全 文 ：第 45卷　增刊 2 厦门大学学报(自然科学版) Vol.45　Sup.2
　2006年 12月 JournalofXiamenUniversity(NaturalScience) Dec.2006　
几种单胞藻对火腿许水蚤脂肪酸组成的影响
刘光兴 1, 2 ,崔建丽 1 ,黄　瑛1
(1.中国海洋大学海洋生命学院 , 2.海洋环境与生态教育部重点实验室 ,山东 青岛 266003)
　　
收稿日期:2006-11-20
基金项目:国家高技术研究发展计划项目 (2002AA629100,
2004AA626100)和国家重点基础研究发展规划项目
(2005CB422306)资助
作者简介:刘光兴(1964-),男 ,教授 ,博导.
Email:gxliu@ouc.edu.cn
摘要:采用气相色谱分析法测定了几种常用单胞藻及其投喂培养的火腿许水蚤的脂肪酸组成.结果表明 , 金藻 8701和
三角褐指藻分别具有较高的 DHA和 EPA含量 ,比较适合作为桡足类饵料.金藻 8701及其与三角褐指藻 、绿色巴夫藻 、
亚心形扁藻等组合作为混合饵料投喂时 ,培养的火腿许水蚤的几种重要必需脂肪酸(ARA、EPA、DHA)的含量都较高 , 其
中 , 以金藻 8701和绿色巴夫藻按体积比 1∶1作为混合饵料时 ,火腿许水蚤的 DHA/EPA值接近 2∶1, 更有利于其作为
海水仔稚鱼的优质饵料.
关键词:饵料;EPA;DHA;ARA;火腿许水蚤
中图分类号:Q501　　　　　文献标识码:A　　　　　文章编号:0438-0479(2006)S2-0250-06
　　在海洋食物链中 ,桡足类是重要的次级生产者 ,也
是仔稚鱼的重要天然饵料.目前 ,虽然水产养殖中广泛
使用轮虫和卤虫(Artemia)无节幼体等作为海水仔稚鱼
的活饵料 ,但是 ,对于某些鱼类而言 ,以轮虫和卤虫无节
幼体为饵料存活率较低 ,如笛鲷科(Lutjanidae)[ 1]和石
斑鱼亚科(Serranidae, Epinephelinae)[ 2] .因此 ,桡足类及
其幼体作为仔稚鱼活饵料受到广泛关注 [ 3, 4] .
哲水蚤和猛水蚤由于产量高且较稳定被普遍作
为仔稚鱼的饵料 [ 5, 6] .猛水蚤可以适应高密度培养条
件 ,因此 ,它们是桡足类培养深入研究的对象 [ 7-9] .然
而 ,猛水蚤主要营底栖生活 ,因此不容易被仔稚鱼所
捕食[ 10] .与此相对照 ,哲水蚤几乎完全是浮游的 ,因此
它们更合适作为仔稚鱼的饵料.火腿许水蚤(Schmack-
eriapoplesia)广泛分布于我国沿海河口水域 ,经常成为
低盐区的优势种并在河口生态系统中扮演着重要的
角色[ 11-14] .本文对不同饵料条件下火腿许水蚤的脂肪
酸组成进行了研究 ,一方面为海水鱼类养殖用活饵料
的培养积累基础资料 ,另一方面 ,也为探讨桡足类在
不同环境条件下生化组成的变化积累基础资料.
1　材料和方法
1.1　实验用水和饵料培养
实验用水取自青岛沙子口的砂滤海水 , 先后经
300目筛绢和 0.45 μm微孔滤膜过滤 ,最后调盐度至
15 ±1.
为了提供饵料中不同的必需脂肪酸(essentialfaty
acids, EFA)水平 ,选用三角褐指藻(Phaeodactylumtri-
cornutumBohlin),金藻 8701(IsochrysisgalbanaParke
8701), 绿色巴夫藻 (PaviovaviridisTsengChenet
Zhang)和 亚 心形 扁 藻 [ Platymonassubcordiformis
(Wile)Hazen]作为饵料.单胞藻均用 f/2培养液培养
至对数生长期待用.
