全 文 ：第0 1卷 第2 期 湛江水产学院学报
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10 No
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2
9 190 年 12 月De e c m比 r 10 9 9
海产单胞藻液 中尖鼻虫和游
捕虫的杀灭研究
刘志 刚 陆根林
(养殖系 )
吉志华
摘 妥 本又拼 芜结 呆衣明: ) l禾用 降低澡液 pl创直至 3.0 的 办 法可 以 杀灭金藻
液和扁藻液嘴 气` 尖鼻虫石 一它二 类原 生动物鞭毛虫类 。 经NaO H中和后 , 绝大部 分
的 藻细胞均一能 复正常的生长和繁殖 。 2 ) 采用降低 p H 值至 3 . 0和提高盐度至 50
一 60 汤相结合的办法可 以 杀灭扁藻液中的游捕虫 。 经 N a O H中和并 降低盐度后 , 扁
藻 仍能恢复正常的生长和繁殖 。
关键词 单胞藻培养液 半鼻虫 游捕虫 PH S `
0 引言
在湛江叉鞭金藻 刀 i e r a , e r ia : , a , z他二君 e n s “ 万 二 . 犷 a r . , , . 和亚心形扁藻 , l a ` y二
。 : a : , 二。 c o r j i厂。 r o i s ( w i zz e ) 万 。 : e , 开放式生产性培养中 , 培养藻液 经 常被尖 鼻虫
( o xy o ih
: , p
.
) 和游捕虫 ( 石 。 p lot e , , p二 ) 所污染。 前者不但吞食、 而且 分 泌 毒素 毒
害藻细胞 , 后者则大量吞食藻细胞 。 二者的大量繁殖使藻液在 1 、 2 天内变清 , 培养失败 ,
严重影响育苗生产。 因此 , 如何有效地杀灭这二种敌害是饵料培养中突出的问题 。 关于这方
面的研究前人已有所报道 〔 2 」 一 L S 〕 , 并取得一定的效果 , 但有的研究范围较局限 , 需要扩充
研究对象 ; 有的所使用的方法在杀灭效果方面并不十分理想 , 除害不彻底。 本研究正是在前
人的工作基础上 , 试 图采用降低 p H值至 3 . 0和提高盐度至 5-0 一 60 筋的方法来杀灭尖鼻虫和游
捕虫 。 现将研究结果报道如下 。
1 料材和方法
,
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, 试验材料
亚心形扁藻 , 细胞长 n 一 14u m , 宽 7一 9 u m, 厚 3 .卜 5 u m 。 湛江叉鞭金 藻 ; 细胞直
径 5一 7 u仇 上述二藻种来自本院养殖系饵料室 。
尖鼻虫 , 属原生动物门 , 鞭毛虫纲 , 腰鞭毛虫 目 ,多 甲 藻 亚 目 , yG m n心访勿以 ae 族 ,尸 or on c ilut `公 ae 科 。 游捕虫 , 属 原 生 动 物 门 , 纤 毛 虫 纲 , 旋 唇 目 (s p ir ot r i cha 少 , 腹毛
亚目 H y oP tr i日ea 。 上 述二种原生动物来自本院海水养殖试验场单胞藻培养池中的污染藻液。
f
.
