全 文 ：植物组织培养简报 Brief Communications of Plant Tissue Culture
收稿　2000-07-25　　　　修定　2001-02-05
龙牙百合的组织培养
罗丽萍　杨柏云 　蔡奇英 　章敏华(南昌大学生命科学与食品工程学院 ,南昌 330047)
Tissue Culture of “Longya Lily”
LUO Li-Ping , YANG Bo-Yun , CAI Qi-Ying , ZHANG Min-Hua(College of Biology Science and Food Management , Nanchang University ,
Nanchang 330047)
1　植物名称　百合(Lilium brownii)品种龙牙百合。
2　材料类别　当年收获的百合鳞茎 。
3　培养条件　(1)诱导鳞片分化培养基:MS+NAA
0.5 mg·L-1(单位下同)+GA 2.0;(2)诱导小鳞片
分化的培养基:MS +6-BA1.0+NAA 0.5;(3)诱导
小鳞片形成愈伤组织:MS+6-BA 4.0+2 ,4-D 4.0;
(4)促进小鳞茎增重培养基:MS+6-BA1.0+2 ,4-D
0.5+NAA 0.2+7%糖+0.8%琼脂+0.2%活性
炭;(5)液体培养基:MS+6-BA 1.0+NAA 0.5。以
上培养基除(4)、(5)外 ,均含 4%蔗糖 、0.7%琼脂 ,
pH值 5.8 ,并以 121℃高温高压灭菌 20 min。培养
温度为(22+2)℃,光照度为 4 000 lx , 光照 12 h·
d
-1 。
4　生长与分化情况
4.1　无菌小鳞茎的获得　将贮藏在冰箱中的百合
鳞茎取出 ,去掉外面 2 ～ 3层腐烂 、带霉点的鳞片
后 ,将中间洁白完整鳞片剥下 ,连同中心芽一起放
入洗衣粉液中漂洗 2 h ,流水冲洗 2 h , 75%酒精处
理30 s ,0.1%升汞浸 10 min ,再用无菌水冲洗 5次 ,
每次不少于 2 min 。将材料置于无菌滤纸上吸干表
面水分 ,用解剖刀将鳞片切成1 cm2的小块 ,中心芽
不用切割 ,接种在(1)号培养基上。10 d 后 ,小块近
轴面基部出现白色小突起 ,以后膨大 、生长 ,成为小
鳞茎 ,同时有生根现象 ,一般每一小块可产生 23个
小鳞茎 。通过统计得出 ,来自鳞片上 、中 、下部的小
块 ,其分化率分别为 7%、15%和 95%。中心芽也
于10 d后发芽 ,但不形成小鳞茎 ,只是节间伸长 ,同
时在鳞茎盘基部产生大量根系 ,形成一颗完整植
株。
4.2　小鳞片的分化　将初代培养获得的小鳞茎上
小鳞片分下来 ,不用切割 ,直接接种到(2)号培养
基。20 d后 ,在小鳞片基部出现 35个小突起 ,以后
长大 。多数次生小鳞茎会抽生细长叶片 ,造成小鳞
茎不饱满;不抽生叶片的小鳞茎相对要肥厚一些。
随着次生小鳞茎的生长 ,小鳞片萎缩 。
4.3　小鳞片愈伤组织诱导及分化　将小鳞片接种
至(3)号培养基上 。25 d 后 ,小鳞片基部出现白色
愈伤组织 ,愈伤组织长至直径 12 cm 时 ,表面出现
许多圆形突起 ,这些突起中有一部分随愈伤组织发
育为次生小鳞茎 。一般一块愈伤组织上会出现 35
个小鳞茎 ,多的甚至达 10个 ,这些次生小鳞茎中 ,
仅有 23个鳞片白 、较肥厚 ,其他都较弱小。
4.4　次生小鳞茎的增重　经上述步骤获得的次生
小鳞茎 ,仅少部分较为健壮 ,直径可达 1 cm ,多数较
为瘦小 。将这些瘦小鳞茎接种到(4)号培养基上 ,
小鳞茎在培养基上较少长叶 ,可以观察到有明显增
重 ,同时平均每个鳞茎有 45条根发生。每 30 d 继
代 1次 ,经 3次继代后 ,小鳞茎繁殖系数为 400%。
4.5　百合愈伤组织次生小鳞茎的液体振荡培养　
次生小鳞茎在固体培养基上增重缓慢 ,改用(5)号
培养基进行液体振荡培养 ,温度 25℃,转速为 110
r·min-1 ,小鳞茎在该条件下可获得快速生长 ,同时
有根 、叶长出。每15 d继代 1次 ,经 3次继代 ,繁殖
系数可达 600%。
百合愈伤组织在该培养条件下获得较高分化
率 。将带有突起的愈伤组织转入(5)号培养基 ,7 d
后可见小突起分化成小鳞茎样 ,10 d 后 ,小鳞茎抽
生绿叶 。该小鳞茎经继代培养 ,可进一步膨大 。
4.6　组培苗的移栽　将直径 1 cm以上 、带 34条根
的小鳞茎取出 ,用水小心将附着的培养基洗净后 ,
用杀菌剂 600倍的百菌清与 1 000倍速克灵混合液
浸泡 10 min ,晾干后移栽于珍珠岩∶蛭石∶火土灰为 1∶1
∶1的混合基质中 ,移栽前基质要浇一次透水 ,再按
行距 15 cm 、株距 7 cm 、深度为 30 cm 移栽 ,
注意基质保持稍偏干状态 ,但要经常对叶面喷水。
527植物生理学通讯　第 37 卷 第 6期 , 2001年 12 月
