全 文 ：牛樟芝 Antrodia camphorata 是原产于我国台湾
省的珍稀药用菌，性寒，味辛、苦、微甘，归肝、胆、肺
经 ［1］。 现代研究表明，牛樟芝含有多糖、三萜、超氧
化物歧化酶、腺苷、免疫蛋白、维生素、固醇类、木质
素、不饱和长链脂肪酸、麦角甾醇、微量元素锗、凝
集素、氨基酸、薄孔菌酸等多种生理活性物质 ［2-4］，
具有广泛的生理活性和临床应用价值，在多种癌症
的治疗上具有显著功效。 目前，已有多种不同剂型
的牛樟芝产品问世。 由于牛樟芝性寒，对胃有一定
刺激性，不适合胃寒者长期服用，限制了其临床应
用。 我们研制牛樟芝肠溶片，使其避免对胃部的刺
激，以提高患者的依从性。
1 材 料
1.1 仪器 CJY-2C 型片剂脆碎硬度测定仪（上海
市黄海药检仪器有限公司）；ZB-1C 智能崩解仪（上
海市安亭电子仪器厂）；LGJ-30FD 型真空冷冻干燥
机（北京市松源华兴科技发展有限公司）。
1.2 试药 固态培养牛樟芝（台湾省亚新生物科
技股份有限公司 ，批号 ：20150603）；维晶纤维素
（Microcrystalline cellulose，MCC）（日本旭化成公司）；
低取代羟丙纤维素 （Low-Substituted Hydroxypropyl
Cellulose，L-HPC）（日本旭化成公司）；糊精、乳糖、
硬脂酸镁、无水乙醇（国药集团化学试剂有限公司）。
2 方 法
2.1 牛樟芝浸膏的制备 固态培养牛樟芝，无水乙
醇回流提取 2 h，提取液回收溶剂，经冷冻干燥制得
醇提干浸膏。 残渣再次用水提取 2 h，提取液浓缩，
经冷冻干燥制得水提干浸膏。 将 2 部分干浸膏合并
打粉混匀制得牛樟芝干浸膏。
2.2 制粒压片 按 Box-Behnken 实验设计的比例
混合浸膏及各种辅料，混匀后湿法制粒，压片，每片
直径 11 mm，每片质量 0.5 g。
2.3 片芯硬度及崩解时间测定 采用 CJY-2C 型
片剂脆碎硬度测定仪测定片芯硬度，崩解时间按照
2015 年版中国药典附录崩解时限检查法项下进行。
2.4 单因素考察
2.4.1 填充剂 固定片芯中的其它辅料的种类及
用量，分别用 MCC、糊精、淀粉和乳糖作为填充剂，
制粒压片，测定所压片芯硬度。 结果表明，片芯以
MCC 为填充剂时硬度最大，而以淀粉为填充剂时硬
度最小。考虑到肠溶衣片片芯对硬度的要求及制剂成
本，选择 MCC、糊精或乳糖混合作为片芯的填充剂。
2.4.2 崩解剂 《中国药典》一部中规定中药浸膏
片的崩解时限不超过 60 min。在固定片芯中的其它
辅料种类及用量后，考察了 L-HPC、CMC-Na及 CMS-
Na 在相同用量下的片芯崩解时间， 均符合药典规
定。 考虑到肠溶衣片要在小肠中崩解释放，选择在
胃液和肠液中膨润度几乎相同的 L-HPC 作为崩解
剂。
2.4.3 润滑剂 固定片芯中的其它辅料种类及用
量，分别以硬脂酸镁、滑石粉和微粉硅胶作润滑剂，
考察压片过程及片芯外观，实验表明压片过程均无
粘冲现象，以硬脂酸镁和微粉硅胶作润滑剂的片面
较为光洁美观，外观差别不大，故选择硬脂酸镁作
为润滑剂。
2.5 Box-Behnken 实验设计 根据单因素考察的
结果，在固定牛樟芝浸膏含量 50%、硬脂酸镁添加
量 1%的情况下， 采用 Box-Behnken 实验设计考察
MCC、糊精、乳糖、L-HPC 的用量，因素水平表见表
1。
由于肠溶衣片对片芯的硬度要求较高，在考察
确认实验中不同处方所压片芯的崩解时限均符合
药典规定后， 选择片芯硬度作为实验的检测指标，
用 Design Expert 对试验结果进行分析。
牛樟芝肠溶片的最佳处方筛选
王 瑾 1，王光磊 1，陈耀金 1，林 雄 2，王 宫 1
（1． 福建省中医药研究院，福建 福州 350003；2． 福建大医本草医药科技开发有限公司，福建 福州 350003）
摘 要： 目的 筛选牛樟芝肠溶片的最佳处方。 方法 用 Box-Behnken 法设计试验， 考察影响牛樟芝肠
