全 文 ：西北农业学报　２０１３，２２（３）：１４０－１４７
Ａｃｔａ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｅ　Ｂｏｒｅａｌｉ－ｏｃｃｉｄｅｎｔａｌｉｓ　Ｓｉｎｉｃａ
电子束辐照百合鳞茎后对生长发育的影响及ＲＡＰＤ分析
＊
王　阳１，李邱华４，李松林１，杨　欢１，何丽娴１，
杨春起４，张　涛２，苏　颖２，周云龙１，３
（１．北京师范大学 生命科学学院，北京　１００８７５；２．北京师范大学 核科学与技术学院，北京　１００８７５；
３．射线束技术与材料改性教育部重点实验室，北京　１００８７５；４．北京盛斯通生态科技有限责任公司，北京　１０２２０２）
摘　要　分别以５、１０、１５、２０、２５Ｇｙ电子束剂量辐照百合品种Ｓｔａｒｆｉｇｈｔｅｒ和Ｔｉｂｅｒ的鳞茎，发现该剂量梯度
明显抑制百合当代的营养生长和生殖生长，但不影响新鳞茎定植后第２代正常营养生长和开花，而且在
Ｃ－１５Ｇｙ第２代中发现花朵颜色变深、花瓣斑点长突起变短的变异株。以百合幼嫩叶片作为材料，应用
ＲＡＰＤ技术分析不同剂量电子束辐照的扩增结果。１１个试验组中，有５个随机引物扩增出清晰谱带２８２条，
其中，３２条为多态性谱带，多态率为１１．３５％。ＲＡＰＤ结果显示，电子束辐照百合鳞茎能够引起百合ＤＮＡ变
异，并且辐照剂量与诱变频率呈正相关关系，此外诱变频率还与试验品种、辐照部位及所处的生长期有关。
关键词　电子束辐照；百合；生长发育；辐射育种；ＲＡＰＤ
中图分类号　Ｑ６９１．５　　　文献标志码　Ａ　　　　　文章编号　１００４－１３８９（２０１３）０３－０１４０－０８
Ｔｈｅ　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ａｎｄ　ＲＡＰＤ　Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　Ｅｌｅｃｔｒｏｎ　Ｂｅａｍ
Ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ　ｏｎ　Ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｌｉｌｙ
ＷＡＮＧ　Ｙａｎｇ１，ＬＩ　Ｑｉｕｈｕａ４，ＬＩ　Ｓｏｎｇｌｉｎ１，ＹＡＮＧ　Ｈｕａｎ１，ＨＥ　Ｌｉｘｉａｎ１，
ＹＡＮＧ　Ｃｈｕｎｑｉ　４，ＺＨＡＮＧ　Ｔａｏ２，ＳＵ　Ｙｉｎｇ２　ａｎｄ　ＺＨＯＵ　Ｙｕｎｌｏｎｇ１，３
（１．Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　Ｎｏｒｍａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　１００８７５，Ｃｈｉｎａ；２．Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｎｕｃｌｅａｒ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ
Ｎｏｒｍａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　１００８７５，Ｃｈｉｎａ；３．Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｂｅａｍ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｍａｔｅｒｉａｌ　Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｍｉｎｉｓｔｒｙ　ｏｆ　Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ，
Ｂｅｉｊｉｎｇ　１００８７５，Ｃｈｉｎａ；４．Ｂｅｉｊｉｎｇ　Ｓｕｎｓｔｏｎｅ　Ｅｃｏｓｙｓｔｅｍ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　Ｌｉｍｉｔｅｄ　Ｌｉａｂｉｌｉｔｙ　Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　１０２２０２，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｔｈｅ　ｂｕｌｂｓ　ｏｆ　Ｌｉｌｙ　Ｓｔａｒｆｉｇｈｔｅｒ　ａｎｄ　Ｔｉｂｅｒ　ｗｅｒｅ　ｉｒｒａｄｉａｔｅｄ　ｂｙ　ｅｌｅｃｔｒｏｎ　ｂｅａｍ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｄｏｓｅ　ｏｆ
５Ｇｙ，１０Ｇｙ，１５Ｇｙ，２０Ｇｙ　ａｎｄ　２５Ｇｙ，ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　Ｌｉｌｙ’ｓ　ｃｏｎｔｅｍｐｏｒａｒｙ　ｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ
ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ　ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｗｅｒｅ　ｓｅｖｅｒｅｌｙ　ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ，ｂｕｔ　ｔｈｅ　ｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ　ｂｌｏｏｍｉｎｇ　ｗｅｒｅ
ｕｎａｆｆｅｃｔｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｅｃｏｎｄ　ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ．Ｍｏｒｅｏｖｅｒ，ａ　ｖａｒｉａｎｔ　ｐｌａｎｔ　ｗｉｔｈ　ｄｅｅｐｅｒ　ｆｌｏｗｅｒ　ｃｏｌｏｒ　ａｎｄ　ｓｈｏｒｔｅｒ
ｓｐｏｔｓ　ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ　ｏｎ　ｔｅｐａｌ　ｗａｓ　ｄｉｓｃｏｖｅｒｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｅｃｏｎｄ　ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｃ－１５Ｇｙ．Ｔｅｎｄｅｒ　ｌｅａｖｅｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒ－
ｅｎｔ　ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ　ｄｏｓｅ　ｗｅｒｅ　ｕｓｅｄ　ａｓ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｍａｔｅｒｉａｌ　ｉｎ　ＲＡＰＤ　ａｎａｌｙｓｉｓ，５ｒａｎｄｏｍ　ｐｒｉｍｅｒｓ　ａｍｐｌｉｆｉｅｄ
２８２ｃｌｅａｒ　ｂａｎｄｓ，３２ｏｆ　ｗｈｉｃｈ　ｗｅｒｅ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ　ｂａｎｄｓ，ｓｏ　ｔｈｅ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ　ｒａｔｅ　ｏｆ　１１ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ
ｇｒｏｕｐｓ　ｗａｓ　１１．３５％．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ＲＡＰＤ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｉｎｄｉｃａｔｅｄ　ｔｈａｔ　ｅｌｅｃｔｒｏｎ　ｂｅａｍ　ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ　ｏｎ　ｌｉｌｙ
ｂｕｌｂｓ　ｃｏｕｌｄ　ｉｎｄｕｃｅ　ｖａｒｉａｔｉｏｎ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｍｕｔａｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　ｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙ　ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ　ｄｏｓｅ，ｉｎ
ａｄｄｉｔｉｏｎ，ｍｕｔａｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ｗａｓ　ａｌｓｏ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｔｏ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｖａｒｉｅｔｉｅｓ，ｉｒｒａｄｉａｔｅ　ｐｏｓｉｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｇｒｏｗｉｎｇ　ｓｅａ－
ｓｏｎ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ　Ｅｌｅｃｔｒｏｎ　ｂｅａｍ　ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ；Ｌｉｌｙ；Ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ；Ｒａｄｉａｔｉｏｎ　ｂｒｅｅｄｉｎｇ；ＲＡＰＤ
　　辐射诱变育种通常是利用γ射线、激光、离子 束、空间诱变等方式对植物体进行诱变，从而产生
＊ 收稿日期：２０１２－０９－０３　　修回日期：２０１２－１２－２９
基金项目：射线束技术与材料改性教育部重点开发实验室课题资助项目（２０１１２３）。
第一作者：王　阳，女，本科在读，研究方向为生物科学。Ｅ－ｍａｉｌ：ｗｙａｎｇ＠ｍａｉｌ．ｂｎｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
通信作者：周云龙，男，教授，研究方向为辐射生物学。Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｙｌｂｉｏ＠ｂｎｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
遗传变异。辐射诱变育种具有缩短育种年限、打
破不良性状之间的连锁、提高突变率等特点，现已
成为现代作物育种的重要途径之一［１］。电子束是
近年发展起来的一种辐射诱变源，电子束辐照具
有操作简单、使用安全、照射时间短、不产生其他
环境污染隐患的优点，而且电子加速器产生的电
子束集中、方向一致，能量均布于被照射的材料，
因此诱变效率高，诱变谱广。张圣君［２］用不同剂
量的电子束对水稻、小麦和油菜作物进行辐射育
种试验，选育出有实用价值的新品系、新材料。温
平等［３］使用电子束辐照已发根的菊花插条，诱发
有利变异。
百合（Ｌｉｌｉｕｍｓｐｐ．）是百合科（Ｌｉｌｉａｃｅａｅ）百合
属多年生鳞茎植物，具有较高的观赏价值和经济