2 试验方法
试验仪器 : 50 m l 比色管共 24 支 , 分列于 比色架上 , 采室内近窗口 自然光培养。 在比较对
照组与处理组生长繁殖速度差异时 , 选择比色管颜色 、 管径及壁厚相同的管子 。 藻类密度以
72 1型分光光度计在 65 On m 处读取消光值。
酸化处理方法 : 每 l o 0 0m l污染藻液加入 1 N HC I 3 m l , 使藻液 p H值由原来的 8 . 2一 8 . 6
降至 3 . 0左 右 。 并通过作时间梯度试验 , 确定出既能杀死敌害又不损伤或基本不损伤藻 细
收稿日期 : 1 9 90一 。一 2 1
扁塾逮 刘志刚等 : 海产单胞藻液中尖鼻虫和游捕虫的杀灭研究 37
胞的最低酸化时间 。 同时观察藻细胞在各处理时间下的恢复程度 , 从而确定对藻类安全的作
用时间上限 。 敌害的死亡以其胞壁破裂为准 , 藻类的安全与否以中和后有 80 % 以上藻 细胞恢
复活力为准。
中和处理方法 : 以等当量的 N a O H 中和已酸化的藻液 , 使 p H值恢复原水平 。 同时 , 从 降
低生产成本出发 , 以低于等当量的 N a O I七进行中和 , 观察能使藻细胞恢复活力的最低 N a O H
用量。
盐化处理方法 : 以干净食盐溶于藻液中 , 设计盐度从正常海水直至饱和盐水。 观察各盐度
梯度下敌害及藻细胞的反应 , 从而确定对敌害有效而对藻细胞无影响的盐度 。 以 日产盐度比
重目测计测定藻液的盐度 。
试验过程水温 21 . 5一 25 . 。℃ , 海水比重为 1 . 0 16 一 1 . 01 80
2 结 果
2
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, 湛江叉鞭金 藻液中尖鼻虫及某些鞭毛虫类 (M as tglo 户初 r a ) 的处理结果 :
2
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1
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1 藻液酸化处理最适时间
表 1 酸化时间与尖班虫变化关系
酸化时间 10` 2 0 , 3 0 , 4 0尸 6 0 , 1 . s h 2 h 2 . s h 3h 、 4 h 5h 6 h
尖鼻虫变 活 活 不 部 全 较 少 个 残 不 同 同
化 情 况 力 力 动 分 部 多 数 别 体 见 左 左正 下 变 解 解 的 的 的 全 残
常 降 椭 体 体 残 残 残 溶 体
圆 体 体 体 解
从表 1 可以看出 , 酸化处理 60 分钟时 , 尖鼻虫全部解体 。 表明酸化时间 1小时即可达到
杀灭尖鼻虫的 目的 。 尖鼻虫变化图解见图 l 。
金` 必海一 、 、 一 /
a 一一原状
b 一一收编
c 一一破 级
d 二一解休图 l 、 处理后尖弃虫的一系列变化
2
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,
.
2 中和后金藻的恢复时间和酸化时间的关系
表 2 金蕊的恢复时间与酸化时间关系
酸化时间 (h ) l 2 3 4 5 6
恢复时间 (h) 2 3 e 2 5 2 8一 2 9 3 0 3 4 3 5一 3 8 4 2一一 4 8
表 2表明 , 金藻能耐受较长的酸化时间 , 但随着时间的延长 , 中和后恢复的时间也相应
延长 。 以 1小时较合适 , 既能完全杀灭尖鼻虫又能使金藻在 1天内得以恢复活力 ,继续繁殖 。
2
.
1
.
3 缩减 N a O H中和用量试验
湛 江 水 产 学 院 学 报
表 3 N aO H 用量和金藻恢复时 间的关系
相当于H O当量数之份数
金藻恢复时间 ( h)
5 / 6
2 3一 2 5
4 / 6
4 2
3 /
4 5
表 3表 明 , N a O } 1用量可节省 1 / 2 , 但金藻恢复时间比等当量用 量要长近
N a O H 用量若节省 2 / 3 , 则金藻长时间内不能恢复活力 。
2
. 】. 4 另外二种鞭毛虫的杀灭效果
2 / 6
没恢复
1倍的时间。
在金藻中 , 还经常污染有其它二种原生动物鞭毛虫类。 一种形状楔形 , 长约 20 u m , 宽约
7 u m
, 无色透明 , 常发生于雨天后 。 另一种个体比金藻稍大 , 陀螺形 , 旋转前进 , 常出现在
高温季节 。 它们的出现使金藻液颜色很快变暗淡 , 金藻丧失活力 , 很快死亡 。
采用酸化处理 l 小时的办法 , 可 以完全杀灭这二种鞭毛虫类。 第一种在处理后虫体破裂 ,
胞质外溢 (见图 2 ) ; 第二种处理后虫体很快消失 , 不 久在水面形成一层脏物 。 中和后 , 金
藻在第二天颜色变浓 , 生长旺盛 。
2
.