溶片片芯质量的 MCC、L-HPC、糊精和乳糖的用量。 结果 Box-Behnken 拟合方程得到的最佳处方为：牛樟芝
浸膏 50%、硬脂酸镁 1%、MCC 25%、L-HPC 6%、糊精 18%。 结论 根据最佳处方制得的牛樟芝肠溶片片芯硬度
较好，表面光洁，崩解时限符合药典规定。
关键词：牛樟芝肠溶片；Box-Behnken 法；最佳处方
中图分类号：R284.2 文献标志码：B 文章编号：1000-338X（2016）05-0026-03
收稿日期：2016-07-25
基金项目：福建省科技厅省属公益类科研院所基本科研专项（2014R
1035-3）
作者简介：王瑾（1979—），女，硕士，助理研究员，主要从事中药保健
品的研究。
通迅作者：王宫（1962—），男，副研究员。 E-mail：1056563129@qq.
com
福建中医药 2016年 10月 第 47卷 第 5期
Fujian Journal of TCM October 2016，47 （5）26
DOI:10.13260/j.cnki.jfjtcm.011218
实验号
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
A
20
20
15
15
20
20
15
20
15
25
20
25
20
25
20
25
20
表 2 实验结果
B
4
4
4
2
6
4
6
4
4
2
2
4
4
4
6
6
2
C
糊精∶乳糖＝1∶1
糊精∶乳糖＝1∶1
糊精
糊精∶乳糖＝1∶1
糊精
糊精∶乳糖＝1∶1
糊精∶乳糖＝1∶1
糊精∶乳糖＝1∶1
乳糖
糊精∶乳糖＝1∶1
糊精
糊精
糊精∶乳糖＝1∶1
乳糖
乳糖
糊精∶乳糖＝1∶1
乳糖
硬度 ／N
42.58
43.96
39.60
32.14
60.40
45.16
37.66
46.74
33.31
50.56
54.79
63.70
44.38
40.13
39.41
48.43
37.33
实验因素
MCC ／%（A）
H-LPC ／%（B）
糊清 ／乳糖（C）
-1
15
2
乳糖
表 1 因素水平表
0
20
4
糊精∶乳糖＝1∶1
1
25
6
糊精
水平
3 结果与讨论
实验结果及方差分析，见表 2、3。响应面方程图
形，见图 1～图 3。
Box-Behnken 拟合的二次多项式回归方程为：
y＝44.56＋7.51A＋1.39B＋8.54C－1.91AB＋
4.32AC＋0.88BC－3.08A2＋0.72B2＋2.70C2
r＝0.9827
从实验结果的方差分析中可知， 模型项 P＜
0.01，说明 y 与回归方程的关系是极显著的；Lack of
Fit 失拟项 P＞0.05，说明所得方程与实际拟合中非
正常误差所占比例很小，此回归方程极显著地表示
了 y 与 A、B、C 因素的关系。 此外，A、C 因素的 P＜
0.01，B 因素的 P＞0.05，说明因素 A、C 对实验结果
的影响极显著，而因素 B 对实验结果的影响较不显
著，因素 A、B、C 对实验结果 y 值的影响大小为 A＞
C＞B，通过响应面方程图形可直观地看出这一结
论。 通过回归方程拟合的最佳处方为 MCC 25%，L-
HPC 6%，糊精 18%，此处方预测硬度为 65.63 N。 根
据此处方进行 3 次验证实验，3 次实测片芯硬度分
别为 67.89 N、66.78 N、63.95 N，非常接近预测值，3
次验证实验所测崩解时间分别为 35、32、26 min，符
合药典规定，且片芯外观光洁，无粘冲现象，说明该
处方合理可行。
变异来源
模型
A
B
C
AB
AC
BC
A2
B2
C2
残差
失拟项
纯误差
总值
总方差
1211.97
451.65
15.35
583.28
14.63
74.65
3.12
39.99
2.16
30.76
21.33
11.91
