全 文 ：第 8卷第 2期
19 9 8年 1 1月
浙江水产学院学报
JU ORN L A OZ H EF JI AN C G OL LE GE OF F I SH E E R I S
Vo l s
,
N o
.
2
N o v
. ,
1 9 8 9
大石花菜 G iel 成u m P ac ij 。 。。 O ak m .
切段再生育苗的进一步研究
裴鲁青 费志清
陈康存带
周剑敏 蒋霞敏 陈 坚 . 柯爱英辛
郑晓春带 丁士芳带 方小红带
( 水产养殖 系 )
近年来 , 随着植物组织和细胞培养技术的迅速发展 , 多细胞海藻的组织与细胞培养也受
对国内外学者的重视 , 特别对一些重要的经济海藻 , 如紫菜 、 海带 、 裙带菜等藻类的细胞培
养 I ’ 〕: 2儿 3 ]、 愈伤组织的诱导 、 愈伤组织诱导分化及愈伤组织细胞的分离培 养 再 分 化〔` lJ “ 1[ . 1
等。 石花菜是生产琼胶的重要原料 , 但由于自然资源有限 , 而人工栽培又受到苗种的限制。
近年来 , 石花菜栽培主要采用劈枝苗种 [` “ l , 种藻需量大 ; 抱子育苗近年来也获得成 功 I ` “ ] ,
但抱子苗生长速度较缓慢 。 国外有报导 , 通过组织培养的方法直接生产琼胶 沙 l , 但大量生产
琼胶还存在许多问题 。 作者自 1 9 8 5年以来对大石花菜 G . p ac i了i你m 进行离体组织培 养研究 ,
对 大石花菜切段再生进行了一系列的工作 ! ’ l , 本文就内外因素对切段再生与附着的影响作了
探讨 , 现将结果报导如下 。
材料与方法
本试验分别于 1 9 8 6年秋— 19 8 7年夏 、 8 年秋— 89 年夏进行。 试验用种藻均采自普陀山岛。
切 段 制 备 选 耳丈紫红色健状的种藻 , 清除附着物 , 用过滤海水逐棵清洗 后 , 在 过滤
海水中暂养备用 。 制备 切段时 , 将暂养藻分枝 , 用消毒海水仔细洗刷数次 , 切除细末小枝 ,
除特殊实验外 , 将枝体切成 4 一 6 毫米长的切段 , 切口方向不严格要求 。
基本培养条件 结养液为浙水院 T . C一 3 液 。 再生试验切段悬浮于三角 并 中进 行培
养 , 培养液与材料重量 比大于 1 0 。 附着试验将切段直接撒播在附着基上 , 置于塑料 水 槽中
培养 , 一般 7一 14 天换液一次 , 光照时间 12 小时。 附着试验的附着基主要是 30 毫 米 x 150 毫
米 x 3 毫米的处理过的竹片 , 用绳子作培养基时则将绳子整齐紧密地绕在塑料板或瓷砖上 。
检查与计算方法 再生试验 , 每个水平设两个平行组 。 培养 _ 20 天后 , 每组抽取 20 个切
段镜检 , 只在一个端面上出现了再生芽的便作为有再生的切段 。 用 目微尺测量再生芽长度达
5 5 0微米的为达到指标长度 ( 即肉眼可辨 ) , 切段退色或变绿为死亡 , 所得数据作如下处理 :
水 系本院毕业 生 。
1 1 4浙江水产学院学报 8卷
再生率 R
_名再生的切段数
名抽样切段数 x 0 0 1 %
单个切段出芽量M _名上
、 下端出芽数
万抽样切段数
达标率 L=名达到指标长度的芽数艺切段 出芽数
_艺死亡切段数
万试验切段总数
x 0 0 1 %
死亡率 , T x 1 0 0%
(当试验中不出现明显死亡不计 T 值 )
附着试验是用镊子轻轻牵动切段进行初检 , 并抽样镜检附着结构的产生 , 最后以垂挂后
仍附着的切段数为附着的切段数。
附着率 = 艺附着切段数艺撒播切段数 X 10 0 %
结果与分析
、 切段的切口方向 、 取材部位 、 切段长度的试验 。
结果见表 1 、 2 。
表 1 切段生理状态时再生的影响试验结果
_ 咭护 \ 因 {_ ” 口 ” “ … 取 “ ” 位士、 一 _ \ 、 于 } } { } _ { {立兰幸烈里二兰}兰翼干李生{共华一岁览二一上里一1一理竺擎州一竺二只一竺竺匕口一二竺一匕二竺一 ~一卜二些一卜二竺一 -一进竺整竺一二一里二一止一里竺兰二一三竺一上一燮一-二兰i一一匕一 ~竺三一 -
, } 上 切 面 { ’
·
5`
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2
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2
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6 0