价值，然而中国在百合育种方面非常薄弱，商业栽
培种球主要依赖于国外进口。经过辐射处理后，
在花色、株高等表型上的变异能丰富百合品种，具
有经济价值。百合以营养体鳞茎栽植，目前已报
道的辐射百合鳞茎进行诱变育种的方法，大都
以６０Ｃｏ－γ射线作为诱变剂，而少见电子束辐照诱
变的报道。
ＲＡＰＤ （Ｒａｎｄｏｍ　Ａｍｐｌｉｆｉｅｄ　Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ
ＤＮＡ）标记技术是以ＰＣＲ技术为背景，用人工合
成的碱基排列随机的寡核苷酸单链（一般８～１０
个碱基）为引物，对所研究的基因组 ＤＮＡ 进行
ＰＣＲ非定点地扩增，产生多态性ＲＡＰＤ片段，这
些扩增片段的多态性反映基因组相应区域的多态
性［４］。经过辐射处理的植株及其后代，其表型往
往容易受到环境因素的影响，不利于选育工作进
行。ＲＡＰＤ标记技术不受环境条件和表达产物显
隐性的影响，只要ＤＮＡ发生突变、重组、缺失、插
入等引起ＲＡＰＤ引物结合位点的变化，就可以快
速检测到，所需要的基因组量较少，是一种简便、
有效的检测突变体的方法。
１　材料与方法
１．１　材 料
百合品种为荷兰进口的Ｓｔａｒｆｉｇｈｔｅｒ（中文名
为星球大战）和 Ｔｉｂｅｒ（中文名为提拔或替伯）百
合鳞茎，规格为１６／１８ｃｍ（百合鳞茎的最大周长
为１６～１８ｃｍ），根据品种及芽长将供试材料分为
３组。Ａ：Ｓｔａｒｆｉｇｈｔｅｒ，平均芽长５．８ｃｍ；Ｂ：Ｓｔａｒ－
ｆｉｇｈｔｅｒ，平均芽长２．２ｃｍ；Ｃ：Ｔｉｂｅｒ，平均芽长
０ｃｍ；每组均为７０株。
１．２　方 法
１．２．１　电子束辐照百合鳞茎　电子束辐照处理
于２０１０－１１－１４上午在北京师范大学核科学与技
术学院教育部重点开放实验室进行。辐照仪器为
ＢＦ－５直线加速器，能量为６．４０８　７０６　１２５　６×
１０－１３　Ｊ，电子束辐照剂量率为１０Ｇｙ／ｓ，每组分别
以５、１０、１５、２０、２５Ｇｙ的剂量辐照百合鳞茎顶端，
以及２５Ｇｙ剂量辐照鳞茎基生根（Ｒ），以未辐照
（０Ｇｙ）的百合作为对照组（ＣＫ），Ａ、Ｂ、Ｃ　３组每处
理设置１０个平行样。经辐照处理后，Ａ组当天下
午定植，Ｂ 组、Ｃ 组在催芽室继续催芽至芽长
３～５ｃｍ后定植于北京盛斯通生态科技有限责任
公司百合基地温室，进行正常的田间管理。待鳞
茎发芽长叶后，对每组嫩叶混合取样，随机选取植
株顶端完全展开的，从上往下第３～５枚叶片为试
材，保存于－８０℃超低温冷冻冰箱。
１．２．２　百合基因组ＤＮＡ提取及检测　使用天
根生化科技（北京）有限公司的植物基因组ＤＮＡ
提取试剂盒（离心柱型，目录号为ＤＰ３０５）提取基
因组ＤＮＡ，针对百合叶片多糖多酚的性质，对试
剂盒提供的提取步骤进行改动：裂解液中β－巯基
乙醇的体积分数由０．１％修改为１．０％；裂解液的
水浴时间由２０ｍｉｎ增加到４０ｍｉｎ。
利用Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ公司生产的紫外分光光度计
进行ＤＮＡ质量检测和质量浓度测定。另外，取
５μＬ　ＤＮＡ样品在１２ｇ／Ｌ琼脂糖凝胶、１２０Ｖ电
压下电泳２０ｍｉｎ，在紫外凝胶成像系统下观察并
照相。
１．２．３　ＲＡＰＤ标记分析　ＲＡＰＤ扩增反应体系
总体积 ２０μＬ，包括 ４．０μＬ 模 板 ＤＮＡ（２０
ｍｇ／Ｌ）、２．０μＬ　１０×ＰＣＲ　Ｂｕｆｆｅｒ（不含 Ｍｇ
２＋）、
１．６μＬ　ｄＮＴＰｓ（２．５ｍｍｏｌ／Ｌ）、１．６μＬ　ＭｇＣｌ２（２５
ｍｍｏｌ／Ｌ）、０．３μＬ随机引物（２０μｍｏｌ／Ｌ）、０．３μＬ
ｒ　Ｔａｑ（５Ｕ／μＬ）、１０．２μＬ　ｄｄＨ２Ｏ。随机引物购于
生工生物工程（上海）股份有限公司，其余皆购于
宝生物工程（Ｔａｋａｒａ）有限公司。
ＲＡＰＤ扩增程序：９４℃４ｍｉｎ；９４℃３０ｓ，
３７℃３０ｓ，７２ ℃ ７０ｓ，循环５次；９０ ℃ ３０ｓ，
４８℃６０ｓ，７２ ℃ ６０ｓ，循环３８次；７２ ℃延伸
７ｍｉｎ；４℃保存。取５μＬ扩增产物于１２ｇ／Ｌ的
琼脂糖凝胶、３．５Ｖ／ｃｍ电压下电泳３０ｍｉｎ，在紫
外凝胶成像系统下观察并拍照。
ＲＡＰＤ结果以电泳图谱中带的有无来体现，
带的有无代表扩增模板片段的有无。电泳图谱中
·１４１·３期　　　　　　　　　王　阳等：电子束辐照百合鳞茎后对生长发育的影响及ＲＡＰＤ分析
的每个ＲＡＰＤ谱带均为１个分子标记，代表１个
引物结合位点，或者也可看作１个遗传位点。多
态性是对遗传变异的计量，是指群体内多态性基
因座的比例（率），公式为Ｐ＝ｋ／ｎ×１００％，式中，
Ｐ为多态位点百分率，ｋ为多态性位点的位点数，
ｎ为测定的位点总数。
２　结果与分析
２．１　百合鳞茎经辐照处理后营养生长及生殖生
长情况
２．１．１　营养生长　百合鳞茎经电子束辐照１２ｄ
后对其芽长进行测量，测量结果见表１。利用
ＳＰＳＳ软件进行分析，在９５％的置信区间内，除Ｂ－
２５Ｇｙ（Ｒ）组外，接受辐照的试验组芽长变化较其
对照组都显著降低，说明一定剂量的辐照鳞茎顶
端使生长点受损。进而对３组辐照鳞茎顶端的芽
长变化平均值和辐照剂量做线性回归分析，在
９５％的置信区间内，回归系数Ａ组Ｐ＜０．０５；Ｂ组
Ｐ＜０．０１；Ｃ组Ｐ＞０．０５；表明：Ａ、Ｂ组芽长变化
与辐照剂量呈显著线性相关，而Ｃ组线性相关不
显著。在２５Ｇｙ的辐照剂量下，辐照基生根的芽
长伸长量较辐照鳞茎顶端的大，即鳞茎顶端的辐
照敏感性高于基生根，也与后期相应植株的生长
情况相符。
　　经辐照处理的百合鳞茎在生长过程中均表现
为生长点严重受损，整体营养生长明显受到抑制，
而且随着生长时间的推移，生长抑制越明显，植株
萎缩越明显。初期随着处理剂量的增加，生长点
受损越严重，生长抑制越明显（图１）。但在２５Ｇｙ