9.43
1233.30
表 3 方差分析表
自由度
9
1
1
1
1
1
1
1
1
1
7
3
4
16
均方
134.66
451.65
15.35
583.28
14.63
74.65
3.12
39.99
2.16
30.76
3.05
3.97
2.36
F 值
44.18
148.19
5.04
191.38
4.80
24.49
1.02
13.12
0.71
10.09
1.68
P 值
＜0.0001
＜0.0001
0.0597
＜0.0001
0.0646
0.0017
0.3457
0.0085
0.4281
0.0156
0.3066
图 1 因素 A、B 对 y 的效应面图
图 2 因素 A、C 对 y 的效应面图
图 3 因素 B、C 对 y 的效应面图
（下转第 30 页）
第 5期 王 瑾等：牛樟芝肠溶片的最佳处方筛选 27
!!!!!!!!!!!!!!!!!
S6
0.556
0.044
0.066
0.090
0.769
0.226
1.421
2.757
1.276
1.678
1.000
0.253
0.294
1.185
0.386
0.102
0.129
表 3 16 批钩吻药材的 HPLC 指纹图谱中共有峰相对峰面积
S2
0.246
0.049
0.260
0.124
0.775
0.236
0.957
1.858
1.896
0.974
1.000
0.408
0.639
0.738
0.617
0.087
0.418
S3
0.219
0.019
0.046
0.110
0.517
0.120
1.456
1.896
1.416
1.256
1.000
0.201
0.239
0.945
0.250
0.144
0.231
S4
0.259
0.043
0.104
0.076
0.474
0.124
1.132
1.500
0.814
1.032
1.000
0.306
0.098
0.437
0.141
0.075
0.059
S5
0.396
0.041
0.075
0.150
0.661
0.320
1.195
1.905
1.016
0.868
1.000
0.259
0.338
0.704
0.405
0.115
0.622
共有峰
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
S1
0.356
0.064
0.361
0.134
0.721
0.317
2.383
2.113
1.832
1.397
1.000
0.592
0.286
1.333
0.437
0.132
0.172
S12
0.071
0.069
0.039
0.753
0.922
0.189
1.141
1.707
0.881
0.748
1.000
0.377
0.219
0.816
0.432
0.178
0.143
S8
0.271
0.029
0.038
0.216
0.656
0.120
1.930
2.827
2.216
1.646
1.000
0.243
0.325
1.613
0.474
0.108
0.166
S9
0.343
0.029
0.137
0.226
0.346
0.202
0.841
2.139
1.008
0.771
1.000
0.132
0.051
0.944
0.223
0.107
0.108
S10
0.170
0.013
0.090
0.057
0.325
0.100
1.227
0.411
1.152
1.008
1.000
0.160
0.121
0.660
0.254
0.074
0.013
S11
0.435
0.033
0.033
0.100
0.556
0.152
1.687
2.213
1.088
1.199
1.000
0.355
0.108
0.729
0.229
0.116
0.181
S7
0.250
0.029
0.199
0.317
