全 文 ：西北农业学报　２０１２，２１（３）：１５３－１５７
Ａｃｔａ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｅ　Ｂｏｒｅａｌｉ－ｏｃｃｉｄｅｎｔａｌｉｓ　Ｓｉｎｉｃａ
氟乐灵诱导百合２ｎ花粉的研究
＊
封　紫，刘瑞峰，贾桂霞
（北京林业大学 园林学院，国家花卉工程技术中心，北京　１０００８３）
摘　要：为恢复Ｆ１ 育性以及进行倍性和基因渗入育种奠定基础，以ＬＡ系列百合Ｂｏｎｓｉｏｒ（２ｎ＝３ｘ＝３６）为材
料，对不同长度花蕾减数分裂的进程进行显微镜观察，并采用注射法对不同体积分数和剂量的氟乐灵诱导２ｎ
花粉进行研究。结果表明，小孢子母细胞减数分裂时期与花蕾的长度有一定的相关性。以粗线期至中期Ⅰ的
花蕾作为处理对象，２ｎ花粉的诱导率随着氟乐灵体积分数和剂量的增加而增加，但对花蕾的伤害也在加深。
综合分析表明，氟乐灵体积分数为２．５％、剂量为６０μＬ时诱导效果较好，诱导率为５１．６％。因此，氟乐灵可
以作为一种“纺锤体抑制剂”，能有效地诱导２ｎ配子。
关键词：百合；２ｎ花粉；氟乐灵
中图分类号：Ｓ６８１．９　　　　文献标志码：Ａ　　　　　文章编号：１００４－１３８９（２０１２）０３－０１５３－０５
Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　２ｎＰｏｌｅｎｓ　ｂｙ　Ｔｒｉｆｌｕｒａｌｉｎ　ｉｎ
Ｌｏｎｇｉｆｌｏｒｕｍ×Ａｓｉａｔｉｃ　Ｈｙｂｒｉｄ（Ｌｉｌｉｕｍ）
ＦＥＮＧ　Ｚｉ，ＬＩＵ　Ｒｕｉｆｅｎｇ　ａｎｄ　ＪＩＡ　Ｇｕｉｘｉａ
（Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｌａｎｄｓｃａｐｅ　Ａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　Ｆｏｒｅｓｔｒｙ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｔｉｏｎａｌ
Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｃｅｎｔｅｒ　ｆｏｒ　Ｆｌｏｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　１０００８３，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ　ｏｒｄｅｒ　ｔｏ　ｂｕｉｌｄ　ｔｈｅ　ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ｒｅｓｔｏｒｉｎｇ　Ｆ１ｓｔｅｒｉｌｉｔｙ，ｐｏｌｙｐｌｏｉｄｉｚａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｎｔｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ
ｂｒｅｅｄｉｎｇ，ｗｅ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ　ｔｈｅ　ｍｅｉｏｓｉｓ　ｏｆ　ＬＡ　ｈｙｂｒｉｄ　ｌｉｌｙ　Ｂｏｎｓｉｏｒ（２ｎ＝３ｘ＝３６）ｗｉｔｈ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｂｕｄ　ｓｉｚｅｓ　ｂｙ
ｔｈｅ　ｏｐｔｉｃａｌ　ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ　ａｎｄ　ａｔｔｅｍｐｔｅｄ　ｔｏ　ｉｎｄｕｃｅ　２ｎｐｏｌｅｎｓ　ｂｙ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｖｏｌｕｍｅ　ｆｒａｃｔｉｏｎ　ａｎｄ
ｄｏｓｅｓ　ｏｆ　ｔｒｉｆｌｕｒａｌｉｎ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｂｕｄ　ｓｉｚｅｓ　ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ　ｓｔａｇｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ
ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｅ　ｍｏｔｈｅｒ　ｃｅｌｓ．Ｔｈｅ　ｂｕｄｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｔａｇｅｓ　ｆｒｏｍ　ｐａｃｈｙｔｅｎｅ　ｔｏ　ｍｅｔａｐｈａｓｅⅠ ｗｅｒｅ　ｃｈｏｓｅｎ　ａｓ　ｏｂ－
ｊｅｃｔｓ．Ｔｈｅ　ｎｕｍｂｅｒｓ　ｏｆ　２ｎｐｏｌｅｎｓ　ｗｅｒｅ　ｇｒｏｗｉｎｇ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ　ｏｆ　ｔｒｉｆｌｕｒａｌｉｎ　ｖｏｌｕｍｅ　ｆｒａｃｔｉｏｎ　ａｎｄ
ｄｏｓａｇｅ，ａｔ　ｔｈｅ　ｓａｍｅ　ｔｉｍｅ　ｔｈｅ　ｂｕｄｓ　ｗｅｒｅ　ｄａｍａｇｅｄ　ｍｏｒｅ　ｓｅｒｉｏｕｓｌｙ．Ｔｈｒｏｕｇｈ　ｔｈｅ　ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ　ａｎａｌｙ－
ｓｉｓ，ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ｉｎｄｕｃｉｎｇ　２ｎｐｏｌｅｎｓ　ｗａｓ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　６０μＬ　ｏｆ　２．５％ｔｒｉｆｌｕｒａｌｉｎ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ
ａｎｄ　ｔｈｅ　ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｆｒｅｑｕｅｎｃｙ　ｗａｓ　５１．６％．Ｓｏ，ｔｒｉｆｌｕｒａｌｉｎ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ａ　ｓｐｉｎｄｌｅ　ｐｏｉｓｏｎ　ｔｏ　ｉｎｄｕｃｅ　２ｎｐｏｌｅｎｓ
ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｌｉｌｉｕｍ；２ｎｐｏｌｅｎ；Ｔｒｉｆｌｕｒａｌｉｎ
　　百合是世界上重要的切花品种。依据亲缘关
系，英国皇家园艺协会将百合分为９大类：亚洲百
合杂种系（Ａｓｉａｔｉｃ　ｈｙｂｒｉｄｓ）、星叶百合杂种系
（Ｍａｒｔａｇｏｎ　ｈｙｂｒｉｄｓ）、白花百合杂种系（Ｅｕｒｏ－
Ｃａｕｃａｓｉａｎ　ｈｙｂｒｉｄｓ）、美洲百合杂种系（Ａｍｅｒｉｃａｎ
ｈｙｂｒｉｄｓ）、麝香百合杂种系（Ｌｏｎｇｉｆｌｏｒｕｍ　ｌｉｌｉｅｓ）、
喇叭形和奥列莲杂种系（Ｔｒｕｍｐｅｔ　ａｎｄ　Ａｕｒｅｌｉａｎ
ｈｙｂｒｉｄｓ）、东方百合杂种系（Ｏｒｉｅｎｔａｌ　ｈｙｂｒｉｄｓ）、其
他杂种系（Ｏｔｈｅｒ　ｈｙｂｒｉｄｓ）、原生种（Ｓｐｅｃｉｅｓ　ａｎｄ
ｃｕｌｔｉｖａｒｓ　ｏｆ　ｓｐｅｃｉｅｓ）［１］。其中亚洲百合、东方百合
和麝香百合杂种系为主要切花和园林绿化品种之
源［２］。亚洲百合开花早，无香味，颜色丰富；东方
＊ 收稿日期：２０１１－０８－２４　　修回日期：２０１１－１０－２５
基金项目：国家自然科学基金（３１０７１８１９）；国家科学支撑计划（２００９ＢＡＤＢ８Ｂ０４）。
第一作者：封　紫，女，博士，研究方向为观赏植物遗传育种。Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｅｌｅｚｉｆｅｎｇ＠１６３．ｃｏｍ
通讯作者：贾桂霞。Ｅ－ｍａｉｌ：ｇｘｊｉａ＠ｂｊｆｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
系列花型大，颜色单一，具有香味；麝香百合花型
优美，有香味但以白色居多。因此，对这３个群体
进行种间杂交，实现基因渗入，获得具有优良性状
的品种成为现代百合育种的一个重要方向。为了
实现优异园艺性状的综合，在不同杂种系间进行
杂交和回交是必需的［３］。但百合不同杂种系间亲
缘关系较远，产生的杂种是高度不育的［４－５］。而恢
复杂种育性的重要且非常有效的方法就是染色体
的体细胞加倍和２ｎ配子的诱导［４］。但是由体细