1.2　实验动物的采集和培养
实验所用的火腿许水蚤采自青岛胶南养虾池 ,运
回实验室内进行镜检 、挑选 ,在温度 20 ±1℃、盐度 15
条件下培养.在不同饵料的喂养实验中 ,火腿许水蚤
培养于 10 L的玻璃缸中 ,在缸底放置气石充气 ,维持
氧饱和度以及水的流动.实验设定 4个组 ,分别投喂金
藻 8701;V(金藻 8701)∶V(绿色巴夫藻)=1∶1;V(金
藻 8701)∶V(三角褐指藻)=1∶1;V(金藻 8701)∶V
(三角褐指藻)∶V(亚心形扁藻)=1∶1∶1.每个实验
组设两个平行 ,培养温度为(25 ±1)℃,盐度为 15,每
天投饵 ,饵料浓度维持在 10 ×104 cels/mL,每隔一天
半换水一次.光暗比为 12 L∶12 D,培养 4周.
1.3　脂肪酸分析
(1)样品处理
用于喂养实验的单胞藻样品经离心机 3 000 r/
min离心 5 min浓缩 ,后冻干.火腿许水蚤经 200目筛
绢筛选出成体 ,然后转移至新鲜海水中 ,饥饿 24 h清
空消化道内的单胞藻饵料 , 然后再筛滤掉排出的废
物 ,经蒸馏水漂洗 ,冻干.
取冻干样品 20 ～ 30 mg,加入 1 mol/LKOH-甲醇 3
mL,在水浴锅中 75 ～ 80℃皂化 10 min;加入 2 mol/L
HCl-甲醇溶液 3 mL,在水浴锅中 75 ～ 80℃酯化反应
10 min;加入正己烷 1 mL,振荡萃取 ,静止分层 ,吸取
上清液约 0.5 ～ 1.5 mL离心管中 ,低速离心 5 min;取
1 μL进样测定.
(2)气相色谱分析
使用美国惠普公司 HP6890型气相色谱仪分析 ,
具体条件如下:
毛细管色谱柱:007-CW;
汽化室温度:270℃;
检测器温度:270℃;
柱温:程序升温 150℃ 15 ℃/min 200℃ 2 ℃/min
250℃;
载气:高纯氮流速 2 mL/min;
数据分析:面积归一法.
2　实验结果
2.1　脂肪酸分析方法的平行性实验
为检验样品整个前处理和测定过程的可靠性 ,对
15℃和 25℃培养条件下投喂相同饵料 V(金藻 8701)
∶V(三角褐脂藻)=1∶1的火腿许水蚤脂肪酸含量进
行了平行实验 ,结果见表 1, 2.由表可知 , 11种脂肪酸
含量的相对偏差为 0.1% ～ 6.5%,均低于 7%,完全符
合平行样变异系数 <10%的分析要求 ,表明本法分离
效果好 、重复性好 、可靠性强.
2.2　不同饵料喂养的火腿许水蚤的脂肪酸组
成分析
本实验所用的饵料单胞藻的脂肪酸组成分析结
果见表 3.金藻 8701和绿色巴夫藻都属金藻门 ,其
DHA水平极显著高于另外两种单胞藻(p<0.01),分
别占总脂肪酸含量的 (7.34 ±0.01)%和(5.52 ±0.
18)%.值得注意的是 , 绿色巴夫藻虽然同属于金藻
门 ,但在脂肪酸组成上又有自己的特点 ,即它除具有
高水平 DHA外 ,还具有高水平的 EPA(20.09 ±0.
12)%和低含量的 18∶1(约 1.65%).
三角褐指藻属硅藻门 , 除具有高水平的 EPA
(23.08 ±0.93)%外 ,还具有高含量的 16∶1((21.99
±0.98)%),但其 DHA含量较低(0.77±0.05)%.
绿藻中的亚心形扁藻 , 含有较高水平的 16∶0
((17.12 ±0.00)%)、18∶1w9((13.28 ±0.02)%)和
18∶3n-3((13.15 ±0.02)%),均高于 10%.但其几种
重要的必需脂肪酸含量都较低 ,比如 ARA和 EPA含
量分别为(0.82 ±0.02)%和(5.71 ±0.07)%, DHA
含量在本实验中未检测到.