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干 } 下 切 面 { 么 ` 8 { ` · 6 , } 0 · 8 5 } 3 · ` 5 … 2 · 5` { ` · 2 “出 } 合 计 ! 4· 7 5 } 4 · 3 2 } 7 · 7 8 1 6 · 6 5 } 5 · 1 2 { 3 · 0 2芽 } } , } , } _ { 。 } , l卫1 1 一 D 1 U I 。 ! “ J U I 、里 } { _
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——M }一一一一一一二一 - -一 几 。 一 _ ~ } 。 _ _ _ _ . 山 。 _ 。I : 七 “ 。 · , 2一 ” 。 · 。 5 ” ` · 。 8 ” 。 · 。 ` 一 ` · 吕。 : l r ” `吕 “ b一 ” 。 · 。 “ 一 3 ` 。吕 厂 。 · 。` = 今 . ` u表 2 切段 长度与再生的关系试验结 果二二 -一 _下. 。 . Zc m` 二、 一、 糕 下一 ~ 1.汤砚融率% _上王竺 一 _仁_竺 _ _ _ _ L 竺_ _ _ _{_ _ __一 L_ 一 i吐 ~一匕一些一 -达标率% 1 5` 1 5。 · 6 } 5 5 · 1 … ; 8 · 1 1 4 4 · 5 { 2` · `, {幸器篡! ; ;; … : ;; … : :: … : : 5 { : :: … :` ::
! F
二 1 0· 3 4” F。 · 。 ` ’ “ · 2 3 全、 · 。` = ” · “ 6
* 为避免污染 , 培养 2 0天后作一次检查 , 若在再 生出芽后死亡 , R 、 L 、 T 值可同时出现 .
2期 大石花菜 G e l id艺。 m p a c i f fe u o O ka二 .切段再生育苗的进一步研究 1 1 5
如表 l 所示 , 石花菜主枝 、 侧枝 、 细枝切段的切口均能再生出芽 〔图 1 、 幻 , 切段的单个出
芽量 , 主枝大于侧枝 , 细枝最少 , 但达标率以细枝最高。 不同的切口 方向的出芽量 , 以纵切
最大 , 再生芽达标率为5 8 . 5% , 比横切 、 料切均高。 将再生切段进行冰冻切片 , 可见再生芽
由髓部直接产生 , 切口处没有再生的部位没有明显变化 〔图 5 〕。 李家俊 ( 1 9 8 5 ) 曾提到石花菜
髓部比其他部位生成再生芽的数量多 , 本文结果与之大致相同 。 本试验中切口处再生出芽在
培养20 天即出现 , 而且很少见切段表面的出芽 , 这与孙建章 ( 1 9 8 )G 报导有别 。 由表 2 可知 , 切
段的长度与再生有密切关系 , 1 一 8毫米长的切段虽均能再生出芽 , 但从测定的各项指标来
看 , 其再生能力是随着切段长度的增加而再生能力递减。 切段的上下端切口 均能出芽 , 从表
1 表 2 , 上下端出芽数之比约为1 . :3 1 。
二 、 外界因素对切段再生的影晌
光照强度 、 光时 由表 3 可知 , 光照强度 10 0一 2 0 0 0勒克斯范围内 , 所有切段均再 生 出
芽 , ( 田段在黑暗中也可再生 , 再生率达 65 % ) 。 再生芽的生长与光强的关系 , 在 1 0 一 70 0勒
克斯时 , 单个出芽量和达标率均较高 ; 但较强的光照下 , 虽再生出芽及单个出芽量还较适合 ,
但对再生芽的生长有较强的抑制作用 。 光照 2 0 0 0勒克斯 , 再生率 97 . 5 % , 单个出芽量 4 . 39 ,
而达标率却仅 1 . 5 % , 较 1 0 一 7 0 勒克斯下显著降低 。
表 3 光照强度与再生的关 系试验结果
、 、一、 结 ` ’!” - 一 `水 ’ ` 一 ’ 一 ” ’ 平佑 、 、 、 翅 } __黑 U青 1 0 0 l u x 2 0 0 3 0 0 5 0 0 7 0 0 1 0 0 0 1 5 0 0
1 00 1 0 0 I Q0 1 0 0 1 0 0 95 1 0 0 9 7
.
5再生率%
达标汽% 1 8 . 6 4 0 3 3 . 3 3 3 . 2 2 7 . 2 2 6 . 8 1 6 9 1 。 5
七` 8 6 . 5 :了` 6 . 7 6 . 5 2 5 . 7 8 { ,c’ 7。 ac’ 3。a b a a b a b { b c
F = 1 5
.
7 2辛命 F o . o、 = 2 . 0 6 F o
.
o l = 2
.
