇ／Ｌ，ｐＨ　５．８，培养温度为２５℃，光照强
度为２　０００～３　０００ｌｘ，光照时间为１２～１４ｈ／ｄ。将灭菌
后的幼芽接种至添加不同浓度６－ＢＡ（０．５、１．０、１．５、２．０
ｍｇ／Ｌ）和 ＮＡＡ（０．１、１．０、１．５ ｍｇ／Ｌ），２，４－Ｄ（０．１、
０．２ｍｇ／Ｌ）的ＭＳ培养基上进行丛生芽诱导，每处理接
种１０个外植，３次重复，定期观察，４周后统计结果。
１．２．４　幼芽的继代增殖　将无菌苗切成带有２～３片叶
片的茎段接种至分别添加６－ＢＡ（０．５、１．０、１．５ｍｇ／Ｌ）和
ＮＡＡ（０．１、０．５、１．０ｍｇ／Ｌ）的 ＭＳ基本培养基中进行增
殖培养，每瓶接种１５个芽，每处理接种９瓶，分别于２０、
３０、４０ｄ后统计增殖率，３次重复。
１．２．５　生根培养　选取继代增殖中长势好的，植株健壮
的白藓茎段切至３～４ｃｍ，接种于添加ＮＡＡ（０．０４、０．１、
１．０、２．０ｍｇ／Ｌ）的１／２ＭＳ培养基以及添加ＮＡＡ（０．１、
１．０、２．０ｍｇ／Ｌ）的ＭＳ培养基中，定期观察，于６０ｄ后统
计生根结果，３次重复。
２　结果与分析
２．１　白藓优良单株的选择
对调查的２０株单株进行编号、性状分析，选择出５
个（０２、０４、０７、１１、１５号）抗性强、花期长、花色艳丽、株型
１３１
·生物技术· 北方园艺２０１３（０７）：１３１～１３３
　　　表１ 白藓待选单株性状调查
　　Ｔａｂｌｅ　１ Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｏｎ
ｃａｎｄｉｄａｔｅ　Ｄｉｃｔａｍｎｕｓ　ｄａｓｙｃａｒｐｓ　Ｔｕｒｃｚ．
编号 开花时株高／ｃｍ 花期／ｄ 花色 抗性
０１　 ６０　 ２７ 淡紫红色 ＋＋＋
０２　 ６６　 ３３ 紫红色 ＋＋＋＋
０３　 ４１　 ２５ 紫红色 ＋＋＋
０４　 ６５　 ３０ 淡紫红色 ＋＋＋＋
０５　 ４０　 ２５ 紫红色 ＋＋
０６　 ３７　 ２５ 紫红色 ＋＋＋
０７　 ６９　 ３０ 紫红色 ＋＋＋＋
０８　 ５０　 ２５ 淡紫红色，边缘发白 ＋＋
０９　 ６５　 ２７ 淡紫红色 ＋＋＋
１０　 ３０　 ２５ 淡紫红色 ＋
１１　 ７０　 ３４ 深紫红色 ＋＋＋＋
１２　 ４１　 ３０ 紫红色 ＋＋＋
１３　 ６０　 ３１ 紫红色 ＋＋＋
１４　 ５９　 ２５ 紫红色 ＋＋＋
１５　 ６７　 ３３ 紫红色 ＋＋＋＋
１６　 ５５　 ２７ 紫红色 ＋＋＋
１７　 ６０　 ２０ 淡紫红色 ＋＋
１８　 ５５　 ２５ 淡紫红色，边缘发白 ＋＋＋
１９　 ６１　 ２７ 紫红色 ＋＋＋
２０　 ４７　 ２０ 紫红色 ＋＋＋
　　注：＋抗性差，出现病虫害及倒伏；＋＋抗性较差，出现病虫害或倒伏；＋＋＋抗
性较强，无病虫害及倒伏，植株长势良好；＋＋＋＋抗性强，无病虫害及倒伏，植株长
势旺盛。
较好的优良单株。
２．２　不同激素浓度对丛生芽诱导的影响
将选择出的优良单株的地下幼芽接种至诱导培养
基中（图１Ａ），在加有ＮＡＡ的培养基中培养约１５ｄ后开
始萌动，茎伸长，有新叶长出，而在加有２，４－Ｄ的培养基
中，芽基部１周后开始有愈伤产生，几乎停止生长，未出
现分化现象。５个单株在相同培养基中表现基本一致，
无明显不同。由表２可知，当６－ＢＡ为０．５ｍｇ／Ｌ、ＮＡＡ
为１．０ｍｇ／Ｌ时植株生长健壮且诱导率最高，因此，白藓地
下芽的最佳诱导培养基为 ＭＳ＋６－ＢＡ　０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ
１．０ｍｇ／Ｌ。
表２ 　　　　不同植物生长调节剂对
　　　　白藓丛生芽诱导的影响
　　Ｔａｂｌｅ　２　　　Ｅｆｅｃｔ　ｏｆ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ　ｐｌａｎｔ　ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅ
　　　　ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ　ｏｎ　ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｂｕｄｓ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ
培养基 接种芽数／个 萌发芽数／个 萌发率／％
０．５ｍｇ／Ｌ　６－ＢＡ＋１．０ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ　 １０　 ９　 ９０
１．０ｍｇ／Ｌ　６－ＢＡ＋１．０ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ　 １０　 ７　 ７０
１．５ｍｇ／Ｌ　６－ＢＡ＋１．５ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ　 １０　 ５　 ５０
１．０ｍｇ／Ｌ　６－ＢＡ＋０．１ｍｇ／Ｌ　ＮＡＡ　 １０　 ５　 ５０
１．０ｍｇ／Ｌ　６－ＢＡ＋０．１ｍｇ／Ｌ　２，４－Ｄ　 １０　 ０　 ０
２．０ｍｇ／Ｌ　６－ＢＡ＋０．２ｍｇ／Ｌ　２，４－Ｄ　 １０　 ０　 ０
２．３　不同生长调节剂与继代周期对无菌苗增殖的影响
由表３可知，将诱导培养基中诱导出的丛生芽分切
后接种至增殖培养基中继续培养，６－ＢＡ对丛生芽诱导
有促进作用，但其不宜过高，否则会抑制丛生芽诱导。
当６－ＢＡ为０．５ｍｇ／Ｌ、ＮＡＡ为０．５ｍｇ／Ｌ时，繁殖率最
高，当继代至３０ｄ时，植株生长最为旺盛（图１Ｂ），随后出
现萎蔫死亡，因此白藓的最佳增殖培养基为 ＭＳ＋６－ＢＡ
０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　０．５ｍｇ／Ｌ，３０ｄ为最佳继代周期。
　　表３ 不同植物生长调节剂与继代周期对增殖系数的影响
　　Ｔａｂｌｅ　３ Ｅｆｅｃｔ　ｏｆ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ　ｐｌａｎｔ　ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅ　ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ　ａｎｄ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｐｅｒｉｏｄｓ　ｏｎ　ｐｌａｎｔｌｅｔｓ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ
培养基 每组接种芽数 ２０ｄ增殖系数 ３０ｄ增殖系数 ４０ｄ增殖系数
ＭＳ＋６－ＢＡ　１．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　１．０ｍｇ／Ｌ　 ４５　 １．８１±０．２６　 ３．３２±０．２３　 ２．８７±０．３２
ＭＳ＋６－ＢＡ　１．０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　０．５ｍｇ／Ｌ　 ４５　 １．２５±０．１５　 ２．０３±０．２６　 １．６５±０．２０
ＭＳ＋６－ＢＡ　０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　０．５ｍｇ／Ｌ　 ４５　 ２．５７±０．２９　 ４．６１±０．２１　 ３．８３±０．２５
ＭＳ＋６－ＢＡ　０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　０．１ｍｇ／Ｌ　 ４５　 ２．１５±０．２５　 ３．７１±０．２９　 ３．０９±０．４３
ＭＳ＋６－ＢＡ　１．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　１．０ｍｇ／Ｌ　 ４５　 １．７５±０．２３　 ３．０５±０．２３　 ２．７７±０．３１
