全 文 ：第0 1卷第6 期
19 86 年9 月
海 洋 科 学
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5
S e P t
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1 986
培养小形舟形藻的氮 、 磷肥料量
王渊源 姜庆国 江航宇
(厦门水产学院 )
小形舟形藻 N a o i e u l a 刀a r o a ( M e n . )
cl e v e
一
E ul e : 是一种底栖性半咸水或海水生活
的硅藻。 金德祥等 ( 1 9 79 , 1 9 8 2) 在硅藻分类
研究中作过记述。 陈世杰等 ( 1 9 7 7) 培养大量
混合种类的底栖硅藻作 为杂 色 鲍 ( H al i 。 , is
d i。 。 r : i。 。 l。 ; ) 苗的饵料中也有舟形藻 (N a -
川。 ul a) 的未定种类 。 显然 , 小形舟形藻单种
的大量培养 , 既可供某些甸旬生活贝类幼体的
饵料 , 还可供作硅藻实验生态的研究材料 。
一 、 材料与方法
1
. 基础培养液
硝酸钠 74 毫克 /升
磷酸二氢钾 4 . 9毫克 /升
硫酸锌 23 微克 /升
氯化锰 1 78 微克 /升
铂酸钠 7微克 /升
氯化钻 12 微克 /升
硫酸铜 10 微克 /升
乙二胺四乙酸钠 4 . 3毫克 /升
· 柠檬酸铁 3 . 9毫克 /升
维生素 B 1 2 0 . 5微克 /升
维生素 B 1 1 0 微克 /升 .
把过滤海水加至 1 升煮沸冷却。
2
. 藻种分离
1 9 8 2年 7 月间在厦门集美码头 , 用 5 0 毫
升玻璃广 口瓶采水带回实验室 , 分装入预先准
备的无杂质 、 无离子 、 无菌的 4 个 5 0 毫升锥
形瓶 , 再加人基础培养液至 40 0 毫升 , 室温 28
一3 ’ c , 光照度为 2 0 一 75 0勒克斯 , 静置 。 两
周后 , 在锥形瓶底聚生一层黄褐色胶被 , 倾去
上层液 , 摇动底层胶被液后接种人新的锥形瓶
培养液 , 待再聚生黄褐色胶被后 , 重复以上接
种 , 直至在显微镜下检查纯为小形舟形藻 , 作
为培养实验的藻种 。
培养是在直径 15 厘米的结晶皿中进行。 培
养皿需严格进行清洗和灭菌 , 各放进 1升基础
培养液为对照组 , 其他氮磷浓度系列组按拟定
的氮 、 磷用量追放 (或减放 ) 氮源与磷源 , 对
照组和氮 、 磷的浓度系列组皆由两个培养皿同
时进行 , 以后在各培养皿中放进浮游植物计数
框 , 再在各培养皿中接种 10 毫升的小形舟形藻
藻种 , 并立即移入黑暗培养箱24 小时 , 最后移
出黑暗培养箱进行同步培养。 培养时 , 每隔两
天取出浮游植物计数框在高倍显微镜下计数细
胞数量 , 每片随机计数 10 个视野 , 每个视野以
计数框的十字交叉为圆心 , 计数其中 1 / 4 视野
的量 , 把所得数量乘 4除以视野面积 , 折合单
位平方厘米面积上的细胞数量。 10 个视野的平
均数量为 1个培养皿单位面积细胞数量 , 同组
的两个培养皿的单位面积细胞数量平均值为一
氮 、 磷浓度组的单位面积的细胞数量 。
二 、 结 果
1
. 氮源需要盘
本实验的氮源来自N O 3 一 N 、 过滤海水中含
有的溶解有机氮和无机氮 , 当氮源的浓度系列
都用同一过滤海水时 , 影响小形舟形藻的氮源
即是 N 0 3 一 N不同的浓度 。 把基础培养液 的 其
他营养元素恒定 , 而将 其 中含氮 的 浓 度 依
土 0 . 5倍递增 (或递减 ) 所配成浓度系列时 , 小
形舟形藻在不同的氮源浓度中的生长数量列于
海 洋 科 学 01 卷
小形舟形藻在氮源不同浓度中的生长数 t ` 、
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培养高峰细胞增加的倍数 1 。 0 9 4一 …4一 4 。 5 3
1 ) 单位 : x 10 “个细胞 /平方厘米 ; 培养水温 : 24 一 27 ℃ ; 光照时间: 14 小时 /天 ; 光照强度 : 18 00一
2 000 l u x
。
表 l 。
从表 1 可以看出 , 各浓度组在培养至第 4
天时 , 普遍出现高峰 , 其中数量最多的是当氮
源浓度在12 . 19 0 毫克 /升 、 18 . 2 85 毫 克 /升和
24
.