5 3
如表 4所示 , 在适宜的光强下 , 每天的光照时间对再生出芽没有明显影响 , 3 小时的短
日照到 2 4小时的连续光照 , 再生率均在 95 %以上 , 单个出芽量和芽的达标率均差异不明显 。
但 日照 16小时以上时切段大量死亡 , 2 4小时的连续光照 , 切段死亡率高达 7 1 . 6% 。
表 4 光照时数与再生的关 系试验结果
布一 _ 结 … 水 平一 \ 果 1— 一 - 一 一 }一— !一 一— 一 _ -一 一— 一— -一万 一— — 一 一—-一一一生_ 二二二 }_ _三竺一 }一竺竺一匕竺竺』三 } ` 2 “、 时 { ’ 6 ,WJ …一 -了夕生竺卫一翌竺一一 ~ j竺生牡 R% l ` 。“ 一 , , · 5 卜塑一 _ _ 1 , ” 。 …` “ 。 1 ” 5 … “ ,-镖器 i言一 .{摆十牛一里:一一资影十.黔一子一一 ::一锐一一。 个 出芽。 、 , { 氢犷` …:了3 { :扩5 …:了` …: 1 2 …愁18 …忿。 7
F = 9
.
0 0二 F o . o。 二 2 . 1 3 F o . o l = 2 . 5 8
1 16浙江水产学院学报 8卷
温度 如表 5 所示 , 石花菜切段再生出芽适宜的温度范围较广 。 8 ℃再生率 10 % , 12 ℃
再生率即达到 7 7 . 5 % 。 12 一 30 ℃范围内单个出芽量 6 一 8 个。 但温度在 14 ℃ 以下以及在30 ℃
以上时 , 不利于再生芽的早期生长 。 14 ℃下达标率 1 1 . 6% , 30 ℃达标率 12 . 32 % ; 更高 的 温
度则无法使切段存活 。 综合上述 , 切段再生的最适温度为 17 一 26 ℃ , 而适宜温度 12 一 30 ℃ 。
表 5 温度与再生的关 系试验结果
认于一二…万司不万 一不丽 一丙万两司 ~ 一王不;瓜石两于 - ;`司- 、一一 再妹味一 下二 卜 5 巨。下丽 {10 0 10 丁偏一不 5 一下一 “ } “
- -万默一{ 括牢当洲号书…王琦一一} u } t, } “ } “ } “ } 一 { 一 } 一 } 一
海水盐度 如表 6 , 海水比重在 1 . 0 1 0 ( S 二 1 3编 )至 1 . 0 2 0 ( S 二 2 6编 )时 , 再生率 、 达标
率及单个出芽量均较高 , 海水比重达 1 . 0 30 以上时 , 各个指标均明显下降 。 据报导 , 石 花 菜
成体在海水比重为 1 。 020 以下时 , 其生长受到障碍〔 ’ “ 〕 , 但其离体组织的再生与之有着较大的
区别 , 这可能与引起再生的原因有着密切的关系 。
表 6 海水比重与再生的关 系试验结果
一犷一六习万面丁石下丽下蕊不石丽不万;砰不刃一 - ~赢
,号羚令称宁:豪冲粼令一{一一岛兰士立· · … …土层拱宾共二熟黑一
氮 、 磷 从表 7 、 8 可以看出 , 自然海水再添加 2 0 0 p p m 以下的氮素时再生率均 在 95 %
以上 , 未添加氮的自然海水 (含氮 5 0 一 60 。毫克 /立方 )中 , 再生率也可达到 87 % 、 9 2 . 5% 。 从
表 7 、 8 中可看出 , 氮的添加量在 10 0一 2 0 p p m 时有利于再生生长 , 90 p p m 以下不同的添
加量对再生生长无明显影响 , 不添加氮的达标率也可达到 28 % 。 这些氮浓度大为不同的培养
基可使相同组织得到同样快速的生长 。 可能 , 氮的不同浓度对再生不存在直接影响 。 磷对切
段再生的影响见表 9 。 按固定的 N 、 P 比例 , 当自然海水中添加 磷 1一 20 p p m 时 , 再 生率
均达 90 %以上 , 从对几个指标的综合影响来看 , 以 N : P 二 2 : 1 , 磷的添加量 5 一 10 p p m ,
对再生及再生芽的早期生长显著有利 。 高的磷浓度虽然导致较强的再生力 , 但在本试验中可
以明显地看到 , 随着磷添加量的增加 , 切段则大量死亡 。 究其原因 , 天然海水中碳酸盐的存
在及与大气中 C O Z 的平衡作用 , 其 p H 值通常在 8 . 2左右 , 经过煮沸消毒后 , p H 值 有一定
数量的增加 , 因此 , 当加入高浓度磷时 , 则易生成絮状沉淀 , 这些沉淀物下降复盖在切段上 ,
它们影响了切段正常的生理活动条件 , 促使切段大量死亡 。
2期 大石花菜 G o l :’ d沁 mP a c汀 fo u mo a km.切段再生育苗的进一步研究 1 1 7
表 7添加 氮 ( N 0 3一 N )与再生的关 系试验结果
、
.。 , 一 * 二
袱 \ \ 曰 l
一一旦一互圣 { . 1一 ~生2竺到三些竺里l竺些…」竺些巴竺些竺竺塑竺些旦到迎旦竺望些只叫竺竺再 生率 % 1 8 7 . 5 」。 7 . 5 } 。7 . 5 1 。了. 5 } 1。。 } 。2 . 5 { 。 5 } 1。。 { 1 。。 ! 1 。。 } 1。。
一 些资兰- 全1到一兰二 L里兰且止色色~巴到竺兰一竺里 匕1.二生 匕竺生少竺卫二生生飞7 } .ea0 5 1a6’ 3
` …: 2 3….a6了` …: 3 3…髻’ 。…sa’ ” 3…?.a` 5 : .sa“ ` …: 7
{ F
= 6
.
