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试管内形成东方百合鳞茎的组织培养



全 文 :试管内形成东方百合鳞茎的组织培养
庄志鸿 刘 建(福建省农业科学院生物技术中心 , 福州 350003)
Tissue Culture of the Bulblet Formed in Tube of Lilium acapulco
ZHUANG Zhi-Hong , LIU Jian(Biological Technology Centre , Fujian Academy of Agricultural Sciences , Fuzhou 350003)
1 植物名称 东方百合(Lilium acapulco)。
2 材料类别 鳞茎内层鳞片 。
3 培养条件 (1)鳞片诱导从芽和增殖培养基:N6
+6-BA 1.0 ~ 2.0 mg·L-1(单位下同)+NAA 1.0;
(2)生鳞茎培养基:MS +6-BA 1.0 ~ 2.0+PP333
1.0 ~ 3.0+NAA 0.05 ~ 0.1;(3)生根培养基:MS
+IBA 0.1 ~ 0.2 。所有培养基均附加0.7%琼脂
和3%的蔗糖 , pH 5.8 ~ 6.0 , 培养温度(25 ±
2)℃,光照 12 h·d-1 ,光照度 2 000 lx 左右。
4 生长与分化情况
4.1 鳞片外植体的灭菌 将用作外植体的鳞茎用
自来水冲洗干净后 ,去掉外层鳞片 ,一层层剥离内
层鳞片。在超净工作台上先用 75%酒精棉球擦拭
鳞片表面 ,再用 0.1%HgCl2消毒 10 min ,然后用无
菌水洗 4 ~ 5次 ,接种于(1)号培养基上 ,较大的鳞
片可切成几小块 。
4.2 丛生芽的诱导及增殖培养 鳞片在培养基
(1)上 10 ~ 15 d后开始膨大增厚 ,继而周围出现浅
绿色颗粒状的愈伤组织 ,约 1 个月后 ,从愈伤组织
上分化出淡绿色的丛芽 ,并逐渐长高 。丛芽生长约
半个月绿色叶片展开后 ,将外植体切成带 3 ~ 4 个
芽的小鳞片 ,仍旧转接到培养基(1)上进行增殖培
养。10 ~ 15 d后每块小鳞片又可分化形成丛芽 ,增
值系数 3 ~ 4 ,1个月可继代培养 1次。
4.3 小鳞茎的诱导 将生长 1个月的丛芽切分成
单芽 ,接种到培养基(2)上 ,10 d后底部开始部分愈
伤化 ,上半部叶片开始变黄枯萎 ,下半部颜色逐渐
变深 、变肥厚 ,并且向内包紧(图 1),约 1个月后叶
片完全干枯形成深绿色鳞片紧包的小鳞茎。
4.4 生根培养与移栽 将完整小鳞茎取出 ,切除
周围杂乱组织和枯叶 ,接种到培养基(3)上 。约 15
d后开始生根 ,生根率 100%,待 30 d 后形成丛根
且根长至 1 cm 左右开始炼苗 ,炼苗 7 d左右 ,即可
移栽 。移栽时 ,小心洗去附着在根上的培养基 ,将
图 1 东方百合小磷茎的诱导
苗移入由珍珠岩 、蛭石和腐殖土 1∶1∶1混合而成的移
栽基质中 ,浇透水 ,盖上塑料薄膜 ,晴天每天早晚各
喷水 1次 ,约 2周后新根长出即可成活 ,成活率达
98%以上 。
5 意义与进展 东方百合是百合科百合属的一种
鳞茎球根类花卉 ,花白色略带粉色 ,有点香味 ,花苞
长 10 cm以上 ,花期为 6 ~ 7月份 ,易于盆栽和切花
观赏。且能药用和食用 ,其性平味甘微苦 ,有养阴
清热 、润肺止咳 、宁心安神之功效 ,故具有较高的经
济价值 。但靠常规鳞茎分株方法进行繁殖的繁殖
率低且易造成鳞茎退化。组织培养具有去病毒 、繁
殖快的优点 ,但瓶苗移栽成活率低 ,容易重新感染
病毒。采用试管内形成鳞茎的组培方法 ,可提高成
活率 、降低污染和感染病毒的机率 ,并有利于种质
保存。尚未见有东方百合以试管内形成的鳞茎作
组织培养的报道 。
收稿 2001-06-05    修定 2001-08-27
149植物生理学通讯 第 38 卷 第 2 期 , 2002年 4月
DOI :10.13592/j.cnki.ppj.2002.02.022