辐照剂量下，鳞茎顶端接受辐照的生长抑制程度
较辐照基生根部位的严重，说明，鳞茎顶端的辐照
敏感性远高于基生根部位。Ｒ处理的试验组生长
情况相对良好，最终Ｃ－２５Ｇｙ（Ｒ）同Ｃ－ＣＫ（Ｃ组的
对照组）一样正常进入生殖生长，其茎粗壮、叶茂
盛，而此时其他试验组已经停止营养生长，出现萎
蔫迹象。
２０１１－０３－１７进行株高测量（表２），此时辐照
鳞茎顶端的试验组均已枯萎死亡，用ＳＰＳＳ软件
分别对３组ＣＫ和Ｒ处理的株高进行独立样本ｔ－
检验，在９５％的置信区间内，３组均Ｐ＜０．０５，说
明，３组中Ｒ处理的株高显著低于ＣＫ，即电子束
辐照百合鳞茎基生根有可能诱导百合发生植株矮
化的形态学变化。
　　百合的基生根数量少且固定，茎生根能够不
断增多和伸长，对百合地上部分的良好发育和地
下鳞茎的更新、增殖有非常重要的作用。将百合
球茎从定植土壤中小心挖出，观察到随着辐照剂
量的增大，百合茎生根的数量逐渐减少。茎生根
的数量减少时，基生根吸收和球茎中储存的营养
不足以供给百合正常生长所需，因此造成后期植
株枯萎。试验中观察到辐照处理后植株正常生长
开花的植株，其茎杆基部形成大量茎生根（图２－
１）；植株生长受到一定抑制，整个生长过程始终保
持有几片绿叶的植株，其茎杆基部仅形成少量茎
生根（图２－２）；植株生长受到严重抑制，最终萎缩死
亡的植株，其茎杆基部没有形成茎生根（图２－３）。
表１　辐照时和辐照１２ｄ后芽长测量结果（珔ｘ±ｓ珔ｘ）
Ｔａｂｌｅ　１　Ｔｈｅ　ｍｅａｓｕｒｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｂｕｄ　ｌｅｎｇｔｈ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｄａｙ　ｏｆ　ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ａｆｔｅｒ　１２ｄａｙｓ
项 目
Ｉｔｅｍ
组 别
Ｇｒｏｕｐ
辐照剂量／Ｇｙ　Ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ　ｄｏｓｅ
０　 ５　 １０　 １５　 ２０　 ２５　 ２５（Ｒ）
辐照时芽长／ｃｍ　 Ａ　 ５．６６±０．５２　 ５．８１±０．５０　 ５．８８±０．６７　 ５．６９±０．６９　 ５．３４±０．２６　 ６．０４±０．８９　 ６．１８±０．５４
Ｉｎｉｔｉａｌ　ｂｕｄ　ｌｅｎｇｔｈ　 Ｂ　 ２．２０±０．３１　 ２．１６±０．３４　 ２．１３±０．２８　 ２．１０±０．４０　 ２．２０±０．３１　 ２．３３±０．２３　 ２．０６±０．４４
Ｃ　 ０　 ０　 ０　 ０　 ０　 ０　 ０
辐照１２ｄ后芽长／ｃｍ　 Ａ　 １１．２０±３．８１　 ８．６３±０．９８　 ７．８０±１．２５　 ５．５５±１．６８　 ４．９８±０．９０　 ３．５５±２．１５　 ７．６４±１．０３
Ｂｕｄ　ｌｅｎｇｔｈ　ａｆｔｅｒ　１２ｄａｙｓ　 Ｂ　 ８．５５±１．９９　 ６．２３±１．０４　 ５．００±１．２７　 ４．８２±１．００　 ４．１２±０．７６　 ３．８２±０．７７　 ６．８１±１．５５
Ｃ　 ４．６５±１．２５　 ３．１２±０．９７　 ３．５２±０．７２　 ３．５６±０．３９　 ３．２３±０．７５　 ３．０５±０．４８　 ３．９３±０．６６
芽长变化／ｃｍ　 Ａ　 ５．５４±３．９０　 ２．８２±０．９０＊ １．９２±１．４４＊ －０．１４±２．１９＊＊－０．３６±０．８７＊＊－２．４９±１．６６＊＊ １．４６±１．３９＊＊
Ｃｈａｎｇｅｓ　ｏｆ　ｂｕｄ　ｌｅｎｇｔｈ　 Ｂ　 ６．３５±２．０９　 ４．０７±１．１７＊＊ ２．８７±１．２７＊＊ ２．７２±１．１０＊＊ １．９２±０．８５＊＊ １．４９±０．６９＊ ４．７５±１．９６
Ｃ　 ４．６５±１．２５　 ３．１２±０．９７＊＊ ３．５２±０．７２＊ ３．５６±０．３９＊ ３．２３±０．７５＊＊ ３．０５±０．４８＊＊ ３．９３±０．６６＊
注：＊、＊＊分别表示与所在组ＣＫ在０．０５和０．０１水平上的差异（独立样本ｔ－检验）。
Ｎｏｔｅ：＊ａｎｄ＊＊ ｍｅａｎｓ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ａｔ　０．０５ａｎｄ　０．０１ｌｅｖｅｌ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ（Ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ－ｓａｍｐｌｅ　ｔ－ｔｅｓｔ）．
·２４１· 西　北　农　业　学　报　　　　　　　　　　　　　　　　　　２２卷
表２　株高测量结果（珔ｘ±ｓ珔ｘ）
Ｔａｂｌｅ　２　Ｔｈｅ　ｍｅａｓｕｒｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｐｌａｎｔ　ｈｅｉｇｈｔ
项 目
Ｉｔｅｍ
Ａ组　Ｇｒｏｕｐ　Ａ
０Ｇｙ　 ２５Ｇｙ（Ｒ）
Ｂ组　Ｇｒｏｕｐ　Ｂ
０Ｇｙ　 ２５Ｇｙ（Ｒ）
Ｃ组　Ｇｒｏｕｐ　Ｃ
０Ｇｙ　 ２５Ｇｙ（Ｒ）
株高／ｃｍ　Ｐｌａｎｔ　ｈｅｉｇｈｔ　 ８８．７５±４．４２　 １６．１７±６．８６　 ７８．８９±８．７８　 ３５．３６±１２．０３　 １０１．７５±６．５０　 ８９．２５±１９．１７
图１　初期百合植株生长情况
Ｆｉｇ．１　Ｔｈｅ　ｉｎｉｔｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｓｔａｇｅ　ｏｆ　ｌｉｌｙ
２．１．２　开花结实　经电子辐照处理的百合鳞茎，
种植后只有Ｃ－２５Ｇｙ（Ｒ）的１０粒鳞茎中的６粒形