2 亚心形扁藻培养液中尖鼻虫的处理结果
2
.
2
.
1 酸化后的观察 污染藻液经过 1小时的酸化处理后 ,扁藻呈 休眠状态 ,但色素体颜色
正常 , 细胞结构和形状均无改变。 尖鼻虫则全部破裂 , 被吞食的扁藻颗粒散出体外 (图 3 ) 。
,二
. 沙
杯 夕、
r 诊
藻扁廖汽郡
了 : :几.’i
图 2 处理后鞭毛虫破裂
2
.
2
.
2 中和后的结果和培养观察
图 3
a 一一 原状
b 一一收 缩
c 一一破 裂
d 一一解 体
中和后的藻液每隔 1小时观察一次 ,发现 , 2小时后有 10 %
左右的扁藻开始原地打转 , 24 小时后有 80 % 以上的扁藻恢复活力 , 约 10 一 20 % 的扁藻不能恢
复或已死亡 , 死亡者龟赓体解体 , 中和后经 4 8小时的培养 , 藻液浓度由处理前的 “。万细胞 /
d 增至 45 万细胞 / m l币声说明酸化处理适 用于亚心形扁藻培养液 。
2
.
2
,
3 经酸化处理的扁藻液与正常扁藻液藻细胞增殖速度的比较 试验组经 24 小时恢复活力
后与对照组进行比较如表 4 。
表 4 试验组与对照组藻细胞增殖速度比较
组 别 试 验 组 对 照 组
l 2 l 2
测定日期 旧 / 月) 2 / 5 3/ 5 4 / 5 2 / 5 3 / 5 4 / 5 2 / 5 3 / 5 4 / 5 2 / 5 3 / 5 4 / {
细胞密度 (万个m/ 1) 9 . 0 l 5 2 9 9 . 0 1 5 . 5 2 9 . 5 9 . 0 1 4 2 6 9 . 0 1 4 . 7 2 6 . {
相对生长常数 K 0 . 5 8 5 0 . 5 9 4 0 . 5 3 1 0 . 5 4 0
同类组 k值平均k 0 . 5 9 0 0 . 5 3 6
不同类组 k值差 0 . 0 5 4
1
_
N
_ _ . _ . _ . _ 、 二 ` … _… 、 _ _ ` 、 , _ ~ _二 _附 : K = 户 · l o ge 策辛, K— 相对生长常数 t— 生长时间 (天 ) N0 — 藻细 胞t ` “ 6 亡 N0 ` 一 ` , “ , , J 一 卜 ” ` ~ “ 一 价 “ J ` , 、 / “ / 一 ’ “ ~ ~ ’ `“初始密度 N— 经 t 时间后藻细胞密度表 4表明 , 试验组虽然经过酸化处理 , 但藻细胞增殖速度反而比对照组的稍快 , 说明酸
第 2期 些鲤嵘 l海产单胞 藻液中尖鼻虫和游捕虫的杀灭研究
化处理不但不会抑制扁藻的生长繁殖 , 相反有促进的作用 。
2
.
2
.
4 缩减 N a O H中和用里试验
表 5 N a 0 H 用 t 与 扁 蕊 恢 复 时 间 的 关 系
为 H C I当量数的份数 1 5 / 6 叮 6 3 / 6 2 / 6
扁藻恢复活力时间 (h) 2 4 2 9 5 2 未恢复 未恢复
从表 5 可见 , 等当量中和时 , 扁藻经 1天时间即恢复活力 , 而节省 1 / 3用量时 , 扁藻
需 2 天多才能恢复 。 节省 1 / 2 以上的用量 , 扁藻长时间不能恢复 。
2
.
