全 文 ：针而言 , RR与 RL近似相等 ,故在进行体内实验时
因相对回收率 RR无法直接测定 ,可采用容易测定
且无显著差异的相对损失率 RL来近似模拟相对回
收率 RR ,进行药物浓度的测定和校正 。
基金项目:国家自然科学基金(3037183);广东省自然科学基金
(31473);广州市科技计划项目(2002Z3-E5011)
参 考 文 献
1　凌家俊 , 等 .青藤碱微透析回收率测定方法的体外模拟
实验 .广州中医药大学学报 , 2005, 22(1)∶56
2　严方 ,等 .微透析技术在体内药物分析中的应用 .药学
进展 , 2004, 28(9)∶499
3　张绍东 ,等 .α-氨基丁酸为内标物高效液相法测定脑微
透析液中氨基酸含量 . 中国康复理论与实践 , 2004, 10
(8)∶475
4　罗汀 ,等 .微透析校正的相关问题和方法 .生物技术通
讯 , 2004, 15(2)∶182
(2005 - 08 -31收稿)
Study of the Relative Recovery of Sinom enineM icrodialysis
System and It’ s Influential Factor
Zhang Y ing feng, Zhou L iling, W ang X iaogen, W ang L isheng
(Guangzhou University of T raditiona l ChineseM edic ine, Guang zhou 510405)
　　Abstrac t　Objective:1.To study the e ffect of concen tra tion and flow ra te on re la tive recovery (RR);2.To study the difference O f
re lative recovery between probes;3. To study the relationship between re la tive recove ry and re la tive loss(RL).　M ethods:H PLC. Re-
su lts:1.The sinomenine concentra tion ha s no obv ious e ffec t on RR in the sam e flow ra te.2.RR is reduced by exponen t law as the flow
ra te increase s. 3.The re is significent difference be tw een probes.　C onc lusion:The RR isn’ t affec ted by sinomenine concentration as
the flow rate is sam e.The flow ra te has no tab le effect on RR as the sinom enine concentration is same. The RR of every probe should be
assayed. We can take RL as RR to do in-vivo study.
K ey words　S inom enine;M ic rodialysis;Re lative recovery (RR);Rela tive loss(RL)
软骨凹顶藻 Laurencia cartilag inea中新的五羟基神经酰胺
徐石海　杨晓燕　廖小建　郭书好
(暨南大学化学系 ,广州 510632)
　　摘要　从中国南海西沙群岛永兴岛软骨凹顶藻 Laurencia cartilag inea乙醇浸提物的乙酸乙酯相分离得到了一
个化合物 , 通过 1H NMR、13C NMR、E I-MS、FAB-MS等波谱技术 , 确定该化合物为结构少见的新神经酰胺。
关键词　软骨凹顶藻 Laurencia cartilag inea;五羟基神经酰胺
　　海藻是海洋生物资源的一大家族 ,生长于海洋
中的低等隐花植物 ,在漫长的进化过程中产生了许
多结构新颖 、功能独特的海洋次生代谢产物 。现代