ＭＳ＋６－ＢＡ　１．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　０．１ｍｇ／Ｌ　 ４５　 １．２８±０．１５　 １．８２±０．１２　 １．５３±０．１７
２．４　不同浓度ＮＡＡ对白藓试管苗生根的影响
选取继代培养中长至３～４ｃｍ的健壮幼苗转接至生
根培养基中进行培养。由表４可知，萘乙酸（ＮＡＡ）对试管
苗的生根有促进作用。在添加ＮＡＡ大于１．０ｍｇ／Ｌ的培
养基中试管苗开始生根的时间明显较早，为１０～１５ｄ，而
低于此值的培养基中，开始生根的时间为１个月以后。
由培养６０ｄ时统计的生根情况（图１Ｃ）可知，ＭＳ培养基
中的生根率明显低于１／２ＭＳ培养基，在１／２ＭＳ培养基
中，当添加ＮＡＡ浓度为０．０４～２．０ｍｇ／Ｌ时，生根率随
ＮＡＡ浓度的增加而增加，当ＮＡＡ为２．０ｍｇ／Ｌ时，生根
率达到最高，当ＮＡＡ浓度为３．０ｍｇ／Ｌ时，无菌苗基部
形成大量愈伤，生根率明显下降。因此，１／２ＭＳ＋ＮＡＡ
２．０ｍｇ／Ｌ为最佳生根培养基。
表４　不同浓度ＮＡＡ对试管苗生根的影响
　　Ｔａｂｌｅ　４　Ｅｆｅｃｔ　ｏｆ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ　ＮＡＡ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｎ　ｒｏｏｔｉｎｇ　ｏｆ　ｐｌａｎｔｌｅｔ
处理 ＮＡＡ／ｍｇ·Ｌ－１ 接种株数／株 生根株数／株 生根率／％
０．０４　 ５０　 ９　 １８
０．１　 ５０　 １３　 ２６
１／２ＭＳ　 １．０　 ５０　 ２５　 ５０
２．０　 ５０　 ３５　 ７０
０．１　 ５０　 ２　 ４
ＭＳ　 １．０　 ５０　 ３　 ６
２．０　 ５０　 ２　 ４
２．５　试管苗的练苗与移栽
试管苗于生根培养基中培养６０ｄ后，于室内正常光
照下练苗２ｄ，将已生根的幼苗从瓶中取出，置于流水下
洗净根部培养基，栽植于园土∶草炭＝１∶１的基质中，
２３１
北方园艺２０１３（０７）：１３１～１３３ ·生物技术·
图１　白癣组织培养过程
注：Ａ：外植体接种时的状态；Ｂ：继代３０ｄ试管苗生长状态；Ｃ：试管
苗生根情况；Ｄ：单株２瓶外移栽状况；Ｅ：单株４瓶外移栽状况；Ｆ：单株７
瓶外移栽状况；Ｇ：单株１１瓶外移栽状况；Ｈ：单株１５瓶外移栽状况。
遮阴处理，成活率在９０％以上（图１Ｄ～Ｈ）。
３　结论与讨论
该试验对野外移植的优良白藓植株进行复选，选
取性状较好的单株作为后续试验材料，组培阶段采用
其地下幼芽为外植体，成功实现了离体快繁。在培养中发
现，不同生长调节剂的种类与浓度对白藓无菌苗的诱导
与增殖有显著的差异。该试验发现，在６－ＢＡ浓度一定
的前提下，ＮＡＡ浓度超过１．０ｍｇ／Ｌ，会有大量愈伤产
生，丛生芽诱导率急剧下降；当ＮＡＡ为１．０ｍｇ／Ｌ时，
６－ＢＡ浓度超过０．５ｍｇ／Ｌ，苗较细弱，易发生玻璃化，因
此，ＭＳ＋６－ＢＡ　０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　１．０ｍｇ／Ｌ为最佳诱导
培养基。在增殖中，可适当降低生长素浓度，在 ＭＳ＋
６－ＢＡ　０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　０．５ｍｇ／Ｌ中，３０ｄ增殖系数达到
最高，为４．６１；１／２ＭＳ＋ＮＡＡ　２．０ｍｇ／Ｌ为最佳生根培养
基，生根率为７０％。后期练苗移栽后成活率在９０％以
上。翌年幼苗开花后可与母株进行性状比较，观察是否
保留了母株的优良性状。鉴于试验初期可供选择的外
植体有限，于２０１０年７～８月采集白藓种子，利用种
子［６－７］为外植体进行组培预试验，继而利用试管中的无
菌苗进行离体再生体系的初期研究，得到初期数据，以
此数据为参考，在一定程度上提高了该试验中启动培养
阶段的成功率。
参考文献
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ＮＩＮＧ　Ｊｉｎｇ，ＺＨＡＯ　Ｈｅ－ｘｉａｎｇ，ＤＯＮＧ　Ｒａｎ，ＺＨＡＯ　Ｃｈｕｎ－ｌｉ，ＣＨＥＮ　Ｌｉ－ｆｅｉ，ＧＵ　Ｄｅ－ｆｅｎｇ
（Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｊｉｌｉｎ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ，Ｊｉｌｉｎ　１３０１１８）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔａｋｉｎｇ　ｔｈｅ　ｐｌｕｍｕｌｅ　ｏｆ　Ｄｉｃｔａｍｎｕｓ　ｄａｓｙｃａｒｐｓ　Ｔｕｒｃｚ．ｕｎｄｅｒｇｒｏｕｎｄ　ａｓ　ｅｘｐｌａｎｔｓ，ｔｈｅ　ｅｘｃｅｌｅｎｔ　ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌ　ｐｌａｎｔｓ
ｗｅｒｅ　ｓｅｌｅｃｔｅｄ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｔｉｓｓｕｅ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｏｆ　Ｄｉｃｔａｍｎｕｓ　ｄａｓｙｃａｒｐｓ　Ｔｕｒｃｚ．ｗｅｒｅ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ，ｉｎ　ｏｒｄｅｒ　ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ｔｈｅ　ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ
ｓｙｓｔｅｍ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｕｍ　ｍｅｄｉｕｍ　ｆｏｒ　ｓｈｏｏｔ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｗａｓ　ＭＳ＋６－ＢＡ　０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　１．０ｍｇ／Ｌ，
ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　９０％；ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｍｅｄｉｕｍ　ｗａｓ　ＭＳ＋６－ＢＡ　０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ　０．５ｍｇ／Ｌ，ｔｈｅ
ｍｕｌｔｉｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｃｏｅｆｉｃｉｅｎｔ　ｗａｓ　４．６；ｔｈｅ　ｒｏｏｔｉｎｇ　ｍｅｄｉｕｍ　ｗａｓ　１／２ＭＳ＋ＮＡＡ　２．０ｍｇ／Ｌ，ａｎｄ　ｉｔｓ　ｇｒｏｗｔｈ　ｗａｓ　ｔｈｅ　ｂｅｓｔ　ａｎｄ　ｔｈｅ
ｒｏｏｔｉｎｇ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　７０％．Ｉｎ　ｏｒｄｅｒ　ｔｏ　ｅｎｈａｎｃｅ　ｔｈｅ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｔｅｓｔ－ｔｕｂｅ　ｐｌａｎｔｌｅｔｓ，ｔｈｅ　ｂｅｓｔ　ｓｕｂｃｕｌｔｕｒｅ　ｐｅｒｉｏｄ　ｓｈｏｕｌｄ
ｂｅ　ｃｏｎｔｒｏｌｅｄ　ｉｎ　３０ｄ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｄｉｃｔａｍｎｕｓ　ｄａｓｙｃａｒｐｓ　Ｔｕｒｃｚ．；ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ　ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ；ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ
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