成花蕾并开放，第１朵花开放的时间比Ｃ－ＣＫ早２
ｄ。由表３可以看出，Ｃ－２５Ｇｙ（Ｒ）组单株形成的
花蕾数量较Ｃ－ＣＫ少，完全成熟时花蕾比Ｃ－ＣＫ
的略大，从花序分支间距与每个蕾的花梗长可以
看出，Ｃ－２５Ｇｙ（Ｒ）的花序较Ｃ－ＣＫ紧凑。
　　 Ｔｉｂｅｒ百合一般不结实，子房也不膨大，但研
究发现Ｃ－２５Ｇｙ（Ｒ）花凋谢后，子房则膨大形成果
实，但果实内种子没有正常发育形成饱满的种子；
而Ｃ－ＣＫ花朵凋谢后，子房没有膨大（图３）。
２．１．３　当年种球的形成　百合鳞茎即为百合的
种球，百合植株生长过程中会消耗鳞片储存的营
养，外层鳞片逐渐萎缩，整个鳞片基部会形成新鳞
茎，随着植株生长，新鳞茎慢慢膨大，即新鳞茎。
　　１．Ｒ处理形成花朵的植株 Ｆｌｏｗｅｒｅｄ　ｐｌａｎｔｓ　ｉｎ　Ｒ　ｇｒｏｕｐ；２．Ｒ
处理未形成花朵的植株 Ｕｎｆｌｏｗｅｒｅｄ　ｐｌａｎｔｓ　ｉｎ　Ｒ　ｇｒｏｕｐ；３．辐照后
逐渐萎缩的植株 Ｗｉｔｈｅｒｅｄ　ｐｌａｎｔｓ　ａｆｔｅｒ　ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ
图２　电子束辐照对百合茎生根的影响
Ｆｉｇ．２　Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｅｌｅｃｔｒｏｎ　ｂｅａｍ　ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ　ｏｎ
ｌｉｌｙ’ｓ　ｓｔｅｍ－ｒｏｏｔｓ
ａ．Ｃ－２５Ｇｙ（Ｒ）子房膨大Ｅｘｐａｎｄｅｄ　ｏｖａｒｉｅｓ　ｉｎ　Ｃ－２５Ｇｙ（Ｒ）ｇｒｏｕｐ；ｂ．Ｃ－ＣＫ子房未膨大 Ｕｎｅｘｐａｎｄｅｄ　ｏｖａｒｉｅｓ　ｉｎ　Ｃ－ＣＫ　ｇｒｏｕｐ
图３　Ｃ－２５Ｇｙ（Ｒ）与Ｃ－ＣＫ的子房膨胀情况
Ｆｉｇ．３　Ｏｖａｒｉｅｓ　ｏｆ　ｌｉｌｙ　ｉｎ　Ｃ－２５Ｇｙ（Ｒ）ａｎｄ　Ｃ－ＣＫ　ｇｒｏｕｐ
·３４１·３期　　　　　　　　　王　阳等：电子束辐照百合鳞茎后对生长发育的影响及ＲＡＰＤ分析
有的品种会在茎部由不定芽发育形成一些小鳞
茎，这些小鳞茎就叫茎生小鳞茎。
　　辐照鳞茎顶端的百合，Ａ组和Ｂ组除２５Ｇｙ
剂量中个别未形成新鳞茎，其余都形成新鳞茎，Ｃ
组全部形成新鳞茎，该处理下３组都没形成茎生
小鳞茎。Ｒ处理中，Ａ组和Ｂ组都没有形成新鳞
茎，而Ｃ组中仅１棵形成新鳞茎，但３组都有茎生
小鳞茎发生。ＣＫ中３组全部形成个大紧实的新
鳞茎，Ａ组和Ｂ组都形成茎生小鳞茎，但Ｃ组未形
成，这可能与Ｔｉｂｅｒ百合品种或者个体差异有关。
对比表４数据可以发现，低剂量辐照鳞茎顶
端不会影响新鳞茎发生，但会抑制茎生小鳞茎形
成；高剂量辐照鳞茎顶端对新鳞茎形成产生较小
程度的阻碍，同样抑制茎生小鳞茎形成。高剂量
辐照基生根会严重抑制新鳞茎的形成，但会促进
Ｔｉｂｅｒ百合形成茎生小鳞茎。
２．１．４　新鳞茎种植后的开花　２０１１年６月将新
形成的鳞茎进行采收、清洗、消毒、包装及冷藏处
理，于２０１２年１月定植，所有新鳞茎都正常生长
并开花，其中花期从早到晚的顺序为辐照鳞茎顶
端的试验组、对照组、辐照基生根试验组。试验中
在Ｃ－１５Ｇｙ第２代中发现１个变异株，其花朵颜
色略深、花瓣斑点长突起变短（图４），最终该变异
株未能结实。
２．２　基因组ＤＮＡ提取及检测
取材时由于Ｂ－２０Ｇｙ、Ｂ－２５Ｇｙ和Ｃ组辐照鳞
茎顶端试验组已萎蔫死亡，故只能选取仍具活力
的其他组幼嫩叶片进行基因组 ＤＮＡ提取，材料
编号 及 ＤＮＡ 质 量 浓 度 检 测 结 果 见 表 ５，
ＯＤ２６０／ＯＤ２８０为１．７～１．９，且电泳检测结果（图５）
中ＤＮＡ 泳带呈单一条带状，符合作为后续
ＲＡＰＤ模板的要求。
表３　Ｃ－２５Ｇｙ（Ｒ）与Ｃ－ＣＫ百合鳞茎开花情况（珔ｘ±ｓ珔ｘ）
Ｔａｂｌｅ　３　Ｂｌｏｏｍｉｎｇ　ｏｆ　ｌｉｌｙ　ｉｎ　Ｃ－２５Ｇｙ（Ｒ）ａｎｄ　Ｃ－ＣＫ　ｇｒｏｕｐ
项 目　Ｉｔｅｍ　 Ｃ－２５Ｇｙ（Ｒ） Ｃ－ＣＫ 备 注　Ｎｏｔｅ
形成不同花蕾数的植株数
Ｐｌａｎｔｓ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｆｌｏｗｅｒ　ｂｕｄｓ
４个花蕾
４ｆｌｏｗｅｒ　ｂｕｄｓ ０　 ３
一般情况下，形成花蕾数少的植株成熟时间比
形成花蕾数多的植株略早，且形成的花蕾较大
Ｃｏｍｍｏｎｌｙ，ｐｌａｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｌｅｓｓ　ｆｌｏｗｅｒ　ｂｕｄｓ　ｍａｔｕ－
ｒａｔｅ　ｅａｒｌｉｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈｏｓｅ　ｗｉｔｈ　ｍｏｒｅ　ｆｌｏｗｅｒ　ｂｕｄｓ，
ａｓ　ｗｅｌ　ａｓ　ｂｉｇｇｅｒ　ｆｌｏｗｅｒ　ｂｕｄｓ
３个花蕾
３ｆｌｏｗｅｒ　ｂｕｄｓ ５　 ７
２个花蕾
２ｆｌｏｗｅｒ　ｂｕｄｓ １　 ０
第１个花蕾成熟时发育情况
Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ｆｉｒｓｔ　ｒｉｐｅ　ｆｌｏｗｅｒ
ｂｕｄ
长 度／ｃｍ
Ｌｅｎｇｔｈ １３．６　 １２．６
周 长／ｃｍ
Ｃｉｒｃｕｍｆｅｒｅｎｃｅ １５．６　 １４．３
花梗长／ｃｍ
Ｌｅｎｇｔｈ　ｏｆ　ｐｅｄｉｃｅｌ １　 １１．２±１．４０　１０．７±５．１４
以花蕾从基部向顶部的方向排序　Ｉｔ　ｒａｎｋｓ
ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｂｏｔｔｏｍ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｔｏｐ　ｏｆ　ｆｌｏｗｅｒ　ｂｕｄ．