在 25℃条件下 ,投喂不同饵料喂养的火腿许水蚤
的脂肪酸组成见表 4.从表中可以看出 ,投喂金藻或者
　表 1　15℃培养条件下火腿许水蚤脂肪酸组成(占总脂肪酸
含量的百分比)的平行性实验结果
　Tab.1　Resultsofreplicatemeasurementsoffatyacidcomposi-
tionofSchmackeriapoplesiaculturedat15℃
脂肪酸　 样品 1 样品 2 平均值 标准偏差/%
相对偏差
/%
14∶1 7.48 7.29 7.38 0.13 1.8
16∶0 21.90 20.82 21.36 0.76 3.6
16∶1 10.72 10.35 10.54 0.26 2.5
18∶0 4.14 4.08 4.11 0.04 1.1
18∶1w9 3.14 3.18 3.16 0.02 0.8
18∶1w7 2.30 2.17 2.24 0.09 3.9
18∶2n-6 2.44 2.39 2.41 0.03 1.4
18∶3n-3 2.76 2.76 2.76 0.00 0.0
20∶4n-6 0.98 1.01 0.99 0.02 1.8
20∶5n-3 15.27 15.69 15.48 0.30 1.9
22∶6n-3 16.78 16.58 16.68 0.15 0.9
HUFA 32.03 34.27 33.15 1.58 4.8
DHA/EPA 1.03 1.12 1.08 0.06 5.7
EPA/ARA 15.58 15.59 15.59 0.01 0.1
注释:ARA(arachidonicacid)=20∶4n-6, DHA(docosahexaenoic
acid)=22∶6n-3, EPA(eicosapentaenoicacid)=20∶5n-3.
　表 2　25℃培养条件下火腿许水蚤脂肪酸组成(%)的平行
性实验结果
　Tab.2　Resultsofreplicatemeasurementsoffatyacidcomposi-
tionofSchmackeriapoplesiaculturedat25℃
脂肪酸 样 品
1
样 品
2
平 均
值
标准偏差
/%
相对偏差
/%
14∶1 7.51 8.12 7.81 0.43 5.5
16∶0 23.81 22.00 22.91 1.28 5.6
16∶1 12.31 11.23 11.77 0.77 6.5
18∶0 5.41 5.51 5.46 0.07 1.3
18∶1w9 3.34 3.33 3.33 0.00 0.0
18∶1w7 1.98 1.98 1.98 0.00 0.0
18∶2n-6 2.19 2.19 2.19 0.00 0.0
18∶3n-3 1.91 1.92 1.92 0.00 0.0
20∶4n-6 1.74 1.79 1.77 0.04 2.3
20∶5n-3 12.84 13.43 13.13 0.42 3.2
22∶6n-3 13.67 14.68 14.18 0.71 5.0
HUFA 28.24 29.90 29.07 1.17 4.0
DHA/EPA 1.07 1.09 1.08 0.02 1.8
EPA/ARA 7.39 7.49 7.44 0.07 0.9
·251·增刊 2　　　　　　　　　　 　　　刘光兴等:几种单胞藻对火腿许水蚤脂肪酸组成的影响
表 3　饵料单胞藻的脂肪酸组成
　　　　　　　　Tab.3　Fatyacidcompositionofmicroalgae　　　(%)
脂肪酸 金藻 8701 绿色巴夫藻 三角褐指藻 亚心形扁藻
14∶1 11.06±0.39 13.52±0.04 7.55±0.61 0.49±0.00
16∶0 9.43±0.56 10.73±0.08 13.15±0.23 17.12±0.00
16∶1 7.92±0.84 8.22±0.12 21.99±0.98 11.50±0.04
18∶0 nd 0.18±0.00 0.46±0.01 0.17±0.01
18∶1w9 7.22±0.33 1.28±0.03 1.20±0.03 13.28±0.02
18∶1w7 0.88±0.02 0.37±0.01 0.87±0.04 2.83±0.00
18∶2n-6 5.23±0.15 0.31±0.01 2.02±0.11 5.67±0.01
18∶3n-3 10.17±0.35 0.31±0.02 nd 13.15±0.02
20∶4n-6 1.52±0.12 2.11±0.01 0.57±0.08 0.82±0.02
20∶5n-3 0.56±0.03 20.09±0.12 23.08±0.93 5.71±0.07
22∶6n-3 7.34±0.01 5.52±0.18 0.77±0.05 nd
HUFA 9.42±0.16 27.72±0.31 24.42±1.07 6.53±0.05
DHA/EPA 13.17±0.58 0.28±0.01 0.03±0.00 nd
EPA/ARA 0.37±0.01 9.51±0.02 40.74±4.07 6.99±0.26
　　　　　　注释:nd(notdetected)=未检测到.　