胞加倍获得的异源四倍体在减数分裂期间由于同
源染色体配对而无法在异源多倍体中实现基因组
间的重组，对基因渗入育种的贡献较小［６］。而当
有性加倍被用来获得多倍体时，在２ｎ配子形成过
程中发生基因组间的重组，增加遗传变异，对植物
的改进具有非常重要的意义［４－５］。
目前，国内关于观赏植物２ｎ雄配子诱导的研
究较少，且使用的化学试剂多为秋水仙碱。郑思
乡等［７］利用１．０～４．０ｇ／Ｌ的秋水仙碱诱导东方
百合２ｎ雄配子，得出３０ｇ／Ｌ的秋水仙碱诱导效
果较好，诱导率为２５．８％。吴红芝等［８］对彩色马
蹄莲２ｎ花粉的诱导表明，１．５ｇ／Ｌ的秋水仙碱可
以诱导出比正常花粉大４５％的大花粉。肖亚琼
等［９］对鹤望兰２ｎ配子的诱导研究得出，２．０ｇ／Ｌ
的秋水仙碱诱导效果最好，诱导率为１７．３％。
由于秋水仙碱相对昂贵，有部分学者开始研
究除草剂对２ｎ配子形成的影响。氟乐灵（２，６－二
硝基－Ｎ，Ｎ－二正丙基－４－三氟甲基苯胺）是人工合
成的化学药剂，通常被用作除草剂。Ｊａｃｋｓｏｎ
等［１０］发现氟乐灵可以导致纺锤体微管和细胞板
的消失。Ｓｕｗａｎａｋｅｔｎｉｋｏｍ［１１］认为在所有高等植
物的真核细胞中微管是蛋白质结构，一些除草剂
可以使植物细胞中的微管无法形成，类似于秋水
仙碱的功能，造成细胞分裂过程中纺锤丝的缺失。
２００８年Ｓｏｈｈａ［１２］利用氟乐灵对柑橘属品种进行
有性加倍，获得较好的诱导效果。
目前，国内外还没有关于氟乐灵用于百合有
性加倍的报道。且ＬＡ系列百合是从麝香百合和
亚洲百合的杂交后代中选育出来的，具有花色丰
富、香气淡雅及抗性较强等优良性状。但ＬＡ系
列百合中的三倍体品种由于减数分裂异常导致大
多数花粉败育 ［２，１３］，限制其作为育种资源的利用。
因此，本试验对氟乐灵诱导ＬＡ百合２ｎ配子进行研
究和探索，以克服ＬＡ系列百合的不育性［２］。
１　材料与方法
材料为百合ＬＡ系列的品种Ｂｏｎｓｉｏｒ（２ｎ＝３ｘ
＝３６），其染色体见图１。露地种植于北京林业大
学小汤山花卉工程中心基地。利用涂片法对
Ｂｏｎｓｉｏｒ不同花蕾长度的减数分裂时期进行观察，
对处于中期Ⅰ的花蕾进行氟乐灵处理。对氟乐灵
体积分数和剂量设计试验方案见表１。采用微量
注射剂对花蕾进行顶端注射。在花朵盛开时收集
花粉，晾干并保存在－２０℃冰箱。利用显微镜对
每个处理的５００粒花粉进行观察，以花粉粒直径
为正常花粉粒的１３０％作为２ｎ花粉的标准［７］，统
计大花粉、小花粉数，并进行分析。
２　结果与分析
２．１　减数分裂时期与花蕾长度的对应关系
对不同花蕾大小与与减数分裂时期的对应关
系进行观察，结果见表２。在花蕾达到１７ｍｍ时
进入减数分裂的间期，１８～２０ｍｍ的花蕾多为减
数分裂前期Ⅰ，处于中期Ⅰ的花蕾长度多为
２１ｍｍ左右，２４～２５ｍｍ的花蕾多处于减数分裂
图１　Ｂｏｎｓｉｏｒ染色体（２ｎ＝３ｘ＝３６）
Ｆｉｇ．１　Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ　ｏｆ　Ｂｏｎｓｏｉｒ（２ｎ＝３ｘ＝３６）
表１　试验设计
Ｔａｂｌｅ　１　Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｄｅｓｉｇｎ
试验编号
Ｔｅｓｔ　ｎｕｍｂｅｒ
氟乐灵体积分数／％
Ｖｏｌｕｍｅ　ｆｒａｃｔｉｏｎ
ｏｆ　ｔｒｉｆｌｕｒａｌｉｎ
处理剂量／μＬ
Ｄｏｓａｇｅ
Ａ　 １．０　 ２０
Ｂ　 １．０　 ４０
Ｃ　 １．０　 ６０
Ｄ　 ２．５　 ２０
Ｅ　 ２．５　 ４０
Ｆ　 ２．５　 ６０
Ｇ　 ５．０　 ２０
Ｈ　 ５．０　 ４０
Ｉ　 ５．０　 ６０
·４５１· 西　北　农　业　学　报　　　　　　　　　　　　　　　　　　２１卷
中期Ⅱ。花蕾２８ｍｍ时出现大量的游离小孢子。
此外，Ｂｏｎｓｉｏｒ花蕾长度与减数分裂时期不是完全
对应的关系，在１９～２８ｍｍ花蕾中减数分裂出现
细胞间的不同步性。参考Ａｋｕｔｓｕ等［１４］的试验结
果，即减数分裂中期Ⅰ为诱导２ｎ配子的较好时
期。因此，选择２１ｍｍ左右的花蕾作为氟乐灵处
理材料。
２．２　氟乐灵对花蕾生长的影响
氟乐灵是一种“纺锤体抑制剂”，它不仅抑制
纺锤体的形成，同时也对花蕾的生长造成伤害。