２　 １１．５±１．６１　１３．４±０．７４
３　 １４．６±１．６６　１５．１±１．７７
４ － １６．４±２．１３
花梗基部间距／ｃｍ
Ｄｉｓｔａｎｃｅ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｂａｓｅ　ｏｆ　ｐｅｄｉｃｅｌ １　 １．７±１．９２　 ４．９±１．９４
间距为相邻花梗基部的间距　Ｔｈｅ　ｄｉｓｔａｎｃｅ
ｍｅａｎｓ　ｔｈａｔ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ａｄｊａｃｅｎｔ　ｂａｓｅ　ｏｆ　ｐｅｄｉｃｅｌ
２　 １．４±１．９８　 ２．６±２．４９
３ － １．７±２．８６
表４　百合鳞茎当年种球形成情况
Ｔａｂｌｅ　４　Ｂｕｌｂ　ｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌｉｌｙ　ｉｎ　ｆｉｒｓｔ　ｙｅａｒ
项目Ｉｔｅｍ 组别 Ｇｒｏｕｐ　 ０Ｇｙ　 ５Ｇｙ　 １０Ｇｙ　 １５Ｇｙ　 ２０Ｇｙ　 ２５Ｇｙ　 ２５Ｇｙ（Ｒ）
形成新鳞茎株数 Ａ　 １０／１０　 １０／１０　 １０／１０　 ９／９　 １０／１０　 ８／１０　 ０／８
Ｎｕｍｂｅｒｓ　ｏｆ　ｐｌａｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｎｅｗ　ｂｕｌｂｓ　 Ｂ　 ９／９　 ９／９　 １０／１０　 ９／９　 １０／１０　 ８／１０　 ０／４
Ｃ　 １０／１０　 １０／１０　 １０／１０　 １０／１０　 １０／１０　 ９／９　 １／１０
是否形成茎生小鳞茎 Ａ √ × × × × × √
Ｗｈｅｔｈｅｒ　ｓｍａｌ　ｂｕｌｂｓ　ｏｎ　ｓｔｅｍ　ｗｅｒｅ
ｆｏｒｍｅｄ Ｂ √ × × × × × √
Ｃ × × × × × × √
注：形成新鳞茎株数一栏，“／”前为形成新鳞茎的株数，“／”后为统计时存活的株数。“√”表示是，“×”表示否。
Ｎｏｔｅ：Ｔｈｅ　ｃｏｌｕｍｎ　ｏｆ　ｎｕｍｂｅｒｓ　ｏｆ　ｐｌａｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｎｅｗ　ｂｕｌｂｓ，ｃｏｎｔｅｎｔ　ｂｅｆｏｒｅ“／”ｍｅａｎｓ　ｎｕｍｂｅｒｓ　ｏｆ　ｐｌａｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｎｅｗ　ｂｕｌｂｓ，ｃｏｎｔｅｎｔ　ａｆｔｅｒ“／”
ｍｅａｎｓ　ｎｕｍｂｅｒｓ　ｏｆ　ａｌｉｖｅ　ｐｌａｎｔｓ　ｗｈｅｎ　ｃｏｕｎｔｅｄ．“√”ｍｅａｎｓ　ｙｅｓ，“×”ｍｅａｎｓ　ｎｏ．
·４４１· 西　北　农　业　学　报　　　　　　　　　　　　　　　　　　２２卷
　　ａ．辐照处理后未变异株花被片 Ｔｅｐａｌ　ｏｎ　ｉｎｖａｒｉａｎｔ　ｐｌａｎｔｓ　ａｆｔｅｒ　ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ；ｂ．变异株花被片，花色略深，花瓣斑点长突起变短 Ｔｅｐａｌ
ｏｎ　ｖａｒｉａｎｔ　ｐｌａｎｔ　ａｆｔｅｒ　ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ，ｄｅｅｐｅｒ　ｆｌｏｗｅｒ　ｃｏｌｏｒ　ａｎｄ　ｓｈｏｒｔｅｒ　ｓｐｏｔｓ　ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ　ｏｎ　ｔｅｐａｌ；ｃ．ＣＫ花被片 Ｔｅｐａｌ　ｏｎ　ｐｌａｎｔｓ　ｏｆ　ＣＫ　ｇｒｏｕｐ
图４　Ｃ－１５Ｇｙ第２代变异株花被片
Ｆｉｇ．４　Ｔｈｅ　ｔｅｐａｌ　ｏｎ　ｓｅｃｏｎｄ　ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｖａｒｉａｎｔ　ｐｌａｎｔ　ｏｆ　Ｃ－１５Ｇｙ
表５　 试验材料编号及基因组ＤＮＡ质量浓度检测
Ｔａｂｌｅ　５　Ｔｈｅ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｍａｔｅｒｉａｌｓ　ａｎｄ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｇｅｎｏｍｉｃ　ＤＮＡ
项目
Ｉｔｅｍ
材料编号　Ｍａｔｅｒｉａｌ　ｎｕｍｂｅｒ
１　 ２　 ３　 ４　 ５　 ６　 ７　 ８　 ９　 １０　 １１　 １２　 １３　 １４
组别 Ｇｒｏｕｐ　 Ａ－Ｒ　 Ｂ－Ｒ　 Ａ－０Ｇｙ　Ｂ－０Ｇｙ　Ａ－５Ｇｙ　Ｂ－５Ｇｙ　Ａ－１０Ｇｙ　Ｂ－１０Ｇｙ　Ａ－１５Ｇｙ　Ｂ－１５Ｇｙ　Ａ－２０Ｇｙ　Ａ－２５Ｇｙ　Ｃ－０ＧｙＣ－２５Ｇｙ（Ｒ）
ＯＤ２６０／ＯＤ２８０ １．７３８　 １．８３８　 １．７８７　 １．８１０　 １．７５０　 １．７６０　 １．７１６　 １．７８１　 １．７３７　 １．７４３　 １．９１９　 １．９００　 １．８７８　 １．８４１
质量浓度／（ｇ／Ｌ）
Ｍａｓｓ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ０．０３６　 ０．０４６　 ０．０７５　 ０．０３４　 ０．０４２　 ０．０５６　 ０．０４３　 ０．０７４　 ０．０２５　 ０．０２５　 ０．０３６　 ０．０３９　 ０．０１７　 ０．０４８
　　１－１３．为材料编号，同表５　１－１３ｗｅｒｅ　ｍａｔｅｒｉａｌ　ｕｍｂｅｒ，ｔｈｅ
ｓｍａｅ　ａｓ　ｔａｂｌｅ　５
图５　百合基因组ＤＮＡ凝胶电泳图
Ｆｉｇ．５　Ｇｅｌ　ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ　ｉｍａｇｅ　ｏｆ　ｌｉｌｙ　ｇｅｎｏｍｉｃ　ＤＮＡ
２．３　ＲＡＰＤ标记