0 2 3二 F o . 。 5 = 1 . 8 5 F 。 。 , = 2 . 3 7
表 8 添加氮 ( N 0 3一N )与再生的关 系试验结果
项 结~ 、 、
目 果
水 平
1 0 0 P P m 2 0 0 p p m 3 O0 p p m 4 0 0 p p m
再 生 率 % 9 2 . 5 1 00 1 0 0 7 2 . 5 4 0%
达 标 2 8 0 5 2 . 9 5 3 . 7 1 1 . 2
…一l
3
.
3 6
.
9 5
。
4 2 7 0 8 8
单 个 出 芽 量 } a } a b
F 二 4 3 . 93 . 介 F o . o 。 = 2 . 3 7 F 0 . 0 1 = 3
.
3 2
表 9 不同氮磷比的磷 ( K : H P 0 4一P )的浓度与再 生的关 系
结是一睽目 一~ 一飞 N
:
P = 1 0
:
1 N
:
P = 2
: 1 N
:
P = 1
: 1
项 1 p p m 1 . S P Pm } 2 P Pm 5 p p m 7 . S P P m } 1 0 P P m { 1 0P Pm 1 5 p p m 2 0 p p m
再生率%
达标率%
单个 出芽量
切段 死亡率%
::
.
5
::
.
:;
.
4 9 7 5
3 2
。
6
8
.
6 5 9
。
2 5
1
lwe州87j l
4
.
6 7
1 5
。
2 2 4
9 0
2 7
.
3
5
.
1 2
2 2 5
9 5
4 7
11
.
7 7
3 4
`
5
1 0 0
5 2
.
2
1 3
。
2
6 2
.
0
9 7
.
5
5 2
.
2
1 1
.
0
6 7
`
9
1 0 0
4 0
.
3
1 0 3 5
6 6
.
3 0 6 3
.
5 7 5
.
3
三 、 光照强度 、 温度对切段附粉的影晌
从表 10 可知 , 在 3 月下旬至 4 月中旬 , 在 14 士 2 ℃ 、 光强度为2 0 勒克斯时 , 附着 率 较
低 , 为 4 9 . 2 8 % , 在 60 0一 2 2 0 0勒克斯时 , 附着率为 65 一 76 % , 以 1 4 0 0勒克斯的附着率最 高。
经 13 天后的预检查 , 有 50 %的切段 已有肉眼可见的再生芽 , 并 已有附着趋势 。 在倒置镜下检
表 10 光照 强度对切段附着的影响 8 9 . 3 . 2 5一 4 . 1 2
切段总数
附 着 数
附着率%
死亡切段
死亡率%
应兰… 6 。。 } 1。。。 1 1 4。。 _」止{竺_ _
: ;)….::…. :!{,.;;…二 :….:6 …. :{….::…:!{.::
2 20 0
:::
6 5
.