药理实验表明 ,这些结构新颖的次生代谢产物对人
类多种疾病具有明显的疗效 〔1、2〕。软骨凹顶藻
Laurencia cartilaginea属于红藻门松节藻科凹顶藻
属 。我们在研究南海软骨凹顶藻化学成分的过程
中 ,曾报道从软骨凹顶藻的乙酸乙酯部分得到化合
物:5α, 8α-环二氧麦角甾-6, 22-二烯-3β-醇 、胆甾-4-
烯-3β , 6β-二醇 、豆甾-5, 22-二烯-3-O-β-D-吡喃葡萄
糖苷 、(2S, 3S, 4R , 2′R)-2-(2′-羟基二十四碳酰氨
基 )十八碳-1, 3, 4-三醇和一组混合甾醇 〔3、4〕。在对
样品的进一步研究中 ,又发现一种新的神经酰胺:N-
(1′-羟甲基-2′, 6′, 8′-三羟基 )二十一烷基-2-羟基-
11, 12-亚甲基二十脂肪酰胺 ,这种含有五个羟基 、且
支链上含有一个三元环结构的化合物文献少有报
道。
图 1　化合物的结构式
1　材料与仪器
AVANCE-500型核磁共振仪 (德国 B ruker公
1067 中药材第 28卷第 12期 2005年 12月
DOI牶牨牥牣牨牫牳牰牫牤j牣issn牨牥牥牨牠牬牬牭牬牣牪牥牥牭牣牨牪牣牥牨牥
司 ,内标 TM S)、BRU KER EQU INOX红外光谱仪 、
ZAB-HS质谱仪 (英国 VG公司 )、HP 5989A质谱仪
(美国 HP公司 )、PERK IN ELMER240C元素分析
仪 、5-X国产显微熔点仪 (温度计未校正)。软骨凹
顶藻 Laurencia cartilaginea于 2001年 5月采集于中
国南海西沙群岛永兴岛 ,经中科院南海海洋研究所
的邹仁林研究员鉴定 ,标本保存于暨南大学化学系
有机化学教研室 。柱层析硅胶和薄层层析硅胶均为
青岛海洋化工有限公司生产;试剂均为广州化学试
剂厂产品。
2 　提取与分离
将 2.75 kg(湿重 )软骨凹顶藻粉碎后 ,用 95%
的工业酒精室温浸泡提取 4 ×15 d,合并浸泡液 ,减
压浓缩得深褐色浸膏 。将浸膏悬浮于 700 m l蒸馏
水中 ,以等体积的乙酸乙酯萃取 ,减压浓缩得深褐色
焦油状物 14 g。将此焦油状物进行硅胶柱层析 ,依
次以乙酸乙酯 /石油醚 、甲醇 /氯仿洗脱剂进行梯度
洗脱 ,从 4%甲醇 /氯肪梯度洗脱得一固体 ,重结晶
除色素后 ,以 8%甲醇 /氯仿为洗脱剂 ,再对该固体
进行硅胶柱层析 ,分离得白色粉末状固体 。
3 　结构鉴定
3.1 　分子式的确定　E I-MS在高质区给出碎片离
子峰 m /z 711 [ M ] +、 693 [ M-H2O ] +、 675 [ M-
2H2O ] +、657[M-3H2O ] +, FAB-MS高质区给出 m /z
712[M +1] +碎片离子峰 ,推断该化合物相对分子
质量 711,同时表明分子中含有奇数个氮原子 ,结合
元素分析 (%):C72.65、H 12.01、N2.03(计算值 C
72.57、H 11.95、N 1.97)推导该化合物分子式为 C43
H85NO6 ,不饱和度为 2。
3.2 　官能团的确定
3.2.1　羟基:1H NMR在 δH:4.78(1H , d), 4. 57
(1H , m), 4. 52(1H , dd, J=10. 0, 5. 0H z), 4. 46(1H ,
dd, J=10. 0, 5. 0Hz), 4. 37(1H , m), 4. 32(1H , m)有
信号 ,结合 13 C MRδC:76.76(d), 76. 15(d), 73. 65
(d), 72. 98(d), 61. 92( t),推断分子中有 1个伯羟
基和 4个仲羟基 。
3.2.2　酰胺基:δC 17.4(s)、53.09(d)和 δH 7.51
(1H , d, J=8. 3H z)显示分子中存在酰胺片段-CO-
NH-。
3.2.3　长链烷基:NMR谱显示 2个甲基 δC14.2
(2C , q), δH 0.87(6H , t, J=5. 6H z),该数据表明酰胺
部分存在两条没有分支的长碳链。分子式存在两个
不饱和度 ,其中一个被酰胺羰基所占据 , 13C-NMR谱
没有显示双键碳存在 ,推测一条长链中存在的一个