3 80 毫克 /升时 , 而且其他浓度组的细 胞 所
增加的倍数都比对照组的数量少 , 只有当浓度
为 1 8 . 2 85 毫克 /升时的细胞数 量 才 比 对 照 组
(含N 0 3 一 N为 1 2 . 1 90 毫克 /升 ) 的细胞数量增
加 5 . 62 倍。 因此 , 培养小形舟形藻的氮源浓度
范围是 1 2一 24 毫克 /升 , 尤其是 18 . 2 85 毫克 /升
为最合适的含氮浓度 。
2
。 磷源需要遥
本实验的磷源为 P O 4 一 P 。 根据氮源研究的
最佳含氮浓度 , 把基础培养液的氮源浓度调升
至 1 8 . 2 85 毫克 /升后 , 再把磷源配成不同 浓 度
系列组 , 其他营养元素保持基础培养液的原来
含量 。 小形舟形藻在不同的磷源浓度中的细胞
数量列于表 2 。
从表 2 不难看出 , 提供小形舟形藻培养液
的磷源浓度范围为 0 . 2一 1 . 1 毫克 /升 , 而且只
有当磷的浓度为0 . 2 79 毫克 /升时 , 其细胞数量
增加的倍数才大于对照组 (含 P o 4 一 P为 1 . 1 17
毫克 /升 ) 所增加的倍数 , 其他各浓度组 的 细
胞增加倍数都小于对照组 。
综上研究结果 , 小形舟形藻合适的 N O 3 -
N浓度范围是 12 一 24 毫克 /升 , P O 4 一 P 的浓度
范围是 0 ` 2一 1 . 1毫克 /升 。 最适的 N 0 3 一 N 浓度
为18 . 28 5毫克 /升 , 最适的 P O 4 一 P浓度为0 . 2 79
毫克 /升 , N : P = 65 : 1 。
二 1 { 于夸一 、 F J 卜 ` J
氮源是培养单细胞藻类时提供构成蛋白质
的重要元素 , 因为碳 、 氢 、 氧 、 氮 、 硫 、 磷是
构成蛋白质分子的诸元素。 除此之外 , 氮源也
影响藻类细抱的成熟与分裂 。 H o se (1 9 5 9) 根
据椭圆小球藻的同步培养指出 , 在 光 照 条件
下 , 只有当提供氮源与硫源的情况 , 藻类细胞
才能进行正常的细胞分裂 ; 在缺氮条件下 , 显
然要少于正常条件下的细胞数量。 磷在植物体
的代谢中起着触媒和磷酸盐的缓冲作用 。 由此
可以认为氮在培养单细胞藻类中的重要性 , 尤
其旨在获得大量培养过程中 , 其用量也需要增
加 。
培养各种单细胞藻类所提供的氮 、 磷用量
不同 。 本文所用的基础培养液即是作者 ( 1 9 84)
所提出的仿灯2培养液 , 其中氮浓度为 12 . 19 。
毫克 /升 ; 磷浓度为 1 . n 7毫克 /升 ; N : P = 1 0 :
1
。 陈世杰 ( 1 9 7 7) 培养鲍苗饵料底栖硅藻时 ,
氮用 l o p Pm , 磷用 l p Pm , N : P 二 2 0 : z 。 根据
本文的结果 , 当氮浓度由对照组增加至 1 8 . 28 5
毫克 /升和磷浓度由对照组减少至 0 . 2 79 毫克 /
升 , N :P = “ :l , 其细胞数量增加的倍数都高
于基础培养液的对照组 。
在室内培养单细胞藻类 , 其形态学效果往
往会有些变化 , 如在实验室中长年保存的中肋
骨条藻 ( S k e l。 t 。 n e m ; 。 o 。 t : 。。 。 ) 的细胞 变
匕期 王渊源等 : 培养小形舟形藻的氮、 磷肥料量
表 2小形舟形藻在磷滚不同浓度中的生长数且 ”…宜叹二二互二”
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1) 单位 : 又 10 ”个细胞 / 平方厘米 ; 培养水温 : 25 一29 ℃ ; 光照时间 : J1 4小时 /天 ; 光照强度 : 1 0 00一
1 00 00 l
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表 3 小形舟形旅的细胞大小 ( 单位 : 徽米 )
生 长 环 境 宽 高 研 究 者
天然水域 1 8一 2 7 4 。 5一 7 。 0
1 5一2 5 续、 右一 6 。 0
室内培养 3 . 0一 6 。 8 2 。 9一 4 。 3
金德祥 , 1 95 2
C l e v e 一 E u l e r , 1 953 又,
本文作者
z ) 自金德祥 ( 1 9 5 2 ) 。
小和牟勒氏角毛藻 ( C人a e t o e e r o s m u e l l e r i )
多数细胞的角毛收缩现象 , 在小形舟形藻的室
内培养中也发现其细胞有变小现象 (表 3) 。
分离小形舟形藻于室内培养器中培养 , 共
最合适的 N O 3 一 N浓度是 1 8 . 2 85 毫克 /升 , 最合
适的 P O `一 P浓度是 。 . 2 79 毫克 /升 , 而且其细
胞的长 K 宽 x 高是 10 . 0一 2 . 3 X 3 . O一 6 . 8 X
2
.
9一 4 . 3微米 , 比在天然水域中所采集的细胞
小 。
T H E A M O U N T
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O F P H O S P H A T A
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e e l l s w e 丈 e 吕m a l l e r i n 5 1艺e t h a n o n e 昌 玉丈。雄 t h e n a t修r e
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