作 者 :尚爱芹;高永鹤;段龙飞;杨利平;
期 刊 :园艺学报 2014年 01期 页码:149-156
关键词:百合;抗热性;转录因子;AtDREB2A;遗传转化;
摘 要 :以东方百合‘西伯利亚’为试验材料,探讨影响农杆菌转化效率的因素,优化了以无菌小鳞片为外植体的遗传转化体系,通过农杆菌介导法将逆境诱导转录因子AtDREB2A基因转入百合基因组中。结果表明:外植体预培养3 d,侵染菌液浓度OD600=0.8,侵染时间20 min,25℃下共培养3 d,获得的卡那霉素阳性植株率最高。对获得的59株抗性单株进行PCR检测,有28个单株的DNA经扩增后产生了与阳性对照相同的特异扩增带。进一步对转基因阳性植株进行Southern杂交鉴定,结果表明外源基因已经整合到转化植株的基因组中。生理指标测定表明转基因植株的对高温的适应性有一定程度的提高。