２．３．１　ＲＡＰＤ体系优化　由于不同物种的ＰＣＲ
扩增，其反应体系和循环体系一般不同，因此进行
ＲＡＰＤ研究时一般都会对其扩增的反应体系和循
环体系进行优化。根据前人的研究结果［５－７］，着重
考虑退火温度的影响。在１０ｂｐ随机引物的
ＲＡＰＤ试验中，退火温度一般在３５～３７℃。但
是Ｙａｍａｇｉｓｈｉ［８］的研究表明，百合属植物退火温
度在４５℃时产生清晰条带的比例更高，但较高温
度退火也会造成某些条带不能成功扩增。因此，
采取“双退火”温度的循环体系（见“１．２．３”部分
ＲＡＰＤ扩增程序），以保证扩增结果的清晰度，便
于最后的数据统计与分析。
·５４１·３期　　　　　　　　　王　阳等：电子束辐照百合鳞茎后对生长发育的影响及ＲＡＰＤ分析
２．３．２　ＲＡＰＤ结果　根据马虹［９］的筛选结果选
取１０个 ＲＡＰＤ随机引物，对１４组试材进行扩
增，其中５个引物扩增得到特异条带，引物编号及
５′→３′序列分别为Ｓ１０１（ＧＧＴＣＧＧＡＧＡＡ）、Ｓ１９８
（ＣＴＧＧＣＧＡＡＣＴ）、Ｓ２１４（ＡＡＴＧＣＣＧＣＡＧ）、
Ｓ２１７（ＣＣＡＡＣＧＴＣＧＴ，Ｓ２１７的ＲＡＰＤ图谱见图
６）、Ｓ２４９（ＣＣＡＣＡＴＣＧＧＴ）。１４组试材中，除Ａ、
Ｂ、Ｃ组的ＣＫ外，接受辐照处理的１１组试材都出
现多态性谱带，５个引物对１１组试材扩增出２８２
条清晰谱带，其中，３２条为多态性谱带，多态率为
１１．３５％。
　　由表６可见，Ａ、Ｂ组都是随着电子束辐照剂
量的增加，多态率呈明显上升的趋势，这证明电子
束辐照百合鳞茎能够引起Ｓｔａｒｆｉｇｈｔｅｒ百合ＤＮＡ
变异，并且辐照剂量与诱变频率间存在一定的正
相关性。在５、１０、１５、２５Ｇｙ（Ｒ）辐照剂量下，Ａ组
的多态率均低于Ｂ组，说明Ｓｔａｒｆｉｇｈｔｅｒ百合的辐
照敏感性与生长阶段有关。对比Ａ－２５Ｇｙ与 Ａ－
２５Ｇｙ（Ｒ）可以发现，辐照鳞茎顶端的试验组多态
率高于Ｒ处理的试验组，这一现象与形态观察的
结果相符，即鳞茎顶端的辐照敏感性高于基生根。
　　由于人为因素错过Ｃ组新鲜叶片采集时间，
故只分析Ｃ－２５Ｇｙ（Ｒ）组，该组样品虽在电子束辐
照的诱导下发生突变，但突变频率显著低于其他
试验组，这可能与Ｔｉｂｅｒ百合辐照敏感性低有关，
然而由于样品太少，不能通过与Ａ、Ｂ组比对得出
显著结果。
Ｍ．ＤＬ　２　０００ＤＮＡ　Ｍａｒｋｅｒ；１～１４．材料编号，同表５　１－１４ｗｅｒｅ　ｍａｔｅｒｉａｌ　ｎｕｍｂｅｒ，ｔｈｅ　ｓａｍｅ　ａｓ　ｔａｂｌｅ　５
图６　 随机引物Ｓ２１７的 ＲＡＰＤ扩增图谱
Ｆｉｇ．６　ＲＡＰＤ　ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｂｙ　ｒａｎｄｏｍ　ｐｒｉｍｅｒ　Ｓ２１７
表６　ＲＡＰＤ扩增结果
Ｔａｂｌｅ　６　Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ＲＡＰＤ
组别
Ｇｒｏｕｐ
引物数量
Ｎｕｍｂｅｒ
ｏｆ　ｐｒｉｍｅｒｓ
条带总数
Ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆ
ｔｏｔａｌ　ｂａｎｄｓ
多态性检
测位点
Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ
ｓｉｔｅｓ
多态率／％
Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ
ｒａｔｅ
Ａ－５Ｇｙ　 ５　 ２４　 １　 ４．１７
Ａ－１０Ｇｙ　 ５　 ２５　 ２　 ８．００
Ａ－１５Ｇｙ　 ５　 ２６　 ３　 １１．５４
Ａ－２０Ｇｙ　 ５　 ２５　 ４　 １６．００
Ａ－２５Ｇｙ　 ５　 ２６　 ５　 １９．２３
Ａ－２５Ｇｙ（Ｒ） ５　 ２６　 ３　 １１．５４
Ｂ－５Ｇｙ　 ５　 ２３　 ２　 ８．７０
Ｂ－１０Ｇｙ　 ５　 ２６　 ３　 １１．５４
Ｂ－１５Ｇｙ　 ５　 ３０　 ５　 １６．６７
Ｂ－２５Ｇｙ（Ｒ） ５　 ２４　 ３　 １２．５０
Ｃ－２５Ｇｙ（Ｒ） ５　 ２７　 １　 ３．７０
合 计 Ｔｏｔａｌ　 ５　 ２８２　 ３２　 １１．３５
３　讨 论
本研究表明，电子束辐照鳞茎通过阻碍茎生
根的发生明显抑制百合当代的营养生长，最终导
致多数植株开花前就已枯萎。张克中等［１０］的研
究也表明，辐射对百合当代植株高生长有抑制作
用，剂量越大，抑制作用越强，植株越矮小。电子
束辐照还严重破坏百合当代的生殖生长，也在一
定程度上抑制新鳞茎和茎生小鳞茎的形成。试验
组中只有部分Ｃ－２５Ｇｙ（Ｒ）组开花，且花蕾数减
少、花絮更紧凑，花被凋谢后子房膨大但未形成正
常饱满的种子。普遍认为激素在果实膨大生长的
过程中发挥重要作用，而授粉和受精启动控制非
单性结实果实膨大生长所需基因的表达。电子束
辐照可能使Ｃ－２５Ｇｙ（Ｒ）组的相关激素基因的活
性增强，从而刺激百合子房膨大，但未能使其胚珠
受精产生种子。杨喜霞等［１１］也在对黄瓜电子束
·６４１· 西　北　农　业　学　报　　　　　　　　　　　　　　　　　　２２卷
辐照的研究中发现同样的现象，对其机理值得进
一步进行探讨。
定植辐照处理后百合长出的新鳞茎最终都正
常生长并开花，而且在Ｃ－１５Ｇｙ第２代中发现花
朵颜色变深、花瓣斑点长突起变短的变异株，结合
当代百合的生长情况，本研究的辐照剂量梯度较
严重影响百合当代的营养生长和生殖生长，但不
影响新鳞茎第２代的生长。鉴于该情况，选择再
低一些的辐照剂量梯度可能较为适宜。
研究发现鳞茎顶端（芽端）的辐照敏感性高于
基生根部位，王丹等［１２］研究中鳞片外植体所处部
位对辐照处理产生不同效应；而且不同品种之间
也有差异，如Ｔｉｂｅｒ的辐照敏感性低于Ｓｔａｒｆｉｇｈｔ－