9 3
2 2
8
。
1 5
室温 1 4℃ 士 2
1 18 浙江水产学院学报8 卷
查 , 可见切段切口处也产生了与再生芽枝上相同的毛样丝体 (图 3 、 4 ) 。 这说明附着不仅可
在再生芽和所形成的甸旬枝上发生 〔’ ] , 而且在适宜的条件下 , 切段本身也可以附着。 表 n 是
在较高温度和高光照强度下的试验结果。 20 一 28 ℃条件下 , 较强的光照对附着明显不适 , 在
低温 、 光强 2 2 0 0勒克斯下切段仍能正常附着 , 但在温度较高条件 、 光强 1 6 0 0勒克斯时 , 附着
率则显著降低 , 仅 为 5% , 仅 8 0 勒克斯时表现了正常的附着生长 , 附着率 7 2 . 5% 。
表 n 光照温度时切段附 着的影响 的 . 5 . 2卜 6 . 19
8 0 0 l u x
切段总数
附 着 数
附着率%
1 改天出芽再 生率%
… “ 。 { ” “ { 8” l
}
通
}
7 … 1 7 …… “ … ” · 75 … “ 1 · 2 5 `死亡 , 1 5`死亡 ,
{
马 7 、 5
} 1 0
0
{
” 5
}
n甘凡乙介`一匕gU工勺丹`OJ
室温 2 0一 2 8℃
表 12 温度对切段附着的影响 8 9 . 3 . 3 1一 4 , 1 7
1
14 ℃ 1 7℃ 2 0℃ 【 2 4 ℃ 2 8℃
{ 1
切段总数 18 0 1 8 0 9 0 12 0 1 2 0
附 着 数 1 3 9 1 1 8 5 ( 1 7 ) 4 ( 3 6 ) 死
附着率 % 7 7 . 2 6 5 . 5 5 6 ( 1 9 ) 3 . 5 ( 3 0 ) 歹巳
死亡率% 3 . 3 1 . 6 2 4 . 4 4 6 . C 7 3 3 . 1
1 3天 出芽再生率 % 96 9 7 9 6 9 6
光照 2 5 0一 5 0 0 lu x
由表 12 可知 , 在 14 一 17 ℃对附着较适宜 , 在20 一 24 ℃时 , 出现了不适附着的结果 。 根据
12 天预检查结果 , 在 20 一 24 ℃时 , 也有一定数量的切段具有附着趋势。 从表 n 也可知高温下
仍达到一定的附着率 (虽是在较弱的光强下 ) , 造成表 n 与表 12 结果不同的原因可能是 : 第
一 , 相同水体所放的附着基 (竹片 )数量不同 , (表 12 为 3片 /盒 、 表 n 为 2片 /盒 ) , 附着器浸
泡时间表 12 的比表 1 的短 ( 约 2 个月 ) 。 因此在高温作用下 , 竹片的有害浸出物较多 , 不利于
再生切段的附着生长 ; 第二 , 高温条件下水槽中的海水蒸发较快 , 而试验中仍补充的海水 , 培
养依的盐度逐渐积累提高 (表 n 试验据此增加全换水次数和补充淡水 )对切段的再生及附着均
产生 了影响 (见表 7 ) 。 4 月 10 日发现 , 培养液发黄 , 培养液表面 出现一层盐晶 , 结果切段死亡 。
四 、 附着基的筛选
试验结果见表 1 3 , 竹片最适宜石花菜切段的附看 , (竹片表面无须刨平 , 且要将游离的竹
丝磨掉 )经碱煮浸泡共 4 个多月 , 但在试验中仍发现培养液微黄 , 有浸出物出现 , 这 将 对 一切
段附着和存活都有影响 。 我们还选择网眼较小的聚乙烯丝编的旧网衣重复三层进行试验 , 切
段虽不能平坦地贴附在基质上 , 甚至不少切段落入水槽中 , 但仍可见切 .段附着 , 即聚乙烯材
料似可做为附着基 , 如在试验中聚乙烯绳 ( d = 5毫米 )仍有 5 2 . 5%的附着。 本试验中所采用
的维尼龙绳非市售品 , 而是用维尼龙细绳和胶丝手工绞合而成 , 表面凹凸 , 絮毛较多绳直径
仅 2 . 5一 3 毫米 , 切段附着不牢固 , 经振摇后脱落严重 , 附着率下降30 % 。 将绳子绕在 塑 料
板上便于切段附着 , 也可直接拆开放养 , 但绕用的板应注意没有浸出物 , 不影响水质 。 再值
得提出的是此法会使板一面的绳子不能充分利用 , 应设法进一步解决。
2期 大石花菜 G e l id l’ um Pa c l’ f f仰m o加m . 切段再生育苗的进一步研究 1 1 9
表1 3几种 附着基对 切段附 着的影响
1 8 9 9
.
4
.
24一 5. 1 9
维 尼 龙 绳 聚 乙 烯 绳 竹 片 旧 网 衣
切段总数
振摇前附着 率%
振摇后附着率%
死亡切段数
死亡率%
4 8 0
8 5
.
2
5 9
.
2
7 5
1 1
.
9
4 8 0
7 2
、
5
5 2
.
5
1 3
.
0
6
。
5
4 2 0
8 6
.
7
4 8
.
2
2 9
1 1 2
1 2 0
2 2
.
5
1 6
.
7
1 4
1 1
.