与正常的花朵（图２）相比，氟乐灵处理后的花朵
变小，中间３花瓣不完全展开，而花瓣厚度增加
（图３）。从表３可以看出，在同一剂量下，凋谢花
蕾数随氟乐灵体积分数增加而增加。当氟乐灵体
积分数一致时，注射剂量与凋谢花蕾数呈正相关。
２．３　氟乐灵对２ｎ花粉形成的影响
根据与未处理花朵的花粉进行比较，氟乐灵
试剂的处理能有效地促进２ｎ花粉的形成（图４，
图５）。总体来说，在试验的设定范围内，２ｎ配子
随着氟乐灵体积分数和剂量的增加而增加
（图６）。当氟乐灵体积分数为５．０％、剂量为
６０μＬ时，２ｎ 配 子 的 诱 导 率 达 到 最 大 值，为
５９．７％；但此处理后的花蕾有４０％凋谢，而其他
均为畸形花蕾。综合氟乐灵对花蕾生长及２ｎ配
子诱导的影响，本试验认为氟乐灵体积分数为
２．５％、剂量为６０μＬ时诱导效果较好。
表２　Ｂｏｎｓｉｏｒ减数分裂时期与花蕾长度的关系
Ｔａｂｌｅ　２　Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｍｅｉｏｔｉｃ　ｓｔａｇｅｓ　ａｎｄ　ｂｕｄ　ｓｉｚｅｓ
花蕾长度／ｍｍ
Ｌｅｎｇｔｈ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｂｕｄｓ
花药颜色
Ｃｏｌｏｕｒ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｎｔｈｅｒｓ
减数分裂时期
Ｓｔａｇｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍｅｉｏｓｉｓ
１７ 绿色 Ｇｒｅｅｎ 间期Ｉｎｔｅｒｐｈａｓｅ
１８ 绿色Ｇｒｅｅｎ 细线期Ｌｅｐｔｏｔｅｎｅ
１９ 绿色Ｇｒｅｅｎ 细线期、粗线期Ｌｅｐｔｏｔｅｎｅ，ｐａｃｈｙｔｅｎｅ
２０ 绿色Ｇｒｅｅｎ 粗线期、终变期、中期Ｉｐａｃｈｙｔｅｎｅ，ｄｉａｋｉｎｅｓｉｓ，ｍｅｔａｐｈａｓｅⅠ
２１ 绿色Ｇｒｅｅｎ 终变期
、中期Ⅰ、后期Ⅰ、末期Ⅰ Ｄｉａｋｉｎｅｓｉｓ，ｍｅｔａｐｈａｓｅⅠ，ａｎａｐｈａｓｅⅠ，ｔｅｌｏ－
ｐｈａｓｅⅠ
２２ 淡绿色Ｌｉｇｈｔｇｒｅｅｎ
中期Ⅰ、后期Ⅰ、末期Ⅰ、前期Ⅱ、中期Ⅱ ＭｅｔａｐｈａｓｅⅠ，ａｎａｐｈａｓｅⅠ，ｔｅｌｏ－
ｐｈａｓｅⅠ，ｐｒｏｐｈａｓｅⅡ，ｍｅｔａｐｈａｓｅⅡ
２３ 淡绿色Ｌｉｇｈｔｇｒｅｅｎ 末期Ⅰ、前期Ⅱ、中期Ⅱ ＴｅｌｏｐｈａｓｅⅠ，ｐｒｏｐｈａｓｅⅡ，ｍｅｔａｐｈａｓｅⅡ
２４ 淡黄绿色Ｐｉｓｔａｃｈｉｏ 中期Ⅱ、后期Ⅱ、末期Ⅱ ＭｅｔａｐｈａｓｅⅡ，ａｎａｐｈａｓｅⅡ，ｔｅｌｏｐｈａｓｅⅡ
２５ 淡黄绿色Ｐｉｓｔａｃｈｉｏ 中期Ⅱ、后期Ⅱ、末期Ⅱ ＭｅｔａｐｈａｓｅⅡ，ａｎａｐｈａｓｅⅡ，ｔｅｌｏｐｈａｓｅⅡ
２６ 黄绿色 Ｋｅｌｙ 后期Ⅱ、末期ⅡａｎａｐｈａｓｅⅡ，ｔｅｌｏｐｈａｓｅⅡ
２７ 黄绿色Ｋｅｌｙ 末期Ⅱ、四分体时期 ＴｅｌｏｐｈａｓｅⅡ，ｔｈｅ　ｓｔａｇｅ　ｏｆ　ｔｅｔｒａｄ
２８ 黄绿色Ｋｅｌｙ 四分体时期、游离的小孢子时期 Ｔｈｅ　ｓｔａｇｅ　ｏｆ　ｔｅｔｒａｄ，ｔｈｅ　ｓｔａｇｅ　ｏｆ　ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｅｓ
表３　氟乐灵体积分数和剂量对Ｂｏｎｓｉｏｒ花蕾生长的影响
Ｔａｂｌｅ　３　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｖｏｌｕｍｅ　ｆｒａｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｄｏｓｅｓ　ｏｆ　ｔｒｉｆｌｕｒａｌｉｎ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｏｆ　Ｂｏｎｓｉｏｒ　ｂｕｄｓ
试验编号
Ｔｅｓｔ　ｎｕｍｂｅｒ
凋谢花数
Ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆ
ｗｉｔｈｅｒｅｄ　ｆｌｏｗｅｒｓ
畸形花数
Ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆ
ｆｒｅａｋ　ｆｌｏｗｅｒｓ
