全 文 ：不同产地不同物候期平贝母的贝母乙素含量研究
王振月 1 ,侯素云1 ,王志林 2 ,赵海鹏 1 ,唐先明1 ,王宗权 1
(1.黑龙江中医药大学药学院 ,黑龙江哈尔滨 150040;2.黑龙江省伊春市红星区林业局 ,黑龙江伊春
153035)
　　摘要　目的:探讨平贝母中贝母乙素含量随产地和物候期变化的规律。 方法:用高效液相色谱法产测定贝母
乙素含量。结果:贝母乙素含量随产地和物候期的变化有差异。结论:贝母乙素的含量随物候期的变化呈现一定
的规律性。
关键词　平贝母;贝母乙素;产地;物候期;高效液相色谱法
中图分类号:R282.2　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2006)11-1135-02
作者简介:王振月 ,男 ,黑龙江中医药大学中药资源与开发教研室主任 ,硕士生导师 , Tel:0451-82196254, E-mail:wangzhen-yue@163.com。
　　百合科平贝母 FritilariaussuriensisMaxim.,主
产于我国东北 ,以鳞茎入药 ,含甾体生物碱种类很
多 ,其中贝母乙素是平贝母止咳 、化痰作用的有效成
分之一 〔1〕。本研究以贝母乙素为指标 ,测定并比较
了不同产地 、不同物候期栽培平贝母中贝母乙素含
量 ,以期为中药材规范化种植和品质评价提供依据 。
1 　试验材料
平贝母样品均于采收期采自黑龙江省不同产地
的栽培品 ,不同物候期的样品采自黑龙江省伊春市
红星区 ,均经黑龙江中医药大学中药资源与开发教
研室王振月教授鉴定 。
Metler电子天平 AE240, GZX-DH型电热恒温
干燥箱(上海跃进医疗器械厂), SX2-5-12箱式电阻
炉 ,循环水式真空泵(郑州长城仪器厂)。KQ-500E
型医用超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公同);
LDZ4-2自动平衡离心机(江苏省金坛市医疗仪器
厂);Waters600泵 , 2487紫外检测器;Empower色谱
工作站 。
乙腈为美国 Dikma公司产品 ,贝母乙素 (中国
药品生物制品检定所)。
2 　方法与结果
2.1 　色谱条件　色谱柱:SymmetryC18(3.9×150
mm, 5μm);预柱 PhonomenexODS-C18 (3.0 mm×4
mm);流动 相:CH3CN-100 mmol/LCH3COONH4
(43∶57);流速 1.1 ml/min;检测波长 375 nm;柱温
为室温;时间 22min;进样 10 μl。
2.2 　供试品的制备　贝母乙素提取溶剂:将纯氨
水与 95%乙醇按 1∶5体积比混合配成。
2, 4-二硝基苯肼(DNPH)处理:分析纯 ,用乙腈-
水重结晶 2次 ,溶于己腈中 ,浓度为 3.0 mg/ml,该
溶液每周新鲜配制。
样品处理及衍生化方法:称取 0.5 g(精确至
0.0001g)平贝母生药粉 ,置 10 ml离心管中 ,加入
5.0 ml提取溶剂 ,振荡。室温放置 48 h后 ,超声提
取 30 min,离心 ,吸取 0.5 ml上清液置小瓶中水浴
蒸干(水温 50℃)后衍生化。衍生化方法为在上述
提取物中加入 20 μl2.0 mol/L盐酸和 200 μl2, 4-
二硝基苯肼 ,混合均匀后在 50℃下反应 30 min,制
备成供试品溶液。
2.3　标准品的制备　精密称取贝母乙素对照品
1.01 mg,加 28 ml2.0 mol/L盐酸和 280 ml2 , 4-二
硝基苯肼制成溶液 , 50℃反应 30 min。制备成标准
品溶液。
2.4　精密度试验　取标准品溶液 ,重复进样 5次 ,
每次 20 μl, 结果贝母乙素的峰面积 RSD值为
1.23%,表明精密度良好。
2.5　重复性试验　精密称取平贝母(五年生)生药
粉 0.5 g(精确至 0.0001 g),共取 5份 ,按 2.2项下
方法制备 ,测定 ,结果该批平贝母中贝母乙素含量的
RSD值为 1.63%。表明重复性良好 。
2.6　线性关系考察 　取上述标准品溶液 3 μl、5
μl、10 μl、15 μl、20μl、25 μl依次进样 ,按上述色谱
条件测定 ,以对照品峰面积值为纵坐标 ,以进样量
(μg)为横坐标进行线性回归 ,回归方程为:Y=2 ×
10
6X+398594 , r=0.9990,结果表明在 0.009838 ～
0.08198μg范围内贝母乙素的进样量与峰面积值
呈线性关系。