7
光照1 2 0 0 l u x室温1 7℃一 2 0℃
五 、 切段苗种种筑用量推算:
经实 际称量原藻 61 2克 , 切去细末小枝可制取用来切段的枝条 1 0 克 ; 每克枝条平均可以
制切段 48 0段 ( 以上称量均用吸水纸吸去表面水份马上进行 ) 。 现以面积 45 平方厘米的竹 片为
例 , 测得室 内培养 2 个月或直接下海后 53 天葡甸体直径为 1 . 8一2 . 。厘米 , 参考试验中适宜条
件下附着率为 70 %左右推算如下 :
每甸甸体占有面积 2 。 8平方厘米 , 每片竹片可容纳切段 (甸甸体 )约 16 个 , 可撒 播切 段 16
+ 7 0% = 2 3个 (试验中 2 0一 3 5 )
设每亩以 1 6 0 0米绳长 吊养 , 竹片间距 0 . 25 米 , 每亩可放竹片 6 4。。片 , 需切段 1 4 7 2 0 0段 ,
需种藻 1 4 7 0 0 0 4 8 0 x 6 2 1
1 0 0
= 1 9 0 4 (克 /亩 )
讨论与结论
一 、 石花菜切段再生 、 附粉的机制
再生 1 . 再生是由髓部丝体发生的 , 切 口上除再生芽外不发生其他明显变化 。 暴露的髓
部细胞的切口上均可见再生发生 。 在一般条件下再生率都在90 % 以上 , 单个出芽 4 一 8 个 ,
7 一 10 天 肉眼可见再生芽 。 2 . 切段切 口的形状 , 切段取自种藻叶状体的部位及切段长度都不
影响切段的再生出芽 , 短的切段再生芽的生长相对较快 。 3 . 在黑暗中和强光 ( 4 5 0 0勒克斯 )下
都可再生 。 但对再生芽早期生长 , 弱光 ( 1。。一 70 勒克斯 )起促进作用 , 而大于 1 0 0 0勒克斯则
有抑制作用 。 4 . 低温下生长缓慢在 1 4一26 ℃的范围内 , 随温度的升高 , 再生芽早期生长加快 ,
超过 30 ℃切段不能存活 , 5 . 试验所使用的 T 、 C一 3培 养 液不含生长刺激物质 。 种藻经暂养和
仔细冲洗 , 培养用水经二次以上煮沸或高压灭菌 , 即便不能排除微生物存在 , 但也不可能在
数年几 十次培养中都混生了同一种能产生生长物质的微生物 。 综以上理由 , 石花菜切段的再
生是由髓部细胞受到物理刺激后所产生的一种物质诱导发生的 。 由于藻类组织 分 化 程 度很
低 , 石花菜离体组织在这种诱导物质 的作用下即脱分化而恢复到了个体发生过程中抱子萌发
形成的细胞团阶段 ; 髓部细胞产生的物质起了在高等植物组培中外加的生长物质的作用 , 直
接诱导髓细胞进行分裂 , 并分化产生了再生芽 。 但从实际的培养结果可知 , 再生芽在适宜的
条件下形成甸旬体— 将来藻体的固着器。 直立幼苗是从甸甸枝上分化形成的。 分化过程与抱子萌发和抱子苗形成过程很相似 I ’ 2 ]。 由髓部细胞产生的内源生长物质 , 不仅使静止的细胞
1 20 浙江水产学院学报 8卷
恢复了分裂能力 , 而且在早期分化中起到一定作用 , 它的活性受到环境条件的影响 : 它在强
光下会抑制 , 在一定范围内 , 随温度的升高而加强 ; 在髓部细胞中传递的方面不受极性的限
制 , 在一定短的距离中它的作用可以叠加 , 它在低浓度的海水中易流失 , 而在较高盐度的海
水中 , 使生长物质易受到抑制。
附着 关于甸旬枝的附着及附着结构已有文说明 [ 7〕。 切段本身也可通过切口处产生与甸
甸 枝上的毛束相同的丝体 , 再由丝体形成附着结构。 从附着试验可知 , 当肉眼见 到 再 生 芽
时 , 切段也趋于附着 , 这就进一步说明切段本身也具有附着能力。 在强光下 , 可促进再生芽
的生长及葡甸体的形成和再生枝芽产生毛束而附着 。
二 、 有关切段育苗应注意的问题 。
适宜的附着基 本试验表明 , 竹片是较好的附着基 , 但竹片必须经过严格处理 , 参考海
带育苗器 (竹筷 )的处理方法 , 除碱煮和清洗外 , 还需要足够的浸泡时间 , 这样才能保证不仅
在较低的温度育苗时没有有害浸出物的浸出 , 而且还可在较高的温度下育苗 , 也没有害浸出
物的浸出 。 用维尼龙绳或聚乙烯绳绕在板上培育切段苗 , 然后拆下直接放养 , 可视为一种较
理想的方式 , 如何提高附着强度及附着率 、 提高绳子利用率应将进一步探索 。
切段的撒播及密度 由切段附着试验结果可知 , 直接撒播可以使垂直培养和下海前的时
间缩短 。 而比切段再生后撒播 , 平面培养时间相对增加 , 作者认为再生芽肉眼可见后再撒播也
有一定优点 : 除便于控制污染 、 适于再生发生外 , 还可节省培养用水和提高平面培养的利用
率 。 有关撒播密度 , 在本试验中 45 平方厘米撒播切段 15 一 35 个 , 未见对再生有不同影响 , 对切
段来说不要相互重叠 , 成长后个体在竹片上所占的空间要适度 , 以达到用较少的种藻达到较
高产量的目的。 要考虑竹片对成长个体的承载能力 , 以每棵成体 5 一 8 克计 , 45 平方厘米竹
片上 15 一 20 棵的成体足以承受。 本试验以 16 棵进行种藻用量的推算 , 竹片吊挂间距 为 0 . 25