表 4　不同饵料喂养的火腿许水蚤(25℃)的脂肪酸组成
　　　Tab.4　FattyacidcompositionofSchmackeriapoplesiaculturedat25℃ andfeddifferentdiets　　(%)
脂肪酸 金藻 金藻 +绿色巴夫藻(1∶1)
金藻 +三角褐指藻
(1∶1)
金藻 +三角褐指藻 +
亚心形扁藻(1∶1∶1)
14∶1 8.75±1.20 8.69±1.08 7.81±0.43 4.61±0.17
16∶0 19.25±1.48 18.21±1.39 22.91±1.28 22.70±0.75
16∶1 4.14±0.34 5.61±0.45 11.77±0.77 6.16±0.21
18∶0 5.77±0.09 5.54±0.04 5.46±0.07 6.03±0.07
18∶1w9 6.36±0.05 4.16±0.00 3.33±0.00 5.20±0.09
18∶1w7 1.91±0.02 1.88±0.00 1.98±0.00 2.52±0.03
18∶2n-6 3.62±0.00 2.11±0.00 2.19±0.00 4.35±0.07
18∶3n-3 5.25±0.01 2.82±0.02 1.92±0.00 5.50±0.07
20∶4n-6 1.41±0.07 2.13±0.14 1.77±0.04 2.26±0.03
20∶5n-3 2.98±0.10 11.17±0.59 13.13±0.42 11.84±0.20
22∶6n-3 24.61±2.23 19.63±1.86 14.18±0.71 13.48±0.60
HUFA 28.99±2.40 32.93±2.60 29.07±1.17 27.58±0.83
DHA/EPA 8.24±0.47 1.76±0.07 1.08±0.02 1.14±0.03
EPA/ARA 2.13±0.03 5.26±0.08 7.44±0.07 5.23±0.01
混和饵料 ,火腿许水蚤的 ARA含量都在 1.4%以上 ,
其中 ,投喂金藻 、三角褐指藻和亚心形扁藻混和饵料
的火腿许水蚤 ,其 ARA含量最高(2.26 ±0.03)%.不
管投喂何种饵料 ,火腿许水蚤的 EPA和 DHA含量都
比较高 ,除了投喂金藻的火腿许水蚤体内的 EPA含量
较低(2.98 ±0.10)%外 ,其它组 EPA和 DHA含量都
在 10%以上 ,特别是投喂金藻以及金藻和绿色巴夫藻
混和饵料的火腿许水蚤的 DHA含量高达(24.61 ±
2.23)%和(19.63±1.86)%.经金藻投喂的火腿许水
蚤 DHA/EPA值较高(8.24 ±0.47),而 EPA/ARA值
较低.各种饵料投喂的火腿许水蚤 EPA/ARA值都相
对较低 ,在 7.5以下.
·252· 厦门大学学报(自然科学版)　　　　　　　　　 　　　　　　　　　2006年
3　讨　论
目前认为 ,桡足类的营养成分尤其是脂肪酸组成
能更好地满足海水仔稚鱼的营养要求 [ 15-19] .脂肪酸是
鱼类生物膜的重要组成成分 ,也是能量的来源 [ 20-23] .
鱼组织中主要脂肪酸是 n-3系列;海洋鱼类的必需脂
肪酸一般认为是 C20和 C22高度不饱和脂肪酸 ,包括
EPA和 DHA及 ARA[ 15, 20 -22, 24-26] .大多数海水鱼类不
能将 C18转变成 n-3和 n-6系列的更长链脂肪酸 ,因
此必需脂肪酸必须由食物提供 [ 22, 23, 27] .传统上使用轮
虫和卤虫为仔稚鱼饵料 ,它们的 HUPA含量低 ,所以
必须 使用 强 化饵 料来 改 进他 们 的脂 肪 酸组
成 [ 22, 23, 28, 29] .Sargent等[ 22]曾指出 ,桡足类作为海水仔
稚鱼饵料具有很多优势:桡足类中磷脂比三酰基甘油
含量更高;其脂肪酸水平和比例更接近海水仔稚鱼的
天然饵料营养要求;另外 ,它们是天然的抗氧化剂 ,防
止 PUFA过氧化 ,是最佳保护剂;还可将天然抗氧化剂
的最佳水平传递给仔稚鱼.
饵料中 n-3HUFA的数量和种类会直接影响海水
仔稚鱼的生长速度 、存活率 、应激能力和体内相关成
分 ,其中以 DHA和 EPA尤为重要 [ 22, 24, 30] .DHA/EPA
和 EPA/ARA的值是评价鱼类饵料质量的重要指
标 [ 27, 30 -32] .研究表明 ,海洋鱼类卵中 DHA和 EPA的
比值约为 2∶1[ 31, 33] ,因此通常认为当饵料中 DHA/
EPA值在 2∶1时仔稚鱼的存活和生长可以得到较好
的效果[ 22, 27, 34] ;另外 , Reitan等[ 35] 的研究发现 , 用
DHA/EPA值为 2∶1的饵料培育大菱鲆仔稚鱼 ,可以
有效地防止大菱鲆非正常色素沉着的产生.