3 亚心形扁藻培养液中游捕 虫的处理方法和结果
2
.
3
.
1 单因子处理效果 单独采用酸化藻液使 p H值降至 3 . 0左右的办法 ,仅能使游捕虫处于不
动的休眠状态 , 而不能将其杀灭 。 经 N a O H中和后 , 完全恢复活力 。 单独使用提高盐度至饱
和盐水的办法 , 也仅能抑制它处于休眠状态 , 降低盐度又能恢复正常。 有效的抑制盐度为 50
一 6 0汤 。
2
.
3
.
2 双因子处理效果
2
.
3
.
2
.
1 用降低 p H值至 3 . 0左右同时提高盐度至 5。 - se 60瓜相结合的办法进行处理并观察。 处
理后 40 分钟 , 藻细胞和游捕虫全部下沉底部 , 停止活动 , 经 1 . 5小时后 , 藻细胞颜色 、形态结
构未发生任何变化 , 而游捕虫则 出现了一系列的变化 : 首先虫体收缩变圆 , 接着体壁破裂 ,
胞质和吞食的藻细胞溢出体外 , 虫体皱缩 (图 4 ) 。 表明游捕虫在双因子的作用下失去了抵
抗能力而被杀灭 。 又因扁藻生活的盐度上限可高达 80 汤 , 因而扁藻实际上只被酸化所暂时抑
制 , 并不受高盐度所影响 。
一一原状
图 4 . 处理后游捕虫的一系列变化
b 一一收编
c l
、
c Z一一破裂
2
.
3
.
2
.
2 中和后的结果及培养观察 经双因子处理 1 . 5小时后 , 以等当量 N a O H中和 , 然后每
隔 0 . 5小时观察扁藻及游捕虫的变化情形。 约 5 . 孙时 , 扁藻开始部分恢复活力 , 原地打转 ,
2 小时后 , 有 80 % 以上扁藻处于游动状态。 游捕虫不能恢复 , 肉眼观察试管底部 , 可见有一
薄层黄绿色的残渣 , 镜检为游捕虫残体和扁藻尸体。 藻液经 3 天培养 , 颜色由浅绿色变成深
绿色 , 说 明扁藻生长繁殖正常。 游捕虫在处理后十几天的培养中一直没出现过 。
2
.
3
,
2
,
3 处理藻 液和正常藻 液藻细胞增殖速度的比较
表 6 处 理 组 与 对 照 组 增 殖 速 度 比 较
组 别 试 验 组 对 照 组
l 2 l 2
测定日期旧 / 月) 2 / 5 3 / 5 4 / 5 2 / 5 3 / 5 4 / 5 2 / 5 3 / 5 4 / 5 2 / 5 3 / 5 4 / 5
细胞密度 (万洲浏 ) 9 . 0 1 7 2 6 . 5 9 . 0 1 8 2 7 9 . 0 1 4 2 6 9 . 0 1 4 . 7 2 6 . 5
相对生长常数k 0 . 54 0 0 . 5 4 9 0 . 5 3 1 0 . 54 0
同类组闷直平均 0 . 54 5 0 . 5 3 6
不同类组 k值差 0 . 0 0 9
4 0 湛 江 水 产 学 院 学 报 .
由表 6可见 , 试验组与对照组经过二天的培养 , 其相对生长常数基本相同 , 表明双因子
处理方法并不影响扁藻正常的生长繁殖 。
3 讨 论
3
.
1 本试验以降低 p H值至 3 . 0的办法处理金藻液中的尖鼻虫 , 取得了预期效果 , 与刘志芳
等 厂“ 了所做结果基本一致 。 但该文 没有肯定此法是否适用于其它原生动物。 本试 验正好 肯定
了这一点 , 它对另二种原生动物鞭毛虫类也是有效的 。 这二种敌害也较常出现 , 但分类位置
尚不清楚。
3
.