米 , 根据 目前海藻载培中筏架的结构 , 吊挂密度还有可能增加。 有关直立体适宜生长条件及
密度与产量 、 成本等生产上的问题有待进一步试验解决。
切段苗种葡甸体的培育条件 制备切段时应仔细进行种藻的选择和清洗 , 避免杂藻污染 。
因石花菜组织柔韧 , 切段时一定注意不要使切口周围的组织受到损伤 , 以减少切段死亡 。 作
者认为 , 光照和温度应适当进行配合 : 温度较低时 (小于 20 ℃ ) , 光照分两个阶段控制 , 早期
以促进再生出现的弱光 ( 2 0 0一 7 0 勒克斯 )为主 ; 待再生芽肉眼可见后 , 提高 到 1 5 0 0一 2 。。。
勒克斯 , 以促进附着和甸旬枝的生长 。 若温度在20 一 28 ℃时 , 再生初期光强控制在 2 0 一 7 0
勒克斯之间 , 后期则控制在 1 0 0 0勒克斯以内为宜。 切段附着后 , 可转入垂直培养 , 共约经 1
个月室内培养 , 甸旬体即可下海培育直立幼苗 , 并直接进入养成 。 综合上述 , 一切段育苗可在
3 一 6 月 , 10 一 12 月间进行。
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12 2 浙江水产学院学报 8卷
图版 ( 1一 5 )
1
. 藻体切段纵切 , 示切口 处再生芽 , 戒` 2 . 藻体切段 , 上 、 下端面及末 技切 目
均有再生芽 , 3一 4 . 切段切口与再生芽上均产 生与附着有关 的毛 ,
5
. 出芽切段 切片 , 示再生芽 由髓部丝体直接分化形成 。
A F U R T H E R S T U D Y O N T H E R A I S IN G O F
S E E D L IN G O F G E L I D I U M 尸 A C I尸 I C U M O K A M .
B Y R E G E N E R A T I O N O F T H A L L U S F R A G M E N T S
P e i L u q in
,
F e ix h i q in
,
Z h o u Ji a mn i
n a n d Jia n g X i a m i n
( A q a e u l t u r e D即 a r t m e n )
A b s t r a e t
o n t he bas i s o f e x P e r im e n t a l r哪 l t 3 t h e au t h o r s ex P o u n d t h e r e l a t i o n s h i P
b e t w e e n r e g e n e r a t i o n a n d fo r r Q a t i o n o f b r a n e h e d e r e e P e r s o n t h e o n c h a n d a n d
e n v i r o m e n t a l e o n d i t i o n s a n d P hy s i o l o g i ca l s t a t e o f t h e f r a g m e n t t ha l lu s o n
t h e o t h e r
.
T h e P r in e i P le s o f r e g e n e ar t i o n o f e x P la n t s a r e
_
d i s e u s s e d
.
D i f f e r e n t
s u b s t r a t e s f o r r e g e n e r a t e d s e e d l i n gs a n d d e n s t t i e s o f b r o a d e a s t s o w i n g a r e
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. `
A t t h e e n d o f t h e P a eP r a s u mm a r y o f t h e t e e h n i q u e o f r a i s i n g
s e e d lin g b y r e g e n e r a t i o n 13 g iv e n
。
浙江水产学院学报 第 8 卷 第 2期 8 19 9年 1月
文 摘
东海群系带鱼亲体与补 充 量 关 系—马永钧 ;浙水 院学报 , 1 9 8 9 , 8 ( 2 )
本文用浙江省海洋水产研究所收集测定 的带鱼 渔捞统
计及生物 学资料 , 研究带鱼亲体 与补充量关系 , 得出 关系
式为 R = 9 . 7 5吞2 A e 一 0 . 1 4 7 7八 。 从而求得最大持续产量所
需的亲体量为 5 . 3亿尾 。 而 1 9 8 6年的亲体量仅为 4 . 6亿 尾 。
确认带鱼产卵亲 休已严 重不足 , 亚 需加强管理 。
东海勤鱼精巢的周年变化— 龚启祥 ,浙水 院学报 , 1 9 8 9 , 8 ( 2 )
本文研究了东海缅鱼精巢的周年变化 。 结果表 明 , .