0.149
0.206
0.985
1.080
0.712
0.819
1.000
0.988
0.255
1.608
0.355
0.106
0.240
S14
0.278
0.032
0.170
0.150
0.309
0.203
1.136
2.162
0.537
1.088
1.000
0.133
0.139
0.872
0.129
0.107
0.193
S15
0.365
0.062
0.100
0.598
0.749
0.257
1.002
2.328
1.070
0.495
1.000
0.186
0.173
0.959
0.486
0.092
0.106
S16
0.211
0.019
0.182
0.124
0.220
0.198
1.015
1.846
0.696
0.995
1.000
0.188
0.119
0.740
0.179
0.057
0.143
RSD ／%
42.7
47.4
77.8
92.1
41.8
38.8
31.6
30.9
39.6
29.8
0.0
75.9
65.7
35.1
43.1
28.7
76.6
S13
0.124
0.015
0.030
0.152
0.810
0.063
1.117
1.702
1.188
1.044
1.000
0.019
0.102
0.845
0.249
0.074
0.120
S6
0.959
表 4 16 批钩吻药材相似度比较
S2
0.947
S3
0.907
S4
0.964
S5
0.975
批 次
相似度
S1
0.927
S12
0.974
S8
0.863
S9
0.954
S10
0.981
S11
0.824
S7
0.977
S14
0.993
S15
0.928
S16
1.000
S13
0.925
3 讨 论
3.1 对照品胡蔓藤碱乙较钩吻素子的保留时间和
峰面积均适中，样品分离良好，故选择胡蔓藤碱乙
作为基准峰。
3.2 确定了钩吻的 17 个共有色谱峰，共有色谱峰
面积大于总面积的 75.43%。 16 批药材的指纹图谱
相似度除 S8、S11 外，均在 0.9～1，说明不同产地的
钩吻其内在化学成分有一定的差异性。
3.3 本研究首次标定 17 个共有峰钩吻的 HPLC 指
纹图谱，操作简单，分析时间较短，方法精密度、重
复性、稳定性较好，可用于钩吻的质量控制。
参考文献：
［1］ 赵庆春，华威，付艳辉. 胡蔓藤中非生物碱类成分的分离与鉴
定：III［J］. 沈阳药科大学学报，2010，27（7）：551-554.
［2］ 栗建明，冯时茵，何华红，等 . 单一内标多控法同步测定钩吻
中钩吻碱甲和钩吻素子的含量 ［J］. 中药材 ，2013，36（10）：
1626-1631.
［3］ 陈卫琳，杨樱，吴水生. 闽产钩吻根茎叶中钩吻碱甲和钩吻素
子及葫蔓藤碱甲的含量测定［J］. 福建中医药大学学报，2011，
21（5）：48-50.
4 结 论
根据 Box-Behnken 法优选的牛樟芝肠溶片片
芯处方为：牛樟芝浸膏 50%，MCC25%，L-HPC 6%，
糊精 18%，硬脂酸镁 1%。
参考文献：
［1］ 苏志诚，阮时宝 . 台湾牛樟芝的性味、归经与功效的探讨［J］.
中医临床研究，2013，5（20）：26-27.
［2］ 蔡为明，金群力，蔡青松，等 . 牛樟芝人工培养及活性成分与
药理作用的研究进展［J］. 食药用菌，2015，23（1）：17-23.
［3］ 冯路瑶，程显好，李寅，等 . 培养皿培养对牛樟芝生长特性及
其总三萜含量的影响［J］. 中国食用菌，2015，34（4）：31-35.
［4］ 程利娟，郭琪。 雷虹，等. 高效液相色谱法测定牛樟芝中腺苷
的含量［J］. 解放军医药杂志，2014，26（5）：76-78，85.
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福建中医药 第 47卷30