作 者 ：吴晨炜
期 刊 ：上海交通大学 2009年 S2期 页码：73
关键词：AtCBF1；AtCBF3；百子莲；狗牙根；遗传转化；
摘 要 ：本试验以野生型拟南芥基因组DNA为模板,通过PCR反应分别克隆了AtCBF1和AtCBF3的全长基因,然后分别将其插入克隆载体pMD18-T中,并分别转入大肠杆菌DH5α菌株中保存。经测序检测后,两个目的基因分别被插入到植物表达载体pCAMBIA 1304中位于CaMV 35S启动子和Nos终止子间的Nco I和Bgl II酶切位点间,分别构建AtCBF1和AtCBF3的植物表达载体,然后分别将两个表达载体转入农杆菌EHA105中。 为了建立狗牙根高效的愈伤诱导体系,我们采用L16(43)的均匀正交设计,对NAA、6-BA和2,4-D三种生长调节剂的浓度进行了优化。通过极...