正常花数
Ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆ　ｎｏｒｍａｌ
ｆｌｏｗｅｒｓ
成花率／％
Ｆｌｏｗｅｒｉｎｇ
ｒａｔｅ
Ａ　 ２　 ２　 １６　 ９０
Ｂ　 １０　 ２　 ８　 ５０
Ｃ　 １０　 ４　 ６　 ５０
Ｄ　 ０　 ８　 １２　 １００
Ｅ　 ２　 １４　 ４　 ９０
Ｆ　 ６　 １４　 ０　 ７０
Ｇ　 ４　 １０　 ６　 ８０
Ｈ　 ４　 １６　 ０　 ８０
Ｉ　 ８　 １２　 ０　 ６０
·５５１·３期　　　　　　　　　　　　　　　封　紫等：氟乐灵诱导百合２ｎ花粉的研究
图２　正常开放的Ｂｏｎｓｉｏｒ花朵
Ｆｉｇ．２　Ｎｏｒｍａｌ　ｆｌｏｗｅｒ　ｏｆ　Ｂｏｎｓｉｏｒ
图３　氟乐灵处理后的Ｂｏｎｓｉｏｒ花朵
Ｆｉｇ．３　Ｔｒｅａｔｅｄ　ｆｌｏｗｅｒ　ｏｆ　Ｂｏｎｓｉｏｒ　ｂｙ　ｔｒｉｆｌｕｒａｌｉｎ
　　ａ．２ｎ花粉２ｎｐｏｌｅｎ；ｂ．正常花粉 Ｎｏｒｍａｌ　ｐｏｌｅｎ；ｃ．干瘪花粉
Ｗｉｚｅｎｅｄ　ｐｏｌｅｎ；下同 Ｔｈｅ　ｓａｍｅ　ａｓ　ｂｅｌｏｗ
图４　氟乐灵处理后的花粉
Ｆｉｇ．４　Ｐｏｌｅｎ　ｇｒａｉｎｓ　ｏｆ　Ｂｏｎｓｉｏｒ　ｔｒｅａｔｅｄ　ｂｙ　ｔｒｉｆｌｕｒａｌｉｎ
图５　自然形成的花粉
Ｆｉｇ．５　Ｐｏｌｅｎ　ｇｒａｉｎｓ　ｏｆ　Ｂｏｎｓｉｏｒ　ｐｒｏｄｕｃｅｄ　ｎａｔｕｒｅｌｙ
图６　氟乐灵诱导Ｂｏｎｓｉｏｒ产生２ｎ花粉的百分比
Ｆｉｇ．６　Ｔｈｅ　ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ　ｏｆ　２ｎｐｏｌｅｎ　ｇｒａｉｎｓ
ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ｔｒｉｆｌｕｒａｌｉｎ
３　讨 论
Ａｋｕｔｓｕ等［１４］的研究结果表明，对百合不同
减数分裂时期的小孢子母细胞进行２ｎ配子诱导，
效果差别很大，中期Ⅰ的诱导率较高。因此，对
Ｂｏｎｓｉｏｒ不同长度的花蕾进行减数分裂的观察是
必要的。百合Ｌ．ｌｏｎｇｉｆｌｏｒｕｍ 花蕾的长度与花
粉的发育阶段是相互关联的［１５－１６］。Ａｋｕｔｓｕ等［１４］
也在亚洲百合 Ｍｏｎａ中观察到花蕾长度在减数分
裂前到二核期范围内是与花粉的发育阶段相关联
的，但不同花蕾的花药发育阶段是不同步的。这
与本试验的观察结果一致，且同一花药内的小孢
子母细胞的发育阶段也是不同步的。
用于诱导２ｎ配子的化学试剂被称为“纺锤体
抑制剂”，它们阻碍减数分裂时期纺锤体的形
成［１７－１８］。用于百合有性加倍的试剂有秋水仙
碱［１９］、安磺灵［２０］和Ｎ２Ｏ［１４，２１－２２］等。Ｓｏｈｈａ［１２］使用
氟乐灵对柑橘属品种进行有性加倍，得出２ｎ雄配
子随着氟乐灵体积分数的增加而增加。试验采用
低体积分数低剂量的氟乐灵就可以获得较高的
２ｎ配子诱导率，且诱导率随着氟乐灵体积分数的
增加而增加。氟乐灵价格便宜，是一种经济、低
毒、实施方便的“纺锤体抑制剂”，可以用于百合
２ｎ配子诱导。但试验中，氟乐灵对花蕾的毒害作
用相当明显，还需对氟乐灵体积分数和剂量作进
一步筛选。
未减数配子是百合种间杂种Ｆ１ 代不育性的
重要途径［２３］。为了将远缘染色体片段成功地渗
入品种或其他基因型中，异源二倍体的未减数配
子是最佳的选择［２３］。本试验成功地获得大量的
２ｎ花粉，为克服Ｆ１ 代的不育性以及进行基因渗
入育种奠定基础。
·６５１· 西　北　农　业　学　报　　　　　　　　　　　　　　　　　　２１卷
参考文献：
［１］　Ｋａｔｅ　Ｄｏｎａｌｄ．Ｔｈｅ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｌｉｌｙ　Ｒｅｇｉｓｔｅｒ　ａｎｄ　Ｃｈｅｃｋｌｉｓｔ
２００７Ｓｅｃｏｎｄ　Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ［Ｍ］．Ｎｏｒｗｉｃｈ：Ｔｈｅ　Ｒｏｙａｌ　Ｈｏｒｔｉ－
ｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｏｃｉｅｔｙ，２０１０：２－３．