2.7　加样回收率试验　精密称取已知含量的 6份
平贝母样品(批号 200401)0.5 g,加入等倍量的标
准品 ,按 2.2项下操作 , 结果平均加样回收率为
99.3%, RSD=1.18%。
2.8　样品测定　精密吸取供试品溶液 10 μl,分别
·1135·中药材第 29卷第 11期 2006年 11月
DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2006.11.005
依法测定 ,采用外标法 ,结果见表 1、表 2。
3 　讨论
3.1 　不同产地平贝母样品均在采收期采收 ,但贝
母乙素的含量有差异 ,可能因伊春市 、五常市 、尚志
市在温度 、光照 、湿度等均存在一定差异。
3.2 　不同物候期平贝母中贝母乙素含量差异较
大 ,且呈现有规律的变化。萌芽期含量较高 ,随着地
上部分的迅速生长 ,贝母乙素含量下降 ,到开花期又
迅速回升达到峰值 ,进入枯萎期时含量达最低值 ,可
能这一时期因母鳞茎生出多个子鳞茎 。更新期有新
鳞茎形成 ,贝母乙素含量又开始逐渐增多 ,虽然此时
地上部分已枯萎 ,但地下鳞茎的代谢仍在进行 。萌
芽期 ,开花期 ,更新期都是平贝母地下鳞茎代谢旺盛
时期。
　表 1　　　不同产地平贝母贝母乙素含量(n=3)
产地 贝母乙素含量(%)
尚志市向阳山林场 0.0163±0.000551
伊春市永绪经营所 0.0223±0.000503
海林市横道河镇 0.0196±0.00121
饶河县岭南村 0.0187±0.00112
大兴安岭河南农场 0.0187±0.000265
伊春市长青农场 0.0184±0.00162
伊春市杨树河经营所 0.0218±0.000651
五常市沙河子镇 0.0172±0.000252
桦南县曙光农场 0.0253±0.000321
尚志市冲河林场 0.0233±0.00172
伊春市新青区 0.0252±0.00213
伊春市红星区 0.0261±0.00165
　　表 2 　平贝母不同物候期贝母乙素含量(n=3)
物候期 萌芽期 展叶期 开花期 枯萎期 更新期
贝母乙素含量(%) 0.0538±0.00385 0.0462±0.0156 0.0480±0.00358 0.0222±0.00412 0.0294±0.00158
RSD(%) 7.17 5.37 7.42 3.31 5.39
3.3 　本研究所测平贝母鳞茎中贝母乙素含量变化
规律与王臣等〔2〕所报道的平贝母地下器官生长发
育规律基本相符 ,也与王栋等 〔3〕所测的栽培平贝母
不同生长期总生物碱含量变化规律基本一致 ,因此 ,
贝母乙素可作为平贝母质量评价指标之一 。
参 考 文 献
[ 1] 周颖 ,季晖.五种贝母甾体生物碱对豚鼠离体气管条 M
受体的拮抗作用 .中国药科大学学报 , 2003, 34(1):58-
60.
[ 2] 王臣 , 刘玫 ,刘明远 .平贝母地下器官生长发育规律的
研究 .植物研究 , 1995, 15(4):460-463.
[ 3] 王栋 ,李承今 , 贾树帜 ,等 .栽培平贝母不同生长期总生
物碱的含量测定 .中医药学报 , 1996, 2:52.
(2006-03-29收稿
2006-06-28修回)
·资源 ·
20种菝葜近缘种的薯蓣皂苷元含量测定
阎　磊 ,徐淑珍 ,李秋怡 ,何再安 ,刘焱文＊
(湖北中医学院 ,湖北武汉 430061)
　　摘要　采用 RP-HPLC法检测 20种菝葜近缘植物 ,结果在选定的色谱条件下 , 薯蓣皂苷元在 5 ～ 15 μg范围内
与峰面积呈良好线性关系 , 方法简单易行 , 准确度高;而且检测的 20种菝葜植物中 , 有 4种所含薯蓣皂苷元均超过
1.2%, 可为菝葜类开发利用提供参考。
关键词　菝葜近缘种;薯蓣皂苷元;RP-HPLC
中图分类号:R282.71　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2006)11-1136-03
作者简介:阎磊 ,硕士生 , Tel:027-63294635。＊通讯作者:刘焱文 ,教授 ,博士生导师 ,湖北省中药资源与中药化学省级重点实验室主任 , Tel:027-88920834。
　　百合科菝葜属为攀缘状灌木 ,广泛分布于热带
和亚热带地区 ,华东 、中南及西南各省均产。菝葜
SmilaxchinaL.(又名金刚藤)及其他一些种 ,现代
药理研究〔1-3〕证实 ,具有抗炎 、抑菌 、抗肿瘤 、类激素
·1136· 中药材第 29卷第 11期 2006年 11月