全 文 ：尸入 产尸伙 尸 .、 尸、 尸 尸 .、 户尸入 六、 、 尸伙 才 .、 尸、 、 尸入 尸曰、
(石 )花 )菜 )代 )用 )琼 )脂 )制 )备 )培 )养 )基 )
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山西 沂县地区原乎农校 杨姗珊 李志超
琼脂是微生物生产中常用 的 重 要 原
料。 但是 , 琼脂不仅价格昂贵 , 而且不易
买到 。 为了促进农用微生物的发展 , 更好地
为农业学大寨运动服务 , 我们在 1 9 7 5年寒
假期间 , 用石花菜进行 了代用琼脂制备培
养基的试验 。 设数十个处理 , 试验二十多
次 。 开始是参考现有资料 , 用石花菜单纯
熬制琼脂 。 后来就研究直接用其做培养基
的方法 。 为了多快好省地得出结果 , 对石
花菜的用量进行了优选 。 为了使研究出来
的方法确实可行 , 又用细菌 、 酵 母 、 霉
菌 、 放线菌等农业上常用的四类微生物进
行了培养效果的检验 。 最后 , 终于获得了
较理想的结果 。
现将我们的试验结果以制备 1 0 0 0毫升
马铃薯基础培养基为例介绍于 下 , 供 参
考 。
有弹性 、 颜色变得洁白为止 。
( 二 ) 用并 配比 经过浸 泡 的 石 花
菜 (干重 )5 O克 , 冰醋酸 0 . 4克 (或酷精 0 . 8
克 ) , 明矾 (白矾 ) 1 . 2 5克 , 清水 1 2 5 0毫升 。
(三 ) 熔化处理 先将所用之清水一
半煮拂 , 随即将冰醋酸 、 白矾和石花菜等一
同加入 , 要充分搅动 , 以使药品与石花菜
很好作用 。 并继续加热 , 保持沸腾 , 当溶
液呈现糊状时 , 将另一半水加人 , 继续熬
煮 , 前后加热约 40 分钟 , 即可使石花菜全
部熔解。 这时即利用二层纱布过滤 , 大约
可得 60 0毫升的石花菜溶液 。 溶液浓 度 为
8
.
3% 左 右 。 溶液呈透明微黄色 , 与一般
琼 脂溶液相当。
这个处理方法是经过多次反复试验获
得的 (表 i ) 。
裹 1 石花菜落液然翻方法试脸
一 、 熬石花菜溶液
( 一 ) 清除杂质 石花菜是生长在海
里的藻类植物 , 一般杂质较多 , 盐分含量也
高 , 在熬制之前 , 必须清除杂质 , 以保证
质量 。
1
、去杂质 : 将市场上买来的石花菜 ,
首先进行抖打 , 以清除泥土枝叶 。 再用清
永浸泡搓洗 , 进一步去净所带的泥沙和蚌
壳之类杂质 。
2
、 浸泡 : 将洗净的石花菜 , 用清水
浸泡 2 昼夜 ( 48 小时 ) 。 在此期间 , 必须
换水数次 , 以使石花菜充分吸水伸展 , 富
处 理 熟制时间 熬 制 结 果
洗净 , 加冰 2 小时 石花莱全部熔化 , 色黑揭 ,酸段和白矶 糊 . 底 , 凝固后质硬 , 弹性与粘连性差
洗净 , 未加 2 小时 石花莱熔化一半 , 色黑揭 ,冰 醋 酸 和 糊偏底 , 凝固后质硬 , 弹性
白矾 与粘连性差
浸渔二昼夜 4 0分钟 石花莱全部熔化 , 颜色徽黄后 , 加冰醋 透明 , 凝固后畜有弹性粘连破和白矶 性 , 与琼脂相当
( 四 ) 调酸碱度 熬得的 石 花 菜 溶
液 , 一般呈酸性反应 (P H 在 6 以下 ) ,
必须及时调整 , 将其提高到 8 。 否则 , 既
影响培养基凝固 , 又有碍微生物生长 (表
2 )
。
一 4过一
衰 2 石花菜溶液P H值对培养若报固及
“ 54 06 ” 生长的影晌 裹 3 石花菜代用玻佑用 t 优选 (对半法)
P H 斜面情况
6 %石花菜 (加冰醋 6 黑褐色 , 凝 不 长酸及白矾 ) , 未调 p H 固不良、 枯连性差
5 %石花菜 (未加其 7 黑揭色 , 有 生长不良
它 ) 自然 pH 弹性 、 粘连性较好
以% 石花菜 (授泡两 8 浅黄色 、 透 生长良好昼夜并加 冰醋酸 、 白 明 、 粘连性矶 ) 调 PH 好 、 与琼脂
斜面相当
6 浅黄色、 透明 、 粘连性较差
’
}石花莱 {培 养 基 l元选次数 }用 量 } }攫! “ }凝固 良好 }第二次 { ` {凝 固 ! “! 3 }挽固不良卜
培养基斜面情况
(接种铲 、 环按压和划线 )
斜面光滑 、 质硬 、 有弹性
斜面光滑 、 质硬 、 有弹性
呈枯糊状
碱%加愉) 调
p H方法 : 准确称取N a O H (或
.0 吕克 ,
`
N . o 甘德液。
溶于 10 毫升水中 , 制得 5
每 10 毫升石花菜溶液 ,
一人 0 . 3毫升 5% N a O H 溶液 , p H值即可 提
离到 8 以上 。
线菌等四类微生物 , 培养效果和用琼脂的
毫无差别 (表 4 ) 。
此外 , 本着节约的精 神 , 经 我 们 试
验 , 过滤后的石花菜渣 , 可加 人 3 0 0毫升
左右净水 , 再熬煮半小时 , 过滤后所得的
二 、 煮马铃薯汁
将20 吞克丢皮洗净的马铃薯 , 切 碎 ,
衰 4 四类撤生物在石拢莱代用
珠皿培养葵上生长情况
一加人 8 0 毫升清水 , · 煮沸20 ~ 30 分 钟 , 双怠纱布过滤 , 即苛瘾4 0 毫升左右的 马铃
芬汁 (浓度约 50 % ) 。
徽生物类别 { 生 长 情 况 斜面长演天效
三 、 制备马铃薯基础培养基
方`%
将制得的 60 毫升石花菜溶液 , 和 4 0
毫升马铃薯汁混合 。 并加入 20 克白糖 (或
菊萄精) 搅匀 , 这时 P H值约为 7 . 5 , 石花
菜含量 5 % (表 3 ) 认
以上混合液 , 、 即可分装试管 , 灭菌备
用 。
大芽袍 (细首 )
前进1 0 2 (醉母 )
4 3 0 5 (霉菌 )
.
5 4 06
,
(放线菌 )
说
方 : 鸟铃落20 % , 白精
6 %
, 水1 0 0%
3 % ,
飞琼脂 2
: 马铃落 20 %
, 水1 0 % 白枪
稀薄石花菜溶液 , 再加人 2 %左右的教皮
(或小米面 、 高粱面等 ) , 搅匀后即可分
装试管灭 菌 , 同样可用 来 培养 “ 5 4 0 6 ”
等微生物 。
、经放阅ù ,.J恩四 、 培养基培养效果检验 .
用上法制得的马铃薯基础培养基 ,
舞们分别进行培养细菌 、 一酵母 、 · 霉菌、
一 4 5一