［２］　Ｂａｒｂａ－Ｇｏｎｚａｌｅｚ　Ｒ，Ｌｏｋｋｅｒ　Ｂ　Ｈ，Ｌｉｍ　Ｋ　Ｂ，ｅｔ　ａｌ．Ｕｓｅ　ｏｆ　２ｎ
ｇａｍｅｔｅｓ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｅｘｕａｌ　ｐｏｌｙｐｌｏｉｄｓ　ｆｒｏｍ　ｓｔｅｒｉｌｅ
Ｏｒｉｅｎｔａｌ× Ａｓｉａｔｉｃ　ｈｙｂｒｉｄｓ　ｏｆ　ｌｉｌｉｅｓ（Ｌｉｌｉｕｍ）［Ｊ］．Ｔｈｅｏｒｅｔｉ－
ｃａｌ　ａｎｄ　Ａｐｐｌｉｅｄ　Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，２００４，１０９：１１２５－１１３２．
［３］　Ｚｈｏｕ　Ｓｈｕｊｕｎ．Ｉｎｔｅｒｇｅｎｏｍｉｃ　ｒｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｎｔｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ
ｂｒｅｅｄｉｎｇ　ｉｎ　ｌｏｎｇｉｆｌｏｒｕｍ×Ａｓｉａｔｉｃ　ｌｉｌｉｅｓ［Ｄ］．Ｗａｇｅｎｉｎｇｅｎ：
Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｗａｇｅｎｉｎｇｅｎ，２００７．
［４］　Ｖａｎ　Ｔｕｙｌ　Ｊ　Ｍ，Ｌｉｍ　Ｋ　Ｂ，Ｒａｍａｎｎａ　Ｍ　Ｓ．Ｉｎｔｅｒｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｈｙ－
ｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｉｎｔｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ［Ｍ］／／Ｖａｉｎｓｔｅｉｎ　Ａ（Ｅｄ）．Ｂｒｅｅｄ－
ｉｎｇ　ｆｏｒ　ｏｒｎａｍｅｎｔａｌｓ：ｃｌａｓｓｉｃａｌ　ａｎｄ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ．
Ｄｏｒｄｒｅｃｈｔ：Ｋｌｕｗｅｒ　Ａｃａｄｅｍｉｃ　Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，２００２：８５－１０３．
［５］　Ｖａｎ　Ｔｕｙｌ　Ｊ　Ｍ，Ｌｉｍ　Ｋ　Ｂ．Ｉｎｔｅｒｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｈｙｂｒｉｄｉｓａｔｉｏｎ　ａｎｄ
ｐｏｌｙｐｌｏｉｄｉｚａｔｉｏｎ　ａｓ　ｔｏｏｌｓ　ｉｎ　ｏｒｎａｍｅｎｔａｌ　ｐｌａｎｔ　ｂｒｅｅｄｉｎｇ［Ｊ］．
Ａｃｔａ　Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒａｅ，２００３，６１２：１３－２２．
［６］　 Ｒａｍａｎｎａ　Ｍ　Ｓ，Ｊａｃｏｂｓｅｎ　Ｅ．Ｒｅｌｅｖａｎｃｅ　ｏｆ　ｓｅｘｕａｌ
ｐｏｌｙｐｌｏｉｄｉｚａｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ｃｒｏｐ　ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ　ａ　ｒｅｖｉｅｗ［Ｊ］．Ｅｕｐｈｙｔ－
ｉｃａ，２００３，１３３：３－１８．
［７］　郑思乡，向仕华，章海龙，等．东方百合２ｎ雌配子诱导及三
倍体多样性研究［Ｊ］．云南农业大学学报，２００５，２０（３）：
３０９－３１２．
［８］　吴红芝，石景峰，郑思乡，等．彩色马蹄莲２ｎ花粉诱导及其
三倍体植株的获得［Ｊ］．农业生物技术学报，２０１１，１９（４）：
６６２－６６８．
［９］　肖亚琼，郑思乡，龙春林，等．鹤望兰２ｎ配子诱导研究初报
［Ｊ］．云南农业大学学报：自然科学版，２００７，２２（４）：４７５－
４７９．
［１０］　Ｊａｃｋｓｏｎ　Ｗ　Ｇ，Ｓｔｅｌｅｒ　Ｄ　Ａ．Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍｉｔｏｓｉｓ．Ⅳ．Ａｎ　ｉｎ
ｖｉｔｒｏ　ａｎｄ　ｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｔｒｉｆｌｕｒａｌｉｎ［Ｊ］．
Ｃａｎａｄｉａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｂｏｔａｙ，１９７３，５１：１５１３－１５１６．
［１１］　Ｓｕｗａｎａｋｅｔｎｉｋｏｍ　Ｒ．Ｈｅｒｂｉｃｉｄｅ　ａｎｄ　ｐｌａｎｔ　ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ［Ｄ］．
Ｂａｎｇｋｏｋ：Ａｇｒｏｎｏｍｙ　Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ，Ｆａｃｕｌｔｙ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，
Ｋａｓｅｔｓａｒｔ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，１９８８．
［１２］　Ｓｏｈｈａ　Ｔｏｏｌａｐｏｎｇ．Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｔｒｉｆｌｕｒａｌｉｎ　ｏｎ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ
ｍａｌｅ　ｂｉｃｅｌｕｌａｒ　ｃｅｌｓ　ｉｎ“Ｓａｉ　Ｎｕｍ　Ｐｈｕｅｎｇ”ｍａｎｄａｒｉｎ（Ｃｉｔｒｕｓ
ｒｅｔｉｃｕｌａｔａ），ｃａｌａｍｏｎｄｉｎ （Ｃｉｔｒｏｆｏｒｔｕｎｅｌｌａ　ｍｉｔｉｓ），ａｎｄ
“Ｐａｅｎ”ｌｉｍｅ（Ｃｉｔｒｕｓ　ａｕｒａｎｔｉｆｏｌｉａ）［Ｊ］．Ｍａｅｊｏ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ
Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００８，２（３）：４８３－４８８．
［１３］　Ｌｉｍ　Ｋ　Ｂ，Ｃｈｕｎｇ　Ｊ　Ｄ，Ｖａｎ　Ｋｒｏｎｅｎｂｕｒｇ　Ｂ　Ｃ　Ｅ，ｅｔ　ａｌ．Ｉｎｔｒｏ－
ｇｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　Ｌｉｌｉｕｍ　ｒｕｂｅｌｌｕｍ Ｂａｋｅｒ　ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ　ｉｎｔｏ　Ｌ．
ｌｏｎｇｉｆｌｏｒｕｍ Ｔｈｕｎｂ：ａ　Ｇｅｎｏｍｅ　ｐａｉｎｔｉｎｇ　ｓｔｕｄｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｆ１
ｈｙｂｒｉｄ，ＢＣ１ａｎｄ　ＢＣ２ｐｒｏｇｅｎｉｅｓ［Ｊ］．Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ　Ｒｅ－
ｓｅａｒｃｈ，２０００，８：１１９－１２５．
［１４］　Ａｋｕｔｓｕ　Ｍ，Ｋｉｔａｍｕｒａ　Ｓ，Ｔｏｄａ　Ｒ，ｅｔ　ａｌ．Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　２ｎ
ｐｏｌｅｎ　ｏｆ　Ａｓｉａｔｉｃ　ｈｙｂｒｉｄ　ｌｉｌｉｅｓ　ｂｙ　ｎｉｔｒｏｕｓ　ｏｘｉｄｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ
［Ｊ］．Ｅｕｐｈｙｔｉｃａ，２００７，１５５：１４３－１５２．
［１５］　ＤｅＧｕｚｍａｎ　Ｒ，Ｒｉｇｇｓ　Ｄ．Ａ　ｓｕｒｖｅｙ　ｏｆ　ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ　ａｃｔｉｖｅ　ｄｕｒ－
ｉｎｇ　ｍｅｉｏｔｉｃ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔａ，２０００，２１０：９２１－９２４．
［１６］　Ｓａｎｏ　Ｙ，Ｔａｎａｋａ　Ｉ．Ａ　ｈｉｓｔｏｎｅ　Ｈ３．３－ｌｉｋｅ　ｇｅｎｅ　ｓｐｅｃｉｆｉｃａｌｙ
ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ　ｃｅｌ　ｏｆ　ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ　ｌｉｌｙ　ｐｏｌｅｎ