鱼精巢为典型 的壶腹型精巢 。 其基本结构 : 精小叶 、 精 小
囊 、 精小叶腔以及小叶间组织等都 随季节而周期性变 化 。
本文还对小叶间组织的生理功能和繁殖季节过后 , 精巢 内
残留精子的退化等间题作了 描述和探讨 。
象山港毛蛆 A : 。 a : 沥二el at a 年龄与生长
的研究— 李明云… ; 浙水院学报 , 1 9 89 ,
8 ( 2 )
象 山港毛蜡年轮的形成周期为一年 、 形成时间 主要在 1
月份 。 贝壳边缘增长率 a = R 一 R n /R 计算式 可作为确定
贝壳年轮形成时期的理论指标 。 体重与贝体 各维数之间相
关 式 的 最 优 方 程 为 w = 1 0一 4 K 7 . 7 8 2 L o · , , 一 , H o · 3 3 5 ,
B Z
` 魂` “ , , 实际应 用时可 采用W = 1 0一 心 火 9 . 2 58 B 2 ’ 9 7 8 7 , 。 毛
蜡壳长生长方 程 为 L = 3 9 . 2 7 3 9 / i + e ’ · ` , , ` 一 。 · 。 , , 3 o a , 。。
根据毛蜡壳长以 及休重在生 长过程 中的变化特 征等生物学
指标为依据 , 碗定最住起捕年龄为 40 至 43 月 龄 , 规格大小
28 nr m至 3改 m m 。 采击n季节规定为 1 2月一 3 月为好 。
大石花菜 G 。 li d i u m p a c f f f c u m o k a m 切
段再生育苗的进一步研究— 装普青… ; 浙水院学报 , 1 9 8 9 , 8 ( 2 )
根据对 比试验结果 , 阐明了 大石花莱切段再生以及 切
段再生附着形 成物甸体与环境条件 、 切段生 理 状 态 的 关
系 , 论述 了大石花莱切段再生的机理 。 对切段育苗 的附着
基和切段撒播 的密度进行了筛选 ; 进而提 出了大石花 莱切
段育苗的技术要点 。
螂鱼对斜向贴底运动纲 索 的 反 应—蔡厚才… , 浙水院 学报 , 一9 8 9 , 8 ( 2 )
本文研究了卿鱼在不同条件下对斜向贴底运动纲 索的
反应距离 、 方向 。 主要结果如下 : ( 1 )正常鱼对 运动纲 索
的反应距离显著地大于 盲鱼 。 (2 )正常鱼原始鱼体方向反 向
时对运 动纲索 的转向率显著地大于 同向时的转向 率 , 但盲
鱼 转向率在原始鱼体方向间差异不显著。 ( 3) 正常鱼 、 宣 鱼
对运动纲索的反应模式可分为 A一 I 、 I 型 、 B一 工、 1 、
正型和 C 一 工、 1 型三类七种 。 ( 4) 无 论正常鱼还是 盲鱼 ,
原始鱼 体方向反 向时的过索率均显著地大于同向时的 过索
率 。 ( 5) 纲索拖速在 0 . 30 3~ 0 . 86 9米 /秒范 围内对娜鱼反 应
特性没有显著影响 。
海带与条斑紫菜的间养方式及其生理基
础的研究一张芬来 ;浙水院学报 , 1 9 8 9 , 8 ( 2 )经测定 , 海带 生长部及其附近组织的光合强度 、 光 合
饱和点比 中上部 , 比紫菜低 , 强光抑制海带生长部及 其附
近组织生长 。 只有在较强光照下 , 海带 中上部光合潜力 才
能充分发挥 。 筏式平养的海带受光条件与上述要求相 反 。
在凹凸期 , 二绳海带 中间挂一或二根紫莱绳 , 脆嫩 期后 ,
提高海带放养水层 , 并把挂在中间的紫莱绳移至海带 绳近
旁 , 结果提高了海 带 中上部受光条件 , 又使生长部得到适
当遮光 , 免受了 提高放养水层的强光刺激 , 促进了海带的
生长 , 提高海带产 量和质量 。 在基本不增加养殖 成本下获
得一定数量的紫 莱 , 提高了养殖经济效益 。
灰色系统理论用于鱼笼试验分析的方法
研究— 何 宗敬 ; 浙水院学报 , 一9 8 9 , 8 ( 2 )本文运用灰色系统的关联度理论定量地分析 出影响 笼
捕产量的主次因素。 与数理统计法相比较 , 它具有观察 动
点小 、 试验省时、 省力 、 样品成本低等优点 , 且 分析 结果
与实际基本相符 , 具有较好 的准确性。
一种多面体隐线消去的新算法— 正负法— 沈纪桂… , 浙水院学报 , 1 9 8 9 , 8 ( 2 )首先利用隐函 数直线表达式 的划分正负性质 , 既可 分
离出多面体的前向面 , 又可分离出与可见 棱线有遮蔽关 系
的相关面 , 然后再利用隐函数平面表达式的 划 分 正 负 性
质 , 就可判定棱线上重影部 分的可见性 , 从而实现全 部隐
线的消去 。 由于不采用传统的最大最小判别原理 , 它分 离
出的相关面更为准确 , 使无效求交的计算量大为减 少 。 这
种方法的数学处理精确 、 简便 , 提高了计算速率 , 数 据结
构简单、 节省了存储空间 , 适用于由平面组成的任意形 状
的多面体 , 而且特别适用子以平面逼近 的曲面立体 。