环 。δH :-0.21(1H , m)、0.69(1H , m)、0.74(2H , m) t
δC 11. 31( t)、16. 17(2C , d)表明环丙烷的存在。
碳原子种类的确定:13 C-NMR、DEPT显示分子
中有 2个-CH3 , 33个-CH 2-, 7个 =CH-, 1个季碳 。
3.3　结构的确定　以上的分析表明该化合物是一
个神经酰胺类化合物 ,故具有 N-酰基神经鞘胺醇的
骨架结构 。神经酰胺的骨架中有两个羟基的位置是
固定的 ,需要确定的是另外 3个羟基和两条碳链的
结构 〔5〕。因此该化合物的结构式可以表示为:
CH2OHCH(CHR2OH)NHCOR1 , R1 +R2 =C39H78O 3 ,
根据官能团结构分析 ,该化合物是一个没有分支的
含有一个丙环烷结构长碳链神经酰胺 , R1和 R2含
有 3个-CHOH-基团。 E I-MS中的碎片离子 m /z
323,是酰胺中酰基的 a裂解所形成的 , m /z295是酰
胺中酰基部分失去一分子羰基所形成的 , m /z 265
是酰胺中酰基部分失去一个分子羰基 、一个-CHOH-
所形成的 ,所以酰基部分存在片断-COCHOH-。根
据碎片离子峰 m /z:113、153、181、223、265推测 R1
为:-CH(OH)(CH2)8 ∧——— (CH2)7CH 3;根据碎片离
子峰 m /z:183、213、195、227(484)、257(454)、300
(412), 推测 R2 为:-CH (OH )(CH 2)3CH (OH )
CH2CH(OH)(CH2)12CH3。从而推断该化合物结构
为:N-(1′-羟甲基-2′, 6′, 8′-三羟基 )二十一烷基-2-
羟基-11 , 12-亚甲基二十脂肪酰胺 。
3.4　波谱数据　白色粉末状固体 ,熔点为 120.1 ～
122.3℃, 分子式为 C43 H85 NO6。1H-NMR(C5D5N ,
500H z), δppm:7. 51(1H , d, J=8. 3Hz), 5. 17(1H ,
m), 4. 78(1H , d), 4. 57(1H , m), 4. 52(1H , dd, J=
10. 0, 5. 0H z), 4. 46(1H , dd, J=10. 0, 5. 0H z), 4. 37
(1H , m), 4. 32(1H , m ), 2. 85(1H , m), 2. 61(1H ,
m), 2. 50(1H , m), 2. 27(1H , m ), 2. 10(2H , m ),
1.95(2H , m), 1.69(2H , m ), 1. 43(4H , brs), 1. 32
(nCH 2), 0. 87(6H , t), 0. 74(2H , b rs), 0. 69(1H ,
m), - 0. 21(1H , brs);13 C NMR(C5D5N , 500H z)
δppm:174. 0(s), 76. 8(d), 76. 2(d), 73. 7(d), 73. 0
(d), 61. 9( t), 53. 1(d), 34. 2( t), 32. 6( t), 32. 1
( t), 30. 1(nCH2), 26. 53( t), 26. 5( t), 22. 9( t),
16.2(d), 16. 2(d), 14. 2(q), 11. 3( t);E I-MS m /z:
711、693、675、657、558、530、484、466、454、448、436、
412、395、382、339、295、278、265、251、237、223、195、
181、 167、 153、 127、 113;FAB-MS m /z:712([ M +
1] +)。
注:国家 863基金 (2004AA628030)、广东省自然科学基金
(39120)和广东省科学计划基金(2004B30101011)资助项目
1068 中药材第 28卷第 12期 2005年 12月
参 考 文 献
1　张淑梅 , 等 .浅谈中国海藻开发利用 .水产科学 , 2001,
20(4)∶35
2　范晓 , 等 .国外海洋药物研究前沿与我国的发展战略 .