DOI :10.13592/j.cnki.ppj.2001.06.014
前15 d需遮荫 ,待新叶 、新根长出后逐步去掉 ,再用
MS大量元素进行喷施 ,每 710 d 1次 ,这样移栽成
活率达 95%以上 。2 个月后 , 鳞茎的周径可达 6
cm 。
5　意义与进展　百合为百合科百合属多年生草本
植物 ,其食用部分是地下鳞茎 ,具有润肺 、健胃 、止
咳 ,促进血液循环等功效。生产中一直存在繁殖系
数低 ,种球成本高等问题。龙牙百合为传统优质食
用百合品种 ,有关它的离体快繁已有报道 ,但以液
体进行振荡培养则尚未见报道 。
收稿　2000-07-21　　　　修定　2001-04-23
　 1　现在广西农业科学院品种资源研究所工作。
黎豆的组织培养和快速繁殖
杭　玲　罗瑞鸿 　陈少珍 　蔡炳华 　罗毓喜1(广西农业科学院生物技术研究所 , 南宁 530007)
Tissue Culture and Rapid Propagation of Velvetbean
HANG Ling , LUO Rui-Hong , CHEN Shao-Zhen , CAI Bing-Hua , LUO Yu-Xi(Institute of Biotechnology , Guangxi Academy of Agricultural
Sciences , Nanning 530007)
1　植物名称　黎豆(Stizolobium cochinchinensis),别
名猫豆 、狗爪豆 。
2　材料类别　无菌种子苗 。
3　培养条件　基本培养基为 MS 。种子萌发及壮
苗培养基:(1)MS+Vc 0.5mg·L-1(单位下同)+0.
1%活性炭;诱导丛芽培养基:(2)MS+6-BA l.0+
NAA 0.1+Vc 0.5;诱导愈伤组织培养基:(3)MS+
6-BA 0.5+NAA 0.05 ,(4)MS+2 ,4-D 0.5 ,(5)MS+
2 ,4-D 1.0 ,(6)MS+2 ,4-D 2.0;分化培养基:(7)MS
+6-A3.0 +Vc 0.5+NAA 0.05;芽体生长及诱导生
根培养基:(8)MS+NAA 0.1+活性炭 0.1%。培养
基中添加 3%白糖 , 0.45%琼脂粉 , pH 5.8 ,培养温
度25 ～ 28℃,种子萌发前在自然光照处培养 ,萌发
后每天光照 10 h ,光照度 1 000 lx 。分化培养的光
照时间和光照度同上 。
4　生长与分化情况
4.1　无菌苗的获得　种子用 75%酒精消毒 10 s ,
再用 0.1%HgCl2 溶液浸泡12 min ,无菌水冲洗 3次
后移到培养基(1)上 ,自然光照培养 , 5 d后种子萌
动 ,10 d开始长苗 ,此时种子周围产生大量褐黑色
分泌物 ,再转至新鲜培养基 ,25 d后苗长至 5 ～ 8 cm
高。
4.2　丛生苗的获得及分化培养　切取带叶茎段 0.
5 cm长 ,横放在培养基(2)上 , 1星期后 ,叶腋节间
有侧芽萌动 ,20 d后长出带叶的芽 2 ～ 3个左右 ,并
可继续生长 ,以此方法反复继代可获大量侧芽 。
4.3　愈伤组织的获得及分化培养　取不带叶腋节
间的叶柄剪成 0.5 cm长接种到培养基(3)～(6),15
d后茎段两端长出愈伤组织。培养基(3)上的愈伤
组织呈淡黄色 ,结构紧密 ,在光照下逐渐变淡绿色 ,
呈颗粒状 ,结构紧密 ,增殖速度很快 , 30 d 可长满
瓶底 ,转入培养基(7)后 30 d可分化出芽。而培养
基(4)～ (6)上的茎段愈伤组织少 ,呈水渍状 ,半透
明褐黄色 ,随着培养时间的延长慢慢变褐黄色而死
亡 。
4.4　诱导生根　切取长约 3 cm 左右的绿芽移入
培养基(8)中 ,25 d后即可长成株高 4 ～ 5 cm ,具2 ～
3片叶 ,2 ～ 3条根的小苗 ,生根率 100%。
4.5　试管苗移栽　将炼苗 7 d 的生根小苗用清水
洗去其基部的培养基 ,栽入熟土 、泥炭土 3∶1的混合
基质中 ,于散射光下培养 ,环境温度25 ～ 28 ℃, 相
对湿度 80%以上 ,15 d 后开始长出新叶 ,移栽成活
率达 90%以上。
5　意义与进展　黎豆是蝶形花科黎豆属植物中的
一个栽培种 ,在广西称为猫豆 ,是一年生缠绕草质
藤本植物。既可作蔬菜食用及家畜家禽的优良饲
料 ,又是提取治疗帕金森氏症 、锰中毒和一氧化碳
中毒引起的震颤麻痹综合症有显著疗效的左旋多
巴(L-Dopa)药物的原料 。在黎豆属中有 3个种(猫
豆 、茸毛黎豆 、黑皮黎豆),其中以猫豆的左旋多巴
含量最高 ,可达 9.54%～ 9.94%,比其余两种黎豆
含量高出 1%～ 2%左右 ,是极其珍贵的种质资源 。
而含量较高的猫豆品种只在广西两个地区有少量
种植 ,资源很缺乏。本文结果为黎豆的快速繁殖 ,
利用和保存种质资源提供了可能的方法 。
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