2 本试验也证明了扁藻液中的尖鼻虫也可用降低 p H值至 3 . 0的办法来处理 ,而对扁藻影响
不大 , 并显示 了此法的优点 。 以前曾用 10 p p m的浓氨水杀尖鼻虫 , 但其效果很大程度受到温
度的影响。 在高温下 (如 2 8一 3 l OC ) , 杀灭效果很好 ; 在低温下 (如 2 -0 一 24 OC ) . 即使是 2 0 0
p p m的浓氨水 ( 2 2℃ ) , 也不起作用 。 而且施用浓氨水后 , 藻液氨氮含量骤然升高 , 不能在
短时间内作为饵料投喂 。 酸化处理的优点不仅在于低温 ( 21 一 22℃ ) 下能起作用 , 而且处理
后 24 小时即可投入使用 , 或者继续培养 。
3
.
3 据介绍 「’ 了! “ 〕 ,扁藻中发现的腹毛虫属于游捕虫 、 尾刺虫等几个属约五 、 六种 。 本试验
中的游捕虫个体较小 , 约为 20 x 40 产m ; 生产中也常见另一种个体较大的游捕虫 , 长约 50一 60
产m 。 那么 , 采用降低p H值至 3 . 0和提高盐度至 5。一 60 汤相结合的办法是否对后一种游捕虫
也有效呢 ? 这就有待于更进一步的研究了 。
3
.
4 在对游捕虫的处理方法中 ,单 因子只能起到抑制游捕虫的作用 , 而双因子则可使它失去
抵抗能力 , 起到综合效应的效果 , 因为二个因素都对它产生毒害作用 。 而对于扁藻 , 它本身
的生活盐度范围为 2分一 80 筋 , 所以提高盐度至 5 0we es 6o编这个因素对扁藻并不构成危害 , 所以
双因子对扁藻并不起到综合效应的作用 。 这正是以扁藻之长克游捕虫之短的办法 。
3
.
5 关于缩减 N a O H用量问题 , 试验表明 .中和金藻液的 N a O H 用量可节省总用量的 20 一
50 %
, 金藻仍能全部恢复活力 ; 中和扁藻的 , 可节省 17一 34 % 。 但随着用量的减少 , 恢复活
力时间随着延长 , 故生产中应视具体情况 , 若要急用饵料 , 则最好以等当量中和 。 另者 , 缩
减用量之后 , 对藻细胞的继续生长繁殖是否有影响 , 则有待于进一步的试验 。
3
.
6 处理尖鼻虫后的扁藻试验组的细胞增殖速度略比对照组的要快 , 这一现象 与 刘 志 芳报
道 f “ 〕的金藻 “ 被酸化后的藻细胞生长和繁殖速度也略快些 ” 的现象相同 ,是否因酸化后藻液
p H值变低 , 或因酸化后藻细胞生理活性增强之故? 有待于进一步的研究。
参 考 文 献
〔 1 〕 陈 明耀等 海洋饵料 生物培养 . 农业 出版社 , 1 9 8伍 1 19一 127
〔 2 〕 刘志芳等 . 湛 江叉鞭金藻液中杀灭尖鼻虫的试验 . 水产科学 , 19 83 ; N 0 . 2 : 7一 1
〔 3 〕 陈明耀 . 扁藻敌害生物 的防 除办法 . 水产与教育 , 19 7 6 ; N o . l : 3 一 41
〔 4 〕 广 西东 兴 珍珠 场 . 扁藻培养的 一些 问题及其处理 . 水产与教育 , 1 9 7 6 ; N o . 2 : 5 7一 60
〔 5 〕 王素华 . 小球藻生 长繁殖 和原生动物关系的研究 . 福建省水产学会会讯 , 1 9 63 ; N 0 . 3一 4 : 1 1 2一 1 18
第 2期 刘志刚等 :海产单胞 藻液中尖鼻虫和游捕虫的杀灭研究4 1
T I E O S S UD! ! N N K LL 6百 u Pl o ts e SP. ` O x少 r r hl’ s SP· I T NH E
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