中国海洋药物 , 1999, 70(2)∶42
3　杨晓艳 , 等 . 软骨凹顶藻 Laurencia cartilageinea甾醇成
分的研究 .光谱实验室 , 2005, 22(1)∶12
4　杨晓梅 , 等 . 软骨凹顶藻 Laurencia cartilageinea代谢产
物的研究 .天然产物研究与开发 , 2005, 17(3)∶303
(2005 - 07 -27收稿)
湖南产艾叶挥发油成分的 GC-MS研究
刘向前　陈素珍*　倪　娜
(中南大学化学化工学院制药工程系 ,湖南长沙 410083)
　　摘要　采用水蒸气蒸馏法 , 从湖南产菊科植物艾叶中提取挥发油 , 通过气相色谱-质谱-计算机联用系统对其成
分中的 30个化合物进行了确认 ,并用峰面积归一化法得出各类化学成分在挥发油中的相对百分含量。并和文献
报道的其它产地的艾叶挥发油成分进行了比较。
关键词　艾叶;挥发油;GC-MS
　　艾叶 Artem isia argyi Lev.l E tVan t为菊科植物艾
的干燥叶 ,有抗菌 、抗病毒 、平喘镇咳 、祛痰 、抗过敏 、
止血 、抗凝血 、护肝利胆 、解热镇静 、抑制心脏收缩及
降压等作用 ,为临床常用中药材。艾叶主要含挥发
油及鞣质 、黄酮类 、甾醇类 、多糖类 、微量元素等成
分 。据文献报道艾叶油中主要为桉油精 、萜品烯醇 、
蒿醇 、樟脑 、龙脑 、芳樟脑 、β-石竹烯 、α-水芹烯 、莰烯
等 〔1、 2〕。曾有文献报道其他产地艾叶挥发油成分 ,
但湖南产艾叶挥发油成分尚未见报道 。作为系统研
究湖南产菊科植物挥发油成分的一部分 ,本文采用
水蒸气蒸馏法 ,提取湖南艾叶挥发油成分 ,然后采用
气相色谱-质谱-计算机系统进行定性分析 ,再以峰
面积归一化法计算了各组分在挥发油中的相对百分
含量。比较不同产地艾叶的挥发油成分 ,为湖南菊
科植物在药用等方面的开发利用提供科学依据 。
1 　仪器与试药
GC-MS(日本岛津 QP2010型气相色谱-质谱联
用仪);实验用艾叶 2004年采集于湖南衡山 ,经中南
大学制药工程系刘向前老师鉴定为 Artem isia argyi
Lev .l E tVan t。
2　方法与结果
2.1　挥发油的提取 〔3〕　将艾叶粉碎后 ,取粉末 50
g,按中国药典附录方法提取 ,继用乙醚萃取 ,得蓝绿
色挥发油 ,有特殊的浓郁香气 。
2.2　GC-MS分析条件　气相色谱条件:载气为氦
气 (99.999%), 流速为 1.0 m l /m in, 柱前压为 50
kPa,汽化室温度 250℃, OV-1甲基硅橡胶毛细管柱
(25 m ×0.25 mm)。程序升温:柱起始温度 50℃,
保持 4 m in,以升温速率 3℃ /m in,升温到 220℃。进
样量 1 μl,分流比 20∶1。质谱条件:电离方式为 E I,
电子能量为 70 eV , 电子源温度 230℃,接口温度
280℃,检测定量为 0.75KV ,质量扫描范围为 50 ～
444 amu,分辨率为 2500。
2.3　实验结果　对湖南产艾叶挥发油成分进行
GC分析 ,鉴定了其中的 30个成分 ,采用峰面积归一
定量法 ,求得它们的各化学成分在挥发油中的相对
百分含量 ,结果见表 1。并和文献报道的其它产地
的艾叶挥发油成分进行比较 ,结果见表 2。
　　表 1 　湖南产艾叶挥发油成分 GC-MS分析结果
序号 保留时间(m in) 相对含量(%) 化合物 分子式 分子量
1 8.828 0. 66 a lpha-P inene(α-蒎烯) C10H16 136
2 10.075 0. 59 1-Oc ten-3-o l(3-羟基-1-辛烯) C8H16O 128
3 12.248 1. 23 o-Cym ene(邻-异丙基甲苯) C10H14 134
4 12.714 17. 53 Eucalypto l(桉树脑) C10H18O 154
5 13.978 0. 57 gamma-Te rpinen(γ-不旋松油精) C10H16 136
6 14.974 1. 76 3, 3, 6-T rim ethy l-1, 5-heptadien-4-o l(3, 3, 6-三甲基-4-羟基-1, 5-庚二烯) C10H18O 154
1069 中药材第 28卷第 12期 2005年 12月