ｅｒ；这说明除辐照剂量这一重要因素外，百合的辐
照敏感性还与百合品种、辐照部位及生长阶段等
多种因素相关。因此，在百合的电子束辐照诱变
育种过程中，选择合适的辐照剂量、试验品种、辐
照部位和生长阶段等是能否获得良好诱变效果的
重要因素。
ＲＡＰＤ结果表明，电子束辐照百合鳞茎能够
引起百合ＤＮＡ的变异，且辐照剂量与诱变频率
间成正相关的关系，与当代营养生长状况相符。
贾月慧等［１３］也使用 ＲＡＰＤ技术分析亚洲百合
ｐｏｌｙａｎｎａ及６０Ｃｏ辐射球茎诱导的突变体，分辨出
２０个表现性雄性不育突变体中有９个属于基因
型突变体。因此，应用ＲＡＰＤ技术从ＤＮＡ水平
上进行早期筛选，淘汰非遗传因素形成的表型变
异，对加快选育的进程具有重要意义。
参考文献：
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海交通大学），２００７（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ）．
［１０］　ＺＨＡＮＧ　Ｋｅｚｈｏｎｇ（张克中），ＺＨＡＯ　Ｘｉａｎｇｙｕｎ（赵祥云），
ＨＵＡＮＧ　Ｓｈａｎｗｕ（黄善武），ｅｔ　ａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｒａｄｉａｔｉｏｎ　ｏｎ
Ｍ１ｐｌａｎｔｓ　ａｎｄ　ｓｃａｌｅ　ｃｕｔｔｉｎｇ’ｓ　ｉｎｉｔｉａｔｉｎｇ　ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ　ｂｕｄ
ｐｌａｎｔｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｂｅｉｊｉｎｇ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｃｏｌｅｇｅ（北京农
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［１１］　ＹＡＮＧ　Ｘｉｘｉａ（杨喜霞），ＪＩＮ　Ｆａｎｇ（靳　芳），ＬＩ　Ｙｕｎｓｈｕａｎｇ
（李云爽），ｅｔ　ａｌ．Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｅｌｅｃｔｒｏｎ　ｂｅａｍ　ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ　ｏｎ　ｐｏｌ－
ｌｅｎ　ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｎ　ｐｏｌｅｎ　ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｒａｔｅ　ａｎｄ　ｆｒｕｉｔ　ｏｆ　ｃｕ－
ｃｕｍｂｅｒ，ｔｏｗｅｌ　ｇｏｕｒｄ，ａｎｄ　ｐｌａｎｕｔ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｂｅｉｊｉｎｇ
Ｎｏｒｍａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ：Ｎａｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｅｄｉｔｉｏｎ（北京师范大
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［１２］　 ＷＡＮＧ　Ｄａｎ（王 　 丹），ＺＨＡＮＧ　Ｄｏｎｇｘｕｅ（张冬雪），
ＺＨＡＮＧ　Ｚｈｉｗｅｉ（张志伟）．Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　６０Ｃｏγ－ｒａｙ　ｒａｄｉａｔｉｏｎ
ｏｎ　ｂｕｄ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｏｒｉｅｎｔａｌ　ｌｉｌｙ　ｓｃａｌｅｓ　ｃｕｌｔｕｒｅｄ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ
［Ｊ］．Ａｔｏｍｉｃ　Ｅｎｅｒｇｙ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（原子能科学
技术），２００９，４３（１）：７１－７６（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｗｉｔｈ　Ｅｎｇｌｉｓｈ　ａｂ－
ｓｔｒａｃｔ）．
［１３］　ＪＩＡ　Ｙｕｅｈｕｉ（贾月慧），ＺＨＡＮＧ　Ｋｅｚｈｏｎｇ（张克中），ＺＨＡＯ
Ｘｉａｎｇｙｕｎ（赵祥云），ｅｔ　ａｌ．Ｒａｐｄ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｎ　ｍａｌｅ　ｓｔｅｒｉｌｉｔｙ
ｍｕｔａｎｔ　ｏｆ　Ｌｉｌｉｕｍａｓｉａｔｉｃ　ｈｙｂｉｄｓ　ｐｏｌｙａｎｎａ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ｉｒｒａ－
ｄｉａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ａｃｔａ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｅ　Ｎｕｃｌｅａｔａｅ　Ｓｉｎｉｃａ（核农学
报），２００５，１９（１）：２９－３２（ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｗｉｔｈ　Ｅｎｇｌｉｓｈ　ａｂ－
ｓｔｒａｃｔ）．
·７４１·３期　　　　　　　　　王　阳等：电子束辐照百合鳞茎后对生长发育的影响及ＲＡＰＤ分析