ARA是磷脂酰肌醇的主要成分 ,在鱼体内含量虽
然很低 ,但是在代谢中很重要 , ARA在刺激蛋白酶过
程中为第二信使 [ 36] ,是合成类二十烷酸(如前列腺素 、
白细胞三烯 、血栓烷等)的前体 ,这些生物活性物质具
有重要的生理功能 ,影响生殖 、消化和呼吸系统 ,影响
膜对离子的通透性及抑制脂质分解等.Furuital等 [ 37]
提出 ,对于牙鲆仔鱼的生长 , ARA比 EPA、DHA更重
要.Castel等[ 38]对大菱鲆 、Bessonart等 [ 39]对金头鲷的
实验结果也是如此 ,饵料中较高含量的 ARA可以提高
仔稚鱼的成活率 ,促进仔稚鱼的生长.但 EPA与 ARA
之间的合适比例 ,至今尚无定论 , 一般来说 , EPA与
ARA之间的合适比例 ,因鱼的种类而异 ,欧洲鲈鱼大
约为 2∶1,比目鱼大约为 10∶1[ 30] .
金藻和三角褐指藻分别具有高含量的 DHA和
EPA,并且细胞体积较小 ,易于桡足类个体特别是其幼
体摄食.另外这两种单胞藻适应能力较强 ,易于培养 ,
适合作为桡足类动物大量培养的主要饵料.亚心形扁
藻个体较大 ,桡足类幼体摄食有一定困难 ,但对于桡
足类成体来说 ,由于其生物量较大 ,所以摄食亚心形
扁藻所消耗能量较少 ,而绿色巴夫藻同时具有较高含
量的 DHA和 EPA,因此这两种单胞藻都比较适合作
为饵料配合金藻和三角褐指藻使用.从本实验的结果
来看 ,含有高水平 DHA的金藻 ,具有很高的饵料价
值 ,特别是与绿色巴夫藻或者三角褐指藻混合使用 ,
能够达到较好的投喂效果.金藻与绿色巴夫藻以 1∶1
混和投喂 ,不仅使火腿许水蚤 DHA与 EPA含量的比
值接近 2∶1(1.76 ±0.07),而且 ARA含量较高(2.13
±0.14)%, EPA/ARA值较低(5.26 ±0.08).本实验
中金藻与三角褐指藻混和组的投喂比率为 1∶1,从实
验结果推测 ,若将其比率提高到 2∶1,可能得到更好
的效果 ,这尚需进一步实验验证.
本研究既反映了不同单胞藻对火腿许水蚤脂肪
酸组成的影响 ,同时 ,也为培养桡足类用单胞藻饵料
的选择提供了参考.
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TheEfectsofDiferentAlgaeontheFatyAcidCompositionof
Schmackeriapoplesia(Copepoda:Calanoida)
LIUGuang-xing1, 2 , CUIJian-li1 , HUANGYing1
(1.ColegeofMarineLifeSciencesOceanUniversityofChina, 2.KeyLabofMarineEnvironmentalScience
andEcology, MinistryofEducation, OceanUniversityofChina, Qingdao266003, China)
Abstract:ThefatyacidcompositionofseveralcommonmonoalgaeandSchmackeriapoplesia(Copepoda:Calanoida)wereexaminedu-
singgaschromatography(GC)technique.TheresultindicatedthesuitabilityofIsochrysisgalbanaParke8701 andPhaeodactylumtricornutum
Bohlinasmaindietsforcopepods, whichcontainhighlevelofDHAandEPArespectively.Inaddition, thecontentsofseveralimportantessen-
tialfatyacids(ARA、EPAandDHA)incopepodsfedbyeachmonoalgaldietandmixeddietswerehigher, moreover, theratioofDHA/EPA
ofS.poplesiawasnear2∶1, whichfedbymixeddietofI.galbanaParke8701 andP.viridisTsengChenetZhang(1∶1).Onthebasisof
DHA/EPAratio, S.poplesiawasahighqualitydietformarinelarvalfish.
Keywords:diet;EPA;DHA;ARA;Schmackeriapoplesia
·255·增刊 2　　　　　　　　　　 　　　刘光兴等:几种单胞藻对火腿许水蚤脂肪酸组成的影响