［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ　Ｃｅｌ　Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，２００５，４６：１２９９－１３０８．
［１７］　Ｄａｒｌｉｎｇｔｏｎ　Ｃ　Ｄ．Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ　ｂｏｔａｎｙ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｏｒｉｇｉｎｓ　ｏｆ
ｃｕｌｔｉｖａｔｅｄ　ｐｌａｎｔｓ［Ｍ］．Ｌｏｎｄｏｎ：Ｇｅｏｒｇｅ　Ａｌｅｎ　ａｎｄ　Ｕｎｗｉｎ
Ｌｔｄ．，１９６７：２３１．
［１８］　Ｇｒａｎｔ　Ｖ．Ｐｌａｎｔ　ｓｐｅｃｉａｔｉｏｎ，ｓｅｃｏｎｄ　ｅｄｉｔｉｏｎ［Ｍ］．Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ：
Ｃｏｌｕｍｂｉａ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｐｒｅｓｓ，１９８１．
［１９］　臧淑珍，杨佳明，赵兴华，等．秋水仙碱不同处理方法和浓
度诱导百合 ２ｎ配子的研究［Ｊ］．北方园艺，２０１０，１１：
９８－１００．
［２０］　Ｖａｎ　Ｔｕｙｌ　Ｊ　Ｍ．Ｓｕｒｖｅｙ　ｏｆ　ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｏｎ　ｍｉｔｏｔｉｃ　ａｎｄ　ｍｅｉｏｔｉｃ
ｐｏｌｙｐｌｏｉｄｉｚａｔｉｏｎ　ａｔ　ＣＰＲＯ－ＤＬＯ［Ｍ］．Ｔｈｅ　Ｌｉｌｙ　Ｙｅａｒｂｏｏｋ　ｏｆ
ｔｈｅ　Ｎｏｒｔｈ　Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｌｉｌｙ　Ｓｏｃｉｅｔｙ，１９９０，４３：１０－１８．
［２１］　Ｒｏｄｒｉｇｏ　Ｂａｒｂａ－Ｇｏｎｚａｌｅｚ，Ｃｈａｄ　Ｔ　Ｍｉｌｅｒ，Ｍｕｎｉｋｏｔｅ　Ｓ，ｅｔ　ａｌ．
Ｎｉｔｒｏｕｓ　ｏｘｉｄｅ（Ｎ２Ｏ）ｉｎｄｕｃｅｓ　２ｎｇａｍｅｔｅｓ　ｉｎ　ｓｔｅｒｉｌｅ　Ｆ１ｈｙ－
ｂｒｉｄｓ　ｂｅｔｗｅｅｎ　Ｏｒｉｅｎｔａｌ× Ａｓｉａｔｉｃ　ｌｉｌｙ（Ｌｉｌｉｕｍ）ｈｙｂｒｉｄｓ　ａｎｄ
ｌｅａｄｓ　ｔｏ　ｉｎｔｅｒｇｅｎｏｍｉｃ　ｒｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｅｕｐｈｙｔｉｃａ，２００６，
１４８：３０３－３０９．
［２２］　Ｓａｔｏ　Ｔ，Ｍｉｙｏｓｈｉ　Ｋ，Ｏｋａｚａｋｉ　Ｋ．Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　２ｎｇａｍｅｔｅｓ
ａｎｄ　４ｎｅｍｂｒｙｏ　ｉｎ　Ｌｉｌｉｕｍ （Ｌｉｌｉｕｍ×Ｆｏｒｍｏｌｏｎｇｉ　Ｈｏｒｔ．）
ｂｙ　ｎｉｔｒｏｕｓ　ｏｘｉｄｅ　ｇａｓ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ［Ｊ］．Ａｃｔａ　Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒａｅ，
２００９，８５５：２４３－２４８．
［２３］　Ｌｉｍ　Ｋ　Ｂ．Ｉｎｔｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ　ｂｒｅｅｄｉｎｇ　ｔｈｒｏｕｇｈ　ｉｎｔｅｒｓｐｅｃｉｆｉｃ
ｐｏｌｙｐｌｏｉｄｉｓａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｌｉｌｙ：ａ　ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｃｙｔｏｇｅｎｅｔｉｃ　ｓｔｕｄｙ［Ｄ］．
Ｗａｇｅｎｉｎｇｅｎ：Ｗａｇｅｎｉｎｇｅｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２０００．
·７５１·３期　　　　　　　　　　　　　　　封　紫等：氟乐灵诱导百合